52121090-analisis-karbohidrat

DAFTAR ISI

DAFTAR ISI……………………………………………….................................... 1

BAB I PENDAHULUAN........................................................................................ 2

BAB II TUJUAN PERCOBAAN........................................................................... 12

BAB III BAHAN & CARA

Uji Molisch................................................................................................................ 13

Uji Iodium................................................................................................................. 13

Uji Benedict.............................................................................................................. 14

Uji Barfoed............................................................................................................... 14

Uji Osazon................................................................................................................ 15

Uji Seliwanoff........................................................................................................... 15

Uji Asam Musat…………………………………………………………………… 16

BAB IV HASIL PRAKTIKUM………………………………………………… 17

BAB V PEMBAHASAN

Uji Molisch................................................................................................................ 18

Uji Iodium................................................................................................................. 19

Uji Benedict.............................................................................................................. 20

Uji Barfoed............................................................................................................... 20

Uji Osazon………………………………………………………………………… 21

Uji Seliwanoff.......................................................................................................... 21

Uji Asam Musat…………………………………………………………………... 22

1

BAB VI KESIMPULAN......................................................................................... 23

DAFTAR PUSTAKA........................................................................................... . 24

SKEMA PERCOBAAN................................................................................. . 25

LAMPIRAN............................................................................................................ 26

Skema Kerja Uji Kualitatif....................................................................................... 20

BAB I

PENDAHULUAN

Karbohidrat tersebar luas baik di dalam jaringan tumbuhan maupun hewan. Pada

tumbuhan, karbohidrat dihasilkan melalui proses fotosintesis dan dan mencakup selulosa

yang merupakan rangka tumbuh – tumbuhan serta pati dari sel – sel tumbuhan. Sedangkan

pada hewan, karbohidrat dalam bentuk glukosa dan glikogen berperan sebagai sumber

terpenting untuk energi bagi aktivitas vital.

Fungsi utama karbohidrat dalam metabolisme adalah sebagai bahan bakar untuk

oksidasi dan menyediakan energi untuk proses – proses metabolisme lainnya.

Selain itu karbohidrat juga memiliki fungsi – fungsi yang lain, seperti :

• Sebagai energi cadangan.

• Kompenen struktur membran dan dinding sel.

• Mempertahankan kadar gula darah.

Ada beberapa definisi tentang karbohidrat, yaitu :

1. Turunan aldehid atau keton dari alkohol polihidroksil atau zat – zat yang

pada hidrolisis menghasilkan derivat – derivat tersebut.

2. Polihidroksi aldehida atau polihidroksi keton yang mempunyai rumus

molekul umum (CH2O)n. Dari rumus ini dapat diketahui bahwa karbohidrat

adalah suatu polimer. Senyawa yang menyusunnya adalah monomer –

monomer.

3. Senyawa karbonil alami dengan beberapa gugus hidroksi.

2

4. Merupakan zat padat berwarna putih yang sukar larut dalam pelarut organik,

tetapi larut dalam air (kecuali beberapa polisakarida).

Karbohidrat terdiri dari berbagai senyawa yang sangat melimpah di alam. Senyawa

yang termasuk biomolekul ini dapat di golongkan dala berbagai macam. Penggolongan

karbohidrat dapat dilakukan berdasarkan berbagai hal, yaitu :

1. Berdasarkan bentuk cincinnya. Karbohidrat dapat di bagi menjadi :

Golongan furanosa

Karbohidrat yang masuk dalam golongan ini adalah karbohidrat yang

mempunyai cincin beranggota 5.

Golongan piranosa

Karbohidrat yang masuk dalam golongan ini adalah karbohidrat yang

mempunyai cincin beranggota 6.

Gambar struktur dari piranosa dan furonosa :

2. Berdasarkan jumlah monomer yang menyusun polimernya, karbohidrat

dapat di bagi menjadi :

Monosakarida

Monosakarida sering juga disebut gula sedrhana (simple sugar).

Karena monosakarida hanya terdiri dari satu unit polihidroksi aldehid atau

keton. Hal ini menyababkan monosakarida tidak dapat dihidrolisis menjadi

bentuk yang lebih sederhana lagi.

Monosakarida segera mereduksi senyawa – senyawa pengoksidasi

seperti ferisianida, hidrogen peroksida, atau ion kipri (CU2+). Pada reaksi

seperti ini, gula dioksidasi pada gugus karbonil dan senyawa pengoksidasi 3

Struktur piranosa Struktur furonosa

menjadi tereduksi (senyawa pereduksi adalah pemberi elektron dan senyawa

pengoksidasi adalah penerima elektron). Glukosa dan gula – gula lain yang

mampu mereduksi senyawa pengoksidasi disebut gula pereduksi. Sifat ini

berguna dalam analisa gula.

Rumus umum monosakarida adalah CnH2mOn. Kerangka monosakarida

adalah rantai karbon berikatan tunggal yang tidak bercabang. Satu di antara

atom karbon berikatan ganda terhadap suatu atom okisigen membentuk

gugus karbonil, sedangkan atom karbon lainnya berikatan dengan gugus

hidroksil. Jika gugus karbonil berada pada ujung rantai karbon,

monosakarida tersebut adalah suatu aldehid, dan disebut suatu aldosa ; jika

gugus karbonil berada pada posisi lain, monosakarida tersebut adalah suatu

keton, dan disebut ketosa.

Monosakarida yang terpenting adalah glukosa dan friktosa. Contoh

lainnya adalah :

Monosakarida Rumus molekul Aldosa Ketosa

Triosa C3H6O3 Gliserosa Dihidroksi aseton

Tretosa C4H8O5 Eritrosa Eritrulosa

Pentosa C5H10O5 Ribosa Ribulosa

Heksosa C6H12O6 Glukosa Fruktosa

Oligosakarida

Oligosakarida merupakan karbohidrat terbentuk dari dua sampai

sepuluh monosakarida. Yang termasuk ke dalam kelompok oligosakarida

adalah disakarida, trisakarida, dan seterursnya sesuai dengan jumlah satuan

monosakaridanya. Oligosakarida yang paling banyak terdapat di alam

adalah disakarida.

Disakarida merupakan karbohidrat yang terdiri atas residu

monosakarida yang dihubungkan oleh ikatan glikosida. Dimana bila

disakarida tersebut dihidrolisis, menghasilkan molekul monosakarida sama

atau berlainan. Misalnya sukrosa, maltose, laktosa, dan selobiosa.

1. Maltosa

4

Maltosa adalah suatu disakarida yang terbentuk dari dua

molekul glukosa. Pada umumnya dihasilkan dari hidrolisis pati.

Terdiri dari dua satuan monosakarida, yaitu glukosa dan glukosa.

2. Sukrosa

Sukrosa termasuk disakarida yang disusun oleh glukosa dan

fruktosa. Gula ini banyak terdapat dalam tanaman berlainan

dengan kebanyakan disakarida dan oligosakarida, sukrosa tidak

mempunyai atom karbon hemiasetal dan hemiketal karena kedua

atom ini saling berikatan sehingga sukrosa tidak memiliki sifat

gula pereduksi, tidak dapat mengadakan mutarotasi dan tidak

bereaksi dengan fenilhidrasi.

Sukrosa mudah dihidrolisis menjadi D- glukosa dan D-

fruktosa. Hidrolisis ini disebut proses inverse dan diikuti ole

perubahan rotasi optic dari kanan ke kiri apabila telah tercapai

campuran yang sama antara glukosa dan fruktosa, campuran ini

disebut gula invert.

3. Laktosa

Laktosa biasa disebut gula susu, terdiri dari D-galaktosa dan

D-glukosa yang berikatan melalui ikatan α(1,4)-glikosida.

Laktosa mempunyai satu atom karbon hemiasetal, maka laktosa

termasuk disakarida pereduksi.

Polisakarida

Polisakarida termasuk gula-gula yang menghasilkan lebih dari

sepuluh molekul monosakarida pada hidrolisis, misalnya amilum, glikogen,

deksterin, dan selulosa.

Polisakarida dibedakan atas :

1. Homopolisakarida, yang pada hidrolisisnya mengasilkan satu

macam karbohidrat. Polisakarida yang pada hidrolisisnya

menghasilkan heksosa disebut heksosan, pentosa disebut

pentosan.

5

2. Heteropolisakarida, yang menghasilkan beberapa macam

karbohidrat misalnya asam hialuronat yang mengandung N-

asetil-glukosamin dan asam glukoronat.

Macam-macam polisakarida yang secara fisiologis penting yaitu :

a. Amilum

Amilum atau dalam bahasa sehari-hari disebut pati,

memiliki rumus molekul (C6H10O5)n. amilum atau pati

merupakan cadangan makanan pada tumbuh-tumbuhan.

Polisakarida ini disebut juga glukosa karena pada

hidrolisisnya anya dibentuk glukosa pada zat akhir.

Amilum terdiri atas 2 bagian yaitu :

1. Amilosa (15-20%) yang merupakan polisakarida

linear berbentuk heliks, yang terdiri dari unit-unit

glukosa yang dihubungkan oleh ikatan α(1,4)-glikosida.

Amilosa ini mermberi warna biru dengan adanay

iodium, karena senyawa ini dapat masuk menduduki

posisi dalam gedung helical yang terbentuk jika amilosa

berada dalam air.

2. Amilopektin (80-85%) yang merupakan polisakarida

yang banyak cabangnya. Dalam molekul ini, rantai

pendek dari rangkaian rangkaian glikosida α (1,4) unit

glukosa digabungkan dengan rangkaian glikosida lain

melalui ikatan glikosida α (1,6). Amilopektin ini akan

menghasilkan warna jingga sampai merah bila

ditambahkan larutan iodium.

b. Glikogen

Glikogen merupakan polisakarida simpanan yang terdapat

dalam jaringan hewan maupun manusia. Pada tubuh kita

glikogen terdapat dalam hati dan otot.

Struktur glikogen serupa dengan amilopektin namun jumlah

percabangannya lebih banyak. Ikatan α(1,4)-glikosida pada

glikogen dapat dihidrolisis oleh α –amilase dan β– amylase,

6

sedangkan ikatan dapat dihidrolisis oleh α(1,6)-glikosidase.

Sehingga apabila glikogen dihidrolisis akan menghasilkan D-

glukosa.

Glikogen tidak mereduksi larutan benedict dan memberi

warna merah pada yodium.

c. Inulin

Inulin adalah karbphidrat simpanan yang terdapat pada

tumbuh-tumbuhan dan biasa ditemukan pada akar dan umbi

dahlia, artichokes, dan bunga dandelion.

Inulin dibangun oleh unit D-fruktosa yang dihubngkan satu

sama lain oleh ikatan β(2,1)-fruktosida. Hal ini menyebabbkan

apabila inulin dihidrolisis dapat menjadi fruktosa. Oleh karena

itu inulin merupakan suatu fruktosan atau disebut juga levan.

Inulin tidak memberi warna bila ditambah yodium. Inulin

mudah larut dalam ait panas. Inulin digunakan untuk penetapan

laju filtrasi glomerulus (glomerular filtration rate).

d. Selulosa

Selulosa merupakan unsure utama dari rangka tumbuhan.

Sebab selulosa sebagai bahan pembentuk dinding sel.

Selulosa tidak memberi warna dengan yodium dan tidak

larut dalam pelarut biasa.

Pada umumnya berupa serbuk putih mempunyai sifat sukar larut dalam pelarut non

polar, tetapi mudah larut dalam air, kecuali polisakarida bersifat tidak larut dalam air.

Amilum dengan air akan membentuk suspensi dan bila dipanaskan akan terbentuk

pembesaran berupa pasta dan bila didinginkan akan membentuk koloid yang kental

semacam gel. Suspensi amilum akan memberi warna biru dengan larutan yodium.

Hidrolisis sempurna oleh asam atau enzim akan menghasilkan glukosa.

Glikogen mempunyai struktur empiris yang serupa dengan amilum pada tumbuhan.

Pada proses hidrolisis, glikogen menghasilkan glukosa pula. Hal ini karena baik amilum

maupun glikogen, tersusun dari sejumlah satuan glukosa. Glikogen dalam air akan

membentuk koloid dan memberikan warna merah dengan larutan yodium.

7

Macam – macam pengujian karbohidrat :

1. Uji Molisch

Uji molisch digunakan untuk menentukan apakah suatu bahan atau zat

merupakan karbohidrat atau bukan.

Karbohidrat oleh asam anorganik pekat akan dihidrolisis menjadi

monosakarida. Dehidrasi monosakarida jenis pentosa oleh asam sulfat pekat

menjadi fulfural dan golongan heksosa menghasilkan hidroksi-metilfulural.

Pereaksi molischyang terdiri dari α–naftol dalam alkohol akan bereaksi dengan

fulfural membentuk senyawa komplek berwarna ungu.

CHO

│

HCOH

│

HCOH

│ + H2SO4 → + → cincin ungu

HCOH

│

CH2OH OH

(pentosa) (furfural) (α-naftol)

CHO

│

HCOH

│

HCOH

│ + H2SO4 → 5-hidroksimetilurfural + → cincin ungu

HCOH

│ OH

CH2OH

8

(heksosa)

2. Uji Iodium

Polisakarida dengan penambahan iodium akan membentuk kompleks

adsorpsi berwarna spesifik. Amilum atau pati dengn iodium menghasilkan warn

biru, dekstrin menghasilkan warna merah anggur, sedangkan glikogen dan

sebagian pati terhidrolisis bereaksi dengan yodium membentuk warna merah

coklat.

3. Uji Benedict

Gula mempunyai gugus aldehida atau keton akan mereduksi ion Cu+, yang

mengendap sebagai Cu2O berwarna merah bata.

O O

║ ║

R─C─H + Cu2+ + 2OH → R─C─OH + Cu2O (s) + H2O↓

Gula pereduksi merah bata

4. Uji Barfoed

Ion Cu2+ (dari pereaksi Barfoed) dalam suasana asam akan di reduksi lebih

cepat oleh gula pereduksi monosakarida daripada disakarida dan menghasilkan

endapan Cu2O berwarna merah bata.

O O

R C H R C OH + CU2O(S) +

H2O

( D-glukosa) Merah bata

Monosakarida

9

5. Uji Bial

Dehidrasi pentosa oleh HCl pekat menghasilkan furfural dan dengan

penambahan orsinol ( 3,5-dihidroksi toluena ) akan berkondensasi membentuk

senyawa kompleks berwarna biru.

+ HCl

( furtural ) ( orsinol )

6. Uji Seliwanoff

Dehidrasi fruktosa oleh HCl pekat menghasilkan hidroksimetilfulfural dan

dengan penambahan resorsinol akan mengalami kondensasi membentuk

senyawa komplek berwarna merah oranye.

7. Uji Osazon

Semua karbohidrat yang mempunyai gugus aldehida atau keton bebas

akan membentuk hidrazon atau asazon bila dipanaskan bersama fenilhidrazin

berlebih. Osazon yang terjadi mempunyai bentuk Kristal dan titik lebur yang

spesifik.

10

Osazon dari disakarida larut dalam air mendidih dan terbentuk kembali

bila didinginkan. Namun, sukrosa tidak membentuk osazon karena gugus

aldehida atau keton yang terikat pada monomer-nya sudah tidak bebas.

Sebaliknya, osazon monosakarida tidak larut dalam air mendidih.

8. Uji Asam Muzat

Oksidasi terhadap karbohidrat dengan asam nitrat pekat akan

menghasilkan asam yang dapat larut. Namun, laktosa dan galaktosa

menghasilkan asam musat yang tidak dapat larut.

BAB II11

TUJUAN PERCOBAAN

Tujuan umum percobaan :

• Mengetahui adanya karbohidrat dalam suatu bahan

• Mengidentifikasi jenis karbohidrat

• Menentukan gula pereduksi

• Mengetahui adanya reaksi – reaksi yang terjadi pada identifikasi pada karbohidrat

Tujuan khusus percobaan :

1. Uji Molisch

Tujuan : Membuktikan adanya karbohidrat secara kualitatif.

2. Uji Iodium

Tujuan : Membuktikan adanya polisakarida ( amilum, glikogen, dan dekstrin ).

3. Uji Benedict

Tujuan : Membuktikan adanya gula pereduksi

4. Uji Barfoed

Tujuan : Membedakan antara monosakarida dan disakarida.

5. Uji Seliwanoff

Tujuan : Membuktikan adanya ketosa ( fruktosa )

6. Uji Asazon

Tujuan : Membedakan bermacam – macam karbohidrat dari gambar kristalnya.

7. Uji Asam Muzat

Tujuan : Membedakan antara glukosa dan galaktosa.

BAB III

12

BAHAN DAN CARA

A. Uji Molisch

1. Bahan dan Alat :

• Amilum, glikogen, dekstrin, sukrosa, laktosa, maltose, galaktosa, fruktosa,

glukosa, dan arabinosa masing – masing dalam larutan 1 %.

• Pereaksi Molisch

• H2SO4 pekat

• Tabung reaksi

• Pipet tetes

2. Prosedur :

• Masukkan 15 teteslarutan uji ke dalam tabung reaksi.

• Tambahkan 3 tetes pereaksi Molisch. Campurlah dengan baik.

• Miringkan tabung reaksi, lalu alirkan dengan hati – hati 1 ml H2SO4 pekat

melalui dinding tabung agar tidak bercampur.

Reaksi positif ditandai dengan terbentukbya cincin berwarna ungu pada batas

antara kedua lapisan.

B. Uji Iodium

1. Bahan dan Alat :

• Amilum, glikogen, dekstrin, sukrosa, laktosa, maltose, galaktosa, fruktosa,

glukosa, dan arabinosa masing – masing dalam larutan 1 %.

• Larutan iodium

• Tabung reaksi

• Pipet tetes

2. Prosedur :

• Masukkan 3 tetes larutan uji ke dalam tabung reaksi atau porselin tetes.

• Tambahkan 2 tetes larutan iodium.

13

• Amati warna spesifik yang terbentuk.

C. Uji Benedict

1. Bahan dan alat :

• Amilum, glikogen, dekstrin, sukrosa, laktosa, maltosa, galaktosa, fruktosa,

glukosa, dan arabinosa masing-masing dalamlarutan 1%.

• Pereaksi Benedict

• Alat pemanas atau penangas air

• Tabung reaksi

• Penjepit taung

• Pipet tetes

• Pengatur waktu

2. Prosedur :

• Masukkan dalam tabung reaksi 5 tetes larutan uji dan 15 tetes pereaksi

Benedict. Campurlah dengan baik.

• Didihkandi atas apikecil selama 2 menit atau masukkan dalam penangas air

mendidih selama 5 menit.

• Dinginkan perlahan-lahan.

• Perhatikan warna atau endapan yang terbentuk.

D. Uji Barfoed

1. Bahan dan alat :

• Sukrosa,laktosa, maltosa, galaktosa, fruktosa, glukosa, dan arabinosa

masing-masing dalam larutan 1%.

• Pereaksi Barfoed

• Alat pemanas

• Tabung reaksi

• Pengatur waktu

• Penjepit tabung

• Pipet tetes

14

2. Prosedur :

• Masukkan dalam tabung reaksi 10 tetes larutan uji dan 10 tetes pereaksi

Barfoed. Campurlah dengan baik.

• Panaskan di atas api kecil sampai mendidih selama 1 menit atau masukkan

dalam penangas air mendidih selama 5 menit.

• Perhatikan warna atau endapan yang terbentuk.

E. Uji Osazon

1. Bahan dan alat :

• Sukrosa, laktosa, maltosa, galaktosa, dan glukosa

• Fenilhidrazin-hidroklorida

• Natrium asetat

• Mikroskop

• Alat pemanas

• Tabung reaksi

• Pipet ukur

2. Prosedur :

• Masukkan 2 ml larutan uji ke dalam tabung reaksi.

• Tambahkan seujung spatel fenilhidrazin-hidroklorida dan kristal natrium

asetat.

• Panaskan dalam penangas air mendidih selama beberapa menit.

• Dinginkan perlahan-pelahan di bawah air kran.

• Perhatikan kristal yang terbentuk dan identifikasi di bawah mikroskop.

F. Uji Seliwanoff

1. Bahan dan alat :

• Sukrosa, galaktosa, fruktosa, glukosa, dan arabinosa dalam larutan 1%.

• Pereaksi Seliwanoff

• Alat pemanas

15

• Pengatur waktu

• Tabung reaksi

• Penjepit tabung

• Pipet tetes

2. Prosedur :

• Masukkan 5 tetes larutan tetes larutan uji dan 15 tetes pereaksi Selwanoff ke

dalam tabung reaksi.

• Didihkan di atas api kecil selama 30 detik atau dalam penangas air mendidih

selama 1 menit.

• Hasil positif ditandai terbentuknya larutan berwarna merah orange.

G. Uji Asam Musat

1. Bahan dan alat :

• Sukrosa, laktosa, galaktosa, dan glukosa

• HNO3 pekat

• Mikroskop

• Alat pemanas

• Tabung reaksi

• Pipet tetes

2. Prosedur :

• Masukkan 10 tetes larutan uji dan 2 tetes HNO3 pekat.

• Panaskan dalam penangas air mendidih sampai volumenya kira-kira tinggal

2-3 tetes.

• Dinginkan perlahan-lahan, lalu perhatikan terbentuknya kristal-kristal keras

seperti pasir.

• Amatilah di bawah mikroskop.

BAB IV

16

HASIL PRAKTIKUM

Reaksi uji Hasil pengamatan KesimpulanUji Seliwanof :

Hasil positif bila :

Berwarna merah oranye

Positif larutan nomor 7

Negatif larutan nomor 2

7 : Fruktosa

2 : Glukosa

Uji Benedict :


berwarna merah bata

Positif larutan nomor 2, 3, 4,

6, 7


5 : Sukrosa

2, 3, 4, 6, 7 : Fruktosa,

Glukosa, Galaktosa,

Laktosa, MaltosaUji Molisch :


Berwarna cincin ungu

Positif larutan nomor 2, 3, 4,

5, 6, 7


1 : bukan Karbohidrat

2, 3, 4, 5, 6, 7 : Karbohidrat

Uji Iodin :


Merah coklat, merah anggur,

biru

Positif larutan nomor -

Negatif larutan nomor 2, 3,

4, 5, 6, 7

2, 3, 4, 5, 6, 7 : Sukrosa,

Maltosa, Laktosa, Galaktosa,

Glukosa, Fruktosa

Uji Barfoed :


Berwarna merah bata

Positif larutan nomor 2, 7

Negatif larutan nomor 3, 4, 6

3, 4, 6 : Maltosa, Laktosa

2, 7 : Galaktosa, Fruktosa,

Arabinosa, GlukosaUji Osazon :


Terdapat Kristal


Negatif larutan nomor -3, 4 : Disakarida

Uji Seliwanof :


Berwarna merah oranye

Positif larutan nomor 7


2 : Glukosa

7 : Fruktosa

Uji Asam Musat :


Terdapat Kristal


Negatif larutan nomor 22 : Glukosa

BAB V

PEMBAHASAN

A. UJI MOLISH

17

Pereaksi molish terdiri atas larutan α naftol dalam alkohol. Apabila

pereaksi ini ditambahkan pada larutan glukosa misalnya, kemudian secara hati –

hati ditambahkan asm sulfat pekat, akan terbentuk dua lapisan zat cair. Pada

batas antara kedua lapisan itu akan terjadi warna ungu karena terjadi reaksi

kondensasi antara furfural dengan α naftol. Walaupun reaksi ini tidak spesifik

untuk karbohidrat, namun dapat digunakan sebagai reaksi pendahuluan dalam

analisis kualitatif karbohidrat. Hasil negative merupakan suatu bukti bahwa

tidak ada karbohidrat.

Dari percobaan kami menunjukkan hasil positif pada 2, 3, 4, 5, 6 dan 7,

karena terdapat lapisan cincin berwarna ungu. Hal ini berbeda dengan hasil

sebenarnya yaitu larutan 1, 2, 3, 4, 5, dan 7 yang seharusnya menunjukkan hasil

positif dan larutan 6 lah yang seharusnya menunjukkan hasil negative.

Kesalahan ini kemungkinan terjadi karena ketidaktelitian dalam pengurutan

larutan dan ketidaktelitian dalam pengamatan hasil uji.

CHO

│

HCOH

│

HCOH

│ + H2SO4 → + → cincin ungu

HCOH

│

CH2OH

(pentosa) OH

(furfural) (α-naftol)

CHO

│

HCOH

│

HCOH

18

│ + H2SO4 → 5-hidroksimetilurfural + → cincin ungu

HCOH

│

CH2OH OH

(heksosa)

B. UJI IODIUM

Pada 2 ml zat yang tidak diketahui tambahkan 2 tetes pereaksi 10% α-

naftol segar dan campur. Tuangkan 2 ml H2SO4 pekat sehingga membentuk

lapisan di bawah campuran. Satu cincin merah – ungu menunjukkan adanya

kerbohidrat.

Dari hasil percobaan kami menunjukkan hasil negative untuk larutan 2,

3, 4, 5, dan 7. Tidak ada larutan yang positif pada percobaan kami. Ini juga

berbeda dengan hasil sebenarnya. Pada hasil sebenarnya, larutan 1 (yang

seharusnya tidak tereliminasi pada percobaan Molisch) menunjukkan hasil yang

positif dengan menghasilkan warna biru.

C. UJI BENEDICT

Pereaksi ini berupa larutan yang mengandung kupri sulfat, natrium

karbonat dan natrium sitrat. Glukosa dapat mereduksi ion Cu++ dari kuprisulfat

menjadi ion Cu+ yang kemudian mengendap sebagai Cu2O. Adanya natrium

karbonat dan natrium sitrat membuat pereaksi Benedict bersifat basa lemah.

Endapan yang terbentuk dapat berwarna hijau, kuning, atau merah bata. Warna

endapan ini tergantung pada konsentrasi karbohidrat yang diperiksa. Pereaksi

Benedict lebih banyak digunakan untuk pemeriksaan glukosa dalam urine

daripada pereaksi Fehling karena beberapa alasan. Apabila dalam urine terdapat

asam urat atau keratin, kedua senyawa ini dapat mereduksi senyawa Fehling

tetapi tidak dapat mereduksi pereaksi Benedict. Di samping itu pereaksi

Benedict lebih peka dari pada pereaksi fehling. Penggunaan pereaksi Benedict

juga lebih mudah karena hanya terdiri atas satu macam larutan, sedangkan

pereaksi Fehling menggunakan dua macam larutan.

19

Dari percobaan kami menunjukkan hasil positif pada tabung 2, 3, 4 dan

7 karena endapan yang dihasilkan berwarna merah bata.

D. UJI BARFOED

Pereaksi ini terdiri atas larutan kupri asetat dan asam asetat dalam air,

dan digunakan untuk membedakan antara monosakarida dengan disakarida.

Monosakarida dapat mereduksi lebih cepat dari pada disakarida. Jadi Cu2O

terbentuk lebih cepat oleh monosakarida dari pada disakarida dengan anggapan

bahwa konsentrasi monosakarida dan disakarida dalam larutan tidak berbeda

banyak. Tauber dan Kleiner membuat modifikasi atas pereaksi ini, yaitu dengan

jalan mengganti asam asetat dengan asam laktatdan ion Cu+ yang dihasilkan

direaksikan dengan pereaksi dengan warna fosfomolibdat hingga menghasilkan

warna biru yang menunjukkan adanya monosakarida. Disakarida dengan

konsentrasi rendah tidak menghasilkan hasil positif. Perbedaan antara pereaksi

Barfoed dengan pereaksi Fehling atau Benedict ialah bahwa pada pereaksi

Barfoed digunakan suasana asam.

Apabila kerbohidrat mereduksi suatu ion logam, karbohidrat ini akan

teroksidasi. Gugus aldehida pada karbohidrat akan teroksidasi menjadi gugus

karboksilat dan terbentuklah asam monokarboksilat. Sebagai contoh galaktosa

akan teroksidasi menjadi galaktonat, sedangkan glukosa menjadi asam glukonat.

Dari percobaan kami menunjukkan hasil positif pada larutan 2 dan 7

karena mengahasilkan warna merah bata.

E. UJI SELIWANOFF

Pereaksi yang dibuat dengan mencampurkan 3,5 ml resolsinol 0,5%

dengan 12 ml HCL pekat lalu diencerkan menjadi 335 ml dengan aquadest + 1

ml larutan contoh lalu ditempatkan dalam air mendidih selama 10 menit. Warna

merah bata menunjukkan adanya fruktosa.

Dari hasil percobaan kami menunjukkan hasil positif untuk larutan 7

karena menghasilkan warna merah bata dan negatif untuk larutan 2.

F. UJI OSAZON

20

Semua karbohidrat yang mempunyai gugus aldehida atau keton bebas

akan membentuk osazon bila dipanaskan bersama fenilhidrazin berlebih.

Osazon yang terjadi mempunyai bentuk kristal dan titik lebur yang khas bagi

masing – masing karbohidrat. Hal ini sangat penting artinya karena dapat

digunakan untuk mengidentifikasi karbohidrat dan merupakan salah satu cara

untuk membedakan beberapa monosakarida, misalnya antara glukosa dan

galaktosa yang terdapat dalam urin wanita yang sedang dalam masa menyusui.

Pada reaksi antara glukosa dengan fenilhidrazin, mula – mula terbentuk

D–glukosafenilhidrazon, kemudian reaksi berlanjut hingga terbentuk D-

glukosazon. Glukosa, fruktosa dan manosa dengan fenilhidrazin menghasilkan

osazon yang sama. Dari struktur ketiga monosakarida tersebut tampak bahwa

posisi gugus – OH dan atom H pada atom karbon nomor 3, 4 dan 5 sama.

Dengan demikian osazon yang terbentuk mempunyai struktur yang sama.

Dari percobaan, kami tidak dapat menemukan adanya kristal pada larutan

3 dan 4.

G. UJI ASAM MUSAT

Tujuan dari percobaan asam musat adalah untuk membedakan antara

glukosa dan galaktosa. Dasar dari uji asam musat ini adalah adanya reaksi

oksidasi terhadap karbohidrat dengan asam nitrat pekat (HNO3) akan

menghasilkan asam yang dapat larut. Namun laktosa dan galaktosa

21

menghasilkan asam yang dapat larut. Hal ini dapat dilihat dengan adanta

endapan kristal berwarna putih untuk galaktosa.

Dari percobaan, kami tidak dapat menemukan kristal pada larutan 2.

Kemungkinan karena kesalahan pada saat pemanasan.

BAB VI

KESIMPULAN

1 : Polisakarida (Amilum)

Karena menghasilkan warna biru pada uji iodium

2 : Glukosa

Karena adanya Kristal pada uji asam musat

3 : Disakarida

Karena tidak mengalami perubahan saat uji barfoed

4 : Disakarida

Karena tidak mengalami perubahan saat uji barfoed

5 : Sukrosa

Karena tidak terjadi perubahan warna dan tidak terdapat endapan saat uji benedict

6 : Bukan Karbohidrat

Karena tidak bereaksi saat uji Molisch

7: Fruktosa

Menghasilkan endapan merah bata saat uji Seliwanoff

22

DAFTAR PUSTAKA

• Murray, Robert K, Daryl K.Granner. 2003. Biokimia HARPER, edisi 25. Jakarta:

Penerbit Buku Kedokteran,EGC.

• Page,David S. 1981. Prinsip-prinsip Biokimia,edisi 2. Jakarta: Penerbit Erlangga.

• Hawab,H.M. 2003. Pengantar Biokimia. Malang : Bayumedia Publishing.

• Lehninger,Albert L. 1988. Dasar-dasar Biokimia. Jakarta: Penerbit Erlangga.

• Poedjiadi,Anna. 1994. Dasar-dasar biokimia. Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia.

• Yazid, Estien dan Lisda Nursanti.2006. Penuntun Praktikum Biokimia. Yogyakarta : Penerbit Andi.

23

SKEMA PERCOBAAN

24

LAMPIRAN

25

Sampel/Bahan

KarbohidratBukan Karbohidrat

Polisakarida : Amilum (biru)

Glikogen (merah)

Dekstrin (coklat)

Sukrosa, maltosa, galaktosa, laktosa, fruktosa, glukosa,

arabinosa

Gula pereduksi: Maltosa, laktosa,

galaktosa, fruktosa,glukosa,arabin

osa.

Monosakarida : Galaktosa,fruktosa,gluko

sa,arabinosa

Disakarida : Maltosa, laktosa

LaktosaMaltos

a

Pentosa: Arabinosa

Heksosa: Glukosa,fruktosa,galakto

sa

Non pereduksi : Sukrosa

Ketosa: Fruktosa

Aldosa: Glukosa,galaktosa

Galaktosa Glukosa

Uji iodim Uji benedict

Uji mollish Uji barfoed

Uji Seliwanoff

26

52121090-analisis-karbohidrat

Documents