BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian

Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian deskriptif analitik dengan

pendekatan cross sectional.

B. Tempat dan Waktu Penelitian

Tempat penelitian dilakukan di Rumah Sakit Emanuel Klampok-Banjarnegara

sedangkan waktu penelitian dilaksanakan pada bulan Februari Mei 2009.

C. Populasi dan Sampel Penelitian

Populasi pada penelitian ini adalah pasien rawat jalan yang menderita penyakit

DM yang mengunjungi klinik DM hari Kamis pada bulan Mei tahun 2009 di Rumah

Sakit Emanuel Klampok - Banjarnegara baik pria maupun wanita yang jumlahnya

sebanyak 30 orang dan sampel penelitian berasal dari total populasi.

D. Pengambilan Data

Data yang diperoleh adalah data primer dan data sekunder. Pengumpulan data

primer diperoleh dengan cara pemeriksaan kadar kolesterol darah sedangkan data

sekunder diambil dari catatan medik penderita DM yang berupa hasil kadar gula darah

puasa, nama, umur dan jenis kelamin.

E. Bahan dan Alat Penelitian

Bahan yang digunakan adalah serum darah vena, reagen kolesterol dan larutan

standart kolesterol dari produk DIALAB yang siap pakai dan tanpa pengenceran.

Alat yang digunakan adalah photometer 4010, mikropipet, tabung reaksi, kapas

alkohol, spuit steril, centrifuge, waterbath dan botol semprot.

F. Prosedur Pemeriksaan

1. Persiapan penderita sebelum pengambilan sampel.

Persiapan Puasa.

Penderita diminta puasa selama 8 10 jam pada malam hari, bila haus penderita

diberi air putih / teh tanpa gula, tidak boleh minum obat sebelum diambil darahnya.

2. Pengambilan darah vena

Pengambilan darah dilakukan pada vena fossa cubiti. Torniquet dipasang pada

lengan atas pasien dan pasien diminta untuk mengepalkan tangan dan membuka tangan

berkali-kali agar vena terlihat jelas. Vena yang akan diambil darahnya dibersihkan dahulu

dengan alkohol 70% sampai kering. Setelah kering, menegangkan kulit diatas vena itu

dengan jari tangan kiri supaya vena tidak bergerak.

Kemudian kulit ditusuk dengan jarum dan spuit dengan tangan kanan sampai

ujung jarum masuk ke lumen vena. Perlahan-lahan spuit ditarik sampai didapatkan darah

kurang lebih 1 ml. Setelah darah berhasil didapatkan, torniquet dilepas, kapas alkohol

diletakkan diatas jarum, kemudian jarum dicabut. Tempat tusukan ditekan selama

beberapa menit dengan kapas alkohol. Jarum dilepaskan dari spuit dan darah dialirkan ke

dalam tabung centrifuge melalui dinding tabung.

3. Cara Pembuatan Serum

Darah yang sudah berhasil didapatkan didiamkan selama 30 menit pada suhu

kamar. Kemudian dicentrifuge selama 10 menit pada kecepatan 3000 rpm. Serum yang

terbentuk dipisahkan dari endapan sel-sel darah dengan menggunakan pipet.

4. Prosedur pemeriksaan kadar kolesterol

Metode : CHOD-PAP

Prinsip : Kolesterol dan ester-esternya dibebaskan dari lipoprotein oleh detergent.

Kolesterol esterase menghidrolisa ester-ester tersebut dan H2O2 dibentuk dari kolesterol

dalam proses oksidasi enzimatik oleh kolesterol oksidasi. H2O2 bereaksi dengan 4-amino

antipyrine dan phenol dengan katalisator peroksidase membentuk quinonimine yang

berwarna. Absorbance warna ini sebanding dengan kolesterol dalam sampel.

Reaksi : Kolesterol ester + H2O CHE kolesterol + asam lemak

Kolesterol + O2 CHO kolesterol 3 one + H2O2

2H2O2 + 4 amino phenazone + phenol POD quinoneimine + 4 H2O

Pemeriksaan kolesterol dilakukan dengan menggunakan metode CHOD-PAP.

Pipet ke dalam tabung Blanko Sampel Standart Serum - 10 l -

Standart - - 10 l Reagen 1000 l 1000 l 1000 l

Dicampur dengan baik, kemudian diinkubasi selama 10 menit pada suhu 370C. Dibaca

Absorbance sampel dan standart terhadap blangko pada panjang gelombang 546 nm,

faktor 200, program C/St.

G. Analisa Data

Data yang dikumpulkan kemudian diedit, diolah menggunakan SPSS dan

ditabulasikan dalam tabel selanjutnya dianalisa secara deskriptif analitik.

Variabel gula darah puasa dan variabel kolesterol diuji kenormalan datanya

dengan menggunakan uji saphiro wilk kemudian diuji dengan menggunakan uji Korelasi

Rank Spearman karena data gula darah puasa dan kolesterol berdistribusi tidak normal.

H. Nilai Normal

Kadar kolesterol darah 120-200 mg/dl.

I. Definisi Operasional

1. Kolesterol adalah lemak berwarna kekuningan dan berupa seperti lilin yang disintesis

oleh tubuh manusia terutama di dalam hati (Lars Heslet, 1997).

2. Diabetes Mellitus (DM) adalah gangguan metabolisme glukosa yang disebabkan

oleh kekurangan hormon insulin sehingga glukosa tidak dapat diproses oleh tubuh yang

akan menimbulkan meningkatnya kadar glukosa dalam darah (kadar gula darah puasa >

110 mg/dl).

3. Penderita DM adalah orang yang dinyatakan menderita DM rawat jalan yang

memeriksakan diri di kinik DM Rumah Sakit Emanuel Klampok - Banjarnegara pada hari

Kamis tanggal 14 Mei 2009.

4. Pemeriksaan kolesterol adalah pemeriksaan kadar kolesterol dalam darah yang

diperiksa dengan metode CHOD-PAP dengan reagen DIALAB dan menggunakan alat

fotometer 4010 dengan panjang gelombang 546 nm, program c/st, faktor 200 dan

memiliki kadar normal 120-200 mg/dl ( Data primer ).

5. Pemeriksaan gula darah puasa adalah pemeriksaan kadar gula darah puasa penderita

DM yang diperiksa oleh tenaga laboratorium Rumah Sakit Emanuel Klampok -

Banjarnegara dengan menggunakan test strip dengan kadar normal 70-110 mg/dl ( Data

sekunder ).