BAB I

PENDAHULUAN

 

1.1.   Judul Percobaan

“Analisis parasetamol total dalam cuplikan urin”

1.2.   Tujuan Percobaan

1.   Dapat memahami langkah-langkah analisa parasetamol dalam cuplikan urin.

2.   Dapat melakukan analisa parasetamol dalam cuplikan urin.

 

1.3.   Dasar Teori

A.    Parasetamol

Parasetamol atau asetaminofen adalah obat analgesik dan antipiretik yang populer dan digunakan untuk melegakan sakit kepala, sengal-sengal dan sakit ringan, dan demam. Digunakan dalam sebagian besar resep obat analgesik salesma dan flu. Ia aman dalam dosis standar, tetapi karena mudah didapati, overdosis obat baik sengaja atau tidak sengaja sering terjadi.

Berbeda dengan obat analgesik yang lain seperti aspirin dan ibuprofen, parasetamol tak memiliki sifat antiradang. Jadi parasetamol tidak tergolong dalam obat jenis NSAID. Dalam dosis normal, parasetamol tidak menyakiti permukaan dalam perut atau mengganggu gumpalan darah, ginjal atau duktus arteriosus pada janin.

Farmakokinetik

Parasetamol yang diberikan secara oral diserap secara cepat dan mencapai kadar serum puncak dalam waktu 30 – 120 menit. Adanya makanan dalam lambung akan sedikit memperlambat penyerapan sediaan parasetamol lepas lambat. Parasetamol terdistribusi dengan cepat pada hampir seluruh jaringan tubuh. Lebih kurang 25% parasetamol dalam darah terikat pada protein plasma.

Waktu paruh parasetamol adalah  antara 1 – 3 jam. Parasetamol diekskresikan melalui urine  sebagai metabolitnya,  yaitu asetaminofen glukoronid, asetaminofen sulfat, merkaptat dan bentuk yang tidak berubah.

Sebagian asetaminofen 80% dikonjugasi dengan asam glukoronat dan sebagian kecil lainnya dengan asam sulfat. Selain itu dapat mengalami hidroksilasi. Metabolit hasil hidroksilasi ini dapat menimbulkan methemoglobinemia dan hemolisis eritrosit. Obat ini diekskresi melalui ginjal, sebagian kecil sebagai parasetamol (3%) dan sebagian besar dalam bentuk terkonjugasi.

B.     Analisis Parasetamol

Parameter farmakokinetika obat dapat diperoleh berdasarkan hasil pengukuran kadar obat utuh dan / atau metabolitnya di dalam cairan hayati (darah, urin, saliva atau cairan tubuh lainnya).

Oleh karena itu agar nilai-nilai parameter kinetik obat dapat dipercaya, metode penetapan kadar harus memenuhi berbagai kriteria yaitu meliputi perolehan kembali (recovery), presisi dan akurasi.

Persyaratan yang dituntut bagi suatu metode analisa adalah jika metode tersebut dapat memberikan nilai perolehan kembali yang tinggi (75-90% atau lebih), kesalahan acak dan sistematik kurang dari 10%.

Kepekaan dan selektivitas merupakan kriteria lain yang penting dan nilainya tergantung pula dari alat pengukur yang dipakai. Dalam percobaan ini akan dilakukan langkah-langkah yang perlu dikerjakan untuk optimalisasi analisis meliputi:

1. Penentuan jangka waktu larutan obat yang memberikan resapan tetap (khusus untuk reaksi warna).

2. Penetapan panjang gelombang larutan obat yang memberikan resapan maksimum (parasetamol).

3.  Pembuatan kurva baku (parasetamol).

4. Perhitungan nilai perolehan kembali, kesalahan acak dan kesalahan sistematik.

Ketersediaan hayati merupakan kecepatan dan jumlah obat yang mencapai sirkulasi sistemik dan secara keseluruhan menunjukkan kinetic dan perbandingan zat aktif yang mencapai peredaran darah terhadap jumlah obat yang diberikan. Ketersediaan hayati obat yang diformulasi menjadi sediaan farmasi merupakan bagian dari salah satu tujuan rancangan bentuk sediaan dan yang terpenting untuk keefektifan obat tersebut. Pegkajian terhadap ketersediaan hayati ini tergantung pada absorpsi obat ke dalam sirkulasi umum serta pengukuran dari obat yang terabsorpsi tersebut. Dalam menaksir ketersediaan hayati ada tiga parameter yang biasanya diukur yang an profil konsentrasi dalam darah dan waktu dari obat yang diberikan.

Konsentrasi puncak (Cmax), menggambarkan konsentrasi obat tertinggi dalam sirkulasi sistemik. Konsentrasi ini tergantung pada konstanta absorbsi, dosis, volume distribusi dan waktu pencapaian konsentrasi obat maksimum dalam darah. Konsentrasi puncak sering kali dikaitkan dengan intensitas respon biologis dan harus di atas MEC dan tidak melebihi MTC.

Waktu untuk konsentrasi puncak (tmax) menggambarkan lamanya waktu tersedia untuk mencapai konsentrasi puncak dari obat sirkulasi sistemik. Parameter ini tergantung pada konstanta absorbs yang menggambarkan permulaan dari level puncak dari respon biologis dan bias digunakan sebagai perkiraan kasar untuk laju absorbsi.

Luas daerah di bawah kurva (AUC), merupakan total area di bawah kurva konsentrasi vs waktu yang menggambarkan perkiraan jumlah obat yang berada dalam sirkulasi sistemik.

Bila membandingkan suatu formulasi untuk acuan, parameter ini menggambarkan jumlah ketersediaan hayati dan biasa digunakan sebagai perkiraan kasar jumlah obat diabsorbsi. Ketersediaan hayati merupakan suatu penerapan baru yang kegunaannya tidak perlu diragukan lagi. Penerapan ketersediaan hayati berkembang dalam dua arah, yaitu:

1.      Farmasi klinik yang berkaitan dengan rasionalisasi keadaan individu penderita, artinya penyesuaian pasologi yang tepat pada setiap penderita, dengan mempertimbangkan perubahan farmakokinetika in vivo, baik karena interaksi obat maupun karena fungsi fisiolagi.

2.      Farmasetika yang berkaitan dengan rasionalisasi pengembangan suatu obat, yaitu penyesuaian optimal jalur pemberian obat dan bentuk sediaan terhadap karakteristik farmakokinetika zat aktif.

Kedua arah pengembangan tersebut tercakup dalam lingkup penelitian biofarmasetika dan berkaitan dengan penyesuaian pada kurva profil kadar zat aktif dalam darah penderita dan efek yang diteliti.

Data ketersediaan hayati digunakan untuk menentukan:

1.      Banyaknya obat yang diabsorbsi dari formulasi sediaan.

2.      Kecapatan obat yang diabsorbsi.

3.      Lama obat berada dalam cairan biologi atau jaringan dan dikorelasikan dengan respon pasien.

4.      Hubungan antara kadar obat dalam darah dan efikasi klinis serta toksisitas.Metode penilaian ketersediaan hayati.

Penelitian ketersediaan hayati pada sukarelawan dapat dilakukan dengan beberapa metode:

a.       Metode dengan menggunakan data darah

b.      Data urin

c.       Data efek farmakologis

d.      Data respon klinis

Pemilihan metode bergantung pada tujuan studi, metode analisis untuk penetapan kadar obat dan sifat produk obat. Data darah dan data urin lazim digunakan untuk menilai ketersediaan hayati sediaan obat yang metode analisis zat berkhasiat telah diketahui cara dann validitasnya. Jika cara dan validitasnya belum diketahui dapat digunakan data farmakologi dengan syarat efek farmakologi yang timbul dapat diukur secara kuantitatif, seperti efek pada kecepata denyut jantung atau tekanan darah yang dapat digunakan sebagai indeks ketersediaan hayati obat. Untuk evaluasi ketersediaan hayati menggunakan data respon klinis dapat mengalami perbedaan antar individu akibat farkokinetika dan farmakodinamik obat

yang berbeda. Factor farmakodinamik yang berpengaruh meliputi: umur, toleransi obat, interaksi obat dan factor-faktor patofisiologik yang tidak diketahui.

Faktor-faktor yang mempengaruhi ketersediaan hayati oabat yang digunakan secara oral:

1)      Sifat fisikokimia zat aktif.

a.       Bentuk isomer; alkaloid-alkaloid dan steroid-steroid terdapat dalam bentuk isomer, seperti misalnya isomer d atau l. seringkali yang aktif atau diaktif hanya salah satu saja, misalnya d-etambutol, d-propoksipen, d-amfetamin, l-kloramfenikol.

b.      Polimorfisme; bentuk kristal yang kurang stabil lebih mudah larut dan kemudian cepat terabsorbsi daripada bentuk kristalnya yang stabil, misak kloramfenikol mempunyai 2 bentuk polimorf A dan B; kristal bentuk A bersifat tidak aktif.

c.       Ukuran partikel; bila ukuran partikel lebih kecil maka luas permukaan akan besar sehingga obat – obat akan cepat melarut dan diabsorbsi.

d.      Hidrat dan solvate; kadang – kadang beberapa bahan obat cenderung untuk mengikat beberapa molekul pelarut. Ikatan ini disebut solvate, dan kalau pelarutnya adalah air maka ikatan ini disebut hidrat. Ampisilin anhidrat lebih mudah larut dibandingkan ampisilin trihidrat, sehingga pemakaian peroral akan memberiakan blood level yang tinggi.

e.       Bentuk garam, ester dan lainnya; gugusan estolat dari eritromisin estolat dapat menyebabkan hepatotoksisitas, sedangkan stearatnya tidak. Tapi sifat fisik eritromisin mempersulit pengisian dalam jumlah yang cukup ke dalam kapsul yang berukuran wajar. Pemadatan yang tidak tepat atas bahan baku ini sebaliknya dapat menimbulkan persoalan disolusi dan ketersediaan hayati.

f.       Kemurnian; bahan baku penisilin yang tidak murni bias mengandung mikrokontaminan berupa hasil degradasi penisilin sendiri bahkan inferior ini yang dapat menyebabkan alergi. Namun meskipun telah menggunakan bahan – bahan baku murni jika cara dan kondisi produksi dalam hal ini kebersihan,temperature, dan kelembapan kurang baik, bahan penisilin akan menimbulkan efek samping yang sama.Bahan – bahan pembantu; banyak obat – obatan dimana pengaruh bahan – bahan pembantu dapat merubah secara drastic pola absorbsinya dan oleh karena itu efek terapi dan toksisitasnya juga berpengaruh, seperti meningkatnya toksisitas fenitoin setelah bahan pembantu yang semula dipakai CaSO4 diganti dengan laktosa.

2)      Cara – cara prosesing

a.       Formulasi obat yang sudah baik dalam suatu pabrik bisa sama sekali berubah bila dibuat oleh pabrik lain dengan menggunakan alat – alat yang berbeda. Hal ini menjadi masalah kritis apabila digunakan untuk memproduksi tablet – tablet dengan kadar zat khasiat yang rendah seperti digoksin 0,25 mg/tablet 200 mg.

b.      Ruangan dan kondisi – kondisinya ( temperature, kelembaban, penerangan, dan sebagainya ) yang memenuhi syarat. Misalnya pada pembuatan sediaan tetrasiklin yang merupakan bahan baku yang kurang stabil pada kondisi tertentu sehingga dapat mengakibatkan penguraian tetrasiklin menjadi nonaktif, hepatotoksik, dan nefrotoksik.

c.       Tenaga – tenaga yang kompeten.

d.      Dikerjakan dengan system produksi dan system control yang baik. Dalam hal ini persyaratan – persyaratan Good Manufacturing Practices ( GMP ) menjadi penting.

 

BAB II

METODE KERJA

 

2.1.   Alat dan Bahan

A.    Alat :

·      Spektrofotometer

·      Botol

·      Pipet ukur

·      Tabung reaksi

·      Rak tabung

·      Beaker glass

·      Pipet

B.     Bahan :

·         Paracetamol

·         Urin

·         Sarung tangan

·         Masker

 

2.2.   Metode Kerja

A.    Pemberian Paracetamol dengan Pengumpulan Urin

Cuplikan urin harus dikumpulkan selama waktu 6 jam. Probandus dapat meminum obat dan dapat mengumpulkan cuplikan urin sehari sebelum dianalisis. Cuplikan urin dapat disimpan selama 1 malam pada suhu 40C tanpa penguraian yang berarti.

1.      Untuk menjaga aliran urin, subjek harus minum 200 ml air setelah 30 menit. Cuplikan ini digunakan sebagai blanko, catat volumenya.

2.      Paracetamol 500 mg diminum dengan 200 ml air dan waktu mulai dicatat. Ini adalah waktu jam ke nol.

3.      Setelah 1 jam, kandung kemih dikosongkan, banyaknya volume urin diukur dan dicatat serta ditandai. Ambil kurang lebih 15 ml. Probandus minum 200 ml air.

4.      Prosedur yang sama (seperti angka 3) diulang dengan interval waktu: 2,3,4,5 dan 6 jam.

 

B.     Analisis Cuplikan Paracetamol Total dalam Urin

1.      Tentukan kadar paracetamol total dalam cuplikan urin pada masing-masing interval waktu yang telah ditentukan (jam ke-1, 2, 3, 4, 5 dan 6). Untuk penetapan kadarnya:

§  Ambil 1 ml cuplikan urin dan tambahkan 4 ml HCL 4 M kedalam tabung reaksi.

§  Cukupkan volumenya menjadi 10 ml dengan aquadestcampur homogen.

§  Lakukan pembacaan serapan pada panjang gelombang 252 nm.

§  Lakukan duplo.

2.      Selanjutnya hitung parameter farmakokinetik paracetamol.

 

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

 

IV.1 Data Pengamatan

Waktu interval

(jam)

Vu

(mL)

Cu

(mg/mL)

Du

(mg)Dukum Du˜-Dukum

Ln(Du˜-Dukum)

0-8,5 80 0,0726 5,808 5,808 8,839 2,17928,5-9,5 50 0,0637 3,185 8,993 5,654 1,73249,5-10,5 50 0,0645 3,225 12,218 2,429 0,8875

10,5-11,5 100 0,0119 1,19 13,408 1,239 0,214311,5-12,5 70 0,0049 0,343 13,751 0,896 -0,109812,5-13,5 70 0,0128 0,896 14,647 0 -

 

Nilai Serapan Sampel

Sampel Ao

1 1,4212 1,2473 1,2644 0,2425 0,1086 0,259

 

Tabel Regresi Linear

X= Waktu interval (jam) Y= Ln(Du˜-Dukum)

8,5 2,1792

9,5 1,7324

10,5 0,8875

11,5 0,2143

12,5 -0,1098

 

IV.2 Perhitungan

X = Cu =

X1 =  = 72,6367

X2 =  = 63,6723

X3 =  = 64,5481

X4 =  = 11,8948

X5 =  = 4,9912

X6 =  = 12,7707

Regresi:

b = -0,60961

kel =  - (-0,60961) = 0,60961

t1/2 =  = 1,1368

 

IV.2 Pembahasan

Pada praktikum kali ini, kami melakukan uji analisis parasetamol dalam urin. Sebelum meminum paracetamol probandus berpuasa selama 6 jam. Hal ini dilakukan agar parasetamol yang diberikan secara oral diserap secara cepat dan mencapai kadar serum puncak, adanya makanan dalam lambung akan sedikit memperlambat penyerapan sediaan parasetamol lepas lambat.Menggunakan larutan parasetamol dengan konsentrasi larutan induk 0,01 mg/ml. Konsentrasi yang telah dibuat diukur serapannya menggunakan spektrofotometer.

Setelah perlakuan di atas, sampel diambil untuk diukur serapannya pada spektrofotometer dengan panjang gelombang maksimum 252 nm. Hasil nilai serapan tersebut dimasukkan dalam rumus regresi linear y = bx + a , dimana y adalah nilai serapan dan nilai x yang diperoleh adalah konsentrasi paracetamol dalam urin (mg/mL). Dari nilai x tersebut ditentukan nilai Ln(Du˜-Dukum) kemudian dimasukkan dalam grafik regresi linear antara waktu dan Ln(Du˜-Dukum). Dari hasil perhitungan regresi yang diperoleh, didapatkan nilai b = -0,60961 untuk dihitung nilai t1/2 dan diperoleh sebesar 1,1368 jam. Hasil tersebut memenuhi syarat t1/2 untuk paracetamol yaitu 1-3 jam. Waktu paruh sangat penting untuk menentukan  interval dosis

 

BAB V

KESIMPULAN

 

1.      Konstanta eliminasi menunjukkan kecepatan eliminasi obat dalam tubuh.

2.      Waktu paruh adalah waktu yang dibutuhkan untuk mengeliminasi obat dari tubuh.

3.      Waktu paruh dan kecepatan eliminasi dapat ditentukan dengan mengetahui konsentrasi obat dalam urin (cairan biologis)

 

 

DAFTAR PUSTAKA

 

Rustiani, E., Rokhmah, NN., Fatmi, M., 2011. Penuntun Praktikum Farmakokinetik. Bogor: Universitas Pakuan

Isselbacher, dkk., Prinsip-prinsip Ilmu Penyakit Dalam. Jakarta: penerbit Buku Kedokteran.

Shargel Leon, Yu Andrew B.C. 2005. Biofarmasetika dan Farmakokinetik Edisi ke-2. Airlangga University Press.