TCBS Agar digunakan untuk isolasi selektif, diferensiasi, dan budidaya vibrio patogen. Air Alkaline Peptone digunakan untuk pengayaan spesies Vibrio dari sampel klinis tinja dan lainnya. PRINSIP: Pentingnya vibrio telah meningkat selama bertahun-tahun. 1 Vibrio cholerae, agen penyebab kolera, telah diisolasi dari daerah yang telah bebas dari kolera, yaitu, Guam, Teluk Chesapeake, Louisiana, Alabama, California, Pennsylvania, Maryland, Inggris, Brasil, dan Jepang. 3 Spesies vibrio lain telah terlibat sebagai agen penyebab dalam gastroenteritis dan extraintestinal infeksi, terutama dari telinga, jaringan lunak, dan darah. V. vulnificus telah terlibat dalam mengancam jiwa septikemia. Kebanyakan, tetapi tidak semua, infeksi vibrio berhubungan dengan kontak air laut, dan infeksi sering berkembang pada individu setelah mereka telah kembali ke daerah pedalaman dari daerah pesisir. Peran vibrio yang mungkin tidak terlihat karena gejalanya sering mirip dengan agen pedalaman lebih umum mikroba dan identifikasi karena media atau sistem mungkin kekurangan natrium diperlukan untuk pertumbuhan dan identifikasi klorida. Spesies medis penting adalah: 7 Nonhalophilic vibrio:

Halofilik vibrio: V. cholerae serogrup O1 V. parahaemolyticus V. cholerae serogrup O1 non V. vulnificus (laktosa fermentor) V. mimicus V. metschnikovii V. hollisae V. damsela V. fluvialis V. furnissii V. alginolyticus Vibrio tumbuh baik pada 35-37 C pada media yang mengandung satu persen natrium klorida dan pH yang sangat tinggi (8,5-9,5). Halofilik vibrio memerlukan natrium klorida untuk pertumbuhan optimal dan aktivitas metabolik, beberapa isolat mungkin terlewatkan pada natrium-kekurangan media. 7,10 Kobayashi et al. 8 memodifikasi formula Agar Nakanishi, yang mengakibatkan Agar TCBS, media selektif dan diferensial untuk isolasi dan budidaya vibrio. Agar TCBS mengandung sumber pelengkap protein tumbuhan dan hewan, satu persen natrium

klorida, tiosulfat (sumber sulfur), dan ekstrak ragi, semua yang memungkinkan pertumbuhan optimum. Garam empedu di media menghambat pertumbuhan mikroba gram positif, adanya sukrosa memungkinkan untuk diferensiasi mereka Vibrio, yang dapat memanfaatkan sukrosa dengan bantuan bromthymol biru, dan indikator biru timol. PH 8,6 yang tinggi Agar TCBS menekan usus lain Flora sementara memungkinkan pertumbuhan tanpa hambatan dari vibrio. 9 Penggunaan : Cara Penggunaan, TCBS Agar: Sebelum inokulasi media harus dibawa ke suhu kamar. Langsung menyuntik tinja atau spesimen muntahan ke media atau menyuntik sampling dari sumur-campuran media transportasi. Menggunakan standar mikrobiologi prosedur, beruntun inokulum sehingga memperoleh koloni terisolasi. Menetaskan aerobik pada 35 C selama 18-24 jam. Periksa untuk reaksi karakteristik yang dapat membantu dalam membuat identifikasi dugaan. Interpretasi: Mikroorganisme: Colony Keterangan TCBS: V. cholerae Kuning V. mimicus, V. parahaemolyticus, V. damsela Hijau V. vulnificus Hijau (85%) atau kuning (15%) V. hollisae

Hijau (pertumbuhan yang sangat miskin) V. fluvialis, V. furnissii, V. alginolyticus Kuning V. metschnikovii Kuning (pertumbuhan berkurang) Pseudomonas aeruginosa Penghambatan, parsial untuk lengkap; biru Proteus spesies Penghambatan, parsial untuk lengkap; kuning tembus Escherichia coli Penghambatan, parsial untuk lengkap; tembus PENGENDALIAN KUALITAS: * Mikroorganisme Digunakan (ATCC #): Diharapkan Hasil: Agar TCBS Vibrio alginolyticus (PML ketegangan rumah) Pertumbuhan, kuning koloni Vibrio parahaemolyticus (17802) Pertumbuhan, hijau koloni Escherichia coli (25922) Penghambatan, parsial untuk menyelesaikan Proteus mirabilis (12453) Penghambatan, parsial untuk menyelesaikan

Blake, P.A. dkk . 2009 . Tiosulfat Sitrat Garam empedu sukrosa (TCBS) AGAR, ALKALI pepton AIR (APW ). http://www.pmlmicro.com/assets/TDS/743.pdf . Diakses tanggal 11 Mei 2011 . Vibrio adalah salah satu jenis bakteri yang tergolong dalam kelompok marine bacteria.[1]Bakteri ini umumnya memiliki habitat alami di laut. Karakteristik Secara umum, bakteri vibrio bersifat aerob, tetapi ada pula yang bersifat anaerob fakultatif.[1] Selain itu, vibrio juga bersifat motil karena pergerakannya dikendalikan oleh flagela polar, tergolong bakteri gram negatif dan berbentuk batang yang melengkung (seperti tanda koma).[2] [sunting]Metabolisme Hasil uji biokimia dari bakteri Vibrio antara lain adalah hasil positif pada uji oksidase dankatalase.[3] Pada uji indol Vibrio menunjukan hasil positif dan bersifat motil.[3] Selain itu, pada uji fermentasi sukrosa dan manitol bakteri Vibrio juga memberi hasil positif yaitu dapat melakukan fermentasi sukrosa dan manitol, namun pada uji laktosa didapat hasil negatif yaitu tidak dapat memfermentasikan laktosa.[3] Sementara itu, bila diujikan pada media Triple Sugar Iron Agar(TSIA), hasil yang muncul adalah bagian atas (slant) menunjukan warna merah yang berarti bersifat basa, dan bagian bawah (butt) berwarna kuning yang berarti bersifat asam, dan tidak terbentuk H2S.[3] Uji lisin dekarboksilasi terhadap Vibrio juga menunjukkan hasil positif berupa warna ungu, uji NaCl 0% memberi hasil positif berupa kekeruhan yang tinggi, NaCl 6% dengan hasil bervariasi, dan NaCl 8 % dengan hasil negatif (kekeruhan rendah).[4] Pada uji arginin dihidrolase dan esculin hidrolisis Vibrio akan memberikan hasil negatif, sedangkan pada uji ornitin dekarboksilase Vibrio akan memberi hasil positif.[4] Jenis-jenis Beberapa jenis spesies vibrio yang ditemukan pada lingkungan perairan yaitu Vibrio alginolyticus, V. damsela, V. charchariae, V.anguilarum, V. ordalli, V. cholerae, V. salmonicida, V. vulnificus, V. parahaemolyticus, V. pelagia, V.

splendida, V. fischeri dan V. harveyi.[1] Beberapa dari jenis vibrio tersebut umumnya dapat menginfeksi hewan-hewan laut seperti kerang dan ikan sehingga menyebabkan penyakit yang disebut vibriosis.

Salah satu hasil pewarnaan gram Vibrio (Vibrio cholerae) Klasifikasi ilmiah Domain: Bakteri Kerajaan: Bacteria Filum: Kelas: Proteobacteria Gamma Proteobacteria Vibrionales Vibrionaceae Vibrio

Ordo: Famili: Genus:

Wikipedia . 2011. Vibrio . http://id.wikipedia.org/wiki/Vibrio . Diakss tanggal 11 Mei 2011

Vibrio cholerae merupakan bakteri gram negatif, berbentuk basil (batang) dan bersifat motil (dapat bergerak), memiliki struktur antogenik dari antigenflagelar H dan antigen somatik O, gamma-proteobacteria, mesofilik dan kemoorganotrof, berhabitat alami di lingkungan akuatik dan umumnya berasosiasi dengan eukariot.[1] SpesiesVibrio kerap dikaitkan dengan sifatpatogenisitasnya pada manusia, terutama V. cholerae penyebab penyakit kolera di negara berkembang yang memiliki keterbatasan akan air bersih dan memiliki sanitasi yang buruk.[2] V. cholerae ditemukan pertama kali oleh ahli anatomi dari Italia bernama Filippo Pacini pada tahun 1854. [3]. Namun, penemuan awal ini baru dikenal luas setelah Robert Koch, yang mempelajari penyakit kolera di Mesir, pada tahun 1883 berhasil membuktikan bahwa bakteri tersebut adalah penyebab kolera. [3]

Daftar isi [sembunyikan]

1 Isolasi 2 Uji Biokimia 3 Referensi 4 Lihat pula

[sunting]Isolasi Untuk melakukan isolasi dan pemeliharaan vibrio, dapat menggunakan media Thiosulfate-citrate-bile salts agar (TCBS) yang merupakan media selektif untuk isolasi dan pemurnian Vibrio.[2] Vibriomampu menggunakan sukrosa sebagai sumber karbon akan berwarna kuning, sedangkan yang lainnya berwarna hijau.[2] Akan tetapi terdapat beberapa mikrob yang juga dapat tumbuh pada media ini, seperti Staphylococcus, Flavobacterium, Pseudoalteromonas, [2] and Shewanella. Sedangkan untuk perbanyakan Vibrio, dapat digunakan

media Alkaline Peptone Water (APW) yang memiliki pHrelatif tinggi, yaitu berkisar 8.4 dan mengandung NaCl sebesar 1-2%.[2]Adapun pertumbuhan optimum vibrio adalah pada suhu berkisar antara 20- 35oC.[2] [sunting]Uji Biokimia Teknik yang digunakan dalam identifikasi fenotipe V. cholerae adalah uji lisin dekarboksilase danornitin (arginin) dekarboksilase, oksidase, Kliger Iron [4] Agar (KIA), dan uji indol. V. cholerae akan menunjukkan hasil positif pada keempat uji biokimia tersebut.[4] Hasil positif untuk uji oksidase dan uji lisin dan arginin dekarboksilase adalah terbentuknya warna ungu tua.[4] Pada uji KIA, tidak terbentuk gas, dengan slant (bagian permukaan media) berwarna merah (bersifat basa) dan butt(bagian dasar media) berwarna kuning (bersifat asam).[5] Untuk uji indol, akan terbentuk warna merah keunguan pada permukaan

TEM image Klasifikasi ilmiah Kerajaan: Bacteria Filum: Kelas: Proteobacteria Gamma Proteobacteria

Ordo: Famili: Genus:

Vibrionales Vibrionaceae Vibrio

Spesies: V. cholerae Nama binomial Vibrio Pacini 1854 cholerae

Wikipedia. Vibrio cholera. 2012 . http://id.wikipedia.org/wiki/Vibrio_cholerae