materi p4 biokim

P.4PENETAPAN KADAR GLIKOGEN DALAM LIVER

• Glikogen adalah bentuk cadangan karbohidrat bagi hewan tingkat tinggi dan biasanya disimpan di hepar, otot skelet, ginjal dan hampir di semua jaringan kecuali otak

• Glikogen adalah bentuk simpanan karbohidrat utama dalam tubuh

• Hepar mengandung 6% glikogen• Otot mengandung < 1% glikogen

• Dalam otot glikogen berfungsi sebagai bahan bakar otot

• Dalam hepar glikogen berfungsi sebagai sumber energi untuk jaringan tubuh lain melalui pembentukan glukosa

• Glikogenesis adalah proses perubahan glukosa menjadi glikogen

• Glikogenolisis adalah proses perubahan glikogen menjadi glukosa.

• Hormon-Hormon yang terlibat dalam proses metabolisme karbohidrat :

1. Insulin2. Adrenalin3. Glukarbon4. Glukortikoid

TUGAS!!!!Cari bagaimana pengaruh hormon-hormon tersebut dalam metabolisme karbohidrat.

Bahan :Tikus Jantan Lapar dan KenyangTCA 5%Larutan I-KIEtanol 96%Etanol-EterAquadestReagen Antron

Alat :Cawan PorselenCorong BucherVakumLumpang dan AluBeaker GlassGelas ukurCorongSentrifugeSpektrofotometer

Isolasi Glikogen1. Tikus dibunuh,diambil livernya2. Timbang Hati Tikus dalam cawan porselen3. Gerus dan tambah TCA 2x berat hati tikus4. Dekantir5. Saring Dengan Kertas Saring6. Simpan Filtrat (Filtrat I)7. Gerus kembali residu dan tambahkan TCA 1x

berat hati tikus8. Saring dengan kertas saring9. Campur Filtrat I dan II

10.Tambahkan etanol 96% 2x volume filtrat11.Aduk pelan-pelan hingga terjadi flokulasi

glikogen12.Sentrifugasi selama 10 detik13.Ambil endapan14.Tambahkan etanol 2x volume endapan15.Sentrifugasi kembali16.Ambil endapan, cuci dengan etanol dan

eter17.Kumpulkan endapan dan keringkan

18.Ambil Glikogen kering19.Tambah aquadest ad 10ml20.Ambil 1 ml larutan, tambah reagen antron 4

ml21.Panaskan dalam penangas air selama 10 detik22.Dinginkan23.Ukur Absorbansi pada panjang gelombang

643,5nm24.Hitung Kadar glikogen

Tes Glikogen1. Ambil setetes Filtrat Glikogen2. Tambahkan setetes larutan I-KI, Campur3. Berwarna Merah (+)

Berwarna Kuning (-)