dasar biologi molekuler undana

90

Upload: budi-afriyansyah

Post on 10-Feb-2018

242 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 1/95

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 2/95

DASAR-DASAR BIOLOGI

MOLEKULER

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 3/95

Biologi molekuler 

Definisi :

Merupakan cabang ilmu biologi yang

mempelajari tentang aktivitas biologis dalam

tingkat molekuler 

Biologi molekuler virus :

Mempelajari aktivitas biologis virus ditingkat

molekuler 

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 4/95

Biologi molekuler virus

 Aktivitas biologis virus :

• Menginfeksi inang untuk bisamengekspresikan aktivitas biologisnya(parasit intra seluler obligat)

Mengamati akvitas/ proses infeksi danperkebangbiakan virus dalam tubuh inangditingkat molekuler 

Molekuler : asam inti (gen: DNA/RNA)

asam amino penyusun proteinstruktural maupun fungsional

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 5/95

Mengapa virus harus menginfeksi inang ?

untuk kelangsungan hidupnya :• Viruses must replicate in living

cells.

• However, not all cells will supportreplication of particular viruses.

• Both viruses and cells havereceptors and an affinity(complementarity) between themthat results in attachment.

• This complementarity isresponsible for limitations of hostrange.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 6/95

VIRALLIFE

CYCLE

VIRALLIFE

CYCLE

ATTACHMENT

PENETRATIONPENETRATION HOST

FUNCTIONS

ASSEMBLY

(MATURATION)

Transcription

REPLICATION

RELEASE

UNCOATINGUNCOATING

Translation

Replication

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 7/95

Infeksi virus

• Menimbulkan gejala klinis ( virus

patogenits tinggi dan jumlah cukup

banyak)

• Tidak menimbulkan gejala klinis ( viruspatogenitas rendah, sifat virus slow

infection/ chronis atau laten)

• Deteksi virus : gejala klinis, isolasi

identifikasi virus

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 8/95

Moleculer Diagnostic Systems

• DNA Diagnostic Systems include:

DNA Hybridization

PCRRestriction endonuclease analysis

RAPD (random amplified polymorphicDNA)

DNA fingerprinting

8

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 9/95

Identifikasi DNA atau RNA dengan

teknik polymerase chain reaction

(PCR) dan molecular sequencing

9

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 10/95

Kary MullisInventor of the Polymerase Chain Reaction

10Nobel Prize 1993

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 11/95

Polymerase Chain Reaction

(PCR)

• Using molecular techniques such as PCR toexamine DNA sequences can help to identifywhat strain of a pathogen is present in aspecimen

• PCR is a technique that makes multiplecopies of a piece of DNA or RNA in a processcalled amplification

• Amplification makes it easier to detect the tinystrands of an organisms DNA

• PCR can start with very small amounts of DNA and can be used with viruses or bacteria

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 12/95

PCR

• Capable of amplifying tiny quantities of nucleic acid.

• Cells separated and lysed.• Double stranded DNA separated into single

strands.• Primers, small segments of DNA no more

than 20-30 nucleotides long added.• Primers are complementary to segments of 

opposite strands of that flank the targetsequence.

• Only the segments of target DNA betweenthe primers will be replicated.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 13/95

Polymerase Chain Reaction

• Each cycle of PCR consists of three cycles: – denaturation of target DNA to separate 2 strands.

 – annealing step in which the reaction mix is cooledto allow primers to anneal to target sequence

 – Extension reaction in which primers initiate DNA

synthesis using a DNA polymerase. – These three steps constitute a thermal cycle

• Each PCR cycle results in a doubling of targetsequences and typically allowed to run through 30cycles, one cylce takes approximately 60-90 seconds.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 14/95

Steps in PCR

• PCR starts with a sample of DNA from a

clinical specimen suspected to contain a

pathogen

• A primer is added to the sample

 – A primer is a very short sequence of DNA which

will seek out and bind to a specific sequence of 

the target DNA

 – Primers can be designed to be very specific or more general

• Example – a primer could be made to “match”

echovirus 30 or  to match any echovirus

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 15/95

Steps in PCR (continued)

• After the primer other materials added to the mixtureinclude: – A polymerase enzyme that will “read” a sequence of DNA and

create copies

 – “Building blocks” of DNA bases to use as raw materials to make

copies• The polymerase enzyme will make copies only of the

DNA that matches the primer 

• Results: – Amplification occurs—DNA in specimen matched primer 

 – No amplification—particular DNA that primer was designed tomatch was not present

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 16/95

PCR

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 17/95

PCR

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 18/95

PCR to Detect Feline Viral

Rhinotracheitis Infection and

Persistence

18

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 19/95

Viral Genomic

SequencingAn example of sequencing used indiagnosis. The nucleotide sequences of the genes (DNA copies) of VP1 (virusprotein 1) of foot-and-mouth disease virus,type O. The isolates are from around theworld.

Note the similarity of the UK isolates of 2001with the virus causingdisease in South Africa in late 2000

19

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 20/95

GENETIKA VIRUS

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 21/95

• Penurunan sifat organisme termasuk

mikroorganisme termasuk virus melalui :DNA atau RNA pada Virus.

• DNA (Deoxyribo Nucleic Acid)

Suatu urutan nukleotida yang tersusun dalam 2utas secara helix melingkar dalam bentuk co i l ,yang disebut sebagai superco i l 5 3 denganarah putaran pos it if sense.

Membawa informasi hereditas dari induk keanak.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 22/95

• Urutan basanya disebut dengan Gen.

Gen – gen tsb. menyandikan protein.

• Protein tersebut dapat berupa :

(a) Protein struktural seperti : amplop,

spike, kapsid (virus) atau septa, hifa

(cendawan) dan dinding sel, kapsel,

membran plasma (bakteri)

(b) Protein nonstruktural seperti enzimdan toxin.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 23/95

DNA sebagai molekul utama kehidupan

• Eukariot (cendawan ) 

DNA berada dalam inti sel

dan RNA di sitoplasma

• Prokariot (bakteri ) 

DNA dan RNA di

sitoplasma

DNA tersebut terpilin

supercoi l dan kompak

dalam kromosom.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 24/95

Pada virus DNA atau RNA : 

• Tidak tersusun kompak dalam kromosom, tetapibisa dalam bentuk teruntai, terlipat dansegmental.

• Berutas ganda maupun tunggal.

• Arah putaran bisa pos i t if sense maupun

negati f sense.

• DNA dan RNA tersus un oleh basa : 

Purin :    Adenin (A)

Guanin (G)

Pir imid in:  Citosin (C)Thymin (T)

Uracil (U)

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 25/95

• Sifat induk diturunkan ke anak melalui

DNA. Penurunan gen dari sel induk

(DNA) ke sel anak dilakukan melalui

proses replikasi.• Ekspresi gen tampak setelah DNA

ditranskripsi menjadi messenger RNA

(mRNA) yang kemudian ditranslasi oleh

t rans fer RNA (tRNA) menjadi protein

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 26/95

DNA DNA

repl ikasi 

mRNAt ranskr ipsi 

Protein

t ranslasi 

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 27/95

REPLIKASI

• Replikasi DNA

berlangsung secara

semi konservatis.

• Proses replikasi

melibatkan banyak

sekali enzim.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 28/95

Proses replikasi

       

 

   

 

 

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 29/95

    

 

   

 

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 30/95

• Selanjutnya Fragmen Okazaki disambung oleh enzimDNA ligase menjadi utas DNA komplementari yang

panjang.• Utas baru yang disintesa pada proses replikasi ini harustepat susunannya, sesuai pasangan DNA cetakannya.

• Bila terjadi kesalahan dlm penyusunan nukleotida padaproses replikasi:

Mekanisme koreksi dilakukan oleh enzim DNApolimerase.

Koreksi dilakukan dari ujung 3 ke 5 denganaktivitas 3-5 eksonuklease DNA polimerase I,mekanismenya disebut proo f-reading atau error- checking .

• Kesalahan pada proses replikasi menyebabkanterjadinya mutasi.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 31/95

TRANSKRIPSI

• Transkripsi merupakan konversi informasi dari DNAmenjadi mRNA.

• Proses transkripsi ini difasilitasi oleh enzim RNApolimerase

• Proses transkripsi berjalan mirip seperti proses replikasi

DNA.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 32/95

Perbedaan utama transkripsi dibandingkan

dengan replikasi :

Hanya memproduksi molekul denganukuran relatif pendek

Hanya satu utas DNA yang ditranskripsi

Prosesnya lebih sederhana karena mRNAdapat disintesa secara berkesinambungandgn menggunakan satu enzim saja (RNApolimerase)

Tidak diperlukan primer seperti padaproses replikasi

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 33/95

• Proses transkripsi seperti pada proses

replikasi berjalan dari ujung 5 ke 3

• Proses transkripsi dimulai dari daerah

promotor dan berakhir pada daerahterminator.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 34/95

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 35/95

TRANSLASI

• Translasi adalah proses penerjemahan kodebasa nukleotida ke asam amino.

• Setiap 3 basa (triplet / condon) menyandikan 1asam amino.

• mRNA membawa informasi sekuen asam aminodari protein yang harus diproduksi dalam bentukkode genetika.

• Contoh :

UUU  Phenilalanine (Phe)

UUA 

Leucine (Leu)UAA   Stop

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 36/95

• Kode genetik

DNA ------transfer informasi genetika ke

mRNA dalam bentuk kode (code) terdiri

dari sederetan basa nukleotid

ribosom bergerak sepanjang molekul mRNA

dan "membaca" urutan sekuensnyasebanyak 3 nukleotid (codon) sekaligus

dari arah 5’ ke 3‘

5-AAACGTCGTACCTGT-3

3-TTTGCAGCATGGACA-5

Th G ti C d

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 37/95

The Genetic Code

Amino acids specified by each codon sequence on mRNA.

Amino acids specified by each codon sequence on mRNA.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 38/95

p y q

Key for the above table:

 Ala: Alanine Cys: Cysteine Asp: Aspartic

acid

Glu: Glutamic acid

Phe:

PhenylalanineGly: Glycine His: Histidine Ile: Isoleucine

Lys: Lysine Leu: Leucine Met: Methionine Asn: Asparagine

Pro: Proline Gln: Glutamine Arg: Arginine Ser: Serine

Thr: Threonine Val: Valine Trp: Tryptophane Tyr: Tyrosisne

A = adenine G = guanine C = cytosine T = thymine U = uracil

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 39/95

• Pada prokariot (bakteri) proses transkripsi dan translasidapat berlangsung bersamaan di sitoplasma.

• Pada eukariot (cendawan, hewan tingkat tinggi) proses

transkripsi terjadi di nukleus, sedangkan translasi di

sitoplasma.

• Pada virus proses replikasi dan transkripsi bisa terjadi dinukleus dan sitoplasma sel inang tergantung dari jenis

virusnya.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 40/95

• Pada prokariot (bakteri) proses transkripsidan translasi dapat berlangsungbersamaan di sitoplasma.

• Pada eukariot (cendawan, hewan tingkattinggi) proses transkripsi terjadi di nukleus,sedangkan translasi di sitoplasma.

• Pada virus proses replikasi dan transkripsibisa terjadi di nukleus dan sitoplasma sel

inang tergantung dari jenis virusnya.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 41/95

• Virus

 – DNA

 – RNA

mekanisme perbanyakan virus pada selinang ( saat infeksi) :

• adsorbsi dan penetrasi

• pelepasan selubung virus

• sintesa dan perakitan bahan

komponen virus oleh sel inang• pelepasan virion dari sel inang

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 42/95

• Fast generation time.

• Produce large numbers of progeny.

• High rates of mutation.

Basic point: Virus evolution is fast

Virus-infected cells produce large numbers

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 43/95

Virus infected cells produce large numbers

of progeny• Infection of a single cell by poliovirus can yield up to 104 viral

particles.

• In a person, up to 109 –  1011 particles can be produced per day.

• Enough to infect every person on the planet.

Evolution requires mutation:

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 44/95

High mutation rates (genome replication is

inaccurate)•

Mutations occur when nucleic acids are copied (i.e. genome replication).

• Error rate of human DNA polymerase is approximately 10-9 (3 mutations perreplication of the human genome).

• Error correction machinery lowers this to 10-11

• Virus RNA and DNA polymerases

are much more error prone.

 – RNA dependent RNA pol: 10-3 –  10-6

 – DNA polymerases: 10-6 –  10-7

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 45/95

• Mutasi

gen mutasi ---- DNA ----Kode genetik tidak

sesuai ---- sintesa asam amino terganggu----pembentukan protein terganggu.

Mutasi dapat terjadi

 – Substitusi

 – Addisi

 – Delesi

Virus----mutasi virulentavirulent

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 46/95

• The point at which accumulated mutations reduce

fitness

• Too much mutation can be lead to loss of vital

information

• Too little mutation can lead to host defenses

overcoming the virus.

S

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 47/95

MUTASI

Mutasi adalah suatu perubahan padasekuen basa DNA suatu organisme yang

diturunkan.

Organisme yang mengalami mutasi

disebut mutan. Agen penyebab mutasi disebut mutagen.

Mutasi dapat terjadi secara spontan atau

akibat induksi dari mutagen.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 48/95

Mutasi spontan dapat disebabkan oleh :

Radiasi alam (sinar kosmik)

Kesalahan replikasi

Mutasi dapat berupa :

Delesi (penghapusan)

Insersi (penyisipan)

Subsitusi (penggantian)

Jenis mutasi :

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 49/95

Jenis mutasi :

Point mutation (Mutasi titik)

Pada mutasi titik terjadi perubahan padasepasang basa yang dapat menyebabkan :

Perubahan satu asam amino menjadi asamamino yang lain dalam protein (missense

mutation)Tidak menyebabkan perubahan sama sekalitergantung pada codon yang terlibat (silentmutation).

Terbentuknya stop codon mengakibatkan

tersintesanya protein yang tidak sempurna(nonsense mutation)

Frameshift mutation (mutasi

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 50/95

Frameshift mutation (mutasi

geser)

• Mikroinsersi dan mikrodelesi dapat

menyebabkan mutasi geser bila terjadi

pada gen penyandi protein yang menjadi

bagian dari reading frame.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 51/95

5….T A C…….3

…….A T G…….5

mutasi normal replikasi  

AAC TAG TAG TAC

TTG ATC ATG ATG

trankripsi

AAC UAG UAU UAC

 Asp stop Tyr Tyr 

Contoh mutasi subsitusi :

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 52/95

• Contoh mutasi insersi dan delesi yg mengakibatkan frameshiftmutation :

Mutasi insersi

TACGGACCAATACT

Normal DNA  

TACGGACAATACTMutasi delesi  

TACGGCAATACT

• Dampak mutasi:

Perubahan virulensi/patogenitas

perubahan serotype

contoh antigenic shift dan drift pada virus AI

Genetic information exchange

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 53/95

1. Recombination of genome segments.

2. Reassortment.

3. Acquisition of cellular genes

g

Genetic information is exchanged by recombination of genome

segments. Infection of a cell by two different viruses can resultin exchange of genetic information, resulting in production of mixed progeny.

Recombination

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 54/95

HIV 2 mechanisms:

1. Copy choice: during (-) strand synthesis

2. Strand assimilation: during (+) strand synthesis

Template switching: polio virus

Reassortment

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 55/95

• Genetic drift: slow accumulation of mutations in a population Due to copying errors and

Shift vs Drift

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 56/95

• Genetic drift: slow accumulation of mutations in a population. Due to copying errors andimmune selection.

• Genetic shift: a major genetic change caused by recombination or reassortment of genomes.

Drift Shift

Evolution is both  driven and  constrained by

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 57/95

the fundamental properties of viruses

• Despite lots of sequence diversity, viral populations maintain stable

master or  consensus sequences.The sequence that reflects the most common choice of nucleotide oramino acid at each position.

• Diversity limited be the to ability to function within certain constraints. These include:

 – Particle geometry: eg. Icosahedral capsids limit genome size by limiting volume. – All genomes are composed of nucleic acids: limits solutions to replication ordecoding of viral information.

 – Requirement for interactions with host cell machinery.

 – Requirements for interactions within the host.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 58/95

GENETIKA VIRUS

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 59/95

Penurunan sifat organisme termasukmikroorganisme termasuk virus melalui :

DNA atau RNA pada Virus.

DNA (Deoxyribo Nucleic Acid)

Suatu urutan nukleotida yang tersusun dalam 2utas secara helix melingkar dalam bentuk co i l ,yang disebut sebagai superco i l 5 3 denganarah putaran pos i t if sense.

Membawa informasi hereditas dari induk keanak.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 60/95

Urutan basanya disebut dengan Gen.

Gen – gen tsb. menyandikan protein.

Protein tersebut dapat berupa :

(a) Protein struktural seperti : amplop,

spike, kapsid (virus) atau septa, hifa(cendawan) dan dinding sel, kapsel,

membran plasma (bakteri)

(b) Protein nonstruktural seperti enzim

dan toxin.

DNA sebagai molekul utama kehidupan

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 61/95

DNA sebagai molekul utama kehidupan

Eukariot (cendawan ) 

DNA berada dalam inti sel

dan RNA di sitoplasma

Prokariot (bakteri )  DNA dan RNA di

sitoplasma

DNA tersebut terpilin

supercoi l dan kompak

dalam kromosom.

Pada virus DNA atau RNA : 

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 62/95

Tidak tersusun kompak dalam kromosom, tetapi

bisa dalam bentuk teruntai, terlipat dansegmental.

Berutas ganda maupun tunggal.

 Arah putaran bisa pos i t if sense maupunnegati f sense.

DNA dan RNA tersus un oleh basa : 

Purin :    Adenin (A)

Guanin (G)

Pir imid in:  Citosin (C)Thymin (T)

Uracil (U)

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 63/95

Sifat induk diturunkan ke anak melaluiDNA. Penurunan gen dari sel induk

(DNA) ke sel anak dilakukan melalui

proses replikasi.

Ekspresi gen tampak setelah DNA

ditranskripsi menjadi messenger RNA

(mRNA) yang kemudian ditranslasi oleh

t rans fer RNA (tRNA) menjadi protein

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 64/95

DNA DNA

repl ikasi 

mRNAt ranskr ipsi 

Protein

t ranslasi 

REPLIKASI

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 65/95

REPLIKASI

Replikasi DNAberlangsung secara

semi konservatis.

Proses replikasi

melibatkan banyaksekali enzim.

Proses replikasi

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 66/95

     

 

 

   

 

 

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 67/95

      

   

 

Selanjutnya Fragmen Okazaki disambung oleh enzim

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 68/95

Selanjutnya Fragmen Okazaki disambung oleh enzimDNA ligase menjadi utas DNA komplementari yangpanjang.

Utas baru yang disintesa pada proses replikasi ini harustepat susunannya, sesuai pasangan DNA cetakannya.

Bila terjadi kesalahan dlm penyusunan nukleotida padaproses replikasi:

Mekanisme koreksi dilakukan oleh enzim DNA

polimerase. Koreksi dilakukan dari ujung 3 ke 5 dengan

aktivitas 3-5 eksonuklease DNA polimerase I,mekanismenya disebut proo f-reading atau error- checking .

Kesalahan pada proses replikasi menyebabkanterjadinya mutasi.

TRANSKRIPSI

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 69/95

Transkripsi merupakan konversi informasi dari DNAmenjadi mRNA.

Proses transkripsi ini difasilitasi oleh enzim RNApolimerase

Proses transkripsi berjalan mirip seperti proses replikasiDNA.

Perbedaan utama transkripsi dibandingkan

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 70/95

dengan replikasi :

Hanya memproduksi molekul denganukuran relatif pendek

Hanya satu utas DNA yang ditranskripsi

Prosesnya lebih sederhana karena mRNA

dapat disintesa secara berkesinambungandgn menggunakan satu enzim saja (RNApolimerase)

Tidak diperlukan primer seperti pada

proses replikasi

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 71/95

Proses transkripsi seperti pada prosesreplikasi berjalan dari ujung 5 ke 3

Proses transkripsi dimulai dari daerah

promotor dan berakhir pada daerah

terminator.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 72/95

TRANSLASI

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 73/95

TRANSLASI

• Translasi adalah proses penerjemahan kodebasa nukleotida ke asam amino.

• Setiap 3 basa (triplet / condon) menyandikan 1asam amino.

• mRNA membawa informasi sekuen asam amino

dari protein yang harus diproduksi dalam bentukkode genetika.

• Contoh :

UUU  Phenilalanine (Phe)

UUA  Leucine (Leu)

UAA   Stop

• Kode genetik

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 74/95

DNA ------transfer informasi genetika ke

mRNA dalam bentuk kode (code) terdiridari sederetan basa nukleotid

ribosom bergerak sepanjang molekul mRNA

dan "membaca" urutan sekuensnya

sebanyak 3 nukleotid (codon) sekaligus

dari arah 5’ ke 3‘

5-AAACGTCGTACCTGT-3

3-TTTGCAGCATGGACA-5

The Genetic Code

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 75/95

Amino acids specified by each codon sequence on mRNA.

Amino acids specified by each codon sequence on mRNA.

Key for the above table:

A A ti Gl Gl t i

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 76/95

 Ala: Alanine Cys: Cysteine Asp: Aspartic

acid

Glu: Glutamic

acid

Phe:

Phenylalanine Gly: Glycine His: Histidine Ile: Isoleucine

Lys: Lysine Leu: LeucineMet:

Methionine Asn: Asparagine

Pro: Proline Gln: Glutamine Arg: Arginine Ser: Serine

Thr:

ThreonineVal: Valine

Trp:

TryptophaneTyr: Tyrosisne

A = adenine G = guanine C = cytosine T = thymine U = uracil

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 77/95

• Pada prokariot (bakteri) proses transkripsi dan translasi

dapat berlangsung bersamaan di sitoplasma.

• Pada eukariot (cendawan, hewan tingkat tinggi) proses

transkripsi terjadi di nukleus, sedangkan translasi di

sitoplasma.

• Pada virus proses replikasi dan transkripsi bisa terjadi dinukleus dan sitoplasma sel inang tergantung dari jenis

virusnya.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 78/95

• Pada prokariot (bakteri) proses transkripsidan translasi dapat berlangsungbersamaan di sitoplasma.

• Pada eukariot (cendawan, hewan tingkat

tinggi) proses transkripsi terjadi di nukleus,sedangkan translasi di sitoplasma.

• Pada virus proses replikasi dan transkripsibisa terjadi di nukleus dan sitoplasma sel

inang tergantung dari jenis virusnya.

• Virus

DNA

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 79/95

 – DNA

 – RNA

mekanisme perbanyakan virus pada selinang ( saat infeksi) :

• adsorbsi dan penetrasi• pelepasan selubung virus

• sintesa dan perakitan bahankomponen virus oleh sel inang

• pelepasan virion dari sel inang

Basic point: Virus evolution is fast

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 80/95

• Fast generation time.

• Produce large numbers of progeny.

• High rates of mutation.

Virus-infected cells produce large numbers

of progeny

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 81/95

• Infection of a single cell by poliovirus can yield up to 104 viral

particles.

• In a person, up to 109 –  1011 particles can be produced per day.

• Enough to infect every person on the planet.

Evolution requires mutation:

High mutation rates (genome replication is

inaccurate)

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 82/95

inaccurate)• Mutations occur when nucleic acids are copied (i.e. genome replication).

• Error rate of human DNA polymerase is approximately 10-9 (3 mutations perreplication of the human genome).

• Error correction machinery lowers this to 10-11

• Virus RNA and DNA polymerasesare much more error prone.

 – RNA dependent RNA pol: 10-3 –  10-6

 – DNA polymerases: 10-6  –  10-7

• Mutasi

t i DNA K d tik tid k

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 83/95

gen mutasi ---- DNA ----Kode genetik tidak

sesuai ---- sintesa asam amino terganggu----pembentukan protein terganggu.

Mutasi dapat terjadi

 – Substitusi

 – Addisi

 – Delesi

Virus----mutasi virulent

avirulent

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 84/95

• The point at which accumulated mutations reducefitness

• Too much mutation can be lead to loss of vital

information

• Too little mutation can lead to host defenses

overcoming the virus.

MUTASI

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 85/95

Mutasi adalah suatu perubahan pada

sekuen basa DNA suatu organisme yang

diturunkan.

Organisme yang mengalami mutasi

disebut mutan. Agen penyebab mutasi disebut mutagen.

Mutasi dapat terjadi secara spontan atau

akibat induksi dari mutagen.

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 86/95

Mutasi spontan dapat disebabkan oleh :Radiasi alam (sinar kosmik)

Kesalahan replikasi

Mutasi dapat berupa :

Delesi (penghapusan)

Insersi (penyisipan)

Subsitusi (penggantian)

Jenis mutasi :

Point mutation (Mutasi titik)

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 87/95

Point mutation (Mutasi titik)

Pada mutasi titik terjadi perubahan padasepasang basa yang dapat menyebabkan :

Perubahan satu asam amino menjadi asamamino yang lain dalam protein (missense

mutation)Tidak menyebabkan perubahan sama sekalitergantung pada codon yang terlibat (silentmutation).

Terbentuknya stop codon mengakibatkan

tersintesanya protein yang tidak sempurna(nonsense mutation)

Frameshift mutation (mutasi

geser)

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 88/95

geser)

• Mikroinsersi dan mikrodelesi dapatmenyebabkan mutasi geser bila terjadi

pada gen penyandi protein yang menjadi

bagian dari reading frame.

Contoh mutasi subsitusi :

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 89/95

5….T A C…….3

…….A T G…….5

mutasi normal replikasi  

AAC TAG TAG TACTTG ATC ATG ATG

trankripsi

AAC UAG UAU UAC

 Asp stop Tyr Tyr 

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 90/95

• Contoh mutasi insersi dan delesi yg mengakibatkan frameshiftmutation :

Mutasi insersi

TACGGACCAATACT

Normal DNA  

TACGGACAATACT

Mutasi delesi   TACGGCAATACT

• Dampak mutasi:

Perubahan virulensi/patogenitas

perubahan serotype

contoh antigenic shift dan drift pada virus AI

Genetic information exchange

Genetic information is exchanged by recombination of genome

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 91/95

1. Recombination of genome segments.

2. Reassortment.

3. Acquisition of cellular genes

Genetic information is exchanged by recombination of genomesegments. Infection of a cell by two different viruses can result

in exchange of genetic information, resulting in production of mixed progeny.

RecombinationHIV 2 mechanisms:

1. Copy choice: during (-) strand synthesis

Template switching: polio virus

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 92/95

2. Strand assimilation: during (+) strand synthesis

Reassortment

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 93/95

• Genetic drift: slow accumulation of mutations in a population. Due to copying errors andimmune selection.

G ti hift j ti h d b bi ti t t f

Shift vs Drift

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 94/95

• Genetic shift: a major genetic change caused by recombination or reassortment of genomes.

Drift Shift

Evolution is both  driven and  constrained by

the fundamental properties of viruses

D i l f di i i l l i i i bl

7/22/2019 Dasar Biologi Molekuler Undana

http://slidepdf.com/reader/full/dasar-biologi-molekuler-undana 95/95

• Despite lots of sequence diversity, viral populations maintain stable

master or consensus

sequences.The sequence that reflects the most common choice of nucleotide oramino acid at each position.

• Diversity limited be the to ability to function within certain constraints. These include:

 – Particle geometry: eg. Icosahedral capsids limit genome size by limiting volume.

 – All genomes are composed of nucleic acids: limits solutions to replication ordecoding of viral information.

 – Requirement for interactions with host cell machinery.

 – Requirements for interactions within the host.