bahan isolasi dna

1
BAHAN ISOLASI DNA Buffer 1. Tris base 2. Boric acid 3. Ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA) : menginaktivasi enzim DNase yang dapat mendenaturasi DNA yang diisolasi 4. HCl 5. NaOH Penghancuran membran dan dinding sel 1. Nitrogen cair 2. Proteinase K : melisiskan membran pada sel darah serta mendegradasi protein globular maupun rantai polipeptida dalam komponen sel 3. Sodium dodecyl sulphate (SDS) : melisiskan membran sel juga dapat berperan dalam mengurangi aktivitas enzim nuklease yang merupakan enzim pendegradasi DNA 4. CTAB : mendegradasi dinding sel, denaturasi protein, memisahkan karbohidrat, merusak membran sel dan melarutkan DNA Ekstraksi DNA 1. Phenol : menyebabkan protein kehilangan kelarutannya dan mengalami presipitasi yang selanjutnya dapat dipisahkan dari DNA melalui sentrifugasi 2. Chloroform : Denaturasi protein 3. Isoamil alcohol : Denaturasi protein 4. ddH 2 O : endapan DNA yang dihasilkan didapat dengan konsentrasi yang cukup tinggi Presipitasi 1. Etanol atau Isopropanol : mempresipitasi DNA pada fase aquoeus sehingga DNA menggumpal membentuk struktur fiber dan terbentuk pellet setelah dilakukan sentrifugasi, dan juga menghilangkan residu-residu kloroform yang berasal dari tahapan ekstraksi. Uji Kualitatif 1. Agarose 2. Ethidium bromide

Upload: ncx

Post on 12-Apr-2016

12 views

Category:

Documents


4 download

DESCRIPTION

Bahan Isolasi Dna

TRANSCRIPT

BAHAN ISOLASI DNA

Buffer

1. Tris base 2. Boric acid 3. Ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA) : menginaktivasi enzim DNase yang dapat

mendenaturasi DNA yang diisolasi 4. HCl 5. NaOH

Penghancuran membran dan dinding sel

1. Nitrogen cair 2. Proteinase K : melisiskan membran pada sel darah serta mendegradasi protein globular

maupun rantai polipeptida dalam komponen sel 3. Sodium dodecyl sulphate (SDS) : melisiskan membran sel juga dapat berperan dalam

mengurangi aktivitas enzim nuklease yang merupakan enzim pendegradasi DNA 4. CTAB : mendegradasi dinding sel, denaturasi protein, memisahkan karbohidrat, merusak

membran sel dan melarutkan DNA

Ekstraksi DNA

1. Phenol : menyebabkan protein kehilangan kelarutannya dan mengalami presipitasi yang selanjutnya dapat dipisahkan dari DNA melalui sentrifugasi

2. Chloroform : Denaturasi protein 3. Isoamil alcohol : Denaturasi protein 4. ddH2O : endapan DNA yang dihasilkan didapat dengan konsentrasi yang cukup tinggi

Presipitasi

1. Etanol atau Isopropanol : mempresipitasi DNA pada fase aquoeus sehingga DNA menggumpal membentuk struktur fiber dan terbentuk pellet setelah dilakukan sentrifugasi, dan juga menghilangkan residu-residu kloroform yang berasal dari tahapan ekstraksi.

Uji Kualitatif

1. Agarose 2. Ethidium bromide