laprak pembuatan medium dan sterilisasi

8/20/2019 Laprak Pembuatan Medium Dan Sterilisasi

1/9

Minanda Fachladelcada Primara

240210130056

V. HASIL PENGAMATAN DAN PEMBAHASAN

5.1 Hasil Pengamatan

5.1.1 Identifikasi Media

Setiap media memiliki karakteristik yang berbeda, baik bentuk, arna,

!ungsi dll" #erikut adalah tabel identi!ikasi media dari beberapa media yang

dilaksanakan pada praktikum kali ini"

$abel 1" %asil Pengamatan &denti!ikasi Media

'(" )el(mp(k Media)arakteristik

Fungsi#entuk *arna

1" 11 P(tat(

+etr(se

-gar

.P+-/

Serbuk )uning

muda atau

)rem

ntuk mengidenti!ikasi,

peng(lahan, dan media

penumbuhan mikr(ba

seenis kapang, amur,

khamir"

2" 11 'utrient

#r(th

.'#/

#utiran )uning tua ntuk mengidenti!ikasi,

peng(lahan, dan media

penumbuhan semua

enis mikr(ba"

3" "M"# Serbuk Merah

muda

Mengidenti!ikasi

E.Coli, biasa digunakan

untuk pemisaham gram

negati! dari gram

spesies lain secara

klinis"

4" 'utrient

-gar

.'-/

Serbuk )uning

)uning

ntuk penanaman

beberapa kultur

mikr((rganisme dalam

air, !eses, dan sampel

klinik"

5" 10 Plate

(unt

Serbuk )uning

kec(klatan

Media untuk

menumbuhkan bakteri


2/9


3/9


240210130056

1" 11 P(tat(

+etr(s

e -gar

.P+-/

(nda 50 m; 36 gram=;w

2=

w1

v1×v

2

w2=

36

1000 ×50

w2=1,8g

2" "M"# (nda 50 m; 3 gram=;w

2=

w1

v1×v

2

w2=

39

1000×50

w2=1,95g

3" 10 Plate

(unt

-gar

.P-/

)>a- 50 m; 22,5

gram=;w

2=

w1

v1×v

2

w2=

22,5

1000×50

w2=1,125g

4" Plate

(unt

-gar

.P-/

)>a- 50 m; 22,5

gram=;w

2=

w1

v1×v

2

w2=

22,5

1000×50

w2=1,125g

5" 12 Plate(unt

-gar

.P-/

)>a- 50 m; 22,5gram=;

w2=w1

v1×v

2

w2=

22,5

1000×50


4/9


5/9


240210130056

perkembangbiakan mikr(ba ada empat enis medium yaitu medium umum, medium

selekti!, medium di!erensial, dan medium pengaya"

Pada praktikum pembuatan medium dibuat enam enis medium yaitu P(tat(

+etr(se -gar .P+-/, Plate (unt -gar .P-/, 'utrient -gar .'-/, 'utrient #r(th

.'#/, "M"#" Masing?masing media memiliki karakteristik bagi pertumbuhan

mikr(ba yang akan dikembangkan"

Mikr((rganisme tidak hanya amat ber9ariasi dalam persyaratan nutrisinya,

tetapi uga menunukkan resp(ns yang berbeda?beda terhadap k(ndisi !isik di dalam

lingkungannya" ntuk keberhasilan kulti9asi berbagai tipe bakteri, disesuaikan

dengan mediumnya" Perkembangbiakkan bakteri dipengaruhi (leh beberapa !akt(r,

yaitu suhu, cahaya, kelembaban, keasaman .p%/, pengaruh @2, pengaruh tekanan , pengaruh mikr((rganisme di sekitarnya, pengaruh Aat kimia .desin!ektan/ terhadap

mikr(ba"

;arutan pengencer padatan yang digunakan adalah 'al !is sebanyak 0,5B

dari 9(lume medium yang dibuat" Pada praktikum ini dibuat 1, gram 'al !is untuk

200 m; a:uades" Pengenceran dilakukan agar pertumbuhan mikr((rganisme pada sampel

tidak terlalu banyak sehingga dapat dilakukan penghitungan" 'al !is digunakan sebagai

pengencer agar suspensi sampel tetap steril dan menghindari adanya k(ntaminan pada sampel

karena 'al !is memiliki si!at dapat mempertahankan k(ndisi p%" Sebagaimana kita ketahui

baha pertumbuhan mikr((rganisme sangat peka terhadap perubahan p%, sehingga diperlukan

suatu larutan pengencer yang tidak mempengaruhi k(ndisi p%, sehingga media yang

digunakan dapat mengembangbiakan bakteri"

Masing?masing media dibuat sebanyak 50 m; .10 m; untuk '#/ dengan

larutan 'al !is dan melarutkan bahan media di dalam gelas rlenmeyer, kemudian

medium dipanaskan didalam dandang selama 10 menit dengan gelas rlenmeyer

yang telah disumbat menggunakan kapas kassa agar mikr((rganisme tidak ikut

menguap, dan k(ndisi medium tetap steril"

Pada dasarnya semua media dibuat dengan cara yang sama" Setelah pr(ses

pembuatan 'al !is dan penimbangan selesai, kemudian dilakukan pelarutan medium

diikuti dengan pengadukan dalam rlenmeyer yang bertuuan untuk


6/9


240210130056

mengh(m(genkan larutan, sedangkan pemanasan larutan bertuuan untuk

mempercepat pelarutan ika larutan masih belum h(m(gen sempurna" Selain itu

mulut rlenmeyer disumbat dengan kapas, hal ini bertuuan untuk meminimalkan

k(ntaminasi saat pemanasan"

-gar biakan bakteri dapat dibuat, maka medium dan alat?alat yang diperlukan

harus disterilisasi sebelum in(kulasi" Sterilisasi yaitu usaha untuk membebaskan

bahan?bahan dari mikr(bia yang tidak diinginkan" %al ini mencegah tumbuhnya

mikr((rganisme yang tidak diinginkan pada alat" Sterilisasi bisa dengan dimasukkan

ke dalam (9en atau menggunakan alk(h(l 0B" -lk(h(l 0B ini merupakan d(sis

yang c(c(k bagi alat yang akan disterilisasi" #ila alk(h(l yang diberikan kadarnya

lebih tinggi, mikr((rganisme kemungkinan akan membentuk semacam pelindung dan ustru akan bertahan hidup" Selain itu, tempat kera dan tangan uga harus disterilkan

dengan alk(h(l 0B dan menyalakan api bunsen"

+idalam sterilisasi terdapat dua cara yaitu sterilisasi dengan cara basah dan

sterilisasi dengan cara kering"

1" Sterilisasi #asah

Pada sterilsasi ini menggunakan -ut(cla9e, !ungsi dari aut(cla9e adalah alat

untuk mensterilkan alat?alat atau media dengan menggunakan uap air bertekanan

tinggi" mumnya pada suhu 1210 selama 15 menit pada tekanan 1 atm" ap air

panas akan merusak pr(tein mikr(ba hingga mengalami k(agulasi, pada saat itu

pr(tein akan mengendap .denaturasi/ dan menyebabkan kematian pada mikr(ba" Saat

penggunaan aut(kla! penutupan harus benar?benar rapat agar uap air yang bertekanan

tinggi masuk ke dalam atau berinduksi ke alat"

Sterilisasi basah dilakukan untuk sterilisasi media yang telah dibuat" Media

tersebut dimasukkan ke dalam rlenmeyer, kemudian disumbat dengan kapas dan

dibungkus alumunium !(il untuk selanutnya disterilisasi di dalam aut(kla!"

Sterilisasi basah dapat uga dilakukan dengan cara perebusan .suhu 100 C,

aktu 5?10 menit/, blansing .suhu 0?5 C, aktu ? menit/ dan pasteurisasi .suhu

2 C, aktu 15 detik/" ara ini selain digunakan untuk mensterilkan alat, digunakan

uga untuk bahan?bahan yang mengandung cairan yang tidak tahan udara panas

kering, misalnya medium"


7/9


240210130056

2" Sterilisasi )eringPada sterilisasi ini menggunakan (9en, !ungsi dari (9en adalah mensterilkan

bahan?bahan atau alat?alat gelas secara kering pada suhu 0 ? 00 selama 2 am"

Sterilisasi kering .(9en/ digunakan untuk sterilisasi caan petri dan pipet

ukur yang telah dibungkus kertas arang sebelumnya" *aktu untuk sterilisasi kering

cukup lama yaitu sekitar dua am, karena hanya menggunakan udara panas, dimana

k(ntak dengan media tidak teradi secara langsung dan intens, tidak seperti

menggunakan uap panas"

VI. PEN%T%P

&.1 #esim'"lan• Media pertumbuhan mikr((rganisme adalah suatu bahan yang terdiri dari

campuran Aat?Aat makanan .nutrisi/ yang diperlukan mikr((rganisme untuk

pertumbuhannya"

• Setiap media mempunyai k(mp(sisi yang berbeda?beda dan mempunyai

spesi!ikasi tertentu terhadap berbagai enis mikr((rganisme"

• Sebelum dilakukan in(kulasi, maka media dan alat?alat praktikum harus

disterilisasi terlebih dahulu"

• Sterilisasi yaitu suatu pr(ses untuk mematikan semua (rganisme yang dapat

menadi k(ntaminan"

• Met(de yang laAim digunakan untuk mensterilisasikan media dan alat?alat

ialah dengan pemanasan"

• ara penyiapan dan pembuatan media pada umumnya sama, yang

membedakan hanya d(sis yang digunakan dan enis media"

&.2 Saan

•;ebih teliti dalam pembacaan skala meniscus di gelas ukur"

• Pastikan semua alat dan bahan yang digunakan bersih dan steril"

• )eamanan pribadi seperti as lab, masker dan sarung tangan harus tersedia

dan steril"

• -lat harus dipegang dengan baik dan benar sehingga mengurangi resik(

atuhnya alat praktikum"


8/9


240210130056

• Pr(ses penimbangan menggunakan neraca analitik harus dilakukan dengan

teliti dan tepat sesuai dengan takaran yang tertulis di pr(sedur"

DA(TA) P%STA#A

+id(seputr(, +", Pr(!", +r" 11" Dasar-Dasar Mikrobiologi" +ambatan,

Surabaya"

FardiaA, S" 12" Mikrobiologi pangan I " >ramedia Pustaka tama, Dakarta"

PelAcar, dan han" 16" Dasar-dasar Mikrobiologi" Penerbit ni9ersitas &nd(nesia .

&?Press/, Dakarta"

Sumanti, +ebby M" dkk" 200" Diktat Penuntun Praktikum Mikrobiologi Pangan"

Durusan $ekn(l(gi &ndustri Pangan Fakultas $ekn(l(gi &ndustri Pertanian

ni9ersitas Padadaran

*a+a$an Petan,aan


9/9


240210130056

1" Setelah saudara pelaari dan dipraktekkan, elaskan !ungsi penambahan bee!

etract pada pembuatan media '- dan !ungsi penambahan kentang pada

pembuatan media P+-E Mengapa berbeda

Daab7Penambahan bee! etract dan kentang adalah sebagai nutrisi atau makanan dari

mikr((rganisme yang tumbuh pada media tersebut" '- merupakan media untuk

pertumbuhan dan perkembangan semua mikr((rganisme namun umun untuk

bakteri" )andungan bee! ekstrak digunakan sebagai k(mp(nen yang penting bagi

pertumbuhan bakteri karena kandungan pr(tein heaninya yang tinggi"

Sedangkan P+- sebagai media pertumbuhan kapang dan khamir" )entang

digunakan sebagai k(mp(nen yang penting bagi pertumbuhan kapang dan )hamir

karena mengandung pr(tein nabati"2" Delaskan !ungsi dari lerutan pengencerE Mengapa harus menggunakan )%2P@4

+apatkah digantikan dengan senyaa kimia lain

Daab7

;arutan pengencer digunakan untuk membuat media=substrat pertumbuhan

mikr((rganisme dengan cara melarutkan media instan agar k(nsentrasinya tidak

terlalu pekat dan memudahkan mikr((rganisme tumbuh")%2P@4 adalah larutan penyangga asam yang ber!ungsi sebagai pengencer dan

tidak akan mempengaruhi p% media" Pertumbuhan kultur bakteri sangat sensiti!

terhadap perubahan p%, sehingga dibutuhkan suatu larutan pengencer yang

mempertahankan k(ndisi p% media yang disenangi mikr((rganisme atau media

yang cenderung asam" )%2P@4 dapat diganti dengan senyaa kimia lain, tetapi

memiliki si!at yang sama yaitu sebagai larutan penyangga .buffer / asam yang

dapat mempertahankan p% pada daerah asam .p%G/"

laprak pembuatan medium dan sterilisasi

Documents