Dipresentasikan pada acara Kongres Nasional XIV Hal. 1Ikatan Farmakologi Indonesia; Manado, 31 Okt -2 Nop 2013

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDANREBUSAN DAUN SAMBANG GETIH

(Hemigraphis bicolor Boerl.) SECARA IN VIV0

Dra. Lestari Rahayu, MS., Apt., Ni Made Dwi S, S.Si, M.Kes., Apt.,Dr. Ros Sumarny, MS., Apt., Lili Yusnita Sari

Fakultas Farmasi, Universitas Pancasila, Jakarta.

ABSTRAK

Latar Belakang : Aktivitas fisik yang berlebih dapat menyebabkan terjadinya stresoksidatif pada manusia dan pada mencit. Stres oksidatif adalah suatu keadaan dimanaproduksi radikal bebas melebihi produksi antioksidan. Antioksidan merupakan seperangkatsistem pertahanan yang dapat melindungi tubuh dari kerusakan oleh radikal bebas.Tujuan : Untuk mengetahui aktivitas antioksidan rebusan daun sambang getih secara invivo dengan mengukur kadar MDA plasma mencit yang diberi perlakuan dengan carapemberian rebusan daun sambang getih selama 7 hari dan perenangan selama 55 menitpada hari ke-7.Metode : Pengujian aktivitas antioksidan secara in vivo dengan mengukur kadar MDAplasma dilakukan dengan cara pembagian 30 ekor mencit menjadi 6 kelompok yaitukelompok normal, kelompok kontrol negatif, kelompok kontrol positif vitamin C dosis 6,5mg/kgBB, kelompok perlakuan dosis 1,95 g/kgBB, kelompok perlakuan dosis 3,9g/kgBB, kelompok perlakuan dosis 7,8 g/kgBB, selama 7 hari dan dan perenangan selama55 menit pada hari ke-7.Hasil : Pengukuran aktivitas antioksidan secara in vivo didapat kadar MDA plasmakelompok normal sebesar 1,660,50 nmol/mL, kelompok kontrol negatif sebesar5,670,30 nmol/mL, kelompok kontrol positif vitamin C dosis 6,5 mg/kgBB sebesar1,450,58 nmol/mL, kelompok perlakuan dosis 1,95 g/kgBB sebesar 1,990,21 nmol/mL,kelompok perlakuan dosis 3,9 g/kgBB sebesar 1,460,18 nmol/mL dan kelompokperlakuan dosis 7,8 g/kgBB sebesar 0,850,19 nmol/mL. Kadar MDA plasma kelompokperlakuan dosis 3,9 g/kgBB tidak berbeda bermakna dengan kelompok kontrol positifvitamin C dosis 6,5 mg/kgBB.Kesimpulan : Uji aktivitas antioksidan rebusan daun sambang getih menunjukkan bahwakadar MDA plasma pada ketiga kelompok perlakuan dosis tidak berbeda bermakna dengankelompok kontrol positif vitamin C dosis 6,5 mg/kgBB.

Kata kunci : Antioksidan, sambang getih, MDA

Nama : Dra. Lestari Rahayu, MS.,AptInstitusi : Fakultas Farmasi Universitas PancasilaAlamat :Fakultas Farmasi Universitas Pancasila, Jl. Srengseng Sawah, Jagakarsa, Jakarta

SelatanEmail : tari2006@yahoo.comHP : 081386583899Fax : 021-7864723

Dipresentasikan pada acara Kongres Nasional XIV Hal. 2Ikatan Farmakologi Indonesia; Manado, 31 Okt -2 Nop 2013

PENDAHULUAN

Radikal bebas adalah atom atau molekul yang mempunyai satu atau lebih elektron tidak

berpasangan pada lintasan paling luar. Radikal bebas memiliki sifat yang reaktif sehingga dapat

bereaksi dengan berbagai molekul lain seperti protein, lipid dan DNA (1). Dalam keadaan normal

radikal bebas yang diproduksi di dalam tubuh tidak berbahaya dan penting untuk fungsi biologis

seperti pengaturan pertumbuhan sel. Namun ketika diproduksi dalam jumlah yang berlebihan oleh

sel, radikal bebas dapat menjadi berbahaya karena saat masuk ke dalam tubuh radikal bebas ini

akan mencari pasangan elektron lain dengan mengambil elektron dari sel tubuh sehingga

membentuk reaksi berantai dan menghasilkan radikal bebas baru (2). Beberapa sumber radikal

bebas antara lain: polusi lingkungan (asap rokok, asap kendaraan, asap pabrik), sinar ultra violet

matahari, radiasi, obat-obatan dan aktivitas fisik yang berlebih (3).

Aktivitas fisik yang berlebih dapat menyebabkan terjadinya stres oksidatif pada manusia dan

pada mencit (4). Stres oksidatif adalah suatu keadaan dimana produksi radikal bebas melebihi

produksi antioksidan (3). Peningkatan radikal bebas pada mencit dapat dilakukan dengan cara

perenangan, karena ketika dimasukkan ke dalam bak renang, mencit akan mengalami stres dan

berusaha untuk bertahan hidup dengan cara berenang sekuat tenaga (5). Dalam keadaan stres

oksidatif akan menyebabkan perubahan pada berbagai senyawa antara lain protein dan lipid. Pada

rantai asam lemak tak jenuh lapisan fosfolipid membran akan diserang oleh radikal hidroksil

menyebabkan terjadinya peroksidasi lipid. Produk hasil peroksidasi lipid dalam tubuh yang terdapat

dalam bentuk bebas atau terkompleks dengan jaringan di dalam tubuh disebut malondialdehid

(MDA). Keberadaan malondialdehid (MDA) ini bersifat toksik terhadap sel (6).

Salah satu upaya untuk mengatasi bahaya potensial dari radikal bebas, tubuh dilengkapi oleh

seperangkat sistem pertahanan yang dapat membatasi kerusakan yang diakibatkan oleh radikal

bebas yang disebut sebagai antioksidan (7). Sistem pertahanan antioksidan ini terbagi menjadi

antioksidan enzimatik dan antioksidan nonenzimatik. Antioksidan enzimatik antara lain superoksida

dismutase (SOD), glutation peroksidase (GPx) dan katalase, sedangkan antioksidan non enzimatik

diantaranya adalah vitamin E, vitamin C, beta karoten, albumin, glutation dan selenium (8).

Golongan antioksidan lain yang terkenal adalah antioksidan dari senyawa polifenol dan yang paling

banyak diteliti adalah golongan flavonoid (9). Senyawa tersebut banyak terdapat di dalam tumbuh-

tumbuhan salah satunya adalah sambang getih (Hemigraphis bicolor Boerl.). Sambang getih

merupakan tanaman asli Indonesia dan pada umumnya ditemukan tumbuh liar atau di tanam di

halaman dan taman sebagai tanaman hias. Senyawa kimia yang terdapat dalam daun sambang getih

Dipresentasikan pada acara Kongres Nasional XIV Hal. 3Ikatan Farmakologi Indonesia; Manado, 31 Okt -2 Nop 2013

adalah flavonoid, polifenol dan tanin (10). Dibeberapa penelitian menyebutkan tanaman yang

mengandung flavonoid, polifenol dan tanin dapat memiliki aktivitas antioksidan (7,9).

Pada penelitian ini ingin dilihat aktivitas antioksidan pada rebusan daun sambang getih secara

in vivo dengan mengukur kadar malondialdehid (MDA). Pengujian aktivitas antioksidan secara in

vivo dilakukan dengan mengukur kadar MDA dalam material biologi. Analisis MDA merupakan

analisis radikal bebas secara tidak langsung dan mudah dalam menentukan jumlah radikal bebas

yang terbentuk, analisis radikal bebas secara langsung sulit dilakukan karena senyawa radikal

sangat tidak stabil dan reaksinya pun berjalan sangat cepat. Pengukuran kadar MDA dapat

dilakukan dengan pereaksi thiobarbituric acid (TBA) membentuk senyawa MDA-TBA, senyawa

ini berwarna merah muda yang dapat diukur intensitasnya dengan menggunakan spektrofotometer

UV-VIS. Pengukuran kadar MDA telah digunakan secara luas sebagai indikator dari kerusakan

oksidatif pada lemak tak jenuh sekaligus merupakan indikator keberadaan radikal bebas (6).

BAHAN, ALAT DAN METODE PENELITIAN

BAHAN

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah rebusan daun sambang getih, vitamin C, eter,

heparin, asam trikloroasetat (TCA) 20%, asam tiobarbiturat (TBA) 0.67%, tetraetoksipropan (MDA

standar) dan aquadest.

ALAT

Sonde oral, alat sentrifuge, alat-alat bedah, bak renang, tabung reaksi, rak tabung, labu tentukur,

kertas saring, pipet volume, pipet filler, alumunium foil, timbangan hewan, mikropipet, penangas

air, lemari pendingin, tabung effendrof, timbangan analitik (AND GR 200), spektrofotometer

Genesys 10UV.

METODE PENELITIAN

1. Persiapan tanaman yang akan diuji

a. Pengumpulan tanaman yang didapat dari Balai Penelitian Obat dan Aromatik

(BALITRO).

b. Determinasi tanaman untuk memastikan kebenaran simplisia dari tanaman yang akan

digunakan dalam penelitian.

Dipresentasikan pada acara Kongres Nasional XIV Hal. 4Ikatan Farmakologi Indonesia; Manado, 31 Okt -2 Nop 2013

2. Pengukuran aktivitas antioksidan secara in vivo dengan mengukur kadar MDA plasma.

a. Pembuatan sediaan uji (rebusan daun sambang getih)

Timbang 30 gram daun segar sambang getih, dicuci, direbus dengan 200 ml air sampai

setengah dari volume awal, setelah dingin kemudian disaring, masukkan air rebusan daun

sambang getih ke dalam wadah gelas atau botol.

b. Persiapan hewan percobaan

1) Adaptasi hewan percobaan selama 1 minggu pada lingkungan laboratorium untuk

membiasakan mencit hidup pada lingkungan baru dan diberi makan pelet standard dan

minum.

2) Pengelompokan hewan percobaan

30 ekor mencit yang sehat dibagi dalam 6 kelompok yang masing-masing terdiri atas 5

ekor, yaitu:

Kelompok I : Kelompok kontrol normal yang diberi aquadest.

Kelompok II : Kelompok kontrol negatif yang diberi aquadest dan

perenangan selama 55 menit pada hari ke-7.

Kelompok III : Kelompok kontrol positif yang diberi vitamin C

6,5mg/kgBB per-oral setiap hari selama 7 hari dan perenangan

selama 55 menit pada hari ke-7.

Kelompok IV : Kelompok yang diberi rebusan daun sambang getih dosis 1,95

g/kgBB per-oral setiap hari selama 7 hari dan perenangan selama 55

menit pada hari ke-7.

Kelompok V : Kelompok yang diberi rebusan daun sambang getih dosis 3,9

g/kgBB per-oral setiap hari selama 7 hari dan perenangan selama 55

menit pada hari ke 7.

Kelompok VI : Kelompok yang diberi rebusan daun sambang getih dosis 7,8

g/kgBB per-oral setiap hari selama 7 hari dan perenangan selama 55

menit pada hari ke 7.

c. Pengambilan sampel darah,

1) Mencit dieutanasia dengan eter lalu diletakkan telentang pada papan bedah, bagian dada

dan perut diolesi dengan alkohol 70% dan dilakukan pembedahan.

2) Darah diambil dari jantung menggunakan jarum suntik dan ditempatkan dalam tabung

sentrifuse yang telah diberi antikoagulan heparin, darah yang diperoleh disentrifuse

dengan kecepatan 3000 rpm selama 10 menit, setelah terpisah lapisan atas (plasma)

yang berwarna bening kekuningan diambil untuk pengukuran kadar MDA.

Dipresentasikan pada acara Kongres Nasional XIV Hal. 5Ikatan Farmakologi Indonesia; Manado, 31 Okt -2 Nop 2013

d. Pengukuran aktivitas antioksidan secara in vivo

1) Kadar MDA plasma yang diukur menurut metode Wills. 200 L larutan sampel

(plasma) ditambahkan 1 ml trikloroasetat (TCA) 20% dan 2 ml asam tiobarbiturat

(TBA) 0,67%.

2) Larutan dicampur homogen dan dipanaskan di atas penangas air selama 10 menit.

3) Setelah dingin disentrifuse pada 3000 rpm selama 10 menit. Filtrat yang berwarna

merah muda diukur serapannya pada panjang gelombang 532 nm menggunakan

spektrofotometer UV-VIS. Kadar MDA dihitung dengan menggunakan kurva baku

MDA dengan konsentrasi 0; 0,025; 0,05; 0,1; 0,2; 0,4; 0,8 dan 1,6 nmol/ml (10).

TAHAP PENELITIAN

1. Persiapan tanaman yang akan diuji

a. Pengumpulan tanaman yang didapat dari Balai Penelitian Obat dan Aromatik (BALITRO).

b. Determinasi tanaman untuk memastikan kebenaran simplisia dari tanaman yang akan

digunakan dalam penelitian.

c. Pembuatan larutan sediaan uji (rebusan daun sambang getih).

2. Persiapan hewan percobaan

a. Adaptasi hewan percobaan selama 1 minggu dilakukan untuk membiasakan mencit hidup

pada lingkungan baru.

b. Pemberian sediaan uji rebusan daun sambang getih secara oral selama 7 hari pada hewan

percobaan.

c. Peningkatan kadar MDA plasma dengan cara perenangan.

d. Pengambilan sampel darah.

3. Pengujian aktivitas antioksidan secara in vivo dengan mengukur kadar MDA plasma.

HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

A. DETERMINASI TANAMAN

Dipresentasikan pada acara Kongres Nasional XIV Hal. 6Ikatan Farmakologi Indonesia; Manado, 31 Okt -2 Nop 2013

Determinasi tanaman dilakukan di Pusat Penelitian Biologi Herbarium Bogoriense Bidang

Botani LIPICibinong, Bogor dengan tujuan untuk mengetahui kebenaran jenis dari tanaman

yang digunakan dalam penelitian. Hasil determinasi menunjukkan bahwa tanaman yang

digunakan dalam penelitian ini adalah daun sambang getih (Hemigraphis bicolor Boerl.) dari

suku Acanthaceae.

B. PENGUJIAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN SECARA IN VIVO DENGAN

MENGUKUR KADAR MDA PLASMA

Hasil uji kenormalan dan homogenitas data MDA yang diperoleh menunjukkan data tidak

terdistribusi normal dan tidak homogen, sehingga data dianalisis dengan statistik

nonparametrik menggunakan uji Kruskal Wallis

Tabel 1. Hasil pengukuran kadar MDA plasma (nmol/mL)

NoKadar MDA plasma (nmol/mL)pada kelompok ke

I II III IV V VI

1 2,2540 5,4050 0,7715 1,9508 1,2433 0,9737

2 1,3950 5,3700 1,0580 1,7823 1,3780 0,8726

3 1,9675 6,0445 1,3445 1,8497 1,7318 1,0580

4 1,7150 5,6065 2,2035 2,0856 1,5128 0,8053

5 0,9570 5,9095 1,8665 2,3214 1,4286 0,5526

8,2885 28,3355 7,2440 9,9898 7,2945 4,2622

Rata-rata 1,6577 5,6671 1,4488 1,9980 1,4589 0,8524

SD 0,5037 0,3008 0,5845 0,2139 0,1812 0,1933

Dipresentasikan pada acara Kongres Nasional XIV Hal. 7Ikatan Farmakologi Indonesia; Manado, 31 Okt -2 Nop 2013

Gambar 1. Hasil pengukuran kadar MDA plasma

Keterangan :

I : Kelompok kontrol normal yang diberikan aquadest.

II : Kelompok kontrol negatif.

III : Kelompok kontrol positif, yang diberi vitamin C 6,5 mg/kgBB.

IV : Kelompok perlakuan dosis 1,95 g/kgBB.

V : Kelompok perlakuan dosis 3,9 g/kgBB.

VI : Kelompok perlakuan dosis 7,8 g/kgBB

Gambar 1. memperlihatkan bahwa kadar MDA antara kelompok II (5,66710,3008) berbeda

dengan kadar MDA kelompok III (1,44880,5845), kelompok IV (1,99800,2138), kelompok

V (1,45890,1812) dan kelompok VI (0,85240,1933).

Tabel 2. Hasil uji statistik beda rata-rata kadar MDA plasma (nmol/ml) antar kelompok

Kelompok Median I II III IV V VI

I 0,8289

II 2,8336

III 0,7244 *

IV 0,9990 *

V 0,7295 * *

VI 0,4262 * * *

Keterangan : * (ada perbedaan bermakna pada =0,05)

Dipresentasikan pada acara Kongres Nasional XIV Hal. 8Ikatan Farmakologi Indonesia; Manado, 31 Okt -2 Nop 2013

Tabel 2. memperlihatkan ada atau tidaknya perbedaan antara masing-masing kelompok

terhadap kadar MDA yang telah diuji secara statistik. Antara kelompok II (kelompok kontrol

negatif) dengan kelompok III (kelompok kontrol positif), kelompok IV (kelompok perlakuan

dosis 1,95 g/kgBB), kelompok V (kelompok perlakuan dosis 3,9 g/kgBB) dan kelompok VI

(kelompok perlakuan dosis 7,8 g/kgBB) menunjukkan adanya perbedaan bermakna.

Antara kelompok III (kelompok kontrol positif) dengan kelompok IV (kelompok perlakuan

dosis 1,95 g/kgBB), kelompok V (kelompok perlakuan dosis 3,9 g/kgBB) dan kelompok VI

(kelompok perlakuan dosis 7,8 g/kgBB) menunjukkan tidak ada perbedaan bermakna .

Antara kelompok IV (kelompok perlakuan dosis 1,95 g/kgBB) dengan kelompok V

(kelompok perlakuan dosis 3,9 g/kgBB) dan kelompok VI (kelompok perlakuan dosis 7,8

g/kgBB) menunjukkan adanya perbedaan bermakna, begitu pula antara kelompok V (kelompok

perlakuan dosis 3,9 g/kgBB) dengan kelompok VI (kelompok perlakuan dosis 7,8 g/kgBB)

juga menunjukkan adanya perbedaan bermakna.

Dalam penelitian ini ingin dilihat kemampuan antioksidan dari luar tubuh (antioksidan

eksogen) dalam mengatasi bahaya potensial dari radikal bebas. Antioksidan adalah senyawa

yang dapat menghambat reaksi oksidasi dengan cara mengikat radikal bebas dan molekul yang

sangat reaktif, akibatnya kerusakan sel akan dihambat. Sistem pertahanan antioksidan dibagi

menjadi antioksdian endogen dan antioksidan eksogen. Antioksidan endogen antara lain

superoksida dismutase (SOD), glutation peroksidase (GPx) dan katalase, sedangkan

antioksidan eksogen antara lain (vitamin E, vitamin C, flavonoid, polifenol,dll). Antioksidan

endogen merupakan sistem pertahanan utama (primer) terhadap kondisi stres oksidatif yang

bekerja dengan cara mencegah terbentuknya senyawa radikal bebas yang baru, sedangkan

antioksidan eksogen merupakan antioksidan sekunder yang bekerja dengan cara membantu

antioksidan endogen ketika jumlah antioksidan endogen tidak mampu mengatasi jumlah radikal

bebas yang berlebihan dalam tubuh serta mencegah terjadinya reaksi berantai.

Radikal bebas merupakan senyawa oksidan kuat yang dapat menimbulkan kerusakan

pada senyawa-senyawa yang ada di dalam tubuh jika, jumlahnya melebihi jumlah antioksidan

di dalam tubuh (stres oksidatif). Namun, keberadaan radikal bebas juga diperlukan oleh tubuh

bila jumlahnya seimbang dengan antioksidan, contohnya untuk membunuh komponen patogen

yang menginvasi tubuh (11).

Dalam penelitian ini peningkatan kadar MDA plasma pada kelompok kontrol negatif

menunjukkan terjadinya peningkatan oksidasi lemak tak jenuh yang banyak terdapat didalam

membran. Hal ini terjadi karena pemberian stressor pada mencit melalui aktivitas fisik yang

berlebih dengan cara perenangan selama 55 menit, dimana aktivitas fisik yang berlebih ternyata

Dipresentasikan pada acara Kongres Nasional XIV Hal. 9Ikatan Farmakologi Indonesia; Manado, 31 Okt -2 Nop 2013

dapat meningkatkan radikal bebas dalam tubuh (12), karena ketika mencit dimasukkan ke

dalam bak renang, mencit akan mengalami stres dan berusaha untuk bertahan hidup dengan

cara berenang sekuat tenaga (5).

Kelompok yang diberikan antioksidan rebusan daun sambang getih dan vitamin C

menunjukkan terjadinya pencegahan oksidasi lemak tak jenuh. Daun sambang getih

mengandung senyawa flavonoid dan polifenol (10). Vitamin C, flavonoid dan polifenol

merupakan antioksidan eksogen dimana senyawa tersebut memiliki kemampuan untuk

menangkal radikal bebas seperti superoksida dan radikal hidroksil, menghambat peroksidasi

lipid dan menekan kerusakan jaringan oleh radikal bebas (13).

Pencegahan oksidasi lemak tak jenuh pada kelompok yang diberikan rebusan daun

sambang getih sama dengan pencegahan oksidasi lemak tak jenuh pada kelompok yang

diberikan vitamin C. hal ini menunjukkan bahwa rebusan daun sambang getih memiliki

kemampuan sama dengan vitamin C yang telah terbukti efektif sebagai antioksidan.

SIMPULAN

Uji aktivitas antioksidan rebusan daun sambang getih yang diuji secara in vivo dengan mengukur

kadar MDA plasma menunjukkan bahwa kadar MDA plasma pada kelompok perlakuan dosis tidak

berbeda bermakna dengan kelompok kontrol positif vitamin C.

DAFTAR PUSTAKA

1. Harjanto. Pemulihan stress oksidatif pada latihan olahraga. Jurnal KedokteranYarsi.2004;12(3):82,83&85

2. Agus Zainal AN. Stress oksidatif dan penyakit degenerative: Suatu tinjauan biokimia. JurnalKedokteran Yarsi.2002;10(3):69

3. Sugianto NL. Pemberian jus delima merah (punica granatum) dapat meningkatkan kadarglutation peroksidase darah pada mencit (Mus musculus) dengan aktivitas fisik maksimal(tesis). Denpasar: Program Pascasarjana;2011.h.3&5.

4. Senturk UK, Gunduz F, Kuru O, Aktekin MR, Kipmen D, Yalcin O, et al. Exercise inducedoxidative stress affects erythrocytes in sedentary rats but not exercise-trained rats. J ApplPhysiol;2001; 91.

Dipresentasikan pada acara Kongres Nasional XIV Hal. 10Ikatan Farmakologi Indonesia; Manado, 31 Okt -2 Nop 2013

5. Kurnianingsih. Uji efek tonikum suspensi ekstrak batang brotowali (Tinospora crispa (L.)Miers. Ex Hook.f. & Thoms) terhadap ketahanan berenang mencit (Mus musculus L.) jantangalur DDY (skripsi). Depok: FMIPA Departemen Biologi Universitas Indonesia; 2006.h.34.

6. Prangdimurti E, pratiwi D, Zamhoor H, Pertiwi K, Dewi R, Nugroho G. Pengaruh proteinransum dan pemberian teh hijau terhadap kadar malondialdehid (MDA) organ hati tikuspercobaan. Makalah Kimia Organik bahan Alam 2009;h.2.

7. Ahmad A, Patong Rauf. Aktivitas antikanker senyawa bahan alam kurkumin dan analognyapada tingkat molekuler. Jurnal Kedokteran Yarsi.2006;14(2):159

8. Nisma F, Situmorang A, Fajar M. Uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol 70% bunga rosella(Hibiscus sabdariffa L.) berdasarkan aktivitas SOD (superoxyd dismutase dan kadar MDApada sel darah merah domba yang mengalami stress oksidatif secara in vitro (Skripsi). Jakarta:Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Prof.Dr.Hamka; 2011.h.2.

9. Nurhasana F, Syamsudin. Efek antioksidan dari ekstrak biji petai cina (Leucaena leucocephalaL) Pada Tikus Putih. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia.2004;3(1):1-3.

10. Syamsuhidayat SS, Hutapea JR. Inventaris tanaman indonesia. Jilid I. Jakarta: Badan Penelitiandan Pengembangan Kesehatan Departemen Kesehatan RI; 1991.h.286-287.

11. Winarsi H. Antioksidan alami dan radikal bebas potensi dan aplikasinya dalam kesehatan.Yogyakarta: Kanisius; 2007. 12,14&16.

12. Jawi IM, Ngurah IB, Sutirtayasa IWP, RaiManuaba IB. aktivitas fisik maksimal akut dapatmeningkatkan kadar SGOT SGPT dan menimbulkan degenerasi sel hati mencit. JurnalKedokteran Yarsi.2006;14 (3):204.

13. Yuhernita. Analisis senyawa metabolit sekunder dari ekstrak metanol daun surian yangberpotensi sebagai antioksidan. Makara, sains 2011;15(1):50-51.

Dipresentasikan pada acara Kongres Nasional XIV Hal. 11Ikatan Farmakologi Indonesia; Manado, 31 Okt -2 Nop 2013

Cover Makalah Sambang Getih(1).pdfSurat Tugas_IKAFI MANADO(1).pdfMakalah Daun Sambang Getih_Konas 14_Oke.pdfSertikat Konas XIV_Ros Sumarny.pdf