KEMAMPUAN PSEUDOMONAS AERUGINOSA DALAM MENGURAIKAN PNP (P-NITROFENOL)

Pembimbing: Enny Ratnaningsih, Ph.D

Oleh Solihin

Latar Belakang Tujuan Penelitian Tinjauan Pustaka Metodologi Penelitian dan Hasil Kesimpulan

2/24

Latar Belakang Bioremediasi merupakan metode alternatif

dalam menangani beberapa jenis limbah karena biaya relatif murah dan ramah lingkungan.

Senyawa para-nitrofenol (PNP) sebagai salah satu limbah beracun yang menyebabkan sianosis (kulit kebiruan)

Pseudomonas aeruginosa memiliki kemampuan untuk menguraikan PNP menjadi senyawa yang tak berbahaya bagi lingkungan

3/24

Tujuan Penelitian

Mempelajari mekanisme degradasi PNP oleh bakteri Pseudomonas aeruginosa.

4/24

Tinjauan Pustaka

Bioremediasi didefinisikan sebagai proses penguraian limbah organik/anorganik secara biologi dalam kondisi terkendali dengan tujuan mengontrol, atau mereduksi bahan pencemar dari lingkungan. (Sulia, 2003)

5/24

Pseudomonas aeruginosa: Kingdom: Bacteria

Phylum: ProteobacteriaClass: Gamma ProteobacteriaOrder: PseudomonadalesFamily: PseudomonadaceaeGenus: PseudomonasSpecies: Pseudomonas aeruginosa

Ditemukan oleh Schröter (1872) Bakteri gram negatif Patogen oportunistik

6/24

Para-nitrofenol(PNP), disebut juga sebagai 4-nitrofenol atau 1-hidroksil-4-nitrobenzena.

Banyak dihasilkan sebagai hasil samping industri pupuk , industri obat (paracetamol).

Memiliki 2 bentuk umum pada kristalin:1.bentuk α

tak berwarna, tak stabil pada suhu ruang, stabil pada sinar matahari langsung.

2.Bentuk β berwarna kuning, stabil di suhu ruang, berubah menjadi merah bila terkena sinar matahari

7/24

Metodologi Penelitian dan Hasil Menentukan batas toleransi

konsentrasi maksimum PNP dalam media LB

Menentukan batas toleransi konsentrasi maksimum PNP dalam media MM

Menentukan kegunaan PNP Menentukan temperatur optimum Menentukan penurunan konsentrasi

PNP 8/24

Menentukan konsentrasi maksimum PNP dalam media LB

Pemindahan ke medium LB cair secara aseptik(starter)~suhu 37o C 150 rpm

Pengukuran OD pada 600 nm dan diperoleh hasil

9/24

Penentuan OD Pseudomonas aeruginosa pada media LB+pnp 50, 100, 200, 300, 400, 500 dan 600 ppm

Koloni tunggal dalam media LA

10/24

Hasil potret Pseudomonas aeruginosa dalam media LBpadat (kiri) dan foto Psedumonas aeruginosa bersumber dari literatur (kanan)

Kurva pertumbuhan pd LB+pnp Hasil OD 600 nm (media LB + pnp 50, 100, 20, 300, 400,

500 dan 600 ppm

11/24

Menentukan konsentrasi maksimum PNP dalam media MM

Pengukuran OD pada 600 nm dan diperoleh hasil

12/24

Penentuan OD pseudomonas pada media MM+ glukosa + NH4Cl + pnp 20,40,60,100 dan 120 ppm

Variasi konsentrasi pnp pada media MMA

Media TumbuhMM+glu+NH4Cl Ya

MM+glu+NH4Cl+pnp 20 ppm YaMM+glu+NH4Cl+pnp 40 ppm YaMM+glu+NH4Cl+pnp 60 ppm YaMM+glu+NH4Cl+pnp 80 ppm YaMM+glu+NH4Cl+pnp 100 ppm YaMM+glu+NH4Cl+pnp 120 ppm TidakMM+glu+NH4Cl+pnp 137 ppm Tidak

13/24

14/24

Kurva pertumbuhan pd MM+PNP

15/24

Penentuan kegunaan PNP

Pengukuran OD pada 600 nm dan diperoleh hasil

16/24

17/24

Pengukuran OD pada 600 nm dan diperoleh hasil

18/24

Pengukuran OD pada 600 nm dan diperoleh hasil

Kurva Pertumbuhan pada MM+glu+PNP,MM+NH4Cl+PNP dan MM+PNP

19/24

Optimasi temperatur

Pemindahan bakteri dari media LB padat ke media MM cair+glukosa+NH4Cl (starter)~suhu 30,35,40 dan 45 o C 150 rpm

Inokulasi 1% kedalam media MM+NH4Cl+glu+PNP 100 ppm~suhu 30,35,40 dan 45 o C 150 rpm

Pengukuran OD pada 600 nm pada suhu 30,35,40,dan 45 oC

20/24

Menentukan penurunan konsentrasi PNP

Pengukuran kadar PNP dan hidrokuinon sampel dan lar.standar menggunakan HPLC,kolom C-18 dan didapat hasil

21/24

KESIMPULAN (sementara)

Kehadiran pnp dalam media kaya nutrisi (LB) dapat di toleransi dengan maksimum konsentrasi 100 ppm.

Kehadiran pnp dalam media minimal (MM) dapat di toleransi dengan maksimum konsentrasi 100 ppm.

Para-nitrofenol dapat dimanfaatkan oleh Pseudomonas aeruginosa sebagai sumber makanan namun masih tetap membutuhkan sumber Cdan N dari glukosa dan NH4Cl.

22/24

REFERENSI

http://pksplipb.or.id/index.php?option=com_content&task=view&id=39&Itemid=1

http://www.textbookofbacteriology.net/pseudomonas.html

23/24

TERIMAKASIH

24/24