sop typing (blood bank))

CARTA ORGANISASI MAKMAL TABUNG DARAH

PEGAWAI PERUBATAN UD48

DR. SURESHKUMAR A/L KUMARASINGAM

JTMP U36

PN. HALIZAH MOHAMAD

JTMP U32

EN. SULAIMAN NGALIM

JTMP U29

EN. MARVEN

DONIL

JTMP U29

EN. IDHAM

SHARIF

JTMP U29

EN. ED RAMLEE

BAHTIAR

JTMP U32

PN. NOOR

AKMANIZA

KETUA UNIT TRANSFUSI DARAH

DR. SITI AINI SYAZRAH

1. UJIAN PENAKSIRAN ARAS HEMOGLOBIN DONOR

OBJEKTIF :

Untuk menganggar paras hemoglobin penderma secara semikuantitatif, iaitu

melebihi 12.5 g/dl atau kurang dari 12.5 g/dl.

BAHAN/RADAS/PERALATAN/SPESIMEN :

Darah kapilari (cucukan jari dengan lanset).

Swab alkohol

Haemoglobin Automated Analyser

PRINSIP UJIAN :

Tahap hemoglobin darah ditentukan dengan kaedah kalorimetri pada analyser.

KAEDAH UJIAN :

i. Jari donor di swab dengan swab alkohol.

ii. Cucukan cari dilakukan menggunakan lanset pakai buang.

iii. Titisan darah pertama dilap terlebih dahulu. Titisan darah seterusnya dititis

pada kit plastik analyser, dan dimasukkan ke dalam analyser.

iv. Bacaan yang terhasil pada analyser dicatat.

INTERPRETASI UJIAN : 12.0 - 15.0g/dL (aras hemoglobin normal)

2. PENYEDIAAN KNOWN CELLS

OBJEKTIF :

Untuk menyediakan ampaian sel darah ABO yang telah diketahui antigennya, untuk

digunakan semasa melakukan pengumpulan ABO serum.


Darah di dalam segmen beg darah yang telah digunting (kumpulan A, B, dan O).

Normal saline

Pipet pasteur

Penggempar

Tabung uji plastik/kaca

KAEDAH UJIAN :

i. Tiga tabung uji dilabel sebagai A, B dan O.

ii. Darah daripada segmen dimasukkan ke dalam tabung uji (mengikut label

kumpulan darah).

iii. Sel dicuci dalam setiap tiub dengan salin normal sebanyak tiga kali. Cara

mencuci sel adalah dengan sebatikan sel padat dengan salin normal dan

diempar pada kelajuan 3000 rpm selama satu minit.

iv. Tiga tabung uji baru disediakan dan dilabel dengan A, B dan O. Setitis sel

darah padat dimasukkan dan 19 titis normal saline ditambah untuk

menghasilkan suspensi sel 5%.

v. Suspensi sel kemudiannya diuji dengan sampel serum (menggunakan teknik

tiub) untuk memastikan ketepatan kandungan antigennya.

3. PENYEDIAAN CCC (COOMBS CONROL CELLS)

OBJEKTIF :

Untuk menyediakan CCC yang akan digunakan untuk mengesahkan keputusan

negatif ujian penyaringan antibodi.


Darah kumpulan O rhesus positif

Normal saline

Pipet pasteur

Penggempar

Tabung uji plastik/kaca

Reagen AHG (anti-human globulin)

PRINSIP UJIAN :

Sel darah merah yang tersensitasi dengan serum globulin adalah digunakan

sebagai kontrol positif untuk menguji fungsi AHG. Ia mengandungi IgG yang mana

akan bertindak balas dengan AHG(mengandungi Anti-IgG). Anti-IgG di dalam AHG

akan mengikat molekul IgG seterusnya membentuk agglutinasi.

KAEDAH UJIAN :

i. Satu tabung uji disediakan dan dilabel ‘CCC’.

ii. 19 titis normal saline ditambah ke dalam tiub.

iii. Setitis anti-D (yang telah dilakukan pencairan 1/20) dimasukkan dan

disebatikan.

iv. Empat titis SDM padat dari kumpulan O Rh(D) positif ke ditambah dalam

tabung uji dan disebatikan.

v. Tabung uji dieram pada suhu 37°C selama 15 – 30 minit.

vi. Hasil eraman tadi dicuci 3 – 4 kali dengan normal saline. Semua larutan normal

saline dibuang dengan sempurna pada cucian yang terakhir.

vii. 36 titis larutan normal saline dimasukkan ke dalam tabung uji hasil cucian sel

tadi.

viii. CCC yang disediakan diuji dengan reagen AHG.

INTERPRETASI UJIAN : Agglutinasi gred 2+ terhasil setelah CCC diuji dengan reagen

AHG.

4. UJIAN PENGUMPULAN ABO DAN RHESUS (TEKNIK TIUB)

OBJEKTIF :

Untuk mengenalpasti jenis kumpulan darah dan rhesus.


Darah di dalam tiub EDTA (berantikoagulan Ethylenediaminetetraacetic acid).

Tabung uji kaca (bersaiz kecil)

Antisera anti-A, anti-B, anti A,B, dan anti-D

Known cells tersedia

Pipet pasteur

Penggempar

PRINSIP UJIAN :

Agglutinasi langsung sel darah merah dengan reagen tertentu menentukan

kehadiran antigen tertentu. Secara umumnya, tiada agglutinasi menunjukkan

ketidakhadiran antigen tersebut. Kumpulan ABO dan rhesus D ditentukan dari corak

reaksi dengan reagen yang diuji (anti-A, anti-B dan anti-AB serta anti-D). Serum

kebanyakan individu berusia lebih dari enam bulan menghasilkan antibodi terhadap

antigen ABO yang tidak dimiliki oleh individu berkenaan. Pengumpulan serum,

menggunakan known cells tersedia digunakan untuk mengesahkan keputusan

pengumpulan ABO sel.

KAEDAH UJIAN :

a) Pengumpulan ABO dan Rhesus D langsung

i. Suspensi sel 5% disediakan daripada sampel sel darah merah.

ii. Setitis antisera anti-A, anti-B, anti-AB dan anti-D ditambah ke tiub yang telah

dilabelkan.

iii. Setitis ampaian sel ditambah ke dalam tiub dan disebatikan.

iv. Sebatian kemudiannya diemparkan pada kelajuan 3000 rpm selama 15 saat.

Setiap tiub digoncang (kaedah tilt and turn) untuk melihat agglutinasi (sekiranya

ada). Agglutinasi digredkan dan keputusan direkodkan.

b) Pengumpulan ABO dan Rhesus D tidak langsung

i. Dua titis serum atau plasma dimasukkan ke dalam tiub yang telah dilabelkan

sel A, sel B, dan sel O

ii. Setitis known cell A, B, dan O ditambah ke tiub dan disebatikan.

iii. Sebatian kemudiannya diemparkan pada kelajuan 3000 rpm selama 15 saat.

Setiap tiub digoncang (kaedah tilt and turn) untuk melihat agglutinasi (sekiranya

ada). Agglutinasi digredkan dan keputusan direkodkan.

INTERPRETASI UJIAN :

POSITIF : Ada agglutinasi/+

NEGATIF :Tiada agglutinasi/-

ANTI-A ANTI-B ANTI-

A,B

ANTI-

D

SEL A SEL B SEL O KUMPULAN

DARAH

+ 0 + + 0 + 0 A+

0 + + + + 0 0 B+

0 0 0 + + + 0 O+

+ + + + 0 0 0 AB+

5. UJIAN PENGUMPULAN ABO DAN RHESUS (TEKNIK JUBIN)

OBJEKTIF :

Untuk mengenalpasti jenis kumpulan darah dan rhesus. Kebiasaannya teknik jubin

dilakukan semasa mobile blood bank di luar kawasan hospital.



Plat jubin kumpulan darah

Antisera anti-A, anti-B, anti A,B, dan anti-D

Known cells tersedia

Pipet pasteur

Kayu aplikator

Penggempar (untuk memisahkan SDM dan serum di dalam tiub EDTA).

PRINSIP UJIAN :

Agglutinasi langsung sel darah merah dengan reagen tertentu menentukan

kehadiran antigen tertentu. Secara umumnya, tiada agglutinasi menunjukkan

ketidakhadiran antigen tersebut. Kumpulan ABO dan rhesus D ditentukan dari corak

reaksi dengan reagen yang diuji (anti-A, anti-B dan anti-AB serta anti-D). Serum

kebanyakan individu berusia lebih dari enam bulan menghasilkan antibodi terhadap

antigen ABO yang tidak dimiliki oleh individu berkenaan. Pengumpulan serum,

menggunakan known cells tersedia digunakan untuk mengesahkan keputusan

pengumpulan ABO sel.

KAEDAH UJIAN :

a) Pengumpulan ABO dan Rhesus D langsung

i. Plat jubin dilabel terlebih dahulu.

ii. Setitis antisera anti-A, anti-B, anti-AB dan anti-D dititis pada plat jubin yang

telah dilabelkan.

iii. Setitis darah ditambah pada plat jubin dan disebatikan dalam bentuk bulatan

sebesar syiling 50sen menggunakan kayu aplikator.

iv. Kehadiran agglutinasi diperhatikan (sekiranya ada). Agglutinasi digredkan dan

keputusan direkodkan.

b) Pengumpulan ABO dan Rhesus D tidak langsung

i. Plat jubin dilabel terlebih dahulu.

ii. Dua titis sampel serum dititis pada plat jubin yang telah dilabelkan.

iii. Setitis known cell A,B, dan O ditambah pada plat jubin dan disebatikan dalam

bentuk bulatan sebesar syiling 50sen menggunakan kayu aplikator.

iv. Kehadiran agglutinasi diperhatikan (sekiranya ada). Agglutinasi digredkan dan

keputusan direkodkan.


POSITIF : Ada agglutinasi/+

NEGATIF :Tiada agglutinasi/-

ANTI-A ANTI-B ANTI-

A,B

ANTI-

D

SEL A SEL B SEL O KUMPULAN

DARAH

+ 0 + + 0 + 0 A+

0 + + + + 0 0 B+

0 0 0 + + + 0 O+

+ + + + 0 0 0 AB+

6. UJIAN Du

OBJEKTIF :

Untuk mengesan antigen D yang lemah dalam sampel darah.



Normal saline

Reagen anti-D

Reagen AHG

Reagen CCC

Tabung uji

Pipet pasteur

Penggempar

PRINSIP UJIAN :

Du merupakan antigen D yang lemah. Sel D memberikan reaksi lemah/negatif

dengan Anti-D.

KAEDAH UJIAN :

i. Sel darah dicuci sebanyak tiga kali dengan saline dan suspensi 5% darah

disediakan

ii. Dua titis anti-D dan setitis suspensi 5% darah dimasukkan ke dalam tabung uji

yang dilabelkan.

iii. Tiub tersebut diempar pada kelajuan 3000rpm selama 15 saat dan agglutinasi

diperhatikan.

iv. Tiub dieram pada suhu 37°C selama 15 minit.

v. Tiub dikeluarkan dari inkubator dan sel darah dicuci sebanyak tiga kali.

vi. Dua titis reagen AHG ditambah dan tiub diempar pada 3000rpm selama 15

saat. Agglutinasi diperhatikan.

vii. Sekiranya keputusan didapati negatif, tambahkan setitis CCC untuk

mengesahkan ujian dan reagen AHG adalah berkeadaan baik.


POSITIF : Ada agglutinasi di mana-mana peringkat.

NEGATIF :Tiada agglutinasi yang terhasil.

7. UJIAN COOMBS (DIRECT DAN INDIRECT) MENGGUNAKAN GEL CARD

OBJEKTIF :

Untuk mengesan cold antibodies (IgM) dan warm antibodies (IgG).



Tabung uji

Coombs gel card with AHG

Mikropipet

Penggempar (untuk memisahkan sel darah merah dan serum di dalam tiub EDTA)

Penggempar gel card

PRINSIP UJIAN :

Cold antibodies terdiri daripada IgM yang hanya boleh dikesan pada suhu bilik

sahaja. Pengesanannya adalah berdasarkan antibodi yang tersensitasi pada

permukaan sel darah merah. Warm antibodies pula trdiri daripada IgG yang perlu

dikesan pada suhu badan (37°C), maka ia perlu dieram dalam inkubator.

Pengesanannya adalah berdasarkan antibodi yang terbebas di dalam serum. Teknik

terkini seperti penggunaan gel card digunakan di mana kawalan penggemparan

serum/sel darah merah adalah melalui gel dextran akrilamida.

KAEDAH UJIAN :

a) DIRECT COOMBS :

i. 10μL darah dimasukkan ke dalam tiub yang mengandungi 1000μl DG solution.

Sebatian tersebut akan menghasilkan suspensi darah.

ii. Coombs gel card yang mengandungi reagen AHG dilabel dengan nombor ID

pesakit. 50μl suspensi darah dimasukkan ke dalam satu mikrotiub gel pada gel

card.

iii. Gel card diempar pada kelajuan 990rpm selama sembilan minit.

iv. Hasil agglutinasi sel darah merah dibaca dan digredkan.

b) INDIRECT COOMBS :

i. 50μL sel panel I, II, dan III dimasukkan ke dalam 3 mikrotiub berbeza pada gel

card (yang telah dilabel terlebih dahulu).

ii. 25μl serum dimasukkan ke dalam semua mikrotiub tersebut.

iii. Gel card dieram pada suhu 37°C selama 15 minit.

iv. Gel card diempar selama pada kelajuan 990rpm sembilan minit.

v. Hasil agglutinasi sel darah merah dibaca dan digredkan.


POSITIF : Ada agglutinasi di permukaan/tersebar di dalam mikrotiub gel card.

NEGATIF : Sel darah merah termendap di dasar mikrotiub gel card.

8. UJIAN KESERASIAN/ CROSSMATCH (GXM) MENGGUNAKAN GEL CARD

OBJEKTIF :

Untuk melihat keserasian antara darah penderma dan penerima


10 μl sel darah merah penderma yang telah dilarutkan dengan 1000μl DG Solution

untuk mendapatkan suspensi darah.

Serum pesakit

Gel card with AHG

Mikropipet

Penggempar (untuk memisahkan sel darah merah dan serum di dalam tiub EDTA)

Penggempar gel card

PRINSIP UJIAN :

Darah antara penderma dan pesakit adalah tidak serasi apabila terdapat agglutinasi

di mana antibodi di dalam serum pesakit akan tersensitasi dengan antigen yang

terdapat pada permukaan sel darah merah penderma. Teknik terkini seperti

penggunaan gel card digunakan di mana kawalan penggemparan serum/sel darah

merah adalah melalui gel dextran akrilamida.

KAEDAH UJIAN :

v. Gel card yang mengandungi reagen AHG dilabel dengan nombor ID pesakit.

Hanya satu mikrotiub sahaja yang digunakan.

vi. 50μl suspensi darah penderma dimasukkan ke dalam mikrotiub gel pada gel

card tersebut.

vii. 25μl serum pesakit dimasukkan ke dalam mikrotiub gel yang sama.

viii. Gel card dieram pada suhu 37°C selama 15 minit.

ix. Gel card diempar pada kelajuan 990rpm selama sembilan minit.

x. Hasil agglutinasi sel darah merah dibaca dan digredkan.


POSITIF : Ada agglutinasi di permukaan/tersebar di dalam mikrotiub gel card.

Darah tidak serasi.

NEGATIF : Sel darah merah termendap di dasar mikrotiub gel card. Darah

adalah serasi.

sop typing (blood bank))

Documents