BismillahirrahmaanirrahiimPemeriksaan Hitung Jumlah EosinofilTim Praktikum Hematologi Poltekkes Depkes Bandung

Hitung Jumlah EosinofilWalaupun jumlah relatif eosinofil bisa ditentukan dalam pemeriksaan hitung jenis lekosit, pada kasus-kasus tertentu sel eosinofil juga kadang-kadang diperlukan jumlahnya per mm3 darah. Normal dalam darah yaitu antara 50 350 per mm3 darah.

Hitung Jumlah EosinofilJumlah sel eosinofil dibawah normal disebut eosinofenia biasanya ditemukan pada kasus hyperadrenalism (cushings disease) dan juga pada keadaan Shock. Sedangkan jika jumlah sel ini meningkat disebut eosinophilia, kasus ini ditemukan pada reaksi alergi, infeksi parasit, brucellosis dan bisa juga pada lekemia.

Hitung Jumlah EosinofilUntuk menghitung jumlah sel eosinofil biasanya dipakai volume yang lebih besar karena jumlah sel ini dalam darah sedikit. Tujuannya untuk mengurangi besarnya kesalahan. Metode yang digunakan di antaranya Von Dungern, Tatais.

Hitung Jumlah EosinofilMetode Von DungernPrinsip : Dengan penambahan larutan Von Dungern, maka darah akan encer dan sel lain selain sel Eosinofil akan lisis.Alat-alat : - Haemocytometer - Vaccinostyle/ lancet - Mikroskop

Hitung Jumlah EosinofilBahan : - Darah - Alkohol 70%- Kapas - Lar. Von Dungern , terdiri dari: Eosin 100 mg. (Larutan Eosin 2% 10 mL)Fungsi: mewarnai granula selAseton 10 mL Fungsi: melisiskan sel selain sel eosinofilAquadest 100 mL. Fungsi : sebagai pengencer

Hitung Jumlah EosinofilProsedur : 1. Pengenceran dengan pipet thoma lekosit

- Siapkan bilik hitung dengan deck glass- Bersihkan jari pasien dengan alkohol 70%.- Tunggu sampai kering, kemudian tusuk dengan Vaccinostyle - Darah yang keluar isap dengan pipet thoma lekosit sampai angka 1 - Isap larutan Von Dungern sampai angka 11 (pengenceran 10 kali).- Kocok perlahan selama 3 menit. - Buang tiga tetes pertama lalu masukkan ke dalam bilik hitung.- Simpan dalam cawan petri lembab (kapas basah) selama 15 30 menit agar warna diserap dan untuk mengurangi penguapan- Hitung dalam seluruh kotak (3mm x 3 mm).

Hitung Jumlah Eosinofil2. Pengenceran dalam tabung menggunakan mikropipet- Siapkan bilik hitung dengan deck glass- Larutan Von Dungern sebanyak 200 uL dipipet menggunakan mikropipet, kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi.- Dari larutan tersebut diambil sebanyak 20 uL kemudian dibuang.- Selanjutnya darah (vena/ kapiler) dipipet sebanyak 20 uL menggunakan mikropipet dimasukkan ke dalam tabung yang sudah berisi larutan Von Dungern. (Pengenceran 10 kali).

Hitung Jumlah EosinofilPerhitungan = P ( pengenceran) x V (volume) x N (jumlah sel)P = pengenceran 10 kaliV = volume = p x l x t x jumlah kotak= 3 mm x 3 mm x1/10 mm = 9 / 10 mm3= 10/9 per mm3N = jumlah sel = jumlah sel yang ditemukan Normal : 50 350 sel / mm3

Hitung Jumlah EosinofilContoh perhitungan:Darah EDTA dipipet dengan pipet thoma untuk lekosit sampai tanda 1, kemudian diisap larutan Von Dungern sampai tanda 11 (pengenceran 10 kali).Koreksi volume: 9 kotak yang berukuran 1mm x 1mm= 9 kotak x 1mm x 1 mm x 1/10 mm= 9 kotak x 1/10 mm3= 9/10 mm3Jumlah sel eosinofil dihitung dalam 1 mm3 darah, sehingga koreksi volume menjadi: 1mm3 dibagi 9/10 mm3=10/9 per mm3 darah

Hitung Jumlah EosinofilJumlah eosinofil yang ditemukan pada 9 kotak besar dalam bilik hitung: 9 sel.Jadi jumlah eosinofil / mm3 adalah:P x KV x N = 10 x 10/9 x N= 100/9 x 9= 900/9 = 100 sel eosinofil/ mm3Normal : 50 - 350sel / mm3

Hitung Jumlah EosinofilHal-hal yang harus diperhatikan untuk melakukan hitung jumlah sel darah:Memastikan sampel darah homogenMemastikan pengenceran darah sudah dilakukan dengan tepat atau sesuai sehingga setiap sel bisa dihitung satu persatu dengan jelas.Contoh : - Pengenceran darah untuk eritrosit: 100 kali sampai 200 kali- Pengenceran darah untuk Trombosit: 100 kali- Pengenceran darah untuk Lekosit atau eosinofil: 10 kali sampai 20 kali

Hitung Jumlah Eosinofil Memilih larutan pengencer yang tepat/ sesuai sehingga dapat memperjelas sel yang dihitung.Contoh: Untuk menghitung sel eritrosit: Larutan HayemUntuk menghitung sel lekosit : LarutanTurkUntuk menghitung sel trombosit: LarutanAmonium oksalat 1%Untuk menghitung sel Eosinofil: LarutanVon Dungern.

Hitung Jumlah Eosinofil Memilih bilik hitung serta penutup kaca (dek glas) yang bersih dan kering untuk memastikan penyebaran sel merata pada saat memasukkan ke bilik hitung.5. Mengisi bilik hitung dalam satu aliran yang berkesinambungan untuk memastikan tidak ada gelembung udara atau tumpah.

Hitung Jumlah Eosinofil6. Menghitung sel dengan cara yang sistematis untuk meminimalkan kesalahan menghitung sel dengan cara menentukan patokan menghitung sel.Ada empat pilihan dalam menentukan patokan hitung sel:1. Kiri - atas2. Kanan - atas3. Kiri- bawah4. Kanan- bawahYang paling umum dipilih adalah patokan KIRI - ATAS

Hitung Jumlah Eosinofil7. Menghitung jumlah sel dalam sampel yang asli dalam per mm3 darah.8. Meyakinkan perhitungan yang dilakukan konsisten.

Hitung Jumlah EosinofilSumber-sumber kesalahan:1. Bilik hitung dan pipet kotor.2. Pipet tidak akurat.3. Sampel tidak homogen.4. Teknik pengenceran salah.5. Pengisian cairan ke dalam bilik hitung yang berlebih atau kurang.6. Menghitung sel terlalu cepat sehingga sel belum terdistribusi sempurna.7. Tidak konsisten dalam menggunakan patokan hitung sel.

LEUKOCYTEERYTHROCYTE1. THOMAS PIPET2. COUNTING CHAMBER3. DILUTING FLUID4. HEMOLANCET COTTON + 70% ETHANOLTURK..- HAYEM- FORMAL CITRATECOUNTING CHAMBER = IMPROVED NEUBAUER BURKER , ETC.COLOUR BAND& NEWTONS RINGCHAMBER DEPTH = 0.1 mm..

IMPROVED NEUBAUERLEUKOCYTES COUNT :4 CORNER SQUARES ( L ) = 1 X 1 X 0.1 mm3ERYTHROCYTES COUNT :

Hitung Jumlah Eosinofil

COUNT BY MICROSCOPECONDENSOR : DOWN WARDOBJECTIVE : 10 XCALCULATION :NORMAL :50 350 mm3IMPROVED NEUBAUERCOUNTING CHAMBER

Manual method

Methods in performing CBCManual method - utilizes a hemacytometer1.2.3.4.5.W - WBC R - RBC P - Platelets

Sekian dan terima kasih