7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

1/20

Isolasi DNAdari Buah

Oleh :

Vikie Fauzi Verdian

Mutiara Wulan

Intan Nurwulan

Adelina

Ayu Nurlina

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

2/20

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

3/20

1. Untuk mengetahui cara/metode yang benaruntuk memisahkan (mengisolasi) DNA dari

buah - buahan.2. Mengetahui keefektifan deterjen dan buah

yang dipakai untuk melakukan percobaanisolasi DNA.

Tujuan Praktikum

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

4/20

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

5/20

Penghalusan : Merusak dinding selsecara mekannik sehingga DNAdapat keluar dari dalam sel.

Garam : Berperan sebagailysingbuffer, yakni menjaga pH larutan

agar tetap konstan, sehinggadiharapkan tidak terjadidenaturasi DNA

Prinsip Berdasarkan Reaksi Biokimia

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

6/20

Detergen : melisiskan sel/Merusakmembran sel dan membran inti

sehingga DNA yang diinginkandapat dikeluarkan dari dalam sel. Penyaringan : Agar komponen sel selain

DNA tidang mengkontaminasi DNAyang hendak diisolasi. Alkohol : Mempresipitasikan asam

nukleat polimerik dengan baik untukmeningkatkan konsentrasi DNA

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

7/20

Dapat mengetahui apa yangdimaksud dengan isolasi DNA

Mengetahui langkah - langkahisolasi DNA dari buahbuahan

Mengetahui keefektifan detergen,garam dapur (NaCl) dan alkohol

absolute sebagai bahan pengisolasiDNA.

Manfaat Penelitian

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

8/20

DNA persenyawaan kimia yangpaling penting pada makhluk hidup,yang membawa keterangan genetik.

DNA molekul utama yang

mengkode semua informasi yangdibutuhkan untuk prosesmetabolisme dalam setiap organisme.

Dasar Teori

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

9/20

DNA

DNA yang menyusunkromosom ini merupakannukleotida rangkap yang tersusun

heliks ganda (double helix).

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

10/20

Isolasi DNA suatu proses untuk

mendapatkan DNA murni.

Tahapan isolasi DNA :

1. preparasi esktrak sel,2. pemurnian DNA dari ekstrak sel

dan

3. presipitasi DNA

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

11/20

Pengisolasian DNA secara sederhana :

1. Dapat dilakukan denganmemecahkan dinding sel2. Penambahan larutan basa adalah

untuk melisiskan membraninti,sehingga DNA akan keluar3. Penambahan alkohol absolute,

terjadi presipitasi PresipitatDNA terlihat seperti serabut-serabut putih yang terkumpuldiatas permukaan larutan.

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

12/20

Buah mengandung senyawapolifenol dan polisakarida dalam

konsentrasi tinggi yang dapatmenghambat pemurnian DNA,selain itu juga memeiliki kadar airyang tinggi, sehingga DNA yangterpretisipasi juga akan sedikit.

Proses isolasi DNA pada buah

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

13/20

Isolasi DNA diawali denganperusakan dan ataupembuangan dinding sel.

Melisiskan sel denganpenambahan larutan garamdetergen.

Dilakuakn pemisahan benang-benang DNA denganpenambahan alkohol absolute.

Proses isolasi DNA :

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

14/20

Alat : Gelas plastic Beker glass Pipet tetes Saringan biasa

Kain peyaring Kertas saring Blender Corong glass Tabung reaksi

Rak tabung reaksi Spatula Gelas ukur Timbangan Stopwatch Pisau

Bahan :

Buahbuahan 250 gr(buah nanas, dapat pulamenggunakan buah yanglainnya)

Detergen bubuk 1 spatula Aquadest Garam dapul (Na Cl) 2

spatula Alcohol absolute dingin 6

ml

Alat dan Bahan

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

15/20

1. Buah dibersihkan dari kulitnya

dan di timbang 250 gram2. Kemudian dimasukan ke dalam

blender dan di tambahkan 250 ml

aquadest, (blender selama 1 menit)3. Jus buah yang telah di blender disaring sebanyak tiga kali :1) penyarigan pertama =menggunakan penyaring biasa2) Penyaringan kedua =menggunakan kain penyaring

Cara Kerja

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

16/20

3) Penyaringan ketiga = menggunakan

kertas saring4. Air hasil saringan (alikot) dimasukan

ke dalam beker glass5. Buat laturan garam detergen dengan

cara :memcampurkan 1 spatula detergendengan 2 spatula garam dapur (NaCl)ke dalam 56 ml aquadest. Aduk 15menit sampai larut.Pengadukan dilakukan perlahan agartidak menghasilkan buih

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

17/20

6. Alikot dimasukkan kedalamtabung reaksi sebanyak 2 ml,kemudian ditambahkan denganlarutan detergen-garam sebanyak2 ml, aduk secara perlahan agar

tidak menghasilkan buih selama 3menit

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

18/20

7. Alikot yang sudah tercampurdengan larutan detergen-garam

ditambahkan dengan etanolabsolute melalui dingin tabungtetes demi tetes sebanyak 6 ml

8. Catat waktu pembentukan danketebalan benang-benang DNApada buah nanas

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

19/20

Untuk melihat bentuk double

helix dari DNA tersebut dapt dilakukan pemeriksaan denganmikroskop.

7/28/2019 project "Isolasi DNA Dari Buah"

20/20

TERIMAKASIH