analisis_miikrobiologi

7/24/2019 analisis_miikrobiologi

1/14

1

ANALISIS MIKROBIOLOGIANALISIS MIKROBIOLOGI

Perhitungan Jumlah SelPerhitungan Jumlah Sel Hitungan MikroskopikHitungan Mikroskopik

Hitungan CawanHitungan Cawan

MPN (Most Probable Number)MPN (Most Probable Number)

Perhitungan Massa sel secara langsungPerhitungan Massa sel secara langsung VolumetrikVolumetrik

GraimetrikGraimetrik

!ekeruhan!ekeruhan

Perhitungan Massa sel secara ti"ak langsungPerhitungan Massa sel secara ti"ak langsung #nalisis komponen sel#nalisis komponen sel

#nalisis pro"uk katabolisme#nalisis pro"uk katabolisme

#nalisis konsumsi nutrient#nalisis konsumsi nutrient


2/14

2

H$%&NG#N C#'#NH$%&NG#N C#'#N

Prinsip mikroba "itumbuhkan pa"a agarPrinsip mikroba "itumbuhkan pa"a agar

%ata Cara %ata Cara

%imbang gram "aging ikan *ang telah "iblen"er%imbang gram "aging ikan *ang telah "iblen"er

+"imasukkan ke"alam larutan pengencer , ml+"imasukkan ke"alam larutan pengencer , ml(pengenceran -(pengenceran -.).))+ "ikocok sampai merata/0iambil lagi )+ "ikocok sampai merata/0iambil lagi

ml "ari larutan *ang telah "iencer -ml "ari larutan *ang telah "iencer - .).)+ "icampurkan+ "icampurkan

"engan , ml larutan pengenceran (-"engan , ml larutan pengenceran (- .1.1)+ "ikocok+)+ "ikocok+

selan2utn*a "iencerkan sesuai "engan kebutuhan/selan2utn*a "iencerkan sesuai "engan kebutuhan/


3/14

3

0isiapkan me"ia pertumbuhan bakteri (Nutrient0isiapkan me"ia pertumbuhan bakteri (Nutrient#gar)/#gar)/

#mbil ml suspensi "ari masing.masing#mbil ml suspensi "ari masing.masingpengenceran "ituangkan "iatas agar *ang telahpengenceran "ituangkan "iatas agar *ang telah"ise"iakan+ suspensi "iusahakan serata"ise"iakan+ suspensi "iusahakan serata

mungkin "engan cara menggo*ang.go*angkanmungkin "engan cara menggo*ang.go*angkanpetri"ish/petri"ish/

Selan2utn*a "iingkubasikan selama 13 2amSelan2utn*a "iingkubasikan selama 13 2am

"engan suhu kamar+ "engan catatan petri"ish"engan suhu kamar+ "engan catatan petri"ish"isusun secara terbalik/"isusun secara terbalik/

0ilakukan perhitungan0ilakukan perhitungan


4/14

4

S%#N0#4% P5#%6 C7&N%S%#N0#4% P5#%6 C7&N%

Cawan *ang "ipilih "an "ihitung a"alah *angCawan *ang "ipilih "an "ihitung a"alah *ang

mengan"ung koloni antara 8- . 8--mengan"ung koloni antara 8- . 8--

9eberapa koloni *ang bergabung men2a"i satu9eberapa koloni *ang bergabung men2a"i satumerupakan satu kumpulan koloni *ang besar+merupakan satu kumpulan koloni *ang besar+

"ianggap satu koloni"ianggap satu koloni

Satu "eretan rantai koloni *ang terlihat sebagaiSatu "eretan rantai koloni *ang terlihat sebagai

suatu garis tebal "ihitung sebagai satu kolonisuatu garis tebal "ihitung sebagai satu koloni


5/14

5

C#4# P65#P74#NC#4# P65#P74#N

0#N P64H$%&NG#N !757N$0#N P64H$%&NG#N !757N$ Hasil *ang "ilaporkan han*a "ua angka+ contoh :; < -Hasil *ang "ilaporkan han*a "ua angka+ contoh :; < - 88 "ilaporkan"ilaporkan+= < -+= < ->>

Jika semua pengenceran ? 8-+ "iambil pengenceran terkecilJika semua pengenceran ? 8-+ "iambil pengenceran terkecil

Jika semua pengenceran @ 8--+ "iambil pengenceran tertinggi/Jika semua pengenceran @ 8--+ "iambil pengenceran tertinggi/ Jika pa"a cawan "ari "ua tingkat pengenceran "ihasilkan koloni 8- .Jika pa"a cawan "ari "ua tingkat pengenceran "ihasilkan koloni 8- .

8--+ maka ban"ingkan pengenceran terbesar "engan pengenceran8--+ maka ban"ingkan pengenceran terbesar "engan pengenceran

terkecil+ 2ika hasiln*a kecil sama "engan "ua+ maka "irata.ratakan/terkecil+ 2ika hasiln*a kecil sama "engan "ua+ maka "irata.ratakan/

#pabila hasiln*a @ 1+ "iambil "ari pengenceran terkecil#pabila hasiln*a @ 1+ "iambil "ari pengenceran terkecil

9eker2a "uplo9eker2a "uplo


6/14

6

Ulangan Pengenceran

10-1

Pengenceran

10-2

Pengenceran

10-3

1 215 105 30

2 230 95 50

Berapa jumlah bakteri hasil dari laboratorium tersebut diatasBerapa jumlah bakteri hasil dari laboratorium tersebut diatas

berdasarkan SPC ?berdasarkan SPC ?

Seorang pengusaha budidaya perikanan sedang menghadapi masalah, beberapaSeorang pengusaha budidaya perikanan sedang menghadapi masalah, beberapapelanggannya mengklaim, ikan lele yang dijual pengusaha tersebut telahpelanggannya mengklaim, ikan lele yang dijual pengusaha tersebut telahmenyebabkan penyakit, bahkan ada yang menderita demam tinggi dan tipus danmenyebabkan penyakit, bahkan ada yang menderita demam tinggi dan tipus dansaat ini dirawat di rumah sakit. Setelah dilakukan pengambilan sampel dan diujisaat ini dirawat di rumah sakit. Setelah dilakukan pengambilan sampel dan diujiternyata memang ikan lele yang dijual pengusaha tersebut banyak mengandungternyata memang ikan lele yang dijual pengusaha tersebut banyak mengandung

Bakteri.Bakteri. Menurut saudara apa saja kira-kira jenis bakteri yang mencemari ikan leleMenurut saudara apa saja kira-kira jenis bakteri yang mencemari ikan lele

tersebut.tersebut.

Hasil uji Laboratorium didapatkan hasilnya sebagai berikutHasil uji Laboratorium didapatkan hasilnya sebagai berikut


7/14

7

Keuntungan Hitungan CawanKeuntungan Hitungan Cawan

Han*a sel *ang hi"up *ang "ihitungHan*a sel *ang hi"up *ang "ihitung

beberapa mikroba "apat "ihitung sekaligusbeberapa mikroba "apat "ihitung sekaligus 0apat "igunakan untuk isolasi "an i"entiAikasi0apat "igunakan untuk isolasi "an i"entiAikasi

Kelemahan Hitungan CawanKelemahan Hitungan Cawan

Hasil perhitungan ti"ak menun2ukkan 2umlah sel *angHasil perhitungan ti"ak menun2ukkan 2umlah sel *ang

sebenarn*a+ karena beberapa sel *ang ber"ekatan mungkinsebenarn*a+ karena beberapa sel *ang ber"ekatan mungkinmembentuk satu kolonimembentuk satu koloni

Me"ium "an kon"isi inkubasi *ang berbe"a mungkinMe"ium "an kon"isi inkubasi *ang berbe"a mungkin

menghasilkan nilai *ang berbe"amenghasilkan nilai *ang berbe"a

Mikroba *ang "itumbuhkan harus "apat tumbuh pa"a me"iaMikroba *ang "itumbuhkan harus "apat tumbuh pa"a me"iapa"at "an membentuk koloni *ang kompakpa"at "an membentuk koloni *ang kompak

Memerlukan persiapan "an waktu inkubasi relatiA lamaMemerlukan persiapan "an waktu inkubasi relatiA lama

sehingga pertumbuhan koloni "apat "ihitung/sehingga pertumbuhan koloni "apat "ihitung/


8/14

8

P6NG&J$#N J&M5#H M$!479#P6NG&J$#N J&M5#H M$!479#

S6C#4# P4#0&G# B %$0#! 5#NGS&NGS6C#4# P4#0&G# B %$0#! 5#NGS&NG

Menggunakan Metilen 9lue (metil biru)Menggunakan Metilen 9lue (metil biru)

#mbil - gr "aging ikan ,- ml aDua"es + "iblen"er#mbil - gr "aging ikan ,- ml aDua"es + "iblen"er

sampai homogen/sampai homogen/

%ambahkan larutan metil biru E%ambahkan larutan metil biru E

$nkubasikan pa"a suhu 8-$nkubasikan pa"a suhu 8---C+ "iamati perubahan warnaC+ "iamati perubahan warna

*ang ter2a"i secara perio"ik/ Catat laman*a waktu*ang ter2a"i secara perio"ik/ Catat laman*a waktu

warna biru men2a"i hilang/warna biru men2a"i hilang/ Cocokan "engan %abel/Cocokan "engan %abel/


9/14

9

S%#N0#4% P6NG&J$#N 9#!%64$S%#N0#4% P6NG&J$#N 9#!%64$

06NG#N M6NGG&N#!#N 5#4&%#N M6%$5.9$4&06NG#N M6NGG&N#!#N 5#4&%#N M6%$5.9$4&


10/14

10

Menggunakan 4esaFurinMenggunakan 4esaFurin

#mbil gr "aging ikan+ masukkan ke"alam tabung#mbil gr "aging ikan+ masukkan ke"alam tabungreaksi steril *ang telah "iisi "engan Nutrient brothreaksi steril *ang telah "iisi "engan Nutrient broth

steril "an -+>E ekstrak *east/steril "an -+>E ekstrak *east/

%ambahkan ml larutan -+> E wB resaFurin%ambahkan ml larutan -+> E wB resaFurin

$nkubasikan pa"a suhu 8-$nkubasikan pa"a suhu 8---C sambil amatiC sambil amati

perubahan warna *ang ter2a"i/perubahan warna *ang ter2a"i/

Catat laman*a waktu perubahan warna "ari merahCatat laman*a waktu perubahan warna "ari merah

2ambu men2a"i ti"ak berwarna/ Cocokan hasiln*a2ambu men2a"i ti"ak berwarna/ Cocokan hasiln*a"engan tabel"engan tabel


11/14


12/14

12

P6NG&J$#N S#5M7N655# SH$G655#P6NG&J$#N S#5M7N655# SH$G655# %imbang 1- gr ikan+ "icampur "engan =- ml 5aktose broth%imbang 1- gr ikan+ "icampur "engan =- ml 5aktose broth

strength steril+ "iblen"er sampai homogenstrength steril+ "iblen"er sampai homogen

#mbil - ml larutan homogenat+ masukkan ke"alam tabung reaksi#mbil - ml larutan homogenat+ masukkan ke"alam tabung reaksi

kecil *ang telah berisi me"ia Selenite C*stine 9roth (SC9)+kecil *ang telah berisi me"ia Selenite C*stine 9roth (SC9)+

inkubasikan pa"a suhu 8:inkubasikan pa"a suhu 8:--C selama 13 2am/C selama 13 2am/

Selesai inkubasi tumbuhkan pa"a tiga me"ia 9S#+ SS# "an 6#Selesai inkubasi tumbuhkan pa"a tiga me"ia 9S#+ SS# "an 6#

"engan cara goresan/ $nkubasikan pa"a suhu 8:"engan cara goresan/ $nkubasikan pa"a suhu 8:--C selama 13 2am/C selama 13 2am/

Setelah inkubasi selesai amati koloni *ang tumbuh/Setelah inkubasi selesai amati koloni *ang tumbuh/

%an"a.tan"a koloni Salmonella Shigella %an"a.tan"a koloni Salmonella Shigella

Pa"a 9S# bagian tengah koloni berwarna hitam+ pinggir transparan+ setelahPa"a 9S# bagian tengah koloni berwarna hitam+ pinggir transparan+ setelah

3= 2am seluruhn*a berwarna hitam3= 2am seluruhn*a berwarna hitam

Pa"a SS# koloni 2ernih+ kecil+ rata+ transparan "an ti"ak berwarnaPa"a SS# koloni 2ernih+ kecil+ rata+ transparan "an ti"ak berwarna

Pa"a 6# koloni halus+ licin+ transparan+ warna orange atau merah 2ambuPa"a 6# koloni halus+ licin+ transparan+ warna orange atau merah 2ambu


13/14

13

Setiap koloni *ang "i"uga Salmonella "ipin"ahkan ke agar miring %S$# "enganSetiap koloni *ang "i"uga Salmonella "ipin"ahkan ke agar miring %S$# "engan

cara menggoreskan pa"a bagian *ang miring atau "imasukkan pa"a me"ia agarcara menggoreskan pa"a bagian *ang miring atau "imasukkan pa"a me"ia agar

tegak/tegak/

$nkubasikan pa"a suhu 8:$nkubasikan pa"a suhu 8:--C selama 13 2am/ %S$# *ang "i"uga mengan"ungC selama 13 2am/ %S$# *ang "i"uga mengan"ungSalmonella akan berwarna merah pa"a bagian agar miring atau warna kuningSalmonella akan berwarna merah pa"a bagian agar miring atau warna kuning

pa"a agar tegak/ !alau a"a Hpa"a agar tegak/ !alau a"a H11S akan berwarna hitamS akan berwarna hitam

%S$# *ang "i"uga selan2utn*a "iu2i secara biokimiawi "engan cara memin"ahkan%S$# *ang "i"uga selan2utn*a "iu2i secara biokimiawi "engan cara memin"ahkan

koloni "ari %S$# ke me"ia gula (Purple Carboh*"rat) "engan ariasi sumberkoloni "ari %S$# ke me"ia gula (Purple Carboh*"rat) "engan ariasi sumber

karbohi"rat *ang berbe"a/ Gunakan tabung reaksi "urham/ $nkubasikan pa"akarbohi"rat *ang berbe"a/ Gunakan tabung reaksi "urham/ $nkubasikan pa"asuhu 8:suhu 8:--C selama 13 2am/ #mati pertumbuhann*aC selama 13 2am/ #mati pertumbuhann*a

Jika glukosa terAermentasi me"ia akan berubah "ari ungu men2a"i kuningJika glukosa terAermentasi me"ia akan berubah "ari ungu men2a"i kuning

Jika monitol terAermentasi+ me"ia akan berubah "ari ungu men2a"i kuningJika monitol terAermentasi+ me"ia akan berubah "ari ungu men2a"i kuning

Jika laktosa terAermentasi+ me"ia akan tetap berwarna unguJika laktosa terAermentasi+ me"ia akan tetap berwarna ungu

Jika sakrosa ti"ak terAermentasi+ me"ia akan tetap berwarna unguJika sakrosa ti"ak terAermentasi+ me"ia akan tetap berwarna ungu

Jika maltosa terAermntasi+ me"ia berubah "ari ungu men2a"i kuningJika maltosa terAermntasi+ me"ia berubah "ari ungu men2a"i kuning

Jika ter2a"i reaksi in"ol+ penambahan reagen 6rlich+ cincin ti"ak akan a"aJika ter2a"i reaksi in"ol+ penambahan reagen 6rlich+ cincin ti"ak akan a"a

4eaksi.reaksi tersebut "apatB ti"ak menghasilkan gas4eaksi.reaksi tersebut "apatB ti"ak menghasilkan gas


14/14

14

P6NG&J$#N V$94$7P6NG&J$#N V$94$7 #mbil 1- gr "aging ikan+ "icampur "engan =- ml pepton water#mbil 1- gr "aging ikan+ "icampur "engan =- ml pepton water

3E+ "iblen"er secara aseptik selama 8 menit/3E+ "iblen"er secara aseptik selama 8 menit/

Masukkan ke"alam erlenme*er steril "an inkubasikan pa"a suhuMasukkan ke"alam erlenme*er steril "an inkubasikan pa"a suhu8:8:--C selama 13 2am /C selama 13 2am /

%anam pa"a me"ia %C9S "engan cara goresan+ inkubasikan%anam pa"a me"ia %C9S "engan cara goresan+ inkubasikanpa"a suhu 8:pa"a suhu 8:--C selama 13 2am /C selama 13 2am /

#mati+ 2ika ti"ak a"a *ang menun2ukkan reaksi positiA berarti ti"ak#mati+ 2ika ti"ak a"a *ang menun2ukkan reaksi positiA berarti ti"aka"a ibrio+ pengu2ian ti"ak "ilan2utkan/a"a ibrio+ pengu2ian ti"ak "ilan2utkan/ Jika reaksi positiA tan"a.tan"an*a a"alah sebagai berikutJika reaksi positiA tan"a.tan"an*a a"alah sebagai berikut

Vibrio coleraVibrio colera kolonin*a terang+ berukuran kecil+ "iametern*a mm kolonin*a terang+ berukuran kecil+ "iametern*a mm

Vibrio eltorVibrio eltor kolonin*a berwarna kuning+ "itengahn*a berwarna coklat+ kolonin*a berwarna kuning+ "itengahn*a berwarna coklat+

"atar+ "iametern*a 1.8 mm"atar+ "iametern*a 1.8 mm Vibri parahaemoliticusVibri parahaemoliticus koloni berwarna hi2au+ makin ketengah warna hi2au koloni berwarna hi2au+ makin ketengah warna hi2au

semakin tua+ basah+ "iametern*a 1.8 mmsemakin tua+ basah+ "iametern*a 1.8 mm

!alau a"a koloni *ang "i"uga+ "iinokulasikan pa"a agar %S$+!alau a"a koloni *ang "i"uga+ "iinokulasikan pa"a agar %S$+selan2utn*a I Salmonellaselan2utn*a I Salmonella

analisis_miikrobiologi

Documents