lap. pengaruh lingkungan - ivr
Post on 06-Jul-2018
219 Views
Preview:
TRANSCRIPT
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 1/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
I. KOMPETENSI UMUMPraktikan dapa tmengetahui bagaimana tingkat sterilisasi dari
ruangan LAF, Enkas, dan ruangan lampu UV.
II. KOMPETENSI KHUSUS
Praktikan dapat mengetahui cara menentukan sterilitas ruang
yang disterilkan dengan menggunakan LAF, Enkas , dan Lampu UV.
III. PRINSIP
Mahasiswa dapat mengetahui bagaimana cara mensterilkan
suatu ruangan dan tingkatan ruang steril.
IV. LANDASAN TEORI
Mikroorganisme mempunyai peranan sangat penting dalam
kehidupan, dan eksistensinya merupakan persyaratan mutlak bagi
terbinanya semua kehidupan yang lain !rianto, "##$%.
&alam kondisi lingkungan yang memenuhi persyaratan yang
diperlukannya, bakteri dapat berkembang dengan cepat sekali
ber'lori'erasi% dimana dlam satu (am, satu bakteri dapat
memperbanyak diri men(adi beribu)ribu. *ika lingkungannya tida
memmenuhi persyaratan hidup yang diperlukan oleh bakteri, tidak
berarti bakteri itu akan mati, tetapi pertumbuhannya terhambat
+ranggono, "##$%.
erbagai akti'itas yang dilakukan pada kegiatan analisis
molecular memerlukan kondisi sterilitas yang tinggi untuk mencegah
ter(adinya kontaminasi. -uang steril dipergunakan untuk
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 2/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
melaksanakan peker(aan yang memerlukan sterilitas tinggi . (ika lokasi
terbatas, maka 'ungsi ruang steril dapat digantikan dengan laminar air
flow cabinet &aisy P, //0%.
1anitasi ruangan dapat dilakukan dengan cara membersihkan
ruangan dari debu dan kotoran lain. 1etelah ruangan bersih dan
kering, ruangan disemprot dengan 'ormalin "2 atau alcohol $#2
sampai seluruh bagian ruangan merata. 1elain ruangan yang harus
bersih dan steril, peralatan yang digunakan (uga harus disterilisasi
(uga Muchro(i, "##3%.
Ada beberapa cara untuk mensterilisasi dan desin'eksi
misalnya sa(a dengan pemanasan, umumnya bakteri 4egetati' mati
dalam waktu 5) # menit pada suhu 65 o7 hal ini sama sa(a baik bakteri
yang mampu berbentuk spora maupun tidak. 1edangkan bentuk
spora perlu waktu lebih lama. Pemanasan dapat mematikan bakteri
menggumpalkan protoplasmanya. Ada (uga sterilisasi dengan uap air
yang ditekan autocla4e%, cara ini yang paling baik karena suhu yang
dicapainya tinggi dan air untuk koagulasi protein banyak, dengan alat
ini, besarnya tekanan uap air yang diperlukan dapat diatur
Ent(ang, "##8%.
1terilisasi dalam mikrobiologi merupakan suatu proses
penghilangan semua (enis organisme hidup seperti proto9oa, 'ungi,
bakteri, mycoplasma , dan 4irus yang terdapat dalam suatu benda.
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 3/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
1terilisasi didesain untuk membunuh atau menghilangkan
mikroorganisme. 1edangkan proses pembunuhan atau penghilangan
mikroorganisme yang dapat menyebabkan penyakit. &isin'eksi tidak
men(amin ob(ek men(adi steril karena spora 4iabel dan beberapa
mikroorganisme tetap dapat tersisa Pratiwi, "##/%.
Ada beberapa tu(uan utama mematikan, menyingkirkan atau
menghambat pertumbuhan mikroorganisme, antara lain % untuk
mencegah in'eksi pada manusia, hewan piaraan dan tumbuhan, "%
untuk mencegah makanan dan lain)lain komoditi men(adi rusak, 8%
untuk mencegah gangguan kontaminasi terhadap mikroorganisme
yang digunakan dalam industri, dan 0% untuk mencegah kontaminasi
bahan)bahan yang dipakai dalam penger(aan biakan murni
dilaboratorium !rianto, "##6%.
Antiseptis (uga merupakan salah satu proses yang mencakup
inakti4si atau mematikan mikroorganisme dengan cara kimiawi.
Antiseptik dapat bersi'at bakteri sidal atau bakteriostatik: proses
bakteriostatik hanya menghentikan pertumbuhan bakteri sedangkan
proses bakterisidal mematikan bakteri ibiana, //0%.
V. METODE KERJA
a. Alat dan ahan
. Alat
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 4/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
Alat)alat yang digunakan pada saat praktikum adalah 7awan
petri, Enkas, Erlenmeyer, ;and sprayer, !nkubator, Laminary Air
Flow LAF%, Lampuspiritus, Lampu UV, osebulat, 1arungtangan,
dan 1poit # ml.". ahan
ahan)bahan yang digunakan pada saat praktikum adalah
Alkohol $# 2, Aluminium 'oil, <ertas label, Medium =A =utrient
Agar%, Medium P&A Potato &e>trose Agar%, dan +issu-ol.b. 7ara <er(a
. Penyiapan Mediuma% =utrient Agar =A%
1iapkan 8 cawan petri steril kemudian diisi dengan
medium nutrient agar =A% steril yang sudah dicairkan
secara aseptic sebanyak # mL, lalu dibiarkan memadat.b% Potato &e>trose Agar P&A%
1iapkan 8 cawan petri steril kemudian diisi dengan
medium potato de>trose agar P&A% steril yang sudah
dicairkan secara aseptic sebanyak # mL, lalu dibiarkan
memadat.". Penyiapan -uang 1terilisasi
a% Lampu Ultra4ioletLampu UV dinyalakan kemudian disemprot dengan
alkohol $#2 kemudian didiamkan selama 8# menit sebelum
dilakukan pengu(ian.
b% Laminary Air Flow LAF%Laminary Air Flow LAF% dinyalakan kemudian disemprot
dengan alkohol $#2 kemudian nyalakan kipasnya lalu
didiamkan selama 8# menit sebelum dilakukan pengu(ian.
c% Enkas
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 5/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
Enkas dinyalakan kemudian disemprot dengan alkohol
$#2 kemudian didiamkan selama 8# menit sebelum
dilakukan pengu(ian.8. U(i 1terilitas -uangan
a% Lampu UV&isiapkan alat dan bahan, masing)masing satu cawan
petri steril yang berisi medium =A dan medium P&A dibuka
?8 bagian dan ditempatkan di bawah sinar lampu UV selama
5 menit pada tempat yang tadinya sudah di semprot dengan
alkohol $# 2. <emudian cawan petri steril tersebut
diinkubasikan pada incubator bersuhu 8$@ 7 selama > "0
(am untuk =A dan dimasukkan di enkas selama 8 > "0 (am
untuk medium P&A. &iamati ada tidaknya koloni mikroba.b% Laminary Air Flow LAF%
&isiapkan alat dan bahan, masing)masing satu cawan
petri steril yang berisi medium =A dan medium P&A dibuka
?8 bagian dan ditempatkan di dalam laminary air 'low LAF%
selama 5 menit pada tempat yang tadinya sudah di semprot
dengan alkohol $# 2. <emudian cawan petri steril tersebut
diinkubasikan pada incubator bersuhu 8$@ 7 selama > "0
(am untuk =A dan dimasukkan di enkas selama 8 > "0 (am
untuk medium P&A. &iamati ada tidaknya koloni mikroba.c% Enkas
&isiapkan alat dan bahan, masing)masing satu cawan
petri steril yang berisi medium =A dan medium P&A dibuka
?8 bagian dan ditempatkan di dalam enkas selama 5 menit
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 6/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
pada tempat yang tadinya sudah di semprot dengan alkohol
$# 2. <emudian cawan petri steril tersebut diinkubasikan
pada incubator bersuhu 8$@ 7 selama > "0 (am untuk =A
dan dimasukkan di enkas selama 8 > "0 (am untuk medium
P&A. &iamati ada tidaknya koloni mikroba.VI.HASIL PENGAMATAN
a. +abel Pengamatan
Kel.Enkas Lampu UV LAF
NA PDA NA PDA NA PDA
. " 06 8/ 5 "8
". "8 6 0" 8 0/ 65
8. "8 " 58 / "5 00
0. 5# 50 #$ #3 " $5. 88 3 3$ " " 8"
*umlah 0# "06 885 8#/ "" 3+otal "3 0/," 6$ 6 ,3 "0,0 86,"
b. Foto Pengamatan. akteri Medium =A%
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
LA -A+ -!UM M!<- ! L B!
FA<UL+A1 FA-MA1!
U=!VE-1!+A1 MU1L!M !=& =E1!A
&idiamkan di Enkas Medium =A%
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 7/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
". *amur Medium P&A%
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
LA -A+ -!UM M!<- ! L B!
FA<UL+A1 FA-MA1!
U=!VE-1!+A1 MU1L!M !=& =E1!A
&idiamkan di UV Medium =A%
LA -A+ -!UM M!<- ! L B!FA<UL+A1 FA-MA1!
U=!VE-1!+A1 MU1L!M !=& =E1!A
&idiamkan di LAF Medium =A%
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 8/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
LA -A+ -!UM M!<- ! L B!
FA<UL+A1 FA-MA1!U=!VE-1!+A1 MU1L!M !=& =E1!A
&idiamkan di Enkas Medium P&A%LA -A+ -!UM M!<- ! L B!
FA<UL+A1 FA-MA1!
U=!VE-1!+A1 MU1L!M !=& =E1!A
&idiamkan di UV Medium P&A%
LA -A+ -!UM M!<- ! L B!
FA<UL+A1 FA-MA1!U=!VE-1!+A1 MU1L!M !=& =E1!A
&idiamkan di LAF Medium P&A%
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 9/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
VII. PEMBAHASANerbagai akti'itas yang dilakukan pada kegiatan analisis
molecular memerlukan kondisi sterilitas yang tinggi untuk mencegah
ter(adinya kontaminasi. -uang steril dipergunakan untuk
melaksanakan peker(aan yang memerlukan sterilitas tinggi .
1anitasi ruangan dapat dilakukan dengan cara membersihkan
ruangan dari debu dan kotoran lain. 1etelah ruangan bersih dan
kering, ruangan disemprot dengan 'ormalin "2 atau alcohol $#2
sampai seluruh bagian ruangan merata. 1elain ruangan yang harus
bersih dan steril, peralatan yang digunakan (uga harus disterilisasi
(uga.
-uang 1teril dibagi men(adi beberapa yaitu a% -uang <elas !
Chite Area%, *umlah Partikel non)patogen% ukuran #,5 Dm
maksimum ##?'t 8: b% -uang <elas !! 7lear Area%, *umlah Partikel
non)patogen% ukuran #,5 Dm maksimum ####?'t 8: 8% -uang <elas
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 10/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
!!! Brey Area%, *umlah Partikel non)patogen% ukuran #,5 Dm
maksimum #####?'t 8: d% -uang <elas !V lack Area%, *umlah
Partikel non)patogen% ukuran #,5 Dm maksimum #####?'t 8.
7ara yang digunakan untuk menghancurkan, menghambat
pertumbuhan dan menyingkirkan mikroorganisme berbeda)beda
tergantung pada spesies yang dihadapi. 1elain itu lingkungan dan
tempat mikroba ini (uga berbeda)beda. ;al tersebut (uga dapat
di(adikan sebagai bahan pertimbangan untuk menentukan cara untuk
menghancurkan mikroorganisme yang digunakan tergantung pada
pengetahuan, keterampilan dan tu(uan dari yang melaksanakannya.
Pada praktikum ini, dilakukan u(i sterilisasi ruangan, dimana
ruangan dibagi men(adi 8 bagian yang dimisalkan dengan sterilisasi
dengan UV, Laminary Air Flow LAF% dan Enkas. Pertama)tama
ketiga tempat tersebut di semprotkan dengan alcohol $#2 kemudian
didiamkan 5 menit. &igunakan alkohol karena e'ekti' membunuh
bakteri dan 'ungi namun tidak dapat membunuh endospora dan 4irus
non en4eloped. Mekanisme aksi alkohol adalah dengan
mendenaturasi protein mikroorganisme, melarutkan lipid dari
membran mikroorganisme. 1elan(utnya disiapkan medium =A
nutrient agar% dan P&A Potato &e>trosa Agar%, dimasukkan dalam
cawan petri dan dibiarkan memadat.
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 11/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
<emudian cawan petri dimasukkan masing)masing kedalam
UV, LAF dan Enkas. Pada saat dimasukkan cawan petri dibuka ?8
bagian dan dibiarkan 5 menit. &igunakan LAF Laminar Air Flow%,
enkas, dan lampu UV karena ketiganya digunakan sebagai alat untuk
mensterilkan atau untuk membantu proses sterilisasi dalam
laboratorium sehingga perlu dilakukan pengu(ian sterilisasi terhadap
ketiganya untuk melihat kemungkinan terkontaminasinya oleh
mikroorganisme. Pada cawan petri dibuka ?8 bagian dengan tu(uan
untuk membiarkan mikroorganisme untuk masuk sehingga dapat
diamati. &ibiarkan 5 menit karena pada selang waktu tersebut
mikroorganisme sudah mampu diisolasi dari suatu tempat
lingkungan% ke dalam suatu medium.
1etelah itu, cawan petri dikeluarkan dan diinkubasi dalam
keadaan terbalik, dimana untuk bakteri menggunakan incubator >
"0 (am sedangkan (amur pada enkas 8 > "0 (am. <emudian diamati
dan dihitung (umlah mikroorganisme yang tumbuh.
VIII. KESIMPULAN
&ari percobaan yang telah dilakukan, maka dapat disimpulkan
bahwa (umlah mirkoorganisme yang tumbuh dalam medium =A
adalah 5# koloni dan yang tumbuh dalam medium P&A adalah 50
koloni dengan ruang u(i lampu UV. *umlah mikroorganisme yang
tumbuh dalam medium =A adalah #$ koloni dan yang tumbuh
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 12/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
dalam medium P&A adalah #3 koloni dengan ruang u(i Enkas. &an
(umlah mikroorganisme yang tumbuh dalam medium =A adalah "
koloni dan yang tumbuh dalam medium P&A adalah $ koloni
dengan ruang u(i LAF. 1ehingga dapat disimpulkan bahwa Alat yang
sangat e'ekti' menghambat pertumbuhan mikroorganisme adalah
LAF Laminar Air Flow%. &imana tekanan udara di dalam LAF lebih
besar daripada dari luar sehingga mencegah masuknya
mikroorganisme dan udara yang berisi mikroba akan ditarik keluar.
LAF (uga dilengkapi saringan sehingga mikroba yang telah keluar
tidak akan dapat kembali lagi.
I . DAFTAR PUSTAKA
ibiana Lay, C. //0. Analisis Mikroba di Laboratorium” . P+. -a(aBra'indo Persada akarta.
&aisy P., 1riyanti ;endaryono. //0. Teknik Kultur Jaringan G. Anggota !<AP! Hogyakarta.
Ent(ang, !ndan. "##8. Mikrobiologi & Parasitologi G. P+. 7itra Adityaakti *akarta.
!rianto, <oes. "##$. Mikrobiologi Menguak Dunia MikroorganismeJilid ” . 7V. Hrama Cidya andung.
!rianto, <oes. "##6. Mikrobiologi Medis” . Al'abeta andung.
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 13/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
Muchro(i., 7ahyana HA. "##3. !udi Daya Jamur Kuping G. Penebar 1wadaya *akarta.
Pratiwi, 1yl4ia +. "##/. G Mikrobiologi "armasi G. Erlangga *akarta.
+ranggono, -etno !swari. "##$. !uku Pegangan #lmu Pengeta$uanK% M'T#K G. P+ Bramedia Pustaka Utama *akarta.
. LAMPIRAN
A. 1<EMA <E-*A
Medium =A?P&A # ml
&alam cawan Petri
LAF Lampu UV Enkas
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 14/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
Alkohol $#2 Alkohol $#2 Alkohol $#2
5 menit 5 menit 5 menit
uka ?8 bagian
&iamkan 5 menit
!nkubasi
1uhu 8$@7 >"0 (am untuk medium =A
1uhu 8$@7 8>"0 (am untuk medium P&A
. < MP 1!1! ME&!UM
. Medium =A =utrien Agar%
Peptone 5,# g
Ekstrak bee' 8,# g
Agar 5 g
AIuadest ### ml
". Medium P&A potato de>trose agar%
Ekstrak kentang 0,# dari "## g kentang
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR
http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 15/15
ANALISIS STERILITAS RUANGAN
&) glukosa "# g
Agar 5 g
AIuadest ### ml
IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182
top related