Bagan Eksperimen Pengaruh Ketinggian Terhadap Efek Antidepresan Pada Mencit dengan Metode Papan Datar

Dibagi 2 kelompok :

Masing – masing kelompok 1 ekor mencit.

Setelahdipuasakan 6 jam, mencit di setiap grup diberikan perlakuan sebagai berikut:

Setelah ditunggu 5 menit, mencit diletakkan di tengah-tengah alat

papan datar, kemudian diamati dan dicatat parameter ujinya.

Diamati dan diukur parameter ujinya :

1. Durasi respon motorik awal2. Durasi respon motorik3. Efek maksimumnya

Disiapkan 2 ekor mencit, sehat, jantan, umur 2-3bulan, bobot ±20-25g, diadaptasikan lingkungan 7 – 14 hari, dan bobot badan tidak menurun > 10% selama masa adaptasi

Kelompok ujiKelompok Kontrol

BahanUjiAir suling

Prosedur kerja: Pengaruh Ketinggian Terhadap Efek Antidepresan Pada Mencit dengan Metode Papan Datar

1. Kompetensi Eksperimen

- Memahami efek antidepresan yang dihasilkan pada mencit.

- Mengamati respon motorik yang ditunjukkan pada mencit pada saat diujikan dengan metode papan datar

2. Prinsip eksperimen - Eksperimen dilakukan dengan mengujikan hewan uji dengan metode papan datar , dengan diberikan bahan uji -Tofranil dan plasebo (pelarut tanpa bahan obat) sebagai bahan pembanding secara oral terlebih dahulu untuk mengamati efek antidepresan dari bahan uji Tofranil dan bahan obat pembanding, plasebo, yang dapat memperlama/menunda respon motorik awal.

3. Persiapan hewan uji - Hewan yang digunakan sebanyak 3 ekor , telah

memenuhi persyaratan pengujian dan sehat.- Hewan belum pernah mengalami perlakuan apapun

sebelumnya dan setiap hewan mencit hanya dapat diberi satu kali perlakuan saja.

4. Memilih hewan uji mencit Mus muscullus galur webster

- Dipilih hewan uji mencit ini karena unsur kepekaan yang dimilikinya, dimana mencit yang biasanya hidup dengan komunitasnya, akan merasa asing apabila berada jauh dari komunitasnya dan berada ditempat asing yang tidak sesuai dengan habitatnya. Dan aktualisasi/bentuk dari rasa depresi yang dialami oleh mencit dapat dilihat dengan jelas, yaitu mencit akan merasa ingin tahu dan melakukan jengukan kepala dalam rentang waktu tertentu, apabila mencit merasa depresi,mencit akan diam,tidak aktif dan berdiam diri disuatu tempat dengan badan ditekuk.

5. Adaptasi hewan uji dengan lingkungan tempat pengujian

- Dilakukan agar hewan tidak merasa asing dengan lingkungan sehingga dapat merasa nyaman.

6. Hewan uji ditimbang satu per satu

- Agar semua hewan uji mempunyai rata-rata bobot yang sama antara 20-25 gram sehingga pemberian dosisnya bisa homogen.

7. Pengelompokkan hewan uji

- Mencit sebanyak 2 ekor yang telah dipilih, kemudian dikelompokkan berdasarkan bahan uji yang diberikan untuk memudahkan pengamatan terhadap pengujian.

8. Penandaan hewan uji - Penandaan hewan uji dilakukan untuk memudahkan pengamatan, mengingat banyaknya hewan uji dan perbedaan pemberian bahan dan dosis pada masing-masing kelompok ( mencit ).

9. Pemilihan bahan uji- Pengujian terhadap efek antidepresan ini dibutuhkan

bahan uji yang memiliki mekanisme antidepresan, maka dipilihlah obat tofranil

10. Persiapan bahan uji - Bahan yang tersedia adalah obat tofranil Bahan obat yang tersedia adalah tofranil 125 mg/50 ml Dosis obat: 125 mg/50 ml = 25 mg dalam 50 mlUntuk mencit dengan bobot rata-rata 25g maka bahan uji yang diperlukan adalah :

Volume maksimum untuk pemberian secara oral 0,5ml. Dengan demikian volume oral 0,5ml, maka kadar larutan obat yang dibuat adalah :0,0125 mg dalam 0,5 ml

12. Pemberian bahan uji Pemberian bahan uji dibedakan menjadi sebagai berikut : 1. Kontrol ( plasebo/ pelarut tanpa bahan uji )2. Bahan uji

13. Perlakuan terhadap hewan uji

- Semua perlakuan diberikan secara oral. Keseragaman perlakuan/cara pemberian obat terhadap hewan uji bertujuan agar dapat menghasilkan mula kerja obat (onset of action) serta proses absorpsi dan proses distribusi obat yang sama

- Setelah diberikan bahan uji mencit didiamkan selama 10-15 menit. Hal ini dilakukan agar obat dapat terabsorpsi, kemudian akan didistribusikan ke tempat kerja obat (organ/jaringan)

- Selanjutnya hewan diletakkan ke dalam alat uji yang akan digunakan.

14. Penentuan alat uji yang digunakan

- Alat uji yang digunakan adalah papan datar (platform)- Alat lain : stopwatch, timbangan hewan, timbangan gram

dan miligram.- Alat gelas : beaker glass, erlenmeyar, pengaduk gelas,

mortir.- Spet injeksi 1 ml dan 2 ml.- Sonde oral modifikasi.

15. Pengenalan Alat uji Terdiri dari:

-Acrylic transparan laser pointer

-LDR( Light Depent Resistant) untuk penerima

sinar

-Mikrokontrol

-LCD(Liquid Crystal Display)

16. Penginduksi depresi - Penginduksi depresi yang digunakan adalah papan datar berbentuk lingkaran berdiameter 30 cm dan tinggi 45 cm. Depresi yang terjadi pada hewan dengan metode ini disebabkan oleh pengaruh lingkungan asing(ketinggian).

17. Parameter uji - Parameter uji berupa rentang waktu yang dialami mencit pada saat mencit diletakkan diletakkan ke dalam alat(freezing time), hingga timbul respon motorik pertama kali (respon motorik awal).

- Respon motorik yang timbul dapat dilihat secara jelas, yaitu munculnya respon berupa perilaku mencit yang men-jengukan kepalanya samapi dengan batas ujung telinganya menjulur ke bawah dan rata dengan dasar pijakan hewan.

18. Analisis data - Durasi saat mencit diletakkan pada papan datar hingga memberikan respon motorik pertama kali (onset of action) dicatat.

- Data antar kelompok uji dibandingkan satu dengan yang lain, apabila data kelompok uji berbeda lebih besar bermakna dibanding dengan kelompok kontrol, maka dapat diartikan bahwa bahan uji mempunyai efek menahan, mengurangi atau menghilangkan depresi atau yang dikenal dengan efek antidepresan.

- Hasil efek antidepresan bahan uji tersebut hanya berlaku bagi hewan mencit. Untuk mengetahui apakah efek tersebut berlaku bagi manusia, maka perlu dilakukan penelititan lebih klinik lebih lanjut dengan manusia sebagai subyek penelitian, karena ada kalanya efek pada manusia berbeda dengan efek pada hewan, sehingga hasil penelitian pada hewan tidak dapat langsung diaplikasikan bagi manusia. Namun data penelitian preklinik ini diperlukan untuk menjadi acuan dalam melakukan uji klinis.

Tabel Hasil Eksperimen Pengaruh Ketinggian Terhadap Efek Antidepresan Pada Mencit dengan Metode Papan Datar

Kelompok Perlakuan No.Hewan Freezing time

(detik)

Jumlah Jengukan dalam rentan waktu 5 menit

Kontrol Plasebo I 10 51

Bahan Uji Trofanil 125 mg / 50 ml

II 6 111