konversi enzimatik (enz) - · pdf filegelatinisasi pengaturan pemanasan bioreaktor pereaksian...
TRANSCRIPT
MODUL PRAKTIKUM
LABORATORIUM INSTRUKSIONAL TEKNIK KIMIA
KONVERSI ENZIMATIK
(ENZ)
Disusunoleh:
Arti Murnandari
Dr. Retno Gumilang Dewi
Dr. Ardiyan Harimawan
PROGRAM STUDI TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNOLOGI INDUSTRI
INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG
2014
i
DAFTAR ISI
DAFTAR ISI ............................................................................................................................... i
DAFTAR GAMBAR ................................................................................................................. ii
DAFTAR TABEL .....................................................................................................................iii
BAB I ......................................................................................................................................... 1
PENDAHULUAN ..................................................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ................................................................................................................. 1
BAB II ........................................................................................................................................ 2
TUJUAN DAN SASARAN PERCOBAAN ............................................................................. 2
2.1 Tujuan............................................................................................................................... 2
2.2 Sasaran ............................................................................................................................. 2
BAB III ...................................................................................................................................... 3
RANCANGAN PERCOBAAN ................................................................................................. 3
3.1 Skema Alat ....................................................................................................................... 3
3.2 Alat dan Bahan ................................................................................................................. 3
3.2.1 Alat ............................................................................................................................ 3
3.2.2 Bahan ......................................................................................................................... 3
BAB IV ...................................................................................................................................... 5
PROSEDUR KERJA ................................................................................................................. 5
4.1 Proses PembuatanGlucose Syrup dengan Hidrolisis Enzim-Enzim ................................ 5
4.2 Diagram Alir Percobaan Utama ....................................................................................... 5
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................................................ 6
LAMPIRAN ............................................................................................................................... 7
A. TABEL DATA MENTAH ................................................................................................ 7
B. PROSEDUR PERHITUNGAN ......................................................................................... 8
C. DATA SPESIFIKASI DAN LITERATUR ....................................................................... 8
D. LAIN-LAIN....................................................................................................................... 8
ii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 3.1 Skema alat percobaan............................................................................................. 3
iii
DAFTAR TABEL
Tabel 1.1 Perbandingan Kualitas glucose syrup pada Berbagai Proses..................................... 1
Tabel A.1 Kalibrasi Reaktor ...................................................................................................... 7
Tabel A.2 Pengukuran Volume Titran ....................................................................................... 7
Tabel A.3 Pengukuran Absorbansi Glukosa .............................................................................. 7
Tabel A.4 Pengukuran Absorbansi Pati ..................................................................................... 7
Tabel A.5 Pengukuran Tinggi Larutan dalam Bioreaktor ......................................................... 8
Laboratorium Instruksional Teknik Kimia Konversi Enzimatik
ENZ 1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Glucose Syrup adalah glukosa dalam bentuk sirop yang mengandung padatan ± 80% berupa glukosa
dengan bermacam-macam oligosakarida Syrup ini dapat dimurnikan untuk menghasilkan konsentrat
monosakarida nutritif dengan kadar sakarida tinggi. Glukosa padat adalah produk sirop glukosa yang
memiliki kadar air ± 5% berat. Di negara-negara tropis sperti Indonesia/Thailand/Vietnam/Brazil, pati
diproduksi dari ubi kayu dan dinamakan Tapioka. Glucose Syrup yang dihasilkan dari hidrolisis pati
banyak mengandung dekstrosa, maltosa, dan dekstrin dan dapat digunakan sebagai pemanis.
Terdapat beberapa teknologi pengolahan pati , yaitu dengan hidrolisis asam-asam, hidrolisis asam-
enzim, dan hidrolisis enzim-enzim. Ketiga teknologi ini masing-masing memiliki keuntungan dan
kekurangannya masing-masing. Setiap proses juga menghasilkan glukosa dengan kualtas yang
berbeda. Perbandingan kualitas glucose syrup pada setiap proses ditunjukkan pada Tabel 1.1
Tabel 1.1 Perbandingan Kualitas glucose syrup pada Berbagai Proses
Hidrolisis Asam Asam-Enzim Enzim-Enzim
DE 38 42 28 % 63 % 98
Glukosa 12 % 18 % 5 % 37 % 96 %
Maltosa 10 % 13 % 8 % 34 % 2 %
Maltotriosa 10 % 12 % 16 % 16 % 1 %
Oligosakarida 68 % 57 % 71 % 13 % 1 %
Laboratorium Instruksional Teknik Kimia Konversi Enzimatik
ENZ 2
BAB II
TUJUAN DAN SASARAN PERCOBAAN
2.1 Tujuan
Melalui percobaan ini, praktikan diharapkan untuk,
- Mendapatkan glucose syrup melalui proses hidrolisis enzim-enzim
- Mengamati proses hidrolisis pati menggunakan enzim tertentu
2.2 Sasaran
Sasaran percobaan ini adalah,
- Menentukan jumlah glukosa yang terhidrolisis pada proses hidrolisis pati
- Membandingkan konsentrasi glukosa yang terukur dengan metode Somogy-Nelson dengan
Lane-Eynon.
Laboratorium Instruksional Teknik Kimia Konversi Enzimatik
BAB III
RANCANGAN PERCOBAAN
3.1 Skema Alat
waterbath
Lubang sampel dan inputTangki
pereaksi
Motor pengaduk
Gambar 3.1 Skema alat percobaan
3.2 Alat dan Bahan
3.2.1 Alat
1. Bioreaktor
2. Waterbath
3. Motor dan batang pengaduk
4. Termometer
5. Pemanas listrik
6. Buret
7. Statip dan klem
8. Batang pengaduk
9. Botol semprot
10. Corong gelas
11. Labu erlenmeyer
12. Filler
13. Gelas kimia
14. Gelas ukur
15. Pipet tetes
16. Pipet ukur
17. Spatula
18. Tabung reaksi
3.2.2 Bahan
1. Tepung tapioka
2. Enzim alfa-amilase
Laboratorium Instruksional Teknik Kimia Konversi Enzimatik
3. Enzim glukoamilasi
4. HCl
5. NaOH
6. Reagen Fehling A dan B
7. Metilen Blue
Laboratorium Instruksional Teknik Kimia Konversi Enzimatik
BAB IV
PROSEDUR KERJA
4.1 Proses PembuatanGlucose Syrup dengan Hidrolisis Enzim-Enzim
4.2 Diagram Alir Percobaan Utama
Start
Tepung tapioka
Timbang
Aqua dm
Pengadukan di gelas kimia
Pemanasan dalam waterbath
Reaksi dalam bioreaktor
Pengadukan
CaCl2, alfa-amilase
GelatinisasiPengaturan pemanasan bioreaktor
Pereaksian hingga karakteristik
larutan berubah
Larutan menggumpal
T=90oC?
T = 55-60oCpH=4.5-5.5?
Pengaturan pHDan temperatur
Pengambilan sampel t=0
Pencampuran dalam bioreaktor
glukoamilase
Pengambilan sampel berkala
Pengenceran sampel
sampelAnalisis dan
pengujian sampelselesai
ya
tidak tidak
tidak
ya
ya
Laboratorium Instruksional Teknik Kimia Konversi Enzimatik
DAFTAR PUSTAKA
Laboratorium Instruksional Teknik Kimia Konversi Enzimatik
LAMPIRAN
A. TABEL DATA MENTAH
Tabel A.1 Kalibrasi Reaktor
Volume Tinggi cairan
Tabel A.2 Pengukuran Volume Titran
Hari I Hari II
t Volume
titran Pengenceran t
Volume
titran Pengenceran
Tabel A.3 Pengukuran Absorbansi Glukosa
Hari I Hari II
t Absorbansi Pengenceran t Absorbansi Pengenceran
Tabel A.4 Pengukuran Absorbansi Pati
Hari I Hari II
t Absorbansi Pengenceran t Absorbansi Pengenceran
Laboratorium Instruksional Teknik Kimia Konversi Enzimatik
Tabel A.5 Pengukuran Tinggi Larutan dalam Bioreaktor
Hari 1 Tinggi larutan Hari 2 Tinggi larutan
Sebelum likuifaksi
Setelah likuifaksi
B. PROSEDUR PERHITUNGAN
B.1 Penentuan Konsentrasi Larutan Glukosa Standar
B.2 Penentuan Jumlah Glukosa dalam Larutan Standar
B.3 Penentuan Kandungan Glukosa dalam Sampel
B.4 Penentuan Konsentrasi Substrat
B.5 Penentuan Parameter Michaelis Menten
B.6 Penentuan Nilai DE
B.7 Penentuan Aktivitas Enzim Glukoamilase
B.8 Penentuan Konstanta Laju Reaksi
B.9 Penentuan Laju Reaksi
C. DATA SPESIFIKASI DAN LITERATUR
D. LAIN-LAIN