Pembuatan Media TCBS Agar Tujuan: Mahasiswa dapat membuat media TCBS yang layak digunakan untuk menumbuhkan bakteri Jibrio spp. Metode : Ditimbang lalu dilarutkan kemudian dituang ke dalam cawan petri Prinsip : Bubukmediaditimbangdengantakaranyangtepatkemudiandilarutkandenganaquadeststeril.Media TCBStidakbolehdisterilisasidenganmenggunakanautoklaIsehinggaharusdikerjakansecaraaseptis dan steril. Dasar Teori : Mediamerupakancampuranbahanbahantertentudenganaquadeststerilyangdapat menumbuhkanbakteri,virus,jamur,danparasit(binatangberseltunggal)padaderajatkeasamandan tingkatinkubasitertentu.Karenadigunakanuntukmenumbuhkan bakterimakadalampembuatanmedia haruslah steril dan sesuai dengan kondisi hidup bakteri. MediamenurutsiIatnyadikenalterdapatbeberapajenisyaitumediatransport,mediapemupuk, media selektiI, media universal, dan media identiIikasi. TCBS agar atau ThiosulIate Citrate Bile salt Sucrose agar termasuk media selektiI yang biasanya digunakanuntukmenumbuhkanataumengisolasibakteriJibriospp.MediainidisebutjugaVibrio Selectiveagar.TCBSagarmemilikikeselektiIitastinggiuntukmenumbuhkandanmengisolasibakteri Jibrio cholera dan Jibrio parahaemolitycus. TCBSagarmengandungsodiumcitrate,sodiumthiosulIate,sodiumcholate,danoxbilesebagai mediaselektiI,membuatpHmenjadibasauntukmenghambatpertumbuhanbakterigrampositiIdan menekanbaktericoliIorm.MeningkatkanpHjugabergunauntukmenumbuhkanbakteriJibriocholera karenaorganismeinisangatsensitiIterhadaplingkunganyangsiIatnyaasam.Mediainimengandung sukrosasebagaibahanIrementasiuntukmetabolismebakteriJibriospp.karenabakteriinidapat memIermentasisukrosa.Mediainimengandungsodiumchlorideuntukmenstimulasipertumbuhan bakteri dan menjaga keseimbangan tekanan osmotik. Sodium thiosulIate juga merupakan sumber sulIur. Alat dan Bahan : Alat : O eraca analitik O elas ukur O Batang pengaduk O rlenmeyer besar O Cawan petri steril O ampu spiritus O Pemanas Bahan : O Aquadest steril O Bubuk media TCBS agar Cara Kerja :1. Dilarutkan sebanyak 22 g media TCBS agar dalam 250 m aquadest steril 2. Dipanaskan selama kurang lebih 1 menit hingga media benar benar larut 3. Dijaga pH media agar pH nya 8 sampai 10 4. Media dituangkan ke cawan petri steril, ditunggu hingga dingin 5. Mediasiapdigunakanataujikabelumakandigunakandapatdisimpanpadalemari pendingin suhu 8 sampai 15oC Hasil Pengamatan :Setelah dilarutkan media TCBS berwarna hijau jernih Pembahasan : MediaTCBSmerupakanmediaselektiIyangdigunakanuntukmenumbuhkandanmengisolasi bakteri Jibrio spp. Seperti Jibrio cholera dan Jibrio parahaemolitycus. MediaTCBSinipHnyaharusberadadirentangbasaatausetidaknyamempunyaipH8,6 bertujuanagarbakteriJibriospp.dapattumbuhdenganbaikkarenabakteriinimemilikisensitiIitas terhadap pH asam dan menghambat pertumbuhan bakteri lain Media TCBS ini juga tidak bolehdi sterilisasidenganautoklaI karena sterilisasi dengan autoklaI dapatmerusakbahanyangterkandungdalammediainidanmenyebabkanmediainitidakbagusuntuk digunakan. Media ini juga tidak bolehdipanaskan terlalu lamamelainkanhingga larut saja karena bahan yang terkandung dalam media ini tidak tahan panas terlalu tinggi. KarenadalampembuatannyatidakdisterilisasidenganautoklaImakadalamproses pembuatannya harus benarbenar dijaga agar tidak terkontaminasi, dalam pembuatannya harus steril dan diusahakandibuatsecaraaseptissehinggamengurangiIaktorIaktorkontaminanyangdapatmerusak media. Kesimpulan : O Media TCBS digunakan untuk mengisolasi bakteri Vibrio spp. O Media TCBS setelah dilarutkan berwarna hijau jernih O Media TCBS tidakboleh disterilisasi dengan autoklaI karena dapat merusak bahanyang terkandung di dalam media DaItar Pustaka :Soemarno.IsolasidanIdentiIikasiBakteriKlinik.2000.AkademiAnalisKesehatanYogyakarta. Yogyakarta en.wikipedia.org/wiki/ ThiosulIate-Citrate-Bile-salt-Sucrose-agar www.hardudiagnostic.com/TCBS-agar