PETUNJUK PRAKTIKUM BIOKIMIA

BLOK 11

UJI VITAMIN

PENYUSUN

dr. Hairrudin, M. Kes

dr. Sugiyanta, M. Kes

dr. Zahrah Febianti

TUGAS PENDAHULUAN

Harap ditulis tangan di kertas folio bergaris dan dikumpulkan sebagai tiket masuk ke ruangan

laboratorium!

1. Buatlah bagan / sketsa mengenai langkah praktikum uji vitamin A, B1, dan B2!

2. Sebutkan vitamin yang larut dalam lemak dan vitamin yang larut dalam air!

PETUNJUK PRAKTIKUM BIOKIMIA BLOK 11

UJI VITAMIN

1. VITAMIN A (axerophtol)

Axerophthol dapat ditunjukkan dengan menggunakan reaksi Carr dan Price.

Prinsip: Apabila larutan antimonium trichlorida (SbCl3) dalam chloroform dicampur dengan

larutan yang mengandung vitamin A, maka akan terjadi warna biru,

Menunjukkan adanya vitamin A dalam minyak ikan.

Langkah kerja:

a) Ke dalam tabung reaksi kering, teteskan satu tetes minyak ikan dan 5-6 tetes

chloroform kering.

b) Kemudian tambahkan 1-2 tetes asam cuka anhidrida (untuk menghilangkan sisa-sisa air)

dan 20 tetes antimonium trichloride dalam chloroform yang baru dan jenuh.

c) Amati perubahan yang terjadi.

2. VITAMIN B1 (Thiamin)

Prinsip:

Vitamin B1 mudah dioksidasi oleh bahan oksidator lemah dalam suasana alkali membentuk

thiochrom. Thiochrom dapat diekstraksi oleh isobutyl alcohol dan memberi fluoresensi biru

di bawah sinar ultra violet.

Langkah kerja:

a) 1 ml larutan vitamin B1 diberi 1 ml metil alcohol dan 0.6 ml NaOH 40%.

b) Tambahkan 3 tetes larutan kalium ferricyanida dan 5 ml isobutyl alcohol.

c) Tabung dibalik-balik beberapa kali, supaya vitamin B1 terlarut dalam isobutyl alcohol.

d) Lihatlah hasilnya di bawah sinar ultraviolet (perhatikan warna fluoresensinya)!

3. VITAMIN B2 (Riboflavin)

Prinsip:

Riboflavin menunjukkan fluoresensi hijau di bawah sinar ultra violet

Langkah kerja:

a) Masukkan 5 ml alcohol 80% ke dalam tabung pemusing.

b) Masukkan 2 ml susu sapi ke dalam tabung pemusing tersebut dan kocok

c) Pusingkan campuran larutan dalam tabung pemusing tersebut

d) Ambil dan pindahkan filtrat dari larutan tersebut ke dalam tabung yang kering

e) Amati di fluoresensi filtrat tersebut di bawah sinar ultraviolet