bahan isolasi dna
DESCRIPTION
Bahan Isolasi DnaTRANSCRIPT
BAHAN ISOLASI DNA
Buffer
1. Tris base 2. Boric acid 3. Ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA) : menginaktivasi enzim DNase yang dapat
mendenaturasi DNA yang diisolasi 4. HCl 5. NaOH
Penghancuran membran dan dinding sel
1. Nitrogen cair 2. Proteinase K : melisiskan membran pada sel darah serta mendegradasi protein globular
maupun rantai polipeptida dalam komponen sel 3. Sodium dodecyl sulphate (SDS) : melisiskan membran sel juga dapat berperan dalam
mengurangi aktivitas enzim nuklease yang merupakan enzim pendegradasi DNA 4. CTAB : mendegradasi dinding sel, denaturasi protein, memisahkan karbohidrat, merusak
membran sel dan melarutkan DNA
Ekstraksi DNA
1. Phenol : menyebabkan protein kehilangan kelarutannya dan mengalami presipitasi yang selanjutnya dapat dipisahkan dari DNA melalui sentrifugasi
2. Chloroform : Denaturasi protein 3. Isoamil alcohol : Denaturasi protein 4. ddH2O : endapan DNA yang dihasilkan didapat dengan konsentrasi yang cukup tinggi
Presipitasi
1. Etanol atau Isopropanol : mempresipitasi DNA pada fase aquoeus sehingga DNA menggumpal membentuk struktur fiber dan terbentuk pellet setelah dilakukan sentrifugasi, dan juga menghilangkan residu-residu kloroform yang berasal dari tahapan ekstraksi.
Uji Kualitatif
1. Agarose 2. Ethidium bromide