identifikasi escherichia coli pada sampel urin 23

8/13/2019 Identifikasi Escherichia Coli Pada Sampel Urin 23

1/9

IdentifikasiEscherichia coliPada Sampel Urin

1. Hari/Tanggal : 28 Mei-30 Mei 2013

2. Tujuan Praktikum :

Memahami gambaran koloniEnterobacteriaceaepada media M dan media

!elekti" lainn#a dan memahami $ara identi"ika!i !erta i!ola!iEnterobacteriaceae.

3. Teori %a!ar :

&denti"ika!i dan determina!i !uatu biakan murni bakteri #ang diperoleh dari ha!il

i!ola!i dapat dilakukan dengan $ara pengamatan !i"at mor"ologi koloni' mor"ologi !el

bakteri' pengujian !i"at-!i"at "i!iologi dan biokimian#a. Pertumbuhan bakteri di alam

dipengaruhi oleh beberapa "aktor luar !eperti !u!btrat' pertumbuhan ' pH' temperatur'

dan bahan kimia. (akteri #ang nampak dapat memiliki mor"ologi #ang !ama' namun

keperluan nutri!i dan per!#aratan ekologin#a berbeda. ) &rianto '200*+.

(eberapa media dibuat oleh ahli mikrobiologi untuk membedakan

mikroorgani!me' kelompok media biakan ini di!ebut dengan media !elekti" dan media

di"eren!ial. Media !elekti" adalah media biakan #ang mengandung paling !edikit !atu

bahan #ang menghambat perkembangbiakan mikroorgani!me #ang tidak diinginkan dan

membolehkan perkembangbiakan mikroorgani!me tertentu #ang ingin di i!ola!i.

,edangkan media di"eren!ial dibuat agar dapat membedakan kelompok mikroorgani!me

tertentu #ang tumbuh pada media biakan. Media di"eren!ial ini bia!an#a mengandung

bahan kimia #ang dapat digunakan oleh kelompok mikroorgani!me tertentu. pabila

beberapa mikroorgani!me tumbuh pada media di"eren!ial' maka dapat dibedakan

kelompok mikroorgani!me berda!arkan perubahan pada media biakan atau penampilan

kolonin#a ) a#' 1 +.

arakteri!tik mikroorgani!me dapat dilakukan dengan beberapa metode !eperti

pengamatan mikro!kopik koloni' pearnaan mikroba untuk mengetahui penampakan

mikro!kopik !el maupun membedakan golongan-golongan mikroorgani!me' !erta

karakteri!tik dengan !erangkaian uji-uji biokimia #ang men$erminkan aktiita!

metaboli!me en4imatik mikroorgani!me. 5eak!i-reak!i biokimia bagi mikroorgani!me

dapat dikatakan !ebagai !idik jari biokimia )bio$hemi$al "ingerprint!+' !ebagaimana !idik

jari pada manu!ia #ang menjadi pembeda antara !atu orang dengan orang lainn#a. ,atu


2/9

!pe!ie! mikroba akan memiliki 6!idik jari7 biokimia atau karakter biokimia identita!

#ang berbeda dengan !pe!ie! mikroba lainn#a.

(erikut beberapa uji biokimia #ang digunakan untuk identi"ika!i bakteri' antara

lain :

a+ M$ onke# gar

andungan utama di dalam media ini adalah lakto!a' garam empedu dan

merah netral. Media M$onke# ini dapat menghambat pertumbuhan bakteri ram

Po!iti" #ang di!ebabkan oleh garam empedu dan kri!tal iolet. (akteri ram 9egati"

#ang tumbuh dibedakan dalam kemampuann#a mem"ermenta!ikan lakto!a. oloni

dari bakteri #ang mem"ermenta!ikan lakto!a berarna merah bata dan dapat

dikelilingi oleh endapan garam empedu. ndapan ini di!ebabkan oleh penguraian

lakto!a menjadi a!am #ang akan bereak!i dengan garam empedu. (akteri #ang tidak

mem"ermenta!ikan lakto!a bia!an#a ber!i"at patogen' dimana golongan bakteri

ter!ebut tidak memperlihatkan perubahan pada media' ini berarti baha arna

kolonin#a !ama dengan arna media ) a#' 1 +.

b+ ;ji gula-gula )luko!a' akto!a' ,ukro!a dan Manitol+

;ji ini dilakukan untuk mengindeti"ika!i bakteri #ang mampu

mem"ermenta!ikan karbohidrat. Pada uji gula-gula han#a terjadi perubahan arna

pada media gluko!a #ang berubah menjadi arna kuning' artin#a bakteri ini

membentuk a!am dari "ermenta!i gluko!a. Pada media gluko!a juga terbentuk

gelembung pada tabung durham #ang diletakan terbalik didalam tabung media'

artin#a ha!il "ermenta!i berbentuk ga! )


3/9

berarti bekteri mengha!ilkan ga! Hidrogen ,ul"it )H2,+ dan $in$in indol berarna

merah muda !etelah penambahan reagen koa$k! )Pel$4ar dan han. 200= +.

d+ M5->P

1. ;ji M5 ) Meth#il 5ed +

;ji meth#l red digunakan untuk menentukan adan#a "ermenta!i a!am

$ampuran. (eberapa bakteri mem"ermenta!ikan gluko!a dan mengha!ilkan

berbagai produk #ang ber!i"at a!am' !ehingga akan menurunkan pH media

pertumbuhan menjadi ='0 atau lebih rendah. Penambahan indikator meth#il red

dapat menunjukkan adan#a perubahan pH menjadi a!am' dimana pada pH '

berarna merah dan pH ?'2 ) !edikit mendekati ba!a + berarna kuning'

!ehingga jika ha!iln#a po!iti" #ang ditunjukkan dengan terjadin#a "ermenta!i

a!am $ampuran' maka kaldu biakan akan tetap berarna merah )a!am+ !edang

apabila tidak terjadi "ermenta!i maka biakan akan berubah arna menjadi

kuning )ba!a + ) a#' 1 +.

2. ;ji >P ) >oge! Pro!kauer +

;ji ini digunakan untuk mengidenti"ika!i mikroorgani!me #angmelak!anakan "ermenta!i 2'3-butanadiol. Penambahan 0@


4/9

T,& terutama digunakan untuk mengidenti"ika!ikan bakteri ram 9egati"'

median#a mengandung 3 ma$am gula #aitu gluko!a' lakto!a dan !ukro!a.

Mengandung indikator merah "enol dan Ce,


5/9

lkohol *0@' kerta! label' P )Voges

Proskauer+' reagen oak!' reagen M5'!ampel urin'Trile Sugar Iron Agar)T,&+'

A-na"tol.

=. Metode Praktikum :

Metode #ang digunakan pada praktikum ini adalah metode !treak plate' metode

agar miring gore!an' metode tu!ukan agar tegak' dan metode adukan pada medium agar

$air.

?. Ha!il Pengamatan :

Hari Pertama : &!ola!i pada media M

Hari edua :

Tabel 1. Ha!il &!ola!i pada Media ,elekti"

9o. iri oloni : Media : M

1 (entuk (ulat

2 ;kuran 1-3mm

3 Farna Merah muda

lea!i $embung= Pinggiran rata

? iri kha! lainn#a Permukaan kering

Hari etiga :

Tabel 2. Ha!il Pengamatan ;ji (iokimia

9o. 9ama ;ji Pengamatan Ha!il )B/-+

1 ula-gula $air :

luko!a "ermenta!i : terjadi perubahan arna media dari

ungu menjadi kuning.

a! : mengha!ilkan gelembung.

B


6/9

akto!a "ermenta!i : terjadi perubahan arna media dari



B

Manitol "ermenta!i : terjadi perubahan arna media dari



B

,ukro!a "ermenta!i : tidak terjadi perubahan.

a! : mengha!ilkan !edikit gelembung.

B

2 M5 terjadi perubahan arna media dari kuning menjadi

merah !etelah ditambahkan reagen M5.B

3 >P Tidak terbentuk $in$in merah ke$oklatan menjadi

ungu !etelah ditambahkan A-na"tol dan


7/9

medium #ang beri!i biakan bakteri !ampel #ang membuktikan baha bakteri ter!ebut

mempun#ai en4im untuk mengubah !truktur gula menjadi produk "ermenta!i. Pada

pengamatan medium $air #ang beri!i E. Coli' koloni bakteri ter!ebar merata !ehingga

medium terlihat keruh. Hal ini membuktikan baha bakteriE. Colimerupakan !alah !atu

bakteri #ang ber!i"at "akultati" anaerob' artin#a bakteri ini dapat hidup dalam keadaan

anaerob atau aerob' !ehingga koloni bakteri ini dapat hidup pada permukaan medium

#ang anerob maupun berada di dalam dan di da!ar medium #ang ber!i"at anaerob

)li"ton' 1=8+.

Pada medium M5 !etelah ditambahkan reagen M5 arna akhir medium menjadi

merah. Hal ini menunjukan adan#a "ermenta!i a!am $ampuran. Pada medium >P !etelah

ditambahkan A-na"tol dan


8/9

kering. Pada uji gula-gula )B+' uji M5>P ) B - +' uji , )-+' uji T,& )a!am/a!am'H 2,

)-+'ga! )B++' uji ,&M )- B B+' dan uji urea!e )-+.

. %a"tar Pu!taka

li"ton' ..' 1=8. &ntrodu$tion To The (a$teria. M$ra-Hill (ook ompan#'&n$.

%ai!' (.%.' 5. %ulbe$o' H.9 i!en and in!berg )18?+. Mi$robiokog#. d. ' ipo$ott

ompan#' Philadelphia.

&rianto' ' 200*' Mikrobiologi. Gilid 1. (andung: >. rama Fid#a.

anin' & ) 200?+ !$heri$hia $oli. http: ekipedia.org/2008/02/03.

a#' (ibiana F. 1. nali!i! Mikroba di aboratorium.Gakarta: PT. 5aja ra"indo

Per!ada.


9/9

,umber : %okumenta!i Pribadi

)a+ )b+ )$+ )d+

Gambar 2. Ha!il ;ji ula-ula. )a+ luko!a. )b+ akto!a. )$+ Manitol. )d+

,ukro!a.


)a+ )b+ )$+ )d+

Gambar 3. )a+ ;ji M5' )b+ ;ji >P' )$+ ;ji ,' )d+ ;ji T,&


identifikasi escherichia coli pada sampel urin 23

Documents