ISOLASI DAN KARAKTERISASI SENYAWA FLAVONOID

DARI BIJI MANGGA ARUMMANIS (Mangifera indica L) DAN

UJI AKTIVITASNYA SEBAGAI ANTIOKSIDAN

Skripsi

disusun untuk memenuhi salah satu syarat

untuk memperoleh gelar Sarjana Sains

Program Studi Fisika

oleh

Marathur Rodhiyah

4211416025

JURUSAN FISIKA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS NEGERI SEMARANG

TAHUN 2020

ii

iii

PERNYATAAN

Dengan ini, saya

nama : Marathur Rodhiyah

NIM : 4211416025

program studi : Fisika

menyatakan bahwa skripsi berjudul Isolasi dan Karakterisasi Senyawa Flavonoid

dari Biji Mangga Arummanis (Mangifera indica L) dan Uji Aktivitasnya sebagai

Antioksidan ini benar-benar karya saya sendiri bukan jiplakan dari karya orang lain

atau pengutipan dengan cara-cara yang tidak sesuai dengan etika keilmuan yang

berlaku baik sebagian atau seluruhnya. Pendapat atau temuan orang atau pihak lain

yang terdapat dalam skrisi in telah dikutip atau dirujuk berdasarkan kode etik ilmiah.

Atas pernyataan ini, saya secara pribadi siap menanggung resiko/sanksi hokum yang

dijatuhkan apabila ditemukan adanya pelanggaran terhadap etika keilmuan dalam

karya ini.

Semarang, 19 Maret 2020

Marathur Rodhiyah

NIM 4211416025

iv

v

MOTTO DAN PERSEMBAHAN

MOTTO

“ Man jadda wa jadda, dimana ada kemauan disitu ada jalan”

PERSEMBAHAN

Untuk orang tua

Bapak Masturi

Almamater tercinta

vi

PRAKATA

Segala puji bagi Allah yang telah memberikan kemudahan sehingga penulis dapat

menyelesaikan skripsi yang berjudul Isolasi dan Karakterisasi Senyawa Flavonoid

dari Biji Mangga Arummanis (Mangifera indica L) dan Uji Aktivitasnya sebagai

Antioksidan. Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penelitian ini tidak akan selesai

tanpa bantuan dari berbagai pihak, untuk itu penulis mengucapkan terimakasih

kepada

1. Orang tua saya Bapak Arif Mahmudi dan Ibu Mundari serta keluarga di

rumah yang selalu mendukung dan mendoakan

2. Bapak Masturi selaku dosen pembimbing yang telah membimbing dengan

baik

3. Bapak Susilo dan Bapak Dante Alighiri selaku penguji yang telah memberi

masukan selama sidang skripsi

4. Teknisi Laboratorium Fisika Unnes yang telah membantu selama proses

penelitian skripsi

5. Alif dan rikha yang selalu bersedia mendengar keluh kesah

6. Teman-teman laboratorium fisika komposit terapan: Mbak Ina, Mae, Mbak

riska, Mbak saras, dan Faisal, serta teman-teman kimia: Mbak zanna, Mbak

Luzy, Mas Amrul dan Lutfi yang selalu membantu

7. Adhe yang telah membantu selama persiapan ujian skripsi

8. Dany wijaya partner dalam segala hal

9. Teman-teman Fisika 2016 yang selalu rangkul merangkul berjuang bersama

10. Serta berbagai pihak yang tidak dapat saya sebutkan satu persatu.

Penulis berharap semoga skripsi ini bisa bermanfaat bagi pembaca dan dapat

dijadikan referensi untuk melakukan penelitian selanjutnya.

Semarang, 19 Maret 2020

Marathur Rodhiyah

NIM 4211416025

vii

ABSTRAK

Rodhiyah, Marathur. 2020. Isolasi dan Karakterisasi Senyawa Flavonoid dari Biji

Mangga Arummanis (Mangifera indica L) dan Uji Aktivitasnya sebagai Antioksidan.

Skripsi, Jueusan Fisika, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam,

Universitas Negeri Semarang. Pembimbing Dr. Masturi, M.Si.

Kata kunci: Biji mangga arummanis, fenol, flavonoid, antioksidan.

Mangga (Mangifera indica L) tumbuh diberbagai Negara beriklim tropis. Salah satu

jenis manga yang melimpah di Indonesia adalah mangga arummanis.Telah diteliti

bahwa dalam biji mangga arummanis mengandung senyawa flavonoid. Flavonoid

adalah antioksidan kuat yang memiliki kemampuan untuk menangkal radikal bebas.

Tujuan dilakukannya penelitian ini adalah untuk mengisolasi senyawa flavonoid dan

uji aktivitasnya sebagai antioksidan. Biji mangga arummanis diekstrak menggunakan

metode refluks. Sebelum diisolasi, ekstrak biji mangga tersebut diuji terlebih dahulu

menggunakan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) untuk mengatahui pelarut apa yag

dapat memisahkan senyawa flavonoid dari ekstrak biji mangga arummanis secara

optimum. Ekstrak biji mangga tersebut kemudian diisolasi menggunakan metode

Kromatografi Kolom Gravitasi (KKG). Hasil dari KLT menunjukkan bahwa

flavonoid dapat terpisahkan secara optimum ketika di pisahkan menggunakan fasa

diam plat silika gel60 dan fase gerak berupa pelarut toluene: etil asetat: asam format:

methanol dengan perbandingan 6: 3: 1: 0,6. Pelarut-pelerut dengan perbandingan

tersebut kemudian digunakan untuk mengelusi ekstrak bii mangga menggunakan

metode KKG. Pemisahan menggunakan metode KKG menghasilkan 3 fraksi dengan

nilai RF masing-masing adalah 0,48, 0,44 dan 0,42. Ketiga sampel tersebut kemudian

dikarakterisasi menggunakan FTIR, LCMS dan UV-Vis. Hasil FTIR menunjukkan

bahwa pada ketiga sampel tersebut mengandung senyawa fenol dan flavonoid yang

dibuktikan dengan ditemukannya gugus fungsi O-H dan gugus C=O. Gugus O-H

berturutu-turut pada sampel A, B, dan C ditunjukkan pada bilangan gelombang

3442,37, 3430,44, dan 3433,06 𝑐𝑚−1. Sedangkan gugus C=O pada sampel A, B, dan C berturut-turut ditunjukkan pada bilangan gelombang 1620,27, 1598,39, dan

1625,17 𝑐𝑚−1. Hasil pengujian FTIR tersebut diperkuat oleh hasil pengujian kandungan fenol total dan kandungan flavonoid total menggunakan spektrofotometer

UV-Vis. Dari pengujian kandungan fenol total didapatkan hasil bahwa dalam sampel

A, B, dan C berturut-turut mengandung senyawa fenol sebesar 18,58, 20,35, dan 3,65

mg/g. Sedangkan dari pengujian kandungan flavonoid total didapatkan hasil bahwa

dalam sampel A, B, dan C berturut-turut mengandung senyawa flavonoid sebesar

291,25, 308,77 dan 34,82 mg/g. Selanjutnya dilakukan pengujian menggunakan

LCMS untuk megetahui jenis senyawa flavonoid yang terkandung dalam ekstrak biji

mangga arummanis. Hasil pengujian LCMS menunjukkan bahwa pada sampel A, B

dan C mengandung beberapa senyawa turunan flavonoid dengan kadar yang berbeda-

beda. Aktivitas antioksidan senyawa flavonoid yang ditunjukkan oleh nilai 𝐼𝐶50 dari sampel A, B, dan C berturut-turut adalah sebesar 38,85, 52,47, dan 165,03 µg/mL.

Semaikn kecil nilai 𝐼𝐶50 maka aktivitas antioksidannya akan semakin kuat.

viii

ABSTRACT

Rodhiyah, Marathur. 2020. Isolation and Characterization Flavonoid Compounds

from the Arummanis Mango Seed (Mangifera Indica L) and Activity as an

Antioxidant. Thesis, Department of Physics, Faculty of Mathematics and Natural

Science, Universitas Negeri Semarang. Supervisor Dr. Masturi, M.Si.

Key words: Arummanis mango seed, phenol, flavonoid, antioxidant.

Mango grows in various countries in the world, especially in tropical climates.

Arummanis is one kind of mango that grows in Indonesia. The previous research

proved that in arummanis mango’s seed contains flavonoid compound. Flavonoid

was powerful antioxidant have ability to ward off free radical. The research aims to

isolate and characterize the flavonoids compounds from the arum manis mango seed

and the testing of their activities as antioxidants. Mango seed extracted using reflux

method. Before isolation process, mango seed extract was tested using Thin Layer

Chromatograph (TLC) to find the solvent can separated flavonoid compound of

mango seed extract optimally. Mango seed extract was isolated using Gravity

Coloumn Chromatograph (GCC) method. The result of TLC show that flavonoid can

separated optimally when using silent phase silica gel60 and mobile phase solvent

toluene: ethyl acetate: formic acid: methanol with ratio 6: 3: 1: 0,6. That solvents

used to isolated the flavonoid using GCC method. The separating using GCC method

produce 3 fractions with the value of RF were 0,48, 0,44 and 0,42. The samples was

characterized using FTIR, LCMS and UV-Vis. The result of FTIR show that the

samples contains phenol and flavonoid compound that was proved by founding

functional group of O-H and C=O. O-H group of sample A, B and C showed by wave

number 1620,27, 1598,39, dan 1625,17 𝑐𝑚−1. The result of FTIR was supported

with the tested of Total Phenol Content and Total Flavonoid Content using UV-Vis.

The TPC testing show that sample A, B and C contains 18,58, 20,35, and 3,65 mg/g

of phenol compound. Whereas the TFC testing show that sample A, B and C contains

291,25, 308,77 and 34,82 mg/g of flavonoid compound. The LCMS result show that

in sample A, B and C contains various derifative flavonoid compound with the

different content. The antioxidant activity was showed by 𝐼𝐶50 value of sample A, B

and C were 38,85, 52,47, and 165,03 µg/ml. The most little the number of 𝐼𝐶50 show

the strongest the antioxidant activity.

ix

DAFTAR ISI

PERSETUJUAN PEMBIMBING.......................................... Error! Bookmark not defined.

PERNYATAAN ................................................................................................................. iii

PENGESAHAN .................................................................... Error! Bookmark not defined.

MOTTO DAN PERSEMBAHAN ........................................................................................ v

PRAKATA ......................................................................................................................... vi

ABSTRAK ........................................................................................................................ vii

ABSTRACT ..................................................................................................................... viii

DAFTAR ISI ...................................................................................................................... ix

DAFTAR TABEL ............................................................................................................... xi

DAFTAR GAMBAR ......................................................................................................... xii

BAB I .................................................................................................................................. 1

PENDAHULUAN ............................................................................................................... 1

1.1 Latar Belakang...................................................................................................... 1

1.2 Rumusan masalah ................................................................................................. 2

1.3 Tujuan penelitian .................................................................................................. 2

1.4 Manfaat penelitian ................................................................................................ 2

1.5 Batasan masalah ................................................................................................... 2

1.6 Sistematika Penulisan ........................................................................................... 2

BAB II ................................................................................................................................. 4

TINJAUAN PUSTAKA ....................................................................................................... 4

2.1 Mangga Arum Manis (Mangifera indica L) ........................................................... 4

2.2 Flavonoid ............................................................................................................. 5

2.3 Ekstraksi ............................................................................................................... 6

2.4 Kromatografi Lapis Tipis ...................................................................................... 7

2.5 Kolom Kromatografi ............................................................................................. 8

2.6 Antioksidan .......................................................................................................... 8

BAB III .............................................................................................................................. 10

METODE PENELITIAN ................................................................................................... 10

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ............................................................................. 10

x

3.2 Alat dan Bahan ................................................................................................... 10

3.2.1 Alat ............................................................................................................. 10

3.2.2 Bahan.......................................................................................................... 10

3.3 Prosedur Penelitian ............................................................................................. 10

3.3.1 Preparasi sampel ......................................................................................... 10

3.3.2 Proses Ekstraksi dan Evaporasi ................................................................... 11

3.3.3 Kromatografi Lapis Tipis ............................................................................ 11

3.3.4 Kromatografi Kolom Gravitasi .................................................................... 12

3.3.5 Penentuan Kandungan Fenol total ............................................................... 12

3.3.6 Penentuan Kandungan Flavonoid total ......................................................... 12

3.3.7 Pengujian Antioksidan ................................................................................ 13

3.3.8 Karakterisasi ............................................................................................... 13

BAB IV ............................................................................................................................. 15

HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................................................... 15

4.1 Kromatografi Lapis Tipis .................................................................................... 15

4.2 Kromatografi Kolom Gravitasi ............................................................................ 17

4.3 Hasil Uji FTIR .................................................................................................... 18

4.4 Hasil Uji UV-Vis ................................................................................................ 20

4.4.1 Kandungan Fenol Total ....................................................................................... 20

4.4.2 Kandungan Flavonoid Total ................................................................................ 21

4.5 Hasil Uji LC-MS ................................................................................................ 23

4.6 Aktivitas Antioksidan ......................................................................................... 37

BAB V ............................................................................................................................... 41

PENUTUP ......................................................................................................................... 41

5.1 Kesimpulan......................................................................................................... 41

5.2 Saran .................................................................................................................. 41

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................................ 42

LAMPIRAN ...................................................................................................................... 46

xi

DAFTAR TABEL

Tabel 4.1 Interpretasi spectra IR ……………………………………………….19

Tabel 4.2 Kadar fenol masing-masing sampel………………………………….21

Tabel 4.3 Kadar flavonoid masing-masing sampel…….……………………….22

Tabel 4.4 Interpretasi senyawa dan kadar sampel A…………..………………..27

Tabel 4.5 Interpretasi senyawa dan kadar sampel B ………….………………..32

Tabel 4.6 Interpretasi senyawa dan kadar sampel C ………….………………..36

Tabel 4.7 Nilai IC50 masing-masig sampel……...……………………………..39

Tabel 4.8 Tingkat kekuatan antioksidan dengan metode DPPH………………..39

xii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Mangga arummanis (Mangifera indica L)………………………….4

Gambar 2.2 Biji mangga arummanis (Mangifera indica L)……………….…….5

Gambar 2.3 Struktur kimia flavonoid…………………………………………….6

Gambar 2.4 Plat Kromatografi Lapis Tipis (KLT)………………………………7

Gambar 4.1 KLT menggunakan 4 pelarut………………………………………..15

Gambar 4.2 Hasil KLT sampel dengan pembanding…………………………….16

Gambar 4.3 Sampel hasil kromatografi kolom gravitasi……...………………….17

Gambar 4.4 Spektra IR………..………………………………………………….18

Gambar 4.5 Kurva kalibrasi standar asam galat………………………………….20

Gambar 4.6 Kurva kalibrasi standar kuersetin………………..………………….22

Gambar 4.7 Komatogram sampel A……………..……………………………….23

Gambar 4.8 Struktur dan nama senyawa puncak pertama sampel A…………….24

Gambar 4.9 Struktur dan nama senyawa puncak kedua sampel A…...………….24

Gambar 4.10 Struktur dan nama senyawa puncak ketiga sampel A……………..25

Gambar 4.11 Struktur dan nama senyawa puncak keempat sampel A…………..26

Gambar 4.12 Struktur dan nama senyawa puncak kelima sampel A…………….26

Gambar 4.13 Struktur dan nama senyawa puncak keenam sampel A…………...27

Gambar 4.14 Komatogram sampel B…………....……………………………….28

Gambar 4.15 Struktur dan nama senyawa puncak pertama sampel B…………...29

Gambar 4.16 Struktur dan nama senyawa puncak kedua sampel B……………..30

xiii

Gambar 4.17 Struktur dan nama senyawa puncak ketiga sampel B……………..30

Gambar 4.18 Struktur dan nama senyawa puncak keempat sampel B…………..31

Gambar 4.19 Struktur dan nama senyawa puncak kelima sampel B…………….31

Gambar 4.20 Struktur dan nama senyawa puncak keenam sampel B……………32

Gambar 4.21 Komatogram sampel C…..…………………………………………33

Gambar 4.22 Struktur dan nama senyawa puncak pertama sampel C……………34

Gambar 4.23 Struktur dan nama senyawa puncak kedua sampel C………………34

Gambar 4.24 Struktur dan nama senyawa puncak ketiga sampel C……………...35

Gambar 4.25 Struktur dan nama senyawa puncak keempat sampel C…………...36

Gambar 4.26 Kurva satndar baku DPPH untuk sampel A…….....…………….…37

Gambar 4.27 Kurva satndar baku DPPH untuk sampel B …………………….…38

Gambar 4.28 Kurva satndar baku DPPH untuk sampel C …………………….…38

1

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Mangga (Mangifera indicaL) merupakan buah yang memiliki kandungan air

yang cukup banyak dan termasuk dalam golonganAnacardiaciaea. Mangga tumbuh

diberbagai Negara di dunia, terutama di daerah beriklim tropis (Masud Parvez, 2016).

Produksi mangga di Asia sudah meningkat sekitar 15% dari 2009 hingga 2011,

sekitar 30,2 juta ton dalam komoditas pasar internasional (Santhirasegaram et al,

2015), di Indonesia sendiri produksi mangga dari tahun 2015-2019 sekitar 145 ribu

ton (Kementrian Pertanian, 2019). Buah mangga memiliki manfaat yang besar ketika

dikonsumsi oleh tubuh, mangga sangat kaya akan vitamin A dan C. Selain itu dalam

buah mangga juga terkandung sejumlah vitamin dan mineral lain seperti riboflavin,

niasin, kalsium, fosfor dan zat besi(Kabiru et al, 2013). Akan tetapi disamping

manfaat yang besar tersebut ada permasalahan yang perlu diatasi yaitu limbah yang

dihasilkan dari mangga itu sendiri. Limbah yang dihasilkan dari mangga antara lain

yaitu daun,batang, kulit, dan biji.Menurut penelitian yang telah dilakukan

sebelumnya dilaporkan bahwa dalam kulit mangga mengandung senyawa-senyawa

seperti polifenol,karotenoid,enzim dan serat makanan (Ajila et al, 2007), selain itu

juga diaplikasikan pada bidang biomedical seperti pengobatan penyakit kelebihan

logam besi (Pardo-Andreu et al, 2008), dan aktivitas antikanker (Mertens-Talcott et

al, 2003). Sedangkanbiji buah mangga diproduksi sebagai limbah dan saat ini limbah

biji terebut masih sedikit aplikasinya dalam bidang komersial maupun biomedical.

Oleh karena itu, biji buah mangga hanya menjadi masalah lingkungan saja.

Flavonoid adalah antioksidan kuat yang memiliki kemampuan untuk

menangkal radikal bebas,transisi ion logam dan menghambat enzim yang

bertanggung jawab atas inisiasi reaksi berantai ini (Rzepecka-stojko et al, 2018).

Flavonoid adalah suatu kelompok senyawa fenol terbesar ditemukan di alam yang

menunjukkan aktivitas biokimia misalnya antioksidan, antivirus, antibakteri, dan anti

kanker (Fowler & Koffas,2009). Berdasarkan uraian diatas maka penilitian ini

2

dilakukan untuk mengisolasi dan mengkarakterisasi senyawa flavonoid dari biji

mangga arummanis serta pengujian aktivitasnya sebagai antioksidan.

1.2 Rumusan masalah

Berdasarkan uraian pada latar belakang dari penelitian ini,rumusan masalah

yang diajukan dalam penelitian ini adalah

1. Bagaimana proses isolasi senyawa flavonoid dari biji mangga arum manis?

2. Bagaimana aktivitas antioksidan dari senyawa flavonoid?

1.3 Tujuan penelitian

Berdasarkan rumusan masalah tersebut, penelitian dilakukan dengan tujuan

1. Memisahkan senyawa flavonoid biji mangga arummanis.

2. Mengetahui aktivitas antioksidan senyawa flavonoid.

1.4 Manfaat penelitian

Manfaat dilakukan penelitian ini yaitu:

1. Memberikan informasi tentang metode isolasi biji mangga arum manis

sebagai salah satu bentuk pemanfaatan material biowate.

2. Memberikan informasi tentang aktivitas senyawa flavonoid dari biji buah

mangga arum manis sebagai antioksidan dalam rangka peningkatan nilai

tambah material biowaste yang melimpah di Indonesia.

1.5 Batasan masalah

Batasan masalah dalam peneitian ini yaitu biji yang digunakan pada penelitian

ini dari satu jenis buah mangga yaitu mangga arumanis.

1.6 Sistematika Penulisan

Penulisan skripsi dibagi menjadi tiga bagian utama, yaitu bagian pendahuluan

skripsi, bagian isi skripsi, dan bagian akhir skripsi.

1. Bagian pendahuluan skripsi, terdiri dari halaman judul, abstrak, halaman

pengesahan, motto dan persembahan, kata pengantar, daftar isi, daftar gambar,

daftar tabel, dan daftar lampiran.

3

2. Bagian isi skripsi, terdiri atas lima bab yang meliputi :

BAB 1. Pendahuluan, berisi latar belakang, rumusan permasalahan, batasan

permasalahan, tujuan penelitian, manfaat penelitian, dan sistematika skripsi.

BAB 2. Kajian pustaka, berisi teori-teori pendukung penelitian.

BAB 3. Metodologi penelitian, berisi tempat pelaksanaan penelitian, alat dan

bahan yang digunakan, langkah kerja, pengujian, dan karakterisasi yang

dilakukan dalam penelitian.

BAB 4. Hasil penelitian dan pembahasan, dalam bab ini dibahas tentang hasil-

hasil penelitian yang telah dilakukan.

BAB 5. Penutup, yang berisi tentang simpulan hasil penelitian yang telah

dilakukan serta saran-saran yang berkaitan dengan hasil penelitian.

3. Bagian akhir skripsi memuat referensi yang digunakan sebagai acuan dari

penulisan skripsi dan lampiran-lampiran penelitian.

4

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Mangga Arum Manis (Mangifera indica L)

Mangga merupakan salah satu jenis buah tropis yang menduduki urutan ke

5 dalam total produksi dunia (Kabiru et al, 2013). Mangga termasuk salah satu

jenis buah musiman yang menjadi komoditas andalan sektor pertanian dan

dikonsumsi secara local di Indonesia. Terdapat berbagai varietas mangga yang

tumbuh di Indonesia, antara lain Mangifera indica seperti arum manis, dodol,

golek, madu, manalagi, cengkir, wangi, dan Mangifera foetida yaitu kemang dan

kweni. Salahsatuvarietasbuahmanggayang memiliki potensiekspor

tinggiadalahmanggaarum maniskarenavarietasmangga initidakdihasilkanoleh

negara penghasil dan pengekspor mangga dunia, seperti India, Meksiko, dan

negaraAmerikaLatinlainnya. Berikut merupakan klasifikasi dari tanaman manga

arum manis

Kerajaan : Plantae

Filum : Magnoliophyta

Kelas : Magnoliopsida

Ordo : Sapindales

Famili : Anacardiaceae

Genus : Mangifera

Spesies : M. indica

Nama binomial : Mangifera indica L.

Mangga dengan spesies Mangifera indica varietas arummanis ditunjukkan pada

Gambar 2.1.

Gambar 2.1Mangga arum manis (Mangifera indica L)

5

Mangga mengandung senyawa fenolik seperti flavonol,xanthones

dan gallotannis (Engels et al, 2010). Beberapa penelitian juga

membandingkan kandungan biji buah mangga varietas India dan

Indochina,didapatkan hasil bahwa masing-masing mengandung 6.00 dan

4.95% protein, 5.09 dan 10.36% air, 11.00 dan 15% lemak, 74.41 dan

64.23% karbohidrat, 4.33 dan 2.47% serat, 8.00 dan 12.00% asam lemak,

dan 1.20 dan 1.30% abu (Okpala & Gibson, 2013). Biji mangga arummanis

ditunjukkan pada Gambar 2.2.

Gambar 2.2 Biji mangga arum manis (Mangifera indica L)

2.2 Flavonoid

Flavonoid adalah kelas polifenol tumbuhan yang dapat dikonsumsi

untukdiet manusia melalui sayuran, buah-buahan, sereal, rempah-rempah, dan

produk nabati lainnya. Ilmu epidemiologis menunjukkan bahwa semakin tinggi

asupan makanan dan minuman yang banyak mengandung flavonoid berkaitan

dengan hasil kognitif yang lebih baik pada individu usia di atas 65 tahun,

termasuk penurunan kognitif (Letenneur et al, 2007), mengurangi risiko

demensia (Commenges et al, 2000) dan kemampuan kognitif yang lebih baik

(Christian et al, 2009). Flavonoid adalah polifenol yang mengandung lima belas

atom karbon. Kerangka karbon terdiri dari dua cincin benzene yang dihubungkan

oleh tiga rantai karbon pendek (C6-C3-C6). Salah satu karbon dalam rantai ini

terhubung ke atom karbon di salah stau cincin benzene, baik melalui jembatan

oksigen atau langsung, yang menghasilkan cincin tengah heterosiklik ketiga.

Kelas flavonoid yaitu antara lain flavonol, flavon, flavonol, isoflavonoid, dan

6

antosianidin. Kelimanya berbeda dalam dalam tingkat oksidasi dan saturasi

cincin (Rzepecka-stojko et al, 2018). Struktur flavonoid ditunjukkan pada

Gambar 2.3.

Gambar 2.3 Struktur kimia flavonoid

2.3 Ekstraksi

Ekstraksi adalah suatu proses pemisahan kandungan kimia dari jaringan

tumbuhan ataupun hewan dengan menggunakan penyari tertentu

(Simanjuntak,2008). Pengambilan bahan aktif dari suatu tanaman, dapat

dilakukan dengan ekstraksi. Proses ekstraksi ini menyebabkan bahan aktif akan

terlarut oleh zat penyari yang sesuai sifat kepolarannya. Metode ekstraksi dipilih

berdasarkan beberapa faktor seperti sifat dari bahan mentah obat, daya

penyesuaian dengan tiap macam metode ekstraksi dan kepentingan dalam

memperoleh ekstrak yang sempurna atau mendekati sempurna (Sjahid, 2008).

a. Meserasi

Maserasi merupakan cara ekstraksi yang paling sederhana. Bahan simplisia

yang dihaluskan sesuai dengan syarat farmakope (umumnya terpotongpotong

atau berupa serbuk kasar) disatukan dengan bahan pengekstraksi. Selanjutnya

rendaman tersebut disimpan terlindung dari cahaya langsung (mencegah reaksi

yang dikatalisis cahaya atau perubahan warna) dan dikocok kembali. Mesrasi

biasanya dilakukan 1x24 jam. Metode ekstraksi maserasi digunakan untuk

mengekstrak suatu komponen kimia yang tahan panas maupun tidak.

7

Kekurangan dari metode ini, yaitu diperlukan waktu yang lama dan banyak

menggunakan larutan pengekstrak(Gafur et al, 2012).

b. Refluks

Metode Refluks merupakan metode ektraksi cara panas (membutuhkan

pemanasan pada prosesnya), secara umum pengertian refluks sendiri adalah

ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu

dan jumlah pelarut yang ralatif konstan dengan adanya pendingin balik. Ekstraksi

dengan cara ini pada dasarnya adalah ekstraksi berkesinambungan.

2.4 Kromatografi Lapis Tipis

Kromatografi lapis tipis merupakan jenis kromatografi cair-cair dimana fase

diamnya berupa lapis tipis air yang terserap oleh lembaran kaca atau plastik yang

dilapisi dengan lapisan tipis adsorben. Adsorben KLT dapat berupa alumina,

silika gel, selulosa atau materi lainnya. Pemisahan kromatografi lapis tipis lebih

akurat dibanding kromatografi kertas. Hal ini disebabkan karena kromatografi

lapis tipis bersifat boleh ulang (reprodusible). Metode ini sangat cepat karena

dapat dilakukan kurang dari satu hari dan dapat mendeteksi senyawa yang

mempunyai konsentrasi rendah karena noda yang dihasilkan sangat rapat (Latifah,

2015).

Harga Rf merupakan parameter karakteristik kromatografi kertas dan

kromatografi lapis tipis. Harga Rf (Rate of Low) didefinisikan sebagai

perbandingan antara jarak senyawa dari titik awal dan jarak tepi muka pelarut dari

titik awal. Plat KLT ditunjukkan pada Gambar 2.4.

8

Gambar2.4 Plat Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

Rf =a

b

harga Rf berkisar antara 0,1 – 0,99 dan dipengaruhi oleh beberapa factor antara

lain:

1. Ukuran partikel lapisan penyerap

2. Derajat keaktifan lapisan penyerap

3. Kemurnian pelarut

4. Kejenuhan ruang elusi

5. Ketebalan lapisan pelarut

2.5 Kolom Kromatografi

Kromatografi kolom merupakan suatu bentuk kromatografi serapan

(adsorption chromatography). Kromatografi kolom disebut juga kromatografi

elusi (elution chromatography) karena senyawa-senyawa yang terpisah dielusikan

dari dalam kolom. Prinsip kromatografi kolom sama dengan prinsip KLT yaitu

senyawa senyawa dalam campuran dipisahkan oleh partisi yaitu antara padatan

penyerap yang berfungsi sebagai fasa diam dan pelarut sebagai fasa bergerak

yang mengalir melewati fase diam.

2.6 Antioksidan

Antioksidan adalah vitamin, mineral, atau sejenis nutrisi yang berperan dalam

menjaga dan memperbaiki sel-sel tubuh yang rusak akibat radikal bebas.Radikal

bebas merupakan salah satu bentuk senyawa reaktif, yang memiliki elektron yang

tidak berpasangan di kulit terluarnya. Radikal bebas dapat berasal dari polusi,

debu maupun diproduksi secara kontinyu sebagai konsekuensi dari metabolism

normal yang dapat berdampak buruk bagi tubuh. Antioksidan dapat melawan

pengaruh bahaya dari radikal bebas atau Reactive OxygenSpecies(ROS) yang

terbentuk sebagai hasil dari metabolism oksidatif yaitu hasil dari reaksireaksi

kimia dan proses metabolic yang terjadi dalam tubuh. Antioksidan dapat

9

diklasifikasikan menjadi dua jenis yaitu antioksidan sintetik dan antioksidan

alami. Antioksidan sintetik diperoleh dari hasil sintesa reaksi kimia, sedangkan

antioksidan alami diperoleh dari hasil ekstraksi bahan-bahan alami diantaranya

yaitu tokoferol, lesitin, fosfatida, sesamol, gosipol, karoten, asam tanat, gallic

acid (senyawa phenolic), ferulic acid (senyawa phenolic), quercetin (flavonoid)

dan sebagainya (Ni Nyoman & Desmira, 2015)

41

BAB V

PENUTUP

5.1 Kesimpulan

1. Senyawa flavonoid telah berhasil dipisahkan menjadi tiga sampel dengan

masing-masing kadar flavonoidnya sebesar 291,25, 308,77 dan 34, 82 mg/g.

2. Aktivitas antioksidan yang dinyatakan dalam nilai 𝐼𝐶50 masing-masing ketiga

sampel tersebut adalah sebesar 38,85, 52,47 dan 165,03 µg/mL

5.2 Saran

1. Perlu dilakukan penelitian pengaplikasian senyawa flavonoid

.

42

DAFTAR PUSTAKA

Ajila, C. M., Naidu, K. A., Bhat, S. G., & Rao, U. J. S. P. (2007). Bioactive

compounds and antioxidant potential of mango peel extract. Food Chemistry,

105(3), 982–988. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2007.04.052

Ashok kumar, R., & Ramaswamy, M. (2014). Phytochemical screening by FTIR

spectroscopic analysis of leaf extracts of selected Indian Medicinal plants.

Int.J.Curr.Microbiol.App.Sci, 3(1), 395–406.

Christian, a, Grethe, S., & Harald, a. (2009). Intake of Flavonoid-Rich Wine , Tea ,

and Chocolate by Elderly Men and ... J Nutr, 139(1), 120–127.

https://doi.org/10.3945/jn.108.095182.oxidant

Commenges, D., Scotet, V., Renaud, S., Jacqmin-Gadda, H., Barberger-Gateau, P., &

Dartigues, J. F. (2000). Intake of flavonoids and risk of dementia. European

Journal of Epidemiology, 16(4), 357–363.

https://doi.org/10.1023/A:1007614613771

Engels, C., Gänzle, M. G., & Schieber, A. (2010). Fractionation of gallotann ins from

mango (Mangifera indica L.) kernels by high-speed counter-current

chromatography and determination of their antibacterial activity. Journal of

Agricultural and Food Chemistry, 58(2), 775–780.

https://doi.org/10.1021/jf903252t

Fowler, Z. L., & Koffas, M. A. G. (2009). Biosynthesis and biotechnological

production of flavanones: Current state and perspectives. Applied Microbiology

and Biotechnology, 83(5), 799–808. https://doi.org/10.1007/s00253-009-2039-z

Gafur, M. A., Isa, I., & Bialangi, N. (2012). ISOLASI DAN IDENTIFIKASI

SENYAWA FLAVONOID DARI DAUN JAMBLANG (Syzygium cumini).

Jurusan Kimia Fakultas Mipa Universitas Negeri Gorontalo, 11.

43

Kabiru, A. A., Joshua, A. A., & Raji, A. O. (2013). Drying kinetics of mango

(Mangifera Indica). International Journal of Research and Reviews in Applied

Sciences, 15(April), 41–50.

Letenneur, L., Proust-Lima, C., Le Gouge, A., Dartigues, J. F., & Barberger-Gateau,

P. (2007). Flavonoid intake and cognitive decline over a 10-year period.

American Journal of Epidemiology, 165(12), 1364–1371.

https://doi.org/10.1093/aje/kwm036

Masturi, Alighiri, D., Nuzulina, K., Rodhiyah, M., & Drastisianti, A. (2019).

Optimization of condition extraction in quantification of total flavonoid content

in the seeds of the Arummanis (Mangifera indica L.) mango from Indonesia.

Journal of Physics: Conference Series, 1321(2). https://doi.org/10.1088/1742-

6596/1321/2/022041

Masud Parvez, G., & Masud Parvez, C. G. (2016). Pharmacological Activities of

Mango (Mangifera Indica): A Review. Journal of Pharmacognosy and

Phytochemistry JPP, 1(53), 1–7.

Mertens-Talcott, S. U., Talcott, S. T., & Percival, S. S. (2003). Low Concentrations

of Quercetin and Ellagic Acid Synergistically Influence Proliferation,

Cytotoxicity and Apoptosis in MOLT-4 Human Leukemia Cells–. The Journal

of Nutrition, 133(8), 2669–2674. https://doi.org/10.1093/jn/133.8.2669

Molyneux, P. (2004). The Use of the Stable Free Radical Diphenylpicryl-hydrazyl

(DPPH) for Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin Journal of Science

and Technology, 26(December 2003), 211–219.

https://doi.org/10.1287/isre.6.2.144

Noh, C. H. C., Azmin, N. F. M., Amid, A., & Asnawi, A. L. (2017). Algorithm for

rapid identification of flavonoids classes. International Food Research Journal,

24(December), 410–415.

44

Okpala, L. C., & Gibson-Umeh, G. I. (2013). Physicochemical Properties of Mango

Seed Flour. Nigerian Food Journal, 31(1), 23–27.

https://doi.org/10.1016/s0189-7241(15)30052-7

Pardo-Andreu, G. L., Barrios, M. F., Curti, C., Hernández, I., Merino, N., Lemus, Y.,

… Delgado, R. (2008). Protective effects of Mangifera indica L extract

(Vimang), and its major component mangiferin, on iron-induced oxidative

damage to rat serum and liver. Pharmacological Research, 57(1), 79–86.

https://doi.org/10.1016/j.phrs.2007.12.004

Park, Y. S., Jung, S. T., Kang, S. G., Heo, B. G., Arancibia-Avila, P., Toledo, F., …

Gorinstein, S. (2008). Antioxidants and proteins in ethylene-treated kiwifruits.

Food Chemistry, 107(2), 640–648.

https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2007.08.070

Ribeiro, S. M. R., Barbosa, L. C. A., Queiroz, J. H., Knödler, M., & Schieber, A.

(2008). Phenolic compounds and antioxidant capacity of Brazilian mango

(Mangifera indica L.) varieties. Food Chemistry, 110(3), 620–626.

https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2008.02.067

Rzepecka-stojko, A., Kubina, R., Iriti, M., Wojtyczka, R. D., Buszman, E., & Stojko,

J. (n.d.). comparative study. (21).

Santhirasegaram, V., Razali, Z., & Somasundram, C. (2015). Effects of sonication

and ultraviolet-C treatment as a hurdle concept on quality attributes of Chokanan

mango (Mangifera indica L.) juice. Food Science and Technology International,

21(3), 232–241. https://doi.org/10.1177/1082013214528188

Senthilkumar, S. R., Sivakumar, T., Arulmozhi, K. T., & Mythili, N. (2017). FT-IR

IR analysis and correlation studies on the antioxidant activity , total phenolics

and total flavonoids of Indian commercial teas ( Camellia sinensis L .) - A novel

approach. International Research Journal of International Science Community

Association International Research Journal of Biological Sciences Int. Res. J.

45

Biological Sci, 6(3), 1–7.

Sharma, V., & Janmeda, P. (2017). Extraction, isolation and identification of

flavonoid from Euphorbia neriifolia leaves. Arabian Journal of Chemistry,

10(4), 509–514. https://doi.org/10.1016/j.arabjc.2014.08.019

Singh, R., & Mendhulkar, V. D. (2015). FTIR studies and spectrophotometric

analysis of natural antioxidants, polyphenols and flavonoids in Abutilon indicum

(Linn) Sweet leaf extract. Journal of Chemical and Pharmaceutical Research,

7(6), 205–211. Retrieved from

https://pdfs.semanticscholar.org/b5ca/0c44315041dfc93c6298ed67fbfe3ed8d4a4

.pdf

Sjahid, Landyyun R. 2008. Isolasi dan Identifikasi Flavonoid dar Daun Dewandru

(Eugenia uniflora L.). Surakarta : Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah

Surakarta.

Strategis, R., & Pertanian, K. (2019). 2015 - 2019.

Trifunschi, S., Munteanu, M. F., Agotici, V., Pintea, S., & Gligor, R. (2015).

Determination of Flavonoid and Polyphenol Compounds in Viscum Album and

Allium Sativum Extracts. International Current Pharmaceutical Journal, 4(5),

382–385. https://doi.org/10.3329/icpj.v4i5.22861

Yuliani, Ni Nyoman & Dienima, Desmira Primanty. 2015 .Uji Aktivitas Antioksidan

Infusa Daun Kelor (Moringa oleifera, Lamk) dengan Metode DPPH 1,1-

diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH). Jurna Info Kesehatan ,Vol 14, Nomor 2

Desember 2015.