PEMERIKSAAN BAKTERI DENGAN PEWARNAANADI HARTONO10/6/2008*

PewarnaanSuatu teknik untuk mempelajari morfologi bakteri dengan cara pemberian zat warna kepada sel bakteri.Bagian-bagian sel dapat diamati, karena dapat menyerap zat warna yang berbeda oleh masing-masing bagian sel.

10/6/2008*

Kenapa perlu diwarna ?Bakteri ukurannya sangat kecil 05-1 u x 10 uDibawah mikroskop tidak jelass bagian-bagian nya.Untuk melihat dengan jelas perlu diberi zat warna.10/6/2008*

Umumnya ada 2 macam zat warnaZat warna bersifat asamKomponen warnanya adalah anionDalam bentuk garam natriumZat warna bersifat basa Komponen warna kation. Dalam bentuk klorida10/6/2008*

Macam-Macam Zat Warna Bakteri10/6/2008*

NoNama Zat PewarnaanWarna Bakteri1SapraninMerah2Gentian violetUngu3Methylen blueBiru4Malachit greenHijau5Karbol fuchsinMerah

Struktur SelSel terdiri dari :Dinding sel , terdiri dari :- lapisan peptidoglikan- asam teikoat Membran plasma, terdiri dari :- membran protein- lapisan fosfolipid10/6/2008*

Macam-Macam PewarnaanPewarnaan Sederhana- Menggunakan 1 macam zat warna.- Warna bakteri hanya 1- Tidak dapat membedakan sifatnya.- Untuk melihat ukuran dan bentuknya.

10/6/2008*

2. Pewarnaan Differensial- Menggunakan lebih dari 1 zat warna- Membedakan sifat bakteri.- Melihat bagian-bagian bakteri.- Dapat digunakan untuk identifikasi bakteri tahap awal.

10/6/2008*

Macam-Macam Pewarnaan DifferensialPewarnaan GramPewarnaan BTAPewarnaan SporaPewarnaan Granul10/6/2008*

FiksasiProses melengketkan sediaan pada kaca obyek.Bakteri mati, tetpai tidak lisis.Secara Kimia : metanolSecara Fisika : pemanasan diatas nyala api.10/6/2008*

Pewarnaan GramDitemukan Christian Gram (1884).Pewarnaan dasar dan rutin dalam identifikasi bakteri lebih lanjut.Kuman dibagi dua :- Gram positif berwarna ungu- Gram negatif berwarna merah.10/6/2008*

Tahap pewarnaan Gram10/6/2008*

PerlakuanWaktuWarna BakteriGram +Gram -Pembuatan preparatFiksasiGentian violet30 detikunguunguCuci dengan airLarutan iodium30 detik--Cuci dengan air dan keringkanDekolorisasi dengan alkohol 20 detikCuci dengan air dan keringkanSapranin30 detikungumerah

Pewarnaan BTAUntuk mengidentifikasi kuman M. tbc dan M. lepraeKuman M.tbc dan M. leprae mempunyai dinding sel yang banyak mengandung lipid.Sukar ditembusi zat warna biasa.Perlu pemanasan.Bakteri M tbc dan M leprae berwarna merah.

10/6/2008*

Tahap Pewarnaan BTABuat preparat.FiksasiZat Warna Karbol Fuchsin sambil dipanaskan (tidak mendidih) 3 menit.Cuci dengan airPelunturan dengan asam alkohol hingga bersih.Methylen blue 1 menit.10/6/2008*

Zat Warna Pewarnaan BTAKarbol fuchsin = merah.Methylen blue = biru.Asam alkohol sebagai peluntur.Kuman BTA positif : batang berwarna merah.Kuman BTA negatif : batang berwarna biru.Sensitifitas : 5000 BTA / ml sputum.

10/6/2008*

Metoda Pewarnaan BTAZiehl NellsonKinyoun GabbetTan Tiam Hook.

10/6/2008*

10/6/2008*

*****************