percobaan 1

Cara Penanganan dan Pemberian Obat pada Hewan Percobaan

Laboratorium Farmakologi 1

PERCOBAAN I

CARA PENANGANAN DAN PEMBERIAN OBAT

PADA HEWAN PERCOBAAN

Tujuan Percobaan

Setelah menyelesaikan percobaan ini mahasiswa diharapkan:

1. Mengetahui dan mampu menangani hewan untuk percobaan farmakologi secara baik.

2. Mengetahui sifat-sifat hewan percobaan dan faktor-faktor yang mempengaruhi

responnya.

3. Mengenal teknik-teknik pemberian obat melalui berbagai rute pemberian serta

pengaruhnya terhadap efek yang ditimbulkan.

Teori

Dalam praktikum farmakologi percobaan umumnya dilakukan terhadap hewan hidup.

Setiap hewan harus diperlakukan dengan baik karena perlakuan yang tidak wajar

terhadap hewan percobaan dapat menimbulkan penyimpangan-penyimpangan dalam

hasil pengamatan.

Hewan percobaan memiliki karakteristik yang bermacam-macam. Berikut ini adalah

karakteristik beberapa hewan percobaan yang sering digunakan di laboratorium

farmakologi.

1. Mencit

Mencit merupakan hewan yang relatif lebih mudah ditangani, bersifat penakut dan

fotofobik, cenderung bersembunyi dan berkumpul dengan sesamanya, lebih aktif

pada malam hari, aktivitasnya terganggu dengan adanya manusia, suhu normal

badan 37,40C, laju respirasi normal 163 kali/menit.

2. Tikus

Tikus merupakan hewan yang sangat cerdas, relatif lebih mudah ditangani, tidak

terlalu bersifat fotofobik, lebih tahan terhadap infeksi, kecenderungan untuk

berkumpul dengan sesamanya tidak tinggi, dapat menjadi liar, galak, dan

menyerang si pemegang jika makanannya kurang atau diperlakukan kasar, suhu

normal badan 37,50C, laju respirasi 210 kali/menit.



3. Kelinci

Kelinci jarang bersuara kecuali bila merasa nyeri, dan jika merasa tidak aman akan

memberontak, suhu rektal umumnya 38-39,50C, suhu berubah jika mengalami

gangguan lingkungan, laju respirasi 38-65 kali/menit, umumnya 50 kali/menit pada

kelinci dewasa normal.

4. Marmot

Marmot sangat jinak, mudah ditangani, jarang menggigit, kulitnya halus dan

berkilat, bulunya tebal dan kuat tapi tidak kasar, tidak mengeluarkan cairan di

hidung dan telinga. Laju denyut jantung 150-160 kali/menit, laju respirasi 50-110

kali/menit, suhu rektal 39-400C.

5. Katak

Kulit katak bersifat lembab dan licin.

Volume Pemberian Obat untuk Hewan Percobaan

Volume cairan yang diberikan kepada hewan percobaan tidak boleh melebihi jumlah

tertentu. Tabel 1.1 menunjukkan batas maksimal volume cairan yang dapat diberikan

kepada hewan percobaan.

Senyawa yang tidak larut dalam air dibuat suspensi atau emulsi dengan bantuan zat

pembantu dan diberikan dengan rute pemberian oral.

Tabel 1.1 Batas Maksimal Volume Cairan untuk Hewan Percobaan

Hewan Percobaan

Batas maksimal (mL ) untuk rute pemberian

iv Im ip Sc Po Mencit Tikus Kelinci Marmot

0,5 1 5-10 2

0,05 0,1 0,5 0,2

1 3 10 3

0,5 2 3 3

1 5 20 10

(M. Boucard, et al., Pharmacodynamics, Guide de Travaux Pratiques, 19811982)

Dosis Obat pada Hewan Percobaan

Pendekatan terbaik dalam penentuan dosis adalah dengan menggunakan perbandingan

luas permukaan tubuh. Perbandingan luas permukaan tubuh beberapa spesies hewan

percobaan yang sering digunakan di laboratorium farmakologi ditunjukkan pada Tabel

1.2.



Tabel 1.2. Perbandingan Luas Permukaan Tubuh Hewan Percobaan (Untuk Konversi Dosis)

dicari diketahui

20 g 200 g 400 g 1,5 kg 2 kg 4 kg 12 kg 70 kg

Mencit

Tikus

Marmot

Kelinci

Kucing

Kera

Anjing

Manusia 20 g Mencit 200 g Tikus 400 g Marmot 1,5 kg Kelinci 2 kg Kucing 4 kg Kera 12 kg Anjing 70 kg Manusia

1,0

0,14

0,08

0,04

0,03

0,016

0,008

0,0026

7,0 1,0 0,57 0,25 0,23 0,11 0,06 0,018

12,29 1,74 1,0 0,44 0,41 0,19 0,10 0,031

27,8

3,3

2,25

1,0

0,92

0,42

0,22

0,07

23,7

4,2

2,4

1,08

1,0

0,45

0,24

0,13

64,1

9,2

5,2

2,4

2,2

1,0

0,52

0,16

124,2 17,8 10,2 4,5 4,1 1,9 1,0 0,32

387,9

56,0

31,5

14,2

13,0

6,1

3,1

1,0

(Laurence and Bacharach, A.L., Evalution of Drug Activities: Pharmacometris, 1964)

Bila diinginkan dosis absolut pada manusia 70 kg dari data dosis pada anjing 20 mg/kg

(untuk anjing dengan bobot badan 12 kg) maka dihitung terlebih dahulu dosis absolut

pada anjing tersebut yaitu 20 mg/kg x 12 kg = 240 mg. Dengan menggunakan faktor

konversi pada Tabel 2 maka diperoleh dosis absolut untuk manusia (70 kg) yaitu 240 mg

x 3,1 = 744 mg. Dengan demikian dapat diramalkan efek farmakologis suatu obat yang

timbul pada manusia dengan dosis 744 mg/70 kg BB adalah sama dengan yang timbul

pada anjing dengan dosis 240 mg/12 kg BB.

Faktor-faktor yang Dapat Mempengaruhi Hasil Percobaan

Terdapat banyak faktor yang dapat mempengaruhi hasil percobaan, yaitu:

1. Faktor Internal

Termasuk diantaranya usia, jenis kelamin, ras, sifat genetik, status kesehatan dan

nutrisi, bobot badan, dan luas permukaan tubuh

2. Faktor Eksternal

Termasuk diantaranya suplai oksigen, pemelihara lingkungan fisiologik dan

isoosmosis, dan pemeliharaan kebutuhan struktural ketika menyiapkan jaringan

atau organ untuk percobaan.



3. Faktor Lingkungan

Termasuk diantaranya keadaan kandang, suasana asing atau baru, pengalaman

hewan sebelum menerima obat, keadaan ruangan tempat hidup (suhu, kelembaban,

ventilasi, cahaya, kebisingan), penempatan hewan dalam kandang, cuaca,

ketinggian, musim, jenis makanan, dan waktu percobaan.

Untuk mendapatkan hasil percobaan yang baik maksimum dapat ditempatkan lima

ekor hewan secara bersama-sama.

Rute Pemberian Obat

Rute pemberian obat merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi efek obat karena

karakteristik lingkungan, fisiologis, anatomis dan biokimiawi yang berbeda pada daerah

kontak mula obat dengan tubuh. Karakteristik ini berbeda karena ada hal-hal yang

berbeda seperti:

Suplai darah

Struktur anatomi dari lingkungan kontak antara tubuh dan obat.

Enzim-enzim dan getah-getah fisiologis yang terdapat di lingkungan tersebut.

Hal-hal ini menyebabkan jumlah obat yang dapat mencapai terdapat kerjanya dalam

waktu tertentu akan berbeda tergantung pada rute pemberian obat.

Dalam percobaan ini obat akan diberikan kepada hewan percobaan secara oral,

subkutan, intravena, intramuskular, dan intraperitoneal.

Penanganan Hewan Percobaan

1. Mencit

1.1. Cara Perlakuan

- Mencit diangkat ujung ekornya dengan tangan kanan, letakkan pada suatu tempat

yang permukaannya tidak licin misalnya kasa, ram kawat, sehingga jika ditarik

mencit akan mencengkram, seperti terlihat pada Gambar 1.1.

Gambar 1.1 Tahap pertama



Telunjuk dan ibu jari tangan kiri menjepit kulit tengkuk sedangkan ekornya dipegang

dengan tangan kanan. Kemudian posisi tubuh mencit dibalikkan sehingga perut

menghadap pemegang dan ekor dijepitkan antara jari manis dan kelingking tangan kiri,

seperti terlihat pada Gambar 1.2 dan Gambar 1.3 di bawah ini.

Gambar 1.2 Tahap kedua Gambar 1.3 Tahap ketiga

I.2. Cara Pemberian Obat

- Oral : Diberikan dengan alat suntik yang dilengkapi sonde oral

(kanula). Kanula dimasukkan ke dalam mulut lalu perlahan-

lahan dimasukkan ke belakang melalui tepi langit-langit (palate)

sampai esofagus.

- Subkutan : Diberikan di bawah kulit tengkuk.

- Intravena : Diberikan melalui vena ekor dengan jarum suntik No. 24.

Mencit dimasukkan ke dalam pemegang (restainer) dengan ekor

menjulur keluar.

- Intramuskular : Disuntikkan pada otot paha posterior dengan jarum suntik No.

24

- Intraperitoneal : Mencit dipegang seperti pada Gambar 1.3 tetapi posisi kepala

lebih rendah dari abdomennya. Jarum disuntikkan dengan

membentuk sudut 100 dari abdomen, agak menepi dari garis

tengah, untuk mencegah terkenanya kandung kemih dan tidak

terlalu tinggi agar tidak mengenai hati.

Volume penyuntikan untuk mencit umumnya 1mL/100 g bobot badan. Kepekatan larutan

obat yang disuntikkan disesuaikan dengan volume yang dapat disuntikkan tersebut.

I.3. Anestesi

Senyawa-senyawa anestesi dan cara penggunaannya adalah:



- Eter dan karbondioksida (anestesi singkat)

Letakkan obat pada dasar desikator kemudian hewan dimasukkan dan wadah

ditutup. Bila hewan sudah kehilangan kesadaran maka hewan dikeluarkan dan siap

dibedah. Penambahan selanjutnya bisa diberikan dengan bantuan kapas sebagai

masker.

- Halotan

Digunakan untuk anestesi yang lebih lama.

- Pentobarbital natrium dan heksobarbital natrium

Dosis pentobarbital natrium adalah 4560 mg/kg untuk pemberian intraperitoneal,

dan 35 mg/kg untuk cara pemberian intravena. Dosis heksobarbital natrium adalah

75 mg/kg untuk intraperitoneal dan 47mg/kg untuk pemberian intravena.

- Uretan (etil karbamat)

Bentuk larutan 25% dalam air diberikan dengan dosis 10001250 mg/kg secara

intraperitoneal.

I.4. Cara Mengorbankan

Pengorbanan (etanasia) hewan sering dilakukan apabila terjadi rasa sakit yang hebat

atau lama akibat suatu percobaan, hewan mengalami kecelakaan, menderita penyakit

atau jumlahnya terlalu banyak dibandingkan dengan kebutuhan. Cara etanasia

(kematian tanpa rasa sakit) ini dipilih sedemikian sehingga hewan hanya mengalami

penderitaan yang seminimal mungkin. Dalam memilih cara mengorbankan hewan perlu

juga dilihat tujuan hewan dikorbankan.

Pada dasarnya cara fisik merupakan cara yang paling cepat dilaksanakan, mudah, dan

paling berperikemanusiaan.

- Pemberian dosis CO2 yang mematikan dalam wadah khusus (cara terbaik).

- Pemberian Pentobarbital-Na tiga kali dosis normal (135180 mg/kg BB)

- Cara fisik dengan dislokasi leher



Gambar 1.4

Cara mengorbankan mencit.

2. Tikus

2.1. Cara Perlakuan

- Tikus dapat diperlakukan seperti mencit, tetapi sebaiknya bagian ekor yang

dipegang adalah bagian pangkalnya. Tikus dapat juga diangkat dengan memegang

perutnya dan leher dijepit diantara jari tengah dan telunjuk, seperti terlihat pada

Gambar 1.5 dan Gambar 1.6.

2.2. Cara Pemberian Obat

Oral, iv, im, ip seperti pada mencit

Hewan dipegang pada ekornya,

kemudian ditempatkan pada

permukaan yang bisa dijangkaunya

dengan demikian hewan tersebut

akan berusaha meregangkan

badannya. Kemudian pada

tengkuknya ditempatkan suatu

penahan, misalnya pensil yang

dipegang dengan satu tangan.

Tangan lainnya kemudian menarik

ekornya dengan keras, sehingga

lehernya akan terdislokasi dan

mencit akan terbunuh, seperti pada

Gambar 1.4.

Gambar 1.5 Cara memegang tikus untuk pemberian obat secara oral.

Gambar 1.6 Cara memegang tikus untuk pemberian obat secara ip, im.



Subkutan: Di bawah kulit abdomen atau di tengkuk, di bawah telapak kaki.

Volume penyuntikan paling baik untuk tikus adalah 0,20,3 mL/100 g

bobot badan.

2.3. Anestesi

Senyawa dan caranya sama dengan anestesi pada mencit.

2.4. Cara Mengorbankan

Cara kimia: Dengan menggunakan CO2, eter dan pentobarbital dengan dosis yang

sesuai

Cara fisik:

Letakkan tikus di atas sehelai kain kemudian bungkuslah badan tikus termasuk

kedua kaki depannya. Bunuhlah dengan salah satu cara berikut:

i. Pukullah bagian belakang telinganya dengan tongkat.

ii. Peganglah tikus dengan perutnya menghadap ke atas, kemudian pukullah

bagian belakang kepalanya pada permukaan yang keras seperti meja atau

permukaan logam, dengan sangat keras.

3. Kelinci

3.1. Cara Perlakuan

Harus diperlakukan halus tetapi sigap, karena ia cenderung berontak. Untuk menangkap

atau memperlakukan kelinci jangan dengan mengangkat pada telinganya, tetapi dengan

cara memegang kulit lehernya dengan tangan kiri, kemudian pantatnya diangkat dengan

tangan kanan dan didekapkan ke dekat tubuh seperti pada Gambar 1.7 dan 1.8

Gambar 1.7 Cara menggendong kelinci. Gambar 1.8 Cara mendekap kelinci.


- Oral : dengan sonde oral



- Subkutan : di kulit bagian pinggang atau tengkuk. Caranya angkat kulit dan

tusukkan jarum dengan arah anterior.

- Intravena : di vena marginalis seperti terlihat pada Gambar 1.9, sebelumnya

telinga dibasahi dengan alkohol atau air panas.

- Intramuskular : dilakukan pada otot kaki belakang

- Intraperitoneal : posisi kelinci diatur sedemikian rupa sehingga letak kepala lebih

rendah daripada abdomen. Penyuntikan dilakukan pada garis

tengah di muka kandung kencing.

Gambar 1.9 Vena pada telinga kelinci.

3.3. Anestesi

Senyawa dan cara yang digunakan adalah pentobarbital natrium disuntikkan secara

perlahan-lahan. Dosis untuk anestesi umum adalah 22 mg/kg BB. Untuk anestesi singkat

diambil dari dosis di atas, ditambah eter.


- Dengan CO2

- Injeksi pentobarbital-Na 350 mg

- Dislokasi



Gambar 1.10

Cara mengorbankan kelinci.

4. Marmot

4.1. Cara Perlakuan

Marmot dapat diangkat dengan jalan memegang badan bagian atas dengan tangan yang

satu dan memegang bagian belakangnya dengan tangan yang lain seperti pada Gambar

1.11.

Gambar 1.11 Cara memegang marmot.


- Oral : dengan sonde oral (hewan harus dianestesi) volume 5 mL atau

dengan penambahan makanan lain.

- Intradermal : bulu marmot pada daerah yang akan disuntik dicukur dulu.

Suntikkan sedalam + 2 cm ke dalam kulit.

Caranya: pegang kaki belakang

kelinci dengan tangan kiri sehingga

badan dan kepalanya tergantung

ke bawah menghadap ke kiri.

Pukullah sisi telapak tangan kanan

dengan keras pada tengkuk kelinci.

Seperti terlihat pada Gambar 1.10.

Selain itu, dapat juga digunakan

alat, misalnya tongkat.



- Subkutan : angkat bagian kulit dengan mencubit. Tusukkan jarumnya ke

bawah kulit dengan arah paralel dengan otot di bawahnya.

- Intraperitoneal : marmot dipegang punggungnya sedemikian sehingga perutnya

agak menjolok ke muka. Jarum suntik disuntikkan seperti

subkutan, tetapi sesudah masuk ke dalam kulit, jarum akan

ditegakkan sehingga menembus lapisan otot masuk ke dalam

daerah peritoneum.

- Intramuskular : jarum ditusukkan melalui kulit dan diarahkan pada jaringan otot,

jangan terlalu dalam sampai menyentuh tulang paha. Daerah

penyuntikan adalah otot paha bagian posteriorlateral.

- Intravena : jarang digunakan.

4.3. Anestesi

Bahan yang digunakan biasanya eter dan pentobarbital natrium. Eter digunakan untuk

anestesi singkat, setelah hewan dipuasakan selama 12 jam. Dosis pentobarbital natrium

adalah 28 mg/kg.


Dapat dilakukan secara kimiawi dengan CO2 , tetap icara yang paling umum dan cepat

adalah dengan mematahkan lehernya.

Caranya : - dengan pukulan keras pada tengkuk.

- dengan memukul belakang kepalanya pada permukaan horizontal keras.

- dislokasi dengan tangan.

5. Katak

5.1. Cara Perlakuan

Katak dipegang pada leher/punggung dengan menggunakan lap kasar seperti pada

Gambar 1.12.


- Oral : dengan memakai spatula, mulutnya ditutup, diurut-urut sedikit agar

obatnya masuk

- Lokal : absorpsi pada kulit, misalnya uretan



- Parenteral : cairan obat disuntikkan ke dalam lambung limfa ventral/dorsal

memakai jarum hipodermik No. 12/177 ke bagian tengah tubuh

secara perlahan.

Gambar 1.12 Cara memegang katak.

5.3. Anestesi

Katak direndam dalam 1% uretan sampai teranestesi sempurna, atau disuntikkan larutan

uretan 35% secara intraperitoneal.


Pegang kaki belakang, pukullah kepalanya pada ujung logam atau permukaan yang keras

seperti pada Gambar 1.13.

Gambar 1.13 Cara mengorbankan katak.



Praktek Pemberian Obat

Pada percobaan ini praktikan akan memberikan obat kepada hewan percobaan secara

oral, subkutan, intravena, intraperitoneal, dan intramuskular.

1. Rute pemberian obat secara oral

Hewan percobaan : Mencit

Zat yang diberikan : NaCl Fisiologis atau obat lain

Alat : Sonde oral

Prosedur

2. Rute pemberian secara subkutan

:

Mencit dipegang tengkuknya. Sonde oral yang telah diisi sediaan obat dalam bentuk cair

diselipkan dekat ke langit-langit mencit dan diluncurkan masuk ke esofagus. Larutan

didesak keluar dari sonde oral.



Alat : alat suntik 1 mL

Prosedur:

Penyuntikan biasanya dilakukan di bawah kulit tengkuk atau abdomen. Seluruh jarum

ditusukkan langsung ke bawah kulit dan larutan obat didesak keluar dari alat suntik.

3. Rute pemberian obat secara intravena




Prosedur:

Mencit dimasukkan ke dalam alat khusus yang memungkinkan ekornya keluar

(restainer). Sebelum disuntik sebaiknya pembuluh vena pada ekor didilatasi dengan cara

dihangatkan atau dengan cara dioleskan dengan pelarut organik seperti aseton atau

eter. Bila jarum suntik tidak masuk ke vena maka akan terasa ada tahanan, jaringan

ikat di sekitar daerah penyuntikan memutih, dan bila piston alat suntik ditarik tidak ada

darah yang masuk ke dalam alat suntik. Bila harus dilakukan penyuntikan berulang

maka penyuntikan harus dimulai di daerah distal ekor.



4. Rute pemberian obat secara intraperitoneal




Prosedur

5. Rute pemberian secara intramuskular

:

Tikus dipegang pada tengkuknya sedemikian sehingga posisi abdomen lebih tinggi dari

kepala. Larutan obat disuntikkan pada abdomen bawah tikus di sebelah garis midsagital.




Prosedur

1. Untuk masing-masing rute pemberian obat catat waktu pemberian, saat timbul dan

hilangnya masing-masing efek.

:

Larutan obat disuntikkan ke dalam sekitar gluteus maximus atau ke dalam otot paha lain

dari kaki belakang. Harus selalu dicek apakah jarum tidak masuk ke dalam vena, dengan

menarik kembali piston alat suntik.

Pengamatan

2. Efek yang diamati yaitu berbagai tingkat depresi diantaranya:

- Aktivitas spontan dari respon terhadap stimulus pada keadaan normal

- Perubahan aktivitas, spontan atau dengan stimulusi (gerakan tidak

terkoordinasi)

- Tidak ada respon lokomotorik jika distimulasi, tetapi righting reflex masih ada.

- Usaha untuk menegakkan diri tidak berhasil.

- Diam tidak bergerak, usaha untuk menegakkan diri tidak lagi dicoba.

3. Buatlah tabel yang memuat hasil-hasil pengamatan saudara. Dari tabel itu dapat

dilihat secara lengkap, apa yang saudara kerjakan dan hasil percobaan yang

diamati.

4. Bahaslah hasil percobaan ini dan buatlah kesimpulan.



Pertanyaan

1. Sebutkan keuntungan serta kerugian pemakaian masing-masing hewan tersebut di

atas.

2. Mencit adalah hewan yang paling banyak digunakan dalam percobaan di

laboratorium. Mengapa ?

3. Faktor-faktor apa yang perlu diperhatikan dalam memilih spesies hewan percobaan

yang berifat skrining ataupun pengujian suatu efek khusus.

4. Jelaskan secara spesifik dengan contoh-contoh, mengenai karakteristik lingkungan

fisiologis, anatomis, dan biokimiawi yang berada pada daerah kontak mula antara

obat dan tubuh.

a. Jumlah suplai darah yang berbeda:

Contoh Akibatnya



b. Struktur anatomi yang berbeda:

Contoh Akibatnya

c. Enzim-enzim dan getah-getah fisiologis yang berbeda

Contoh Akibatnya

5. Uraikan secara terperinci kondisi-kondisi penerimaan obat yang menentukan rute

pemberian obat yang dipilih.

6. Sebutkan implikasi-implikasi praktis dari rute pemberian obat (umpamanya

persyaratan sediaan farmasi yang diberikan dengan rute tertentu, dosis obat jika

dipilih rute pemberian tertentu dsb).

Telah diperiksa Asisten

Tanggal :

Nilai :

Paraf Asisten :

PERCOBAAN IVolume Pemberian Obat untuk Hewan PercobaanTabel 1.1 Batas Maksimal Volume Cairan untuk Hewan Percobaan

Dosis Obat pada Hewan PercobaanTabel 1.2. Perbandingan Luas Permukaan Tubuh Hewan Percobaan

Penanganan Hewan Percobaan

percobaan 1

Documents