1

Lanjutan

Instrumentasi Spektrometer

UV_VIS

2

Instrumentasi (1)

Alat yang dipakai untuk mempelajari absorpsi atau emisi radiasi elektromagnetik sebagai fungsi panjang gelombang disebut Spektrometer atau Spektrofotometer. Komponen-komponen utama alat spektrofotometer adalah:

Sumber radiasi yang stabil dan berkelanjutan (kontinu) Sistem lensa, cermin dan celah untuk membatasi, membuat

parallel dan menfokuskan berkas sinar. Suatu monokromator untuk menyeleksi sinar menjadi l tertentu

(sinar monokromatis).

Kontainer transparan untuk tempat sample (biasa disebut dengan sel atau kuvet).

Detektor radiasi yang dirangkaikan dengan suatu pembaca (read out) baik meter atau recorder.

Sumber

Radiasi Monokromator Sampel Detektor Rekorder

3

Instrumentasi (2)

Sumber Radiasi Radiasi sinar tampak: umumnya dipakai lampu filamen tungsten yang

mempunyai daerah panjang gelombang 320 2500 nm. Kontrol terhadap voltase sangat diperlukan karena perubahan 1 volt akan mengakibatkan perubahan kekuatan sinar menjadi 4 x lebih besar. Biasanya digunakan regulator atau stabilisator.

Radiasi sinar ultraviolet: Umumnya digunakan lampu hydrogen (atau deuterium) yang menghasilkan radiasi kontinyu pada l = 180 375 nm. Ada 2 tipe lampu ini, yaitu yang menggunakan voltase tinggi dan voltase rendah. Lampu deuterium dapat menghasilkan intensitas sinar lebih besar dari lampu hydrogen.

Monokromator

Ada 2 jenis monokromator, yaitu:

Prisma: penguraian sinar didasarkan pada perbedaan indeksnya di udara dan di dalam prisma, sehingga sinar diteruskan sesuai dengan panjang gelombang masing-masing.

Difraksi Grating: Penguraian sinar didasarkan pada grating (permukaan benda seperti gergaji), grating dapat diputar dengan sudut tertentu, sehingga diperoleh sinar dengan l seperti yang diinginkan.

4

Gambar Monokromator

5

Instrumentasi (3)

Kontainer sample (sel/kuvet)

Sel atau Kuvet tempat sample (biasanya berupa larutan) ditempatkan harus terbuat dari bahan yang tembus radiasi pada panjang gelombang yang akan digunakan untuk pengukuran absorbansi. Untuk bekerja pada daerah ultraviolet (

6

MACAM-MACAM SPEKTROFOTOMETER

Meskipun secara umum spektrofotometer mempunyai rancangan dasar sebagaimana dibahas dalam sub-bab sebelumnya, namun demikian setidaknya ada tiga jenis spektrofotometer yang telah dikenal.

Spektrofotometer berkas tunggal (single beam) Spektrofotometer berkas ganda (double beam) Spektrofotometer Gilford Spektrofotometer berkas tunggal (single beam): banyak digunakan karena

cukup murah, tetapi memberikan hasil yang memuaskan. Alat ini hanya terdiri dari satu berkas sinar sehingga dalam prakteknya, pengukuran sample dan larutan blanko atau standar harus dilakukan secara bergantian dengan menggunakan sel yang sama.

Spektrofotometer berkas ganda (double beam): biasa dijumpai pada alat spektrofotometer yang telah memakai autosacnning panjang gelombang dan mencatat secara otomatis absorbansi (A) sebagai fungsi panjang gelombang (l). Alat jenis ini mempunyai 2 berkas sinar sehingga pengukuran absorbansi larutan sample dan larutan blanko dapat dilakukan secara parallel dan tidak perlu bargantian.

Spektrofotometer Gilford: banyak dipakai di laboratorium biokimia dan mempunyai beberapa keuntungan dibandingkan dengan spektrofotometri biasa karena mampu membaca absorbansi (A) sampai pada angka 3 (spektrofotometri biasa : 0,1 1,0). Hal ini disebabkan alat ini menggunakan komponen yang disebut dengan photomultiplier feed-back circuit.