tudas pak widodo uas

7/25/2019 Tudas Pak Widodo Uas

1/5

Metode Penelitian

Penelitian ini direncanakan dilakukan dengan tiga tahapan yaitu tahap perisapan, tahap

pengujian dan tahap pengujian. Variabel yang diamati antara lain konsentrasi amonia,

konsentrasi nitrit dan konsentrasi nitrat.

1. Tahap Persiapan

Persiapan Isolat. Penyiapan strain isolat mikroba dengan Menumbuhkan isolat

Pseudomonas sp. LS3K di tumbuhkan pada medium agar yang selanjutnya di kulturisasi pada

medium cair dengan penambahan sumber nitrogen berupa amonium sulfat dan sodium nitrit

dan sodium nitrat selama hari pada suhu ruang. Selama kulturisasi dilakukan pengamatan

terhadap grafik pertumbuhan bakteri !"#$%.

Pembuatan Basal Medium (BM) mengikuti &hang et al. !'())% menggunakan *( ml

larutan trace elementyang dibuat dengan komposisi per liternya antara lain+ * g K'P-, ',* g

MgS-.'-, ',* g /a"l, (,(* g MnS-.'-, (,(* g #eS-. '- yang di buat dengan p

,'.

2. Tahap Pelaksanaan

Pembuatan Medium Nitrifikasi (MN) yang dibuat dari *( ml 0M, 1monium sulfat dan

a2uadest. Pengujian kemampuan nitrifikasi. $ntuk mengetahui bagaimana pengaruh sumber

karbon dan rasio "/ terhadap efisiensi proses nitrifikasi isolat Pseudomonas sp. LS3K, maka

dilakukan faktor percobaan tunggal pada sebuah reaktor yang berisi M/ dengan faktor sumber

karbon !sodium citrate dan glukosa% dengan rasio "/ menggunakan masing4masing adalah *,

)(, )*, dan '( berdasarkan perbandingan molekul " dan / !amonium sulfat + sodium citrate

dan amonium sulfat + glukosa%. Semua percobaan di atas dilakukan 3 ulangan dengan inokulasi

) 5 !66% dalam 3(( mL. Selama 78 jam inkubasi pada suhu ruang, kultur sampel secara


2/5

periodik konsentrasi amonium !/94/%, nitrit !/-'

94/%, nitrat !/-394/% dan grafik

pertumbuhanya !"#$%. 0ila terjadi penurunan konsentrasi amonium maka bisa diestimasikan

bah:a amonium telah dioksidasi oleh bakteri dan telah terjadi proses nitrifikasi.

Pengujian kemampuan denitrifikasi

Pembuatan Medium enitrifikasi (M) yang dibuat dari *( ml larutan 0M ditambah

sodium nitrat dan a2uadest. Pengujian karakteristik kemampuan denitrifikasi se!ara

aerobik. $ntuk mengetahui bagaimana pengaruh sumber karbon dan rasio "/ terhadap

efisiensi proses denitrifikasi isolat Pseudomonas sp. LS3K, maka dilakukan faktor percobaan

tunggal pada sebuah reaktor yang berisi M; dengan faktor sumber karbon !sodium citrate dan

glukosa% dengan rasio "/ menggunakan masing4masing adalah *, )(, )*, dan '( berdasarkan

perbandingan molekul " dan / !sodium nitrat + sodium citrate dan sodium nitrat + glukosa%.

Semua percobaan di atas dilakukan 3 ulangan dengan inokulasi ) 5 !66% dalam 3(( mL.

Selama 78 jam inkubasi pada suhu ruang, kultur sampel secara periodik konsentrasi amonium

!/94/%, nitrit !/-'

94/%, nitrat !/-394/% dan grafik pertumbuhanya !"#$%. 0ila terjadi

penurunan konsentrasi nitrat maka bisa diestimasikan bah:a nitrat telah direduksi oleh bakteri

dan telah terjadi proses denitrifikasi.

Pengujian kemampuan nitrifikasi dan denitrifikasi aerobik.

Pembuatan Medium Nitrifikasi dan enitrifikasi (MN) yang dibuat dengan *( ml

larutan 0M ditambah amonium sulfat, sodium nitrat dan a2uadest. Pengujian karakteristik

kemampuan nitrifikasi dan denitrifikasi se!ara aerobik. $ntuk mengetahui bagaimana

pengaruh sumber karbon dan rasio "/ terhadap efisiensi proses nitrifikasi isolat

Pseudomonas sp. LS3K, maka dilakukan faktor percobaan tunggal pada sebuah reaktor yang

berisi M/; faktor sumber karbon !sodium citrate dan glukosa% dengan faktor rasio "/

menggunakan masing4masing adalah *, )(, )*, dan '( berdasarkan perbandingan molekul "

dan / !amonium sulfat 9 sodium nitrat + sodium citrate dan amonium sulfat 9 sodium nitrat +

glukosa%. Semua percobaan di atas dilakukan 3 ulangan dengan inokulasi ) 5 !66% dalam 3((


3/5

mL. Selama 78 jam inkubasi pada suhu ruang, kultur sampel secara periodik konsentrasi

amonium !/94/%, nitrit !/-'

94/%, nitrat !/-394/% dan grafik pertumbuhanya !"#$%.

"plikasi pada ekskreta a#am petelur.

Pembuatan media ekskreta. )*( g ekstkreta !yang terlebih dahulu dihitung rasio "/nya%

dicampur dengan )*( ml a2uadest, diaduk sampai homogen dan dimasukan ke dalam

erlenmayer !*(( ml% kemudian dilakukan sterilisasi dengan menggunakan autoklaf. Pengujian

nitrifikasi dan denitrifikasi se!ara aerob. Penambahan jenis karbon dan rasio "/ larutan

ekskreta di buat berdasarkan data hasil sumber karbon dan rasio "/ yang terbaik pada

pengujian nitrifikasi dan denitrifikasi secara aerobik. Larutan isolate mikroba ditambahkan )5

!66%. diinkubasi dan diaerasi selama 78 jam dan dilakukan pengamatan setiap 8 jam kultur

sampel secara periodik diamati konsentrasi amonium !/94/%, nitrit !/-'

94/%,nitrat !/-394/%

dan grafik pertumbuhanya !"#$%.

$. Metode Perhitungan

%onsentrasi "monium. Pengukuran kadar amonium menggunakan metode nessler

!1P1, )77arna yang terbentuk diukur

secara berkala menggunakan spektrofotometer dengan panjang gelombang '* nm.

%onsentrasi Nitrat. Pengukuran konsentrasi nitrat dilakukan dengan menggunakan

metode 0rusin !1P1 )77


4/5

yang terbentuk menjadi senya:a kompleks. >arna yang terbentuk diukur secara

spektrofotometer pada panjang gelombang )( nm.

%onsentrasi Nitrit. Pengukuran konsentrasi nitrat dilakukan dengan menggunakan

metode /?; !/4!)4naftil% etilendiamin dihidroklorida% !(8487arna yang terbentuk diukur secara spektrofotometer pada panjang gelombang *3 nm.

Pengukuran &umlah %oloni (Colony Forming Unit' *'ml). Pengukuran jumlah koloni

di hitung menggunakan metode "#$ !>aluyo, '((


5/5

tudas pak widodo uas

Documents