bab iv v dapus lampiran

55

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

4. 1. Karakteristik Es Krim Sinbiotik Rendah Lemak

4. 1. 1. Overrun

Overrun adalah peningkatan jumlah volume es krim yang disebabkan oleh

masuknya gelembung-gelembung udara dalam pembuihan (aerasi). Es krim yang

menggunakan whipping cream yang dikombinasikan dengan gum arab memiliki nilai

overrun berkisar antara 18,66% - 21,22%. Pengaruh whipping cream dan gum arab

yang ditambahkan pada proporsi yang berbeda-beda terhadap overrun es krim dapat

dilihat pada Gambar 10.

Gambar 10. Pengaruh proporsi whipping cream : gum arab terhadap overrun es krim sinbiotik rendah lemak

Keterangan :

P0 = Proporsi gum arab : whipping cream ( 0 : 10) % P1 = Proporsi gum arab : whipping cream ( 6 : 4) % P2 = Proporsi gum arab : whipping cream ( 7 : 3) %

P3 = Proporsi gum arab : whipping cream ( 8 : 2) % P4 = Proporsi gum arab : whipping cream ( 9 : 1) %

Gambar 10. menunjukkan bahwa nilai overrun es krim cenderung menurun

akibat peningkatan proporsi gum arab dan penurunan proporsi whipping cream . Nilai

rerata overrun es krim tertinggi diperoleh pada proporsi penggunaan gum arab dan

whipping cream (0:10) sebesar 21,22%. Dan nilai rerata overrun terendah diperoleh

21.22

19.83

19.02 18.9 18.655

1516171819202122232425

P0 P1 P2 P3 P4

over

run

Proporsi Gum Arab : Whipping Cream

P0P1P2P3P4

56

pada proporsi penggunan gum arab dan whipping cream (9:1) sebesar 18,66%. Dan

dari analisa sidik ragam terdapat pengaruh yang nyata antar perlakuan (BNT ά =

0,05) terhadap overrun es krim yang dihasilkan.

Meningkatnya proporsi gum arab menyebabkan penurunan nilai overrun es

krim dikarenakan dalam pembuatan es krim gum arab digunakan untuk meningkatkan

kekentalan dan viskosits Ice Cream Mix (ICM). Viskositas Ice Cream Mix (ICM)

berpengaruh terhadap overrun dalam pembuatan es krim. Viskositas tinggi

menyebabkan es krim sulit mengembang, sehingga akan menghasilkan overrun yang

rendah (Eckles et al, 1984). Peningkatan konsentrasi subtitusi whipping cream

dengan gum arab dapat meningkatkan kekentalan (viskositas) ICM sehingga semakin

membatasi mobilitas molekul air karena ruang antar partikel di dalam ICM menjadi

semakin sempit. Sempitnya ruang antar partikel menyebabkan udara yang masuk ke

dalam ICM selama agitasi semakin sedikit sehingga nilai overrun yang dihasilkan

semakin rendah

Selain itu, gum arab juga menurunkan titik beku adonan es krim meski tak

sebesar sukrosa. Penurunan titik beku ini diduga menjadi penyebab menurunnya

overrun es krim dengan semakin meningkatnya gum arab yang ditambahkan. Adonan

es krim yang tidak segera membeku akan memudahkan udara untuk masuk ke dalam

adonan es krim ketika proses pengadukan dalam Ice Cream Maker, tetapi udara yang

terperangkap tersebut juga akan mudah keluar karena adonan es krim tidak segera

membeku. (Kuntz, 1997) menyatakan bahwa penurunan titik beku dapat

menyebabkan terjadinya efek negatif diantaranya adalah dapat menghambat aerasi

dan meningkatkan jumlah energi yang dibutuhkan untuk membekukan produk. Dalam

penelitiannya, Dubey and White (1997) menyatakan bahwa seiring dengan

57

membekunya es krim, jaringan kristal es memberikan ketegaran (rigidity) pada

produk. Oleh karena itu jika titik beku adonan es krim semakin rendah maka adonan

es krim tidak akan cepat membeku sehingga udara yang dimasukkan akan mudah

keluar dari produk karena kurangnya ketegaran produk.

4. 1. 2. Kecepatan Meleleh

Kecepatan meleleh menjadi salah satu parameter mutu untuk es krim. Pada

penelitian ini kecepatan meleleh diukur pada suhu ruang (29 ± 0,3oC) dengan

kelembaban rata-rata 63,25%. Kecepatan meleleh es krim yang dihasilkan dari

penggunaan kombinasi gum arab dan whipping cream pada proporsi yang berbeda-

beda berkisar antara 3,28 – 2,35 (g/menit). Kecenderungan kecepatan meleleh es krim

yang dihasilkan tersebut dapat dilihat pada Gambar 11.

Gambar 11. Pengaruh proporsi whipping cream:gum arab terhadap kecepatan meleleh es krim sinbiotik rendah lemak

Keterangan :P0 = Proporsi gum arab : whipping cream ( 0 : 10) % P1 = Proporsi gum arab : whipping cream ( 6 : 4) % P2 = Proporsi gum arab : whipping cream ( 7 : 3) %


3.280

2.446 2.384 2.353 2.352

0

1

2

3

4

P0 P1 P2 P3 P4

Kec

. Mel

eleh

(g/

men

it)


P0P1P2P3P4

58

Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa penambahan gum arab dan

whipping cream pada proporsi penambahan yang berbeda memberikan pengaruh

yaang nyata antar perlakuan (ά = 0,05) terhadap kecepatan meleleh es krim yang

dihasilkan.

Gambar 11. menunjukkan bahwa kecepatan meleleh es krim cenderung

menurun dengan semakin tingginya konsentrasi (penambahan) gum arab dan semakin

rendahnya konsentrasi whipping cream. Kecepatan meleleh tertinggi diperoleh pada

penggunaan proporsi gum arab : whipping cream (0:10) atau perlakuan kontrol yaitu

sebesar 3,28 g/menit. Sedangkan kecepatan meleleh terendah diperoleh dari

perlakuan P4, penggunaan proporsi gum arab : whipping cream (9:1) yang

digunakan, yaitu sebesar 2,352 g/menit.

Menurut Anonymous (2004), kecepatan meleleh es krim dipengaruhi oleh

beberapa faktor diantaranya adalah jumlah udara yang masuk ke dalam es krim

(overrun) dan banyaknya jaringan globula lemak yang terbentuk selama proses

pembekuan.

Menurut Jeremiah (1996), lemak menghasilkan tekstur yang lembut dimana

lemak yang ada tersebar merata dengan ukuran yang homogen dan relatif kecil,

membantu memberikan “body” dan membantu menghasilkan titik leleh yang

diinginkan. Produk dengan nilai overrun atau lemak yang tinggi cenderung kecepatan

lelehnya tinggi karena lemak dapat mentasbilkan struktur buih.

Perlakuan kontrol memiliki nilai kecepatan meleleh tertinggi (3,28 g/menit).

Hal ini dikarenakan es krim pada perlakuan kontrol memiliki total lemak tertinggi

dan sama sekali tidak menggunakan gum arab. Inilah yang membedakan antara es

59

krim perlakuan kontrol dengan es krim perlakuan yang lain. Gum arab merupakan

pengemulsi dan penstabil tekstur es krim. Penggunaan gum arab diharapkan mampu

memperkuat stabilitas tekstur es krim sehingga es krim tidak akan mudah mencair.

Tanpa adanya gum arab, dan hanya memanfaatkan penstabil original awal yaitu

CMC, es krim perlakuan kontrol akan memiliki kestabilan tekstur paling rendah bila

dibandingkan es krim dari perlakuan-perlakuan yang menggunakan gum arab.

Peningkatan konsentrasi gum arab yang ditambahkan menyebabkan

peningkatan waktu meleleh es krim sehingga kecepatan melelehnya menurun. Hal ini

ditunjukkan pada kecepatan meleleh es krim yang menggunakan subtitusi whipping

cream dengan gum arab. Semakin meningkat penggunaan gum arab untuk

mensbtitusi penggunaan whipping cream, semakin menurun kecepetan meleleh es

krim yang dihasilkan. Hal ini dikarenakan gum arab merupakan hidrokoloid yang

sangat mudah larut dengan air bahkan air dingin membentuk larutan gel. Dalam

bentuk gel, gum arab memiliki kemampuan yang baik untuk mengikat air. Setelah

proses pembekuan air yang terikat dalam struktur koloid gum arab akan membeku

sehingga akan sulit mencair atau meleleh.

Selain itu, gum arab yang merupakan pengemulsi (Akoh, 1999) menyebabkan

jumlah emulsi di dalam es krim berlebihan. Menurut Pearson (2005), es krim akan

sukar meleleh apabila menggunakan pengemulsi yang berlebihan. Hal ini disebabkan

lebih banyaknya air yang terikat oleh gugus hidrofilik pengemulsi dalam sistem

emulsi yang sangat kuat.

60

4. 1. 3. Total Asam

Total asam menjadi parameter penting dalam menentukan keberhasilan proses

fermentasi pada produk fermentasi seperti es krim sinbiotik. Rerata total asam es krim

sinbiotik rendah lemak yang menggunakan gum arab yang diproporsikan dengan

whipping cream berkisar antara 1,42% – 1,65%. Kecenderungan pengaruh gum arab :

whipping cream yang ditambahkan pada proporsi yang berbeda-beda, terhadap total

asam produk es krim sinbiotik rendah lemak dapat dilihat pada Gambar 12.

Gambar 12. Pengaruh proporsi whipping cream:gum arab terhadap total asam es krim sinbiotik rendah lemak



Gambar 12. menunjukkan bahwa semakin besar proporsi gum arab dari

whipping cream, yang ditambahkan, semakin meningkat total asam es krim sinbiotik

rendah lemak meski tidak terlalu signifikan. Nilai total asam tertinggi dari produk

diperoleh dari pemakaian proporsi gum arab : whipping cream (9:1). Sedangkan nilai

total asam produk terendah diperoleh dari pemakaian gum arab : whipping cream

1.5375

1.39

1.6 1.591.6525

1

1.2

1.4

1.6

1.8

2

P0 P1 P2 P3 P4

Tot

al A

sam


P0P1P2P3P4

61

proporsi (0:10) yang digunakan sebagai produk kontrol.

Peningkatan proporsi gum arab dapat meningkatkan total asam es krim meski

tidak signifikan dikarenakan gum arab merupakan polisakarida yang tersusun atas

beberapa komponen seperti arabinogalactan oligosakarida dan galaktosa. Pada proses

pembuatan es krim sinbiotik rendah lemak terdapat subproses fermentasi yang

melibatkan bakteri asam laktat yakni Bifidobactrium bifidum dan Lactobacillus

acidophillus. Kedua jenis bakteri tersebut tergolong bakteri asam laktat yang mampu

mengkonversi substrat gula utamanya laktosa dan turunannya seperti galaktosa

menjadi asam-asam laktat dan mebatabolit lainnya selama fermentasi. Menurut

Ganapathi (2007), gum arab yang tersusun salah satunya dari arabinogalactan

oligosakarida dan galaktosa mampu dirombak oleh enzim ß-galaktosidase yang

dihasilkan oleh Bifidobacterim bifidum dan Lactobacillus acidophillus, menjadi

asam-asam organik seperti asam laktat, asam asetat, propionat, butirat. Wood (1998)

menambahkan bahwa galaktosa akan diubah menjadi glukosa-6-fosfat melalui jalur

Leloir dan kemudian bersamaan dengan glukosa difermentasi melalui glikolisis

membentuk asam laktat. Produk asam-asam organik inilah yang menyebabkan nilai

total asam produk es krim.

Perubahan nilai total asam yang tidak terlalu signifikan dari penggunaan gum

arab : whipping cream dalam pembuatan es krim sinbiotik rendah lemak, meski

subtitusi gum arab terhadap whipping cream semakin meningkat, disebabkan oleh

whipping cream juga memiliki peran yang sama dengan gum arab. Whipping cream

mengandung beberapa komponen seperti lemak, protein, dan laktosa (Nutrition Data,

2008). Komponen-komponen tersebut dapat dikonversi oleh bakteri asam laktat

selama proses fermentasi menjadi asam-asam organik seperti asam lemak, asam

62

amino, dan asam laktat.

4. 1. 4. pH

Dengan meningkatnya jumlah asam yang diekskresikan oleh BAL karena

proses akumulasi asam dalam substrat, maka akan meningkatkan keasaman substrat.

Peningkatan akumulasi asam dalam substrat ini dapat diketahui dengan penurunan pH

substrat.

Perubahan total asam berbanding terbalik dengan perubahan pH. Pengaruh

penggunaan gum arab : whipping cream pada proporsi yang berbeda-beda terhadap

nilai total asam es krim sinbiotik rendah lemak, akan berbanding terbalik

pengaruhnya terhadap pH produk tersebut. Pada penelitian ini diketahui nilai pH es

krim sinbiotik rendah lemak berkisar antara 5,11 – 5,25. Kecenderungan pH es krim

sinbiotik rendah lemak yang menggunakan gum arab : whipping cream dalam

proporsi yang berbeda-beda disajikan pada Gambar 13.

Gambar 13. Pengaruh proporsi whipping cream:gum arab terhadap pH es krim sinbiotik rendah lemak

5.245 5.22755.205

5.1825

5.1125

5

5.1

5.2

5.3

5.4

5.5

P0 P1 P2 P3 P4

pH


P0P1P2P3P4

63



Gambar 13. menunjukkan bahwa proporsi yang berbeda-beda dari

penggunaan gum arab : whipping cream tidak terlalu mempengaruhi pH es krim

sinbiotik rendah lemak secara signifikan meski terjadi penurunan pH dengan semakin

meningkatnya proporsi gum arab dan semakin berkurangnya proporsi whipping

cream. Nilai pH terbesar didapatkan dari proporsi penggunaan gum arab : whipping

cream (0:10) sebesar 5,25 dan nilai pH terkecil didapatkan pada proporsi penggunaan

gum arab : whipping cream (9:1) yakni sebesar 5,11.

Sama halnya pada kasus total asam, besarnya nilai pH dipengaruhi oleh nilai

total asam yang tertera pada produk. Semakin besar nilai total asam produk, semakin

kecil nilai pH produk tersebut. Dalam hal ini, pH dipengaruhi oleh keberadaan asam-

asam organik seperti asam laktat, asetat yang merupakan produk (metabolit) hasil

fermentasi Ice Cream Mix (ICM) oleh bakteri asam laktat probiotik, Bifidobacterium

bifidum dan Lactobacillus acidophillus. Sebagaimana disebutkan bahwa gum arab

tersusun atas galaktosa, dan menurut Wood (1998) galaktosa akan diubah menjadi

glukosa-6-fosfat melalui jalur Leloir dan kemudian bersamaan dengan glukosa

difermentasi melalui glikolisis membentuk asam laktat. Rahman (1992)

menambahkan asam laktat yang terbentuk akan menyebabkan penurunan nilai pH.

Sama besarnya peranan gum arab maupun whipping cream yang digunakan,

untuk dikonversi oleh kedua jenis bakteri asam laktat tersebut selama fermentasi,

menjadi penyebab penurunan pH es krim sinbiotik rendah lemak yang tidak

signifikan (tidak berbeda nyata antar perlakuan).

64

4. 1. 5. Total Lemak

Total lemak menjadi parameter yang penting dari produk yang berbasis

rendah lemak seperti es krim rendah lemak. Rerata kadar lemak es krim sinbiotik

rendah lemak yang menggunakan bahan pengganti lemak berbasis gum arab yang

dikombinasikan dengan whipping cream pada proporsi yang berbeda-beda, berkisar

antara 0,89 % - 9,66%. Kecenderungan kadar lemak akibat perlakuan proporsi gum

arab dan whipping cream yang berbeda-beda disajikan pada Gambar 14.

Gambar 14. Pengaruh proporsi whipping cream:gum arab terhadap kadar lemak es krim sinbiotik rendah lemak



Gambar 14. menunjukkan bahwa semakin tinggi proporsi gum arab dan

semakin rendah proporsi whipping cream yang digunakan, kadar lemak es krim

semakin menurun (rendah). Penurunan kadar lemak secara drastis dan sangat nyata (ά

= 0,01) ditunjukkan pada proporsi gum arab:whipping cream dari (0:10) yang sebesar

9.8925

3.8952.9

1.90750.8125

0

3

6

9

12

P0 P1 P2 P3 p4

Kad

ar L

emak

(%)


P0P1P2P3p4

65

9,89% ke (6:4) yang sebesar 3,9%. Hal ini bisa dihubungkan dengan perbandingan

konsentrasi gum arab terhadap whipping cream yang ditambahkan turun begitu

drastis dari (0:10) ke (6:4), serta adanya aktivitas lipolitik oleh bakteri asam laktat

(Jay, 1992).

Gum arab merupakan jenis karbohidrat yaang tak memiliki kadar lemak sama

sekali. Penambahan gum arab pada adonan es krim tidak akan mempengaruhi jumlah

lemak es krim yang dihasilkan. Oleh karena itu, bahan yang termasuk dalam faktor

kajian di penelitian ini yang paling berperan adalah whipping cream, karena whipping

cream digunakan sebagai sumber lemak susu dalam bentuk bubuk di pembuatan es

krim. Hal ini bisa dilihat dari kisaran kadar lemak es krim (Gambar 16.) yang hampir

mendekati variasi penambahan whipping cream (10%, 4%, 3%, 2%, dan 1%).

Lebih rendahnya kadar lemak hasil analisa dengan jumlah whipping cream

yang ditambahkan pada proses awal dapat dihubungkan pada kadar lemak total dalam

whipping cream yang memang tidak sama dengan berat total whipping cream itu

sendiri. Menurut Nutrition Data (2008) whipping cream mengandung lemak total

sebesar 21%. Selain itu, pada proses pembuatan es krim sinbiotik rendah lemak,

terdapat sub proses fermentasi atau inkubasi adonan es krim oleh bakteri asam laktat

(Bifidobacterium bifidum dan Lactobacillus acidophillus) yang diduga terjadi

aktivitas lipolitik, memecah substrat lemak yang terdapat pada adonan es krim,

menjadi asam-asam lemak bebas, sehingga kadar lemak es krim yang dihasilkan

menurun. Pernyataan ini didukung Astawan (2004) yang menyatakan bahwa lemak

susu dapat dibiarkan menjadi asam secara spontan melalui penambahan inokulum

murni bakteri asam laktat pada proses fermentasi.

66

4. 1. 6. Total Bakteri Asam Laktat (BAL)

Total mikroorganisme probiotik menjadi parameter mutu yang utama dari

produk berbasis probiotik maupun sinbiotik. Pada penelitian ini jenis mikroorganisme

probiotik yang digunakan dalam pembuatan es krim sinbiotik rendah lemak ialah

bakteri yang tergolong dalam kelompok bakteri asam laktat, yakni spesies

Bifidobacterium bifidum dan Lactobacillus acidophillus. Proporsi gum arab :

whipping cream yang berbeda-beda dalam pembuatan es krim sinbiotik rendah lemak

mempengaruhi total bakteri asam laktat (BAL) yang dihasilkan. Total bakteri asam

laktat (BAL) es krim sinbiotik rendah lemak berkisar antara 8,76 (Log CFU/g) hingga

8,97 (Log CFU/g). Pengaruh penggunaan gum arab sebagai bahan pengganti lemak

sekaligus prebiotik, yang dikombinasikan dengan whipping cream pada proporsi yang

berbeda-beda, terhadap total bakteri asam laktat (BAL) es krim sinbiotik rendah

lemak dapat dilihat pada Gambar 15.

Gambar 15. menunjukkan bahwa proporsi gum arab yang semakin meningkat

dan proporsi whipping cream yang semakin berkurang meningkatkan total bakteri

asam laktat (BAL) yang dalam hal ini mewakili total bakteri Bifidobacterium bifidum

dan Lactobacillus acidophillus. Total BAL tertinggi didapatkan dari penggunaan gum

arab : whipping cream proporsi 9:1 sebesar 8,94 log CFU/g. Sedangkan Total BAL

terendah didapatkan dari penggunaan gum arab : whipping cream proporsi 0:10 untuk

produk kontrol sebesar 8,36 log CFU/g. Dari hasil analisa sidik ragam terdapat

perbedaan yang sangat nyata (BNT ά = 0,01) antar perlakuan.

67

Gambar 15. Pengaruh proporsi whipping cream:gum arab terhadap total BAL es krim sinbiotik rendah lemak



Proporsi gum arab yang meningkat menyebabkan peningkatan total bakteri

asam laktat (BAL). Hal ini dikarenakan gum arab mengandung beberapa komponen

penyusun serat seperti D-galaktosa (Furia, 1983), dan arabinogalaktan oligosakarida

(Caphlin, 2008), sehingga gum arab disebut sebagai prebiotik, sebagaimana yang

disebutkan oleh Jayanata (2008) bahwa prebiotik pada umumnya adalah karbohidrat

yang tidak dicerna dan tidak diserap, biasanya dalam bentuk oligosakarida dan serat

pangan. Bakteri asam laktat spesies Bifidobacterium bifidum dan Lactobacillus

acidophillus yang digunakan dalam penelitian ini merupakan bakteri probiotik.

Pertumbuhan bakteri probiotik di saluran pencernaan akan meningkat apabila

didukung dengan prebiotik. Meski tidak terjadi di dalam saluran pencernaan, gum

arab yang merupakan prebiotik terbukti dapat meningkatkan pertumbuhan bakteri

asam laktat dalam produk es krim sinbiotik rendah lemak. Pengunaan komponen

8.307

8.5448.596 8.595

8.652

8

8.2

8.4

8.6

8.8

9

P0 P1 P2 P3 P4

Total BAL (Log CFU/g)

Perlakuan

P0P1P2P3P4

68

galaktosa dan oligosakarida penyusun gum arab oleh bakteri asam laktat sebagai

substrat tambahan selama fermentasi menjadi faktor peningkatan total bakteri

tersebut. Sebagaimana disebutkan Astawan (2000) bahwa mikroorganisme

membutuhkan makanan atau substrat untuk mendukung pertumbuhannya. Dengan

memperkaya substrat berarti meningkatkan pertumbuhan mikroorganisme tersebut.

Fermentasi gum arab juga menyebabkan nilai pH produk menurun (Gambar

17) pada kisaran 5,11 – 5,25. Pada kisaran pH ini, bakteri asam laktat eksistensinya

lebih dominan dikarenakan mikroorgansime pesaing yang tidak stabil pada pH rendah

tidak dapat tumbuh. Sebagaimana menurut Foodsci (2001) bahwa Bifidobacterium

bifidum dan Lactobacillus dapat tumbuh optimum pada kisaran pH 4-5.

4. 2. Pemilihan Perlakuan Terbaik untuk Analisa Karakteristik Es Krim

Sinbiotik Rendah Lemak

Pemilihan perlakuan terbaik dilakukan untuk mengetahui es krim sinbiotik

rendah lemak yang memiliki kualitas terbaik, yang selanjutnya dipilih untuk

pengujian efek sinbiotiknya melalui pengujian in vivo. Pemilihan perlakuan terbaik

menggunakan metode rangking (De Garmo, et. al., 1984). Dan dari metode tersebut

perlakuan P1 yakni penggunaan gum arab : whipping cream proporsi (6:4) menjadi

perlakuan terbaik pertama dengan nilai 0,533, dan perlakuan P3 yakni penggunaan

gum arab : whipping cream proporsi (8:2) menjadi perlakuan terbaik kedua dengan

nilai 0,530.

69

Tabel 11. Data Hasil Uji Perlakuan Terbaik

Parameter P1 P3 P0 P2 P4 Overrun (%) 19,83 18,9 21,22 19,02 18,66 Kec Meleleh (g/menit) 0,4055 0,417 0,391 0,426 0,448 PH 5,2275 5,183 5,245 5,205 5,113 Total Asam (%) 1,39 1,59 1,5375 1,6 1,653

Total Lemak (%) 3,895 1,908 9,8925 2,9 0,813 Total BAL (Log CFU/g) 8,91988 8,937 8,7578 8,934 8,973 Nilai Perlakuan (NP) 0,533 0,530 0,511 0,493 0,470 Urutan 1 2 3 4 5

4. 3. Uji Invivo

Pengujian secara biologis biasanya menggunakan hewan coba untuk

membantu menjalankan penelitian yang tidak bisa secara langsung dilakukan dalam

tubuh manusia dengan asumsi semua jaringan, sel-sel penyusun tubuh serta enzim-

emzim yang ada dalam tubuh hewan coba memiliki kesamaan dengan manusia

(Arrington, 1972). Pada penelitian ini digunakan hewan tikus wistar sebagai hewan

percobaan. Sebanyak 12 ekor tikus wistar dengan pembagian : 4 ekor untuk

percobaan tikus yang diberi pakan standart saja (tikus control) dengan empat kali

ulangan, 4 ekor untuk percobaan tikus yang diberi pakan standart dan medium sonde

es krim probiotik (es krim kontrol) dengan empat kali ulangan, dan 4 ekor untuk

percobaan tikus yang diberi pakan standart dan medium sonde es krim sinbiotik (es

krim dengan nilai perlakuan terbaik) dengan empat kali ulangan juga. Selain meneliti

peningkatan akumulasi berat badan tikus yang dilakukan secara periodic (hari ke-0,

ke-15, dank e-30), pengujian in vivo dalam penelitian ini juga meneliti tentang

parameter-parameter yang bisa menunjukkan adanya efek sinbiotik dari medium

sonde es krim sinbiotik dalam saluran pencernaan tikus. Total bakteri asam laktat

70

digesta dan feses tikus, total asam digesta, ph digesta dan feses, profil asam-asam

organik SCFA digesta cukup mewakili sebagai parameter efek sinbiotik mendium

sonde yang diberikan bersama pakan standart.

4. 3. 1. Data Analisa Medium Sonde

Terdapat dua jenis medium sonde yang digunakan pada pengujian invivo di

penelitian ini yaitu es krim probiotik (es krim kontrol pada pengujian sifat fisikokimia

es krim sinbiotik rendah lemak) dan es krim sinbiotik (es krim pada es krim

perlakuan terbaik pada pengujian sifat fisikokimia es krim sinbiotik rendah lemak).

Medium sonde yang berisi es krim probiotik ini digunakan pada formula 1 (F1),

dimana tikus wistar diberikan pakan standart bersama medium sonde es krim

probiotik. Sedangkan medium sonde yang isinya es krim sinbiotik, digunakan pada

formula 2 (F2), yang diberikan setelah tikus diberi makan pakan standart.

Tabel 12. Jenis-jenis Formulasi Pakan yang Diberikan Kepada Tikus

Formulasi Pakan

Keterangan

Kontrol Pakan Standart (Tanpa Medium Sonde) Formula 1 Pakan Standart + Medium Sonde Es Krim Probiotik Formula 2 Pakan Standart + Medium Sonde Es Krim Sinbiotik

Rendah Lemak

Tikus yang hanya diberi pakan standart saja disebut tikus kontrol (K). Tikus

kontrol dalam penelitian ini digunakan sebagai perwakilan tikus yang tidak

mengkonsumsi medium sonde es krim probiotik maupun es krim sinbiotik rendah

lemak pada pengujian hari ke-30, sehingga digesta dan fesesnya bisa dianggap sama

dengan digesta dan feses tikus wistar pada hari ke-1 meski setelah 30 hari

71

pengamatan.

Dan berikut adalah data analisa total BAL, total asam, pH, dan totak gula

dari medium sonde yang digunakan pada pengujian in vivo di penelitian ini.

Tabel 13. Data Analisa Awal Medium Sonde

4. 3. 2. Analisa Berat Badan Tikus

Pengaruh pemberian formula perlakuan pakan (Kontrol, Formula 1, Formula

2) terhadap berat badan tikus dinyatakan sebagai akumulasi peningkatan berat badan

tikus. Akumulasi ini diperoleh dari selisih antara berat badan tikus setelah diberi

perlakuan selama 30 hari dengan sebelum diberi formula perlakuan. Berat badan tiap

kelompok tikus ditimbang setiap 10 hari sekali. Penimbangan dilakukan setelah akhir

pemberian pakan standar (AIN-93M). Pakan standar merupakan pakan yang

diberikan selama masa adaptasi yaitu 10 hari. Kurva rerata akumulasi peningkatan

berat badan tikus selama 30 hari pemberian formula perlakukan tercantum pada

gambar 16.

ParameterSonde untuk F1 Sonde untuk F2

SatuanEs Krim Probiotik Es Krim SinbiotikTotal BAL 8,76 8,93 Log (CFU/g)Totakl Asam 1,54 1,6 %PH 5,25 5,21Total gula 15,66 12,48 %

72

Gambar 16. Gravik rerata akumulasi peningkatan berat badan tikus selama 30 Hari Pemberian Perlakuan Formula Pakan

Tabel 14. Akumulasi Peningkatan Berat Badan Tikus

Perlakuan

Akumulasi Peningkatan Berat Badan Tikus Hari ke- (G)

0 10 20 30 K 0 5,09 14,3525 20,88 F1 0 4,6475 16,635 23,7775 F2 0 3,22 11,6675 20,4175

Keterangan :

Formula 1 = Pakan standar + Es Krim Kontrol (Tanpa Penambahan Gum Arab) Formula 2 = Pakan standar + Es Krim Perlakuan Terbaik (Ada Penamabahan Gum Arab 6%) Kontrol = Pakan standar tikus (AIN-93M)

Berdasarkan Gambar 16 diketahui bahwa dari awal sampai akhir

pengamatan, rerata berat badan semua kelompok tikus mengalami peningkatan. Akan

tetapi berat badan tikus berbeda-beda tergantung formula pakan. Dan berdasarkan uji

BNT, nilai rerata akumulasi berat badan tikus baik di hari ke-0, hari ke-10, hari ke-20,

hari ke-30 pengamatan tidak ada yang memiliki perbedaan yang nyata. Rerata

0

5.09

14.35

20.88

0

4.65

16.64

23.78

03.22

11.67

16.76

0

10

20

30

0 10 20 30Aku

mul

asi p

enin

gkat

an b

erat

bad

an

(g)

Hari Ke -

K

F1

F2

73

akumulasi peningkatan berat badan tikus tiap 10 hari sekali tersaji pada tabel 14.

Dari Gambar 16. dan Tabel 14. dapat diketahui bahwa berat badan tikus

secara keseluruhan mengalami peningkatan setelah diberi perlakuan formula pakan

yang berbeda-beda selama 30 hari. Rerata akumulasi peningkatan berat badan tikus

dari hari ke-0 pengamatan hingga hari ke-30 pengamatan nilainya berbeda tergantung

dari jenis formula pakan yang diberikan.

Tikus yang diberi perlakuan formula pakan standar dan es krim sinbiotik

(Formula 2/F2), rerata akumulasi berat badannya terendah bila dibandingkan dengan

tikus yang diberi dua perlakuan yang lain (Kontrol dan F1). Hal ini disebabkan

karena pada formula pakan 3 (F3) dipakai medium sonde yaitu es krim sinbiotik,

selain pakan standar tikus. Adanya sifat fungsional sinbiotik, yaitu kombinasi dari

probiotik dan prebiotik, dari medium sonde di formula 3 menyebabkan mekanisme

pencernaan tikus bekerja lebih baik daripada tikus-tikus yang diberi dua perlakuan

lainnya (Kontrol dan F2). Dari Tabel 14. diketahui bahwa total BAL medium sonde

untuk Formula 2, tertinggi dibandingkan untuk formula 1. Bakteri asam laktat yang

berperan sebagai probiotik. Sesuai manfaat kesehatan dari probiotik menurut Jayanata

(2002) yaitu menjaga kesehatan saluran pencernaan manusia dan mamalia dengan

memfermentasi komponen-komponen serat tak tercerna serta digesta yang sulit

dicerna di saluran pencernaan. Apabila pencernaan tikus lancar, maka sistem

pengeluaran/pembuangan tikus juga lancar sehingga tikus tersebut akan mengalami

peningkatan berat badan normal.

Rerata akumulasi berat badan tikus yang diberi perlakuan formula 1 (pakan

standar dan es krim probiotik) memiliki nilai rerata akumulasi berat badan tertinggi

bila dibandingkan dengan dua perlakuan yang lain (Kontrol dan F2). Hal ini

74

disebabkan karena untuk formula 2, digunakan medium sonde es krim probiotik.

Meski memiliki sifat fungsional probiotik yang mampu menjaga kesehatan saluran

pencernaan, sehingga sistem pencernaan dan sistem pengeluaran berjalan dengan

baik, yang membuat berat badan tikus tidak akan meningkat drastis, namun es krim

probiotik tidak diformulasi juga dengan prebiotik gum arab seperti pada medium

sonde untuk Formula 2 (F2). Es krim probiotik (tanpa prebiotik gum arab) memiliki

total BAL (probiotik) lebih rendah bila dibandingkan Es krim sinbiotik (medium

sonde untuk Formula 2) karena alasan prebiotik gum arab yang mampu menjaga

viabilitas dan meningkatkan jumlah bakteri asam laktat (BA:). Hal ini dapat dilihat

pada Tabel 17. Lebih rendahnya total BAL inilah yang menyebabkan sistem

pencernaan tikus yang diberi pakan dengan formula1 tidak lebih baik dari sistem

pencernaan dan pengeluaran tikus yang diberi pakan dengan formula 2. Selain itu,

karena jumlah bakteri asam laktat (BAL) yang lebih rendah dari es krim sinbiotik,

jumlah komponen lemak dan gula yang terdapat di es krim probiotik pun pasti lebih

tinggi dibandingkan dengan es krim sinbiotik, yang juga dapat dilihat pada Tabel 17.

Komponen lemak dan gula inilah yang turut meningkatkan berat badan tikus yang

diberi perlakuan formula pakan 1 (F1).

Gum arab dalam es krim sinbiotik rendah lemak yang digunakan sebagai

medium sonde pada formula pakan 2 (F2) merupakan salah satu serat pangan.

Konsumsi serat makanan berhubungan dengan penurunan absorpsi kolesterol,

fermentasi dan peningkatan pelepasan asam empedu. Pektin murni, hidroksimetil

selulosa dan guar gum serta _-glukan menurunkan absorpsi kolesterol sebaliknya

psyllium tidak menurunkan absorpsi kolesterol. Oleh karena itu disimpulkan bahwa

serat yang viscous efektif menurunkan absorpsi kolesterol walaupun mekanismenya

75

belum sepenuhnya dipahami. Serat makanan yang viscous juga menurunkan absorpsi

triasilgliserol (Tensiska, 2008). Hal tersebut dapat mempengaruhi berat badan tikus

yang mengkonsumsi medium sonde dalam formula Pakan 2 (F2) karena serat pangan

seperti gum arab berpengaruh pada metabolisme dan penyerapan lemak, kolesterol,

dan triasilgliserol. Itu kenapa tikus yang mengkonsumsi formula pakan 2 (F2) dengan

medium sonde es krim sinbiotik rendah lemak berbasis gum arab memiliki nilai

akumulasi peningkatan berat badan selama 30 hari yang paling rendah.

4. 3. 3. Analisa Digests Tikus

Analisa digesta dilakukan uutuk mengetahui efek sinbiotik dari es krim

sinbiotik rendah lemak. Efek sinbiotik terjadi karena sinergi dari prebiotik yang

menstimulus pertumbuhan probiotk pada saluran pencemaan khususnya daerah kolon.

Hasil sinergi dari prebiotik dan probiotik salah satunya produksi asam lemak rantai

pendek (SCFA), Analisa yang dilakukan pada digesta tikus meliputi total BAL, total

asam, pH dan profil SCFA.

4. 3. 3. 1. Analisa Total Bakteri Asam Laktat (BAL) Digesta Tikus

Analisa Total BAL digesta dilakukan untuk mengetahui jumlah dan viabilitas

BAL pada saluran pencernaan tikus, khususnya bagian usus besar. Digesta yang

diambil merupakan digesta pada caecum, yaitu organ pertemuan usus halus dengan

usus besar.

Rerata total BAL digesta berkisar antara 5,48x108 – 9,78x108 CFU/g. Rerata

total BAL pada digesta lebih tinggi dibanding feses pada hari ke-20 (3,58x106)

5,8x107 CFU/g ). Tingginya BAL digesta diduga karena sampel yang diambil berasal

76

dari digesta caecum. Caecum merupakan pertemuan usus halus dengan usus besar.

Sedangkan feses merupakan digesta yang telah melalui kolon sehingga jumlah BAL

feses mengalami penurunan akibat kompetisi dengan mikrobia pembusuk kolon.

Menurut Gibson et al., (2006) caecum merupakaa bagian proksimal kolon

yang kondisi di sekitarnya bersifat sakarolitik. Kondisi sakarolitik berarti bahwa

sebagian besar karbohidrat yang lolos hingga penerimaan bagian bawah akan

terfermentasi di caecum. Ketersediaan sumber karbohidrat tak tercerna (prebiotik)

pada caecurn akan meningkatkan pertumhuhan mikrobia menguntungkan pada

caecum. Mikrobia yang diuntungkan merupakan sakarolitik kolon salah satunya

Lactobacillus. Pengaruh pemberian formula perlakuan pakan dengan atau tanpa

penambahan es krim sinbiotik terhadap total BAL Digesta dapat dilihat pada Gambar

17.

Gambar 17. Histogram rerata Total BAL Digesta Tikus

Keterangan :


8.735 8.7848.983

6.0006.5007.0007.5008.0008.5009.000

K F1 F2

Tot

al B

AL

(lo

g C

FU/g

)

Formula Pakan

Pengaruh Formula Pakan terhadap Total BAL Feses Tikus (30 Hari)

K

F1

F2

77

Gambar 17 memperlihatkan bahwa digesta tikus Formula 2 memiliki rerata

jumlah BAL tertinggi (9,78x108 CFU/g). Total BAL digesta tikus yang diberi

perlakuan pakan standar (kontrol) memiliki jumlah BAL terendah. Tikus yang diberi

Formula 1 (pakan standart + es krim probiotik/es krim kontrol) menunjukkan jumlah

BAL digesta lebih tinggi dibandingkan perlakuan kontrol. (konsumsi pakan standar).

Fenomena ini diduga karena adanya isolat probiotik yakni bakteri asam laktat

(Bifidobacterium bifidum dan Lactobacillus acidophillus) yang digunakan sebagai

probiotik dalam es krim. . Ketersediaan asupan probiotik dari pakan tambahan tikus,

diharapkan mampu meningkatkan jumlah probiotik indigenus di dalam saluran

pencernaan tikus yang terdiri dari golongan bakteri asam laktat (BAL).

Jumlah BAL pada formula 1 lebih rendah dibandingkan Formula 2 , hal ini

disebabkan tidak ada penambahan prebiotik gum arab seperti pada formula 2. Pada

formula 2 diduga terjadi efek sinergis dari pretiotik gum arab dengan isolat probiotik

yang digunakan dalam pencernaan. Menurut Suskovic et al., (2001) efek sinbiotik

atau kombinasi probiotik dan prebiotik mempengaruhi komposisi mikroflora feses

tikus. Efek ini berpengaruh terhadap meningkatnya mikrobia menguntungkan dalam

usus seperti genus Lactobacillus. Alkalin et al. (1997) menunjukkan bahwa

pemberjan bakteri asam laklat pada minuman meningkatkan jumlah Lactobacillus

pada feses dan usus pada pengujian in vivo yang menggunakan subyek manusia

maupun hewan.

4. 3. 3. 2. Analisa Total Asam Digesta Tikus

Analisa total asam digesta tikus dilakukan untuk mengetahui perbedaan

produksi asam atau akumulasi asam pada digesta tikus setelah mengalami pengujian

secara invivo dengan memberikan perlakuan pakan yang berbeda (pakan standar,

78

pakan standar dengan es krim kontrol, dan pakan standar dengan es krim sinbiotik).

Dan dari data yang dihasilkan, rerata nilai total asam digesta tikus berkisar antara

0,108 % - 0,155% asam laktat. Penurunan pemberian es krim sinbiotik terhadap nilai

total asam digesta tikus dapat dilihat pada Gambar 18.

Gambar 18. Diagram Rerata Total Asam Digesta Tikus

Keterangan :


Berdasarkan Gambar 18. diketahui bahwa formulasi pakan yang dengan

penambahan es krim sinbiotik rendah lemak (adanya gum arab) memiliki total asam

tertinggi (0,155%). Sedangkan formulasi pakan yang dengan penambahan es krim

probiotik rendah lemak (es krim kontrol/tanpa penambahan gum arab) dan formulasi

pakan standart saja, nilai total asamnya secara berurutan berada di urutan ke-2 dan ke-

3 (0,143% dan 0,108%). Walaupun begitu antar perlakuan tersebut tidak ditemukan

perbedaan yang nyata melalui Uji BNT.

0.11

0.140.16

0.000

0.100

0.200

K F1 F2

Tot

al A

sam

(%

)

Formula Pakan

Pengaruh Formula Pakan terhadap Total Asam Digesta Tikus (30

Hari)

K

F1

F2

79

Formulasi pakan yang menggunakan pakan standart yang ditambahkan

dengan es krim sinbiotik rendah lemak (F2) memiliki nilai total asam tertinggi

(0,155%) dikarenakan pada es krim rendah lemak yang diberikan kepada tikus wistar

melalui metode sonde, formulasinya terdapat gum arab, salah satu serat pangan yang

bersifat prebiotik. Gum arab tersusun sebagian besar dari arabinogalaktan dan

galaktooligosakarida yang merupakan komponen serat, yang menjadi substrat

fermentasi bakteri asam laktat (probiotik) untuk memproduksi asam-asam organik.

Menurut Suskovic et al., (2002), gum arab juga memiliki efek bifidogenik, yaitu

dapat menjadi substrat fermentasi Bifidobacterium bifidum dan Lactobacillus

acidophillus di di dalam saluran pencernaan manusia maupun hewan (tikus), yang

nantinya akan dihasilkan asam-asam organik seperti salah satunya adalah asam

laktat..

Berdasarkan pernyataan tersebut, pada penelitian ini gum arab yang terdapat

dalam es krim sinbiotik rendah lemak berperan dalam dua bentuk. Peran pertamanya,

gum arab yang sebagian besar sudah difermentasi oleh bakteri asam laktat

(Bifidobacterium bifidum dan Lactobacillus acidophillus)/probiotik pada proses

fermetasi es krim, menyumbangkan asam-asam organik dalam es krim sinbiotik

rendah lemak yang dikonsumsi tikus saat pengujian invivo. Penambahan zat asam-

asam organik dari luar (pakan), dapat meningkatkan total asam saluran pencernaan (di

digesta) tikus wistar. Selain itu gum arab juga turut mendukung viabilitas bakteri

asam laktat (probiotik) dalam es krim yang dikonsumsi tikus wistar sehingga populasi

bakteri asam laktat (probiotik) dalam saluran pencernaan tikus (digesta tikus)

meningkat, yang berpengaruh pula pada peningkatan total asam digesta tikus. Peran

keduanya, gum arab yang kemungkinan belum terfementasi sempurna pada proses

80

fermentasi es krim, dan komponen serat prebiotiknya masih utuh saat masuk ke

saluran pencernaan tikus, berperan sebagai “serat prebiotik utuh” yang dapat menjadi

substrat probiotik di dalam saluran pencernaan tikus, yang selanjutnya dihasilkan

asam-asam organik. Hal inilah yang memicu peningkatan total asam digesta (saluran

pencernaan) tikus.

Formula 1 (F1) yang menggunakan formulasi pakan standart dengan es krim

probiotik (es krim kontrol) memiliki nilai total asam digesta pada urutan kedua

(0,143%). Hal ini dikarenakan, es krim kontrol hanya mengandung isolat probiotik

hidup saja, tanpa adanya gum arab sebagai prebiotik. Adanya isolat probiotik jenis

bakteri asam laktat pada es krim kontrol cukup berkontribusi pada peningkatan total

asam, namun tidak sebesar formula 2. Bakteri asam laktat (BAL) berperan dalam

memproduksi asam-asam laktat pada es krim yang dikonsumsi tikus. Hal itu

membuat asam di saluran pencernaan tikus ikut meningkat beberapa persen. Selain

itu bakteri asam laktat yang terbawa dan hidup di saluran pencernaan tikus akan

membuat jumlah bakteri asam laktat (BAL) di saluran pencernaan tikus bertambah.

Produksi asam-asam laktat dan asam-asam organik lainnya dari bakteri tersebut di

saluran pencernaan pun turut meningkat.

Sebagai persamaan untuk Formula 1 dan Formula 2, glukosa yang terkandung

dalam es krim baik pada Formula 1 dan Formula 2 yang dikonsumsi tikus, juga turut

berperan dalam peningkatan total asam. Bifidobacterium bifidum salah satu jenis

bakteri asam laktat (BAL) yang digunakan dalam pembuatan es krim, dapat memecah

glukosa menjadi asam laktat melalui jalur EMP.

Formula 3 yang terdiri dari pakan standart saja, memiliki total asam terendah.

Nilai total asam digesta tikus yang dihasilkan dari Formula 3 ini menyiratkan nilai

81

total asam normal tikus yang tidak mengkonsumsi probiotik atau sinbiotik (probiotik

dan prebiotik).

4. 3. 3. 3. Analisa pH Digesta Tikus

Adanya. produksi asam laktat dan SCFA menyebabkan pH digesta dalam

caecum rendah. Hasil penelitian menunjukkan bahwa proses fermentasi BAL

terhadap serat pangan berperan dalam penurunan pH saluran pencernaan. Pengaruh

pemberian formula perlakuan pakan dengan atau tanpa penambahan es krim sinbiotik

terhadap nilai pH digesta tikus tersaji pada Gambar 19.

Gambar 19. Diagram Rerata Nilai pH Digesta Tikus

Keterangan :


Berdasarkan gambar diatas rerata tertinggi pada kontrol (K) sedangkan

terendah pada formula 2 (F2). Rerata nilal pH digesta tikus semua formula perlakuan

6.555

6.253

5.943

5.5005.7005.9006.1006.3006.5006.7006.900

K F1 F2

pH

Formula Pakan

Pengaruh Formula Pakan terhadap pH Digesta Tikus (30 Hari)

K F1 F2

82

berkisar antara 5,943-6,555. Rerata pH digesta secara umum lebih rendah dibanding

pH feses pada hari ke-30 yaitu 6,13 – 6,41 (Tabel 20). Penyebabnya diduga karena

sampel yang diambil berasal dari digesta caecum. Caecum merupakan organ

pencernaan usus halus dengan usus besar Sedangkan feses merupahn digesta yang

telah melalui kolon, sehingga pH mengalami peningkata (bersifat lebib basa).

Menurat Gibson et al, (2006) pH pada "proksimal colon" (caecum) lebih

rendah dibanding "transverse colon" maupun "Distal colon". Kondisi pada caecum

merupakan kondisi sakarolitik sehingga terjadi proses fermentasi karbohidrat

tercerna, menjadi senyawa asam. Sedangkan pada distal kolon, lebih banyak aktivitas

proteolitik mikrobia pembusuk dibanding aktivitas sakarolitik.

Pada caecum, kondisi sakarolitik diduga menyebabkan pH digesta menjadi

rendah. Penyebab digesta pada caecum yaitu adanya fermentasi serat oleh mikrobia

sakarolitik termasuk golongan Lactoballus menghasilkan "Volatile fatty acid".

Pernyataan ini senada dengan Gibson et al., (2006) bahwa nilai pH caecum manusia

berkisar antara 5,5-6,0. Menurut annonymous (2007) bakteri fermentatif

memproduksi asam-asam organik untuk menjaga pH kolon agar tetap asam yang

mendukung pertumbuhan dan aktifitasaya. Terdapat yang sama dinyatakan Lindrenz

and Dobrogosz (1990 dalam yang 2000) babwa, fermentasi BAL ditandai dengan

akumulasi asam-asam organik yang menyebabkan terjadinya penurunan pH.

Fenomena ini diduga karena tidak tersedianya standar prebiotik (serat

pangan). Pada Perlakuan kontrol, tikus percobaan tidak mendapatkan asupan medium

fermentasi bekatul. Populasi BAL diduga dipengaruhi oleh ketersediaan serat bekatul

yang berpotensi sebagai prebiotik. Menurut Matteuzzi et al., (2003) konsumsi

prebiotik selama 20 hari pada tikus dapat menurunkan 0,4 unit pH feses.

83

Formula 1 memperlihatkan pH digesta tikus lebih rendah dibanding kontrol

yakni berkisar 6,253. Hal ini berkorelasi dengan jumlah BAL digesta Formula 1 yang

lebih tinggi sehingga kecepatan fermentasi terhadap serat menghasilkan senyawa

asam - asam organik lebih tinggi. Akumulasi asam yang dihasilkan dari proses

fermentasi serat menyebabkan pH turun. Menurut Lindrenz and Doblogosz (1990)

fermentasi BAL ditandai dengan akumulasi asam-asam organik yang menyebabkan

terjadinya penurunan pH. pH digesta Formula 1 lebih tinggi dibanding Formula 2.

Fenomena ini disebabkan jumlah BAL digesta Formula 1 (Tabel 15) lebih rendah

sehingga kemampuan menghasilkan senyawa asam. relatif lebih rendah.

Berdasarkan Gambar 17. Formula 2 (Pakan Standar denga es krim sinbiotik)

menunjukkan nilai pH digesta yang paling rendah dibanding formula lainnya yaitu

sebesar 5,943. Hal ini sesuai dengan hasil analisa total BAL (Tabel 15) yang

menunjukkan perlakuan Formula 2 memliki jumlah BAL. digesta tertinggi (9,78x 108

CFU/g). Sejalan dengan pertumbuhan pada bakteri maka akan terjadi penurunan pH

lingkungan yang disebabkan oleh asam organik yang dihasilkan akibat metabolisme

mikroba dalam usus, diantaranya asam laktat. Senyawa ini akan mengkondisikan pH

kolon alami yang asam.

4. 3. 3. 4. Analisa Profil SCFA Digesta Tikus

Asam lemak rantai pendek (SCFA) merupakan asam - asam hasil fermentasi

serat pangan (prebiotik) oleh probiotik dalam usus besar. SCFA tersebut diantaranya

asam asetat, propionat dan butirat. Rerata nilai SCFA dapat pada Gambar 20.

84

Gambar 20. Diagram Rerata Konsentrasi SCFA Digesta Tikus Selama 30 hari Pemberian Formula Perlakuan Tabel 15. Diagram Rerata Konsentrasi SCFA Digesta Tikus Selama 30 hari Pemberian Formula Perlakuan

Perlakuan Pengujian pada Hari Ke-30 (mg/g) Total (mg/g) As. Asetat As. Propionat As. Butirat

K 5,71 2,761 1,041 9,51 F1 6,609 3,020 1,631 11,26 F2 7,323 3,215 1,665 12,20

Keterangan :

Formula 1 = Pakan standar + Es Krim Kontrol (Tanpa Penambahan Gum Arab)

Formula 2 = Pakan standar + Es Krim Perlakuan Terbaik (Ada Penamabahan

Gum Arab 6%)

Kontrol = Pakan standar tikus (AIN-93M)

Dari Gambar 20. diketahui bahwa pemberian formulasi pakan yang berbeda-

beda mempengaruhi jumlah total asam organik (SCFA) digesta tikus yang berkisar

antara 9,51 mg/g – 12,20 mg/g. Tikus yang diberikan pakan dengan formulasi pakan

standart dan es krim sinbiotik (F2) memiliki nilai total asam organik (SCFA) tertinggi

yaitu sebesar 12,20 mg/g. Sedangkan total asam digesta tikus yang diberi pakan

9.512464247

11.2587524812.20178137

0

2

4

6

8

10

12

14

K F1 F2Tot

al A

sam

Org

anik

(SC

FA) (

mg/

g)

Formula Pakan

Pengaruh Formula Pakan Tikus terhadap Total Asam Organik (SCFA) Digesta Tikus

K

F1

F2

85

standart saja tanpa penambahan es krim sinbiotik atau es krim probiotik, yang

merupakan tikus perlakuan kontrol, nilai total asam digestanya terendah yaitu sebesar

9,51 mg/g.

Faktor yang menyebabkan tikus yang diberikan formula pakan yang terdiri

dari pakan standart dan es krim sinbiotik dengan metode sonde, F2, memiliki total

asam organik (SCFA) tertinggi (12,20 mg/g) pada penelitian invivo ini adalah adanya

penambahan es krim sinbiotik. Es krim sinbiotik adalah faktor pembeda antara

formula pakan F2 dengan F1 (pakan + es krim probiotik/es krim kontrol) dan dengan

Formula Pakan Kontrol. Es krim sinbiotik berkontribusi meningkatan total asam

organik (SCFA) lebih tinggi dikarenakan adanya kombinasi probiotik dan prebiotik

yang terformulasi dalam es krim. Probiotik yang dimaksud adalah adanya isolat-isolat

bakteri asam laktat (BAL) dalam es krim, sedangkan prebiotiknya adalah gum arab

yang juga digunakan sebagai bahan pengganti lemak (fat replacer) dalam es krim.

Efek probiotik dari es krim sinbiotik yang dikonsumsi tikus selain pakan

standart ditunjukkan dengan jumlah total bakteri asam laktat (BAL) digesta tikus

yang lebih besar daripada total BAL digesta tikus dengan perlakuan Formula Pakan

Kontrol (tanpa penambahan es krim sinbiotik). Hal ini menyebabkan jumlah isolat

probiotik di saluran pencernaan tikus semakin meningkat karena sebelumnya sudah

ada isolat probiotik indigenus. Jumlah probiotik yang lebih besar dalam usus besar

dan kolon, menyebabkan aktivitas fermentasi karbohidrat golongan non-pati, serat

pangan seperti gum arab akan lebih besar juga, sehingga asam-asam organik yang

dihasilkan termasuk SCFA pun lebih banyak diproduksi.

Adanya prebiotik yaitu gum arab yang dikonsumsi tikus dalam es krim, turut

berkontribusi pada peningkatan total asam organik (SCFA) yang dihasilkan. Menurt

86

Suskovic et al., (2001) prebiotik pada umumnya meningkatka produksi asam laktat

dan asetat. Adanya prebiotik akan menstimulasi pertumbuhan mikrobia

menguntungkan serta meningkatkan prosuksi substansi menguntungkan seperti

SCFA.

Gum arab yang termasuk serat pangan, polisakarida non-pati, bersifat

bifidogenik yaitu dapat difermentasi oleh probiotik jenis bifidobacterium bifidum,

Lactobacillus acidophillus di usus besar karena mampu menghasilkan enzim β-

galaktosidase, yang mampu memecah komponen gum arab (yang sebagian besar

terdiri dari arabinogalaktan dan galaktosa) menjadi monomernya sepert glukosa,

galaktosa, arabinosa, dan asam aronat. Senyawa ini kemudian difermentasi melalui

glikolisis menjadi piruvat yang seterusnya menjadi SCFA dan metabolit yang lain

(Cummings, 1987 dalam Khattak, 2002).

Total SCFA kontrol (Tabel 16) paling rendah dibandingkan Formula 1,

maupun Formula 2. Perlakuan kontrol merupakan kelompok tikus yang diberi pakan

standar tanpa pemberian es krim sinbiotik, sehingga produksi atau pembentukan

SCFA paling rendah. Hal ini diduga karena ketidaktersediaan serat yang berpotensi

sebagai prebiotik bagi prebiotik pencernaan. Tikus pelakuan kontrol dapat

menghasilkan SCFA diduga karena adanya fermentasi dari pakan standar oleh

mikroflora pencernaan, khususnya bagian usus besar. Pakan standart yang digunakan

dalam penelitian mengandung karbohidrat (pati jagung, dekstrin, sukrosa), protein

(Kaselia), dan lemak (minyak kedelai). Menurut Annonymous (2005) SCFA dapat

dibentuk dari fermentasi karbohidrat, lemak maupun protein oleh bakteri usus besar.

Akan tetapi protein kontribusi yang rendah dalam pembentukan SCFA.

Berdasarkan Tabel 16, semua perlakuan memiliki rerata rasio persamaan

87

reaksi asam asetat : Propionat : butirat yaitu 62 : 26 : 12. Cumming, 1987 dalam

Khattak (2002) menyatakan bahwa kisaran perbadingan molar asam asetat > asam

propionat > asam butirat yaitu 60 : 25 : 15, Menurut Topping dan Clitfon (2001),

secara umum persamaan reaksi fermentasi karbohidrat (heksosa) menjadi SCFA alam

kolon sebagai berikut :

59 C6H12O6 + 38 H2O à 60 CH3COOH + 22 CH3CH2COOH + 18

CH3CH2CH2COOH + 96 CO2 + 268 H+ + panas +

additional bakteri.

Pada pencernaan manusia dewasa, produksi SCFA juga seiring dengan produksi lain

seperti CO2, CH4, dan H2 dan produksi panas.

Profil SCFA diduga dipengaruhi oleh jenis serat (prebiotik) yang memasuki

caecum. Kecepatan pembentukan SCFA juga diduga dipengaruhi oleh keberadaan

serat baik jumlah maupun jenisnya. Menurut Topping dan Diton (2001) kecepatan

pembentukan SCFA dipengaruhi oleh jenis asetat yang terfermentasi pada kolon.

Beberapa studi telah menunujukkan hasil SCFA pada sumber serat "brain' (wheat,

barley,oat,rice), serat kedelai, ekstrak sayuran, maupun hasil purifikasinya, seperti

selulosa, glukosa, guar gum, pektin, Selulosa merupakan serat yang memiliki

kecepatan fermentasi rendah pada kolon. Semakin cepat asetat terfermentasi akan

berimplikasi pada peningkatan produksi SCFA.

Menurut Cummings et al., (1991) molar SCFA (asetat : propionat : butirat)

pada fermentasi "wheat" dan "oat. Brate" (64 : 15 : 40). Molar SCFA pada fermentasi

pektin (80 : 12 : 3), sedang dari molar untuk pati (62 : 15 : 23). Jenis NSP yang lain

(Polisaiarida non pati) memiliki rasio molar (63 : 22 : 8). Selain dipengaruhi oleh

88

sumber serat yang terfermentasi, produksi SCFA diduga dipengaruhi oleh lokasi

fermentasi serat pada pencernaan. Menurut Topping dan Difton (2001) caecum

merupakan daerah atau lokasi pada pencernaan yang menghasilkan SCFA tertinggi.

Jumlah SCFA pada caecum lebih tinggi dibanding pada transverse kolon maupun

distal kolon.

a. Asam Asetat

Pada Tabel 16 terlihat bahwa kandungan SCFA tertinggi adalah asam asetat,

kemudian berturut - turut diikuti asam propionat dan butirat. Kandungan asam asetat

paling tinggi dibanding SCFA yang lain (propionat dani butirat) diduga karena

metabolismenya lebih meningkat dari kedua senyawa SCFA yang lain. Menurut

Wollin et al, (1999) pembentukan asam asetat melalui metabolisme glukosa menjadi

piruvat, setelah itu menjadi senyawa antara asetil-COA. Sedangkan pernbentukan

asam propionat melalui 2 senyawa antara yaitu oksaloasetat dan suksinat. Hasil

penggabungan 2 senyawa asetil - COA dari 2 senyawa piruvat akan membentuk asam

butirat.

Pendugaan lain menyebutkan bahwa asetil - CoA tersedia melimpah dalam

tubuh manusia dan hewan. Fardiaz (1990) menyatakan asetil-CoA rnerupakan salah

satu senyawa hasil metabolisme (katabolisme) karbohidrat, lemak. maupun protein.

Fermentasi kabohidrat (glukosa) pada grup bakteri asam laktat (BAL)

homofermentatif melalui jalur glukolis (EMP) akan terjadi produksi asam phuvat oleh

NADH2 menjadi asam laktat. Asam asetat dapat terbentuk dari fermentasi karbohidrat

oleh bakteri asam laktat (BAL) heterofermentatif. Noor (1990) menyatakan semua

asam amino pembentuk piruvat dapat dikonversi menjadi asam-CoA. Asam amino

pembentuk piruvat diantaranya alanin, sistein, sistim, glisin, serin dan threonin. Asam

89

amino yang secara langsumg dapat membentuk asetil-CoA tanpa melalui piruvat

yaitu lisin dari leusin. Asam-asam amino esensial ini banyak terdapat pada bekatul

(Annonymous , 1999).

Menurut Pelezar dan Chan (1986) jalur pembentukan asam asetat meliputi

tahap pemecahan karbohidrat menjadi glukosa kemudian diubah menjadi piruvat.,

Pada proses fermentasi asam piruvat merupakan pusat fermentasi karbohidrat.

Perubahan senyawa padat menjadi asetat dapat melalui 2 cara. Pertama, piruvat

diubah langsung menjadi asam asetat dan asam format. Kedua perubahan melalui

senyawa antara asetil-CoA, setelah itu diubah menjadi asam asetat.

Gambar 21. Pengaruh formula pakan terhadap total asam asetat digesta tikus

Keterangan :


5.716.61

7.32

0

2

4

6

8

10

K F1 F2

Tota

l Asa

m A

seta

t (m

g/g)

Formula Pakan

Pengaruh Formula Pakan terhadap Total Asam Asetat Digesta Tikus

K

F1

F2

90

Rerata kandungan asam asetat tertinggi dari digesta tikus adalah perlakuan

formula 2 (F2) dengan nilai sebesar 7,32 mg/g, sedangkan terendah pada kontrol

(5,71 mg/g). Menurut Tungland (2002), asam asetat di dalam tubuh dihasilkan dari

fermentasi polisakarida non pati. Selanjutnya asam asetat diserap oleh pembuluh

sehingga memungkinkan mempengaruhi tingkat asam lemak darah. Tingkat asam

lemak darah produksi dengan adanya penghambat lipolisisi jaringan adiposa oleh

asetat..

b. Asam Propionat

Rerata kandungan asam propionat tertinggi dari digesta tikus adalah

perlakuan formula 2 (F2) dengan nilai sebesar 3,03 mg/g, sedangkan terendah pada

kontrol sebesar 2.35 mg/g.. Menurut Pelezar dan Chan (1986) jalur pembentukan

asam propionat meliputi tahap pemecahan karbobidrat menjadi glukosa setelah itu

diubah menjadi asam piruvat. Setelah terbentuk piruvat, akan diubah menjadi

senyawa antara asam suksinat, yang kemudian akan terbentuk asam propionat dan

CO2.

91

Gambar 22 . Pengaruh Formula Pakan terhadap Total Asam Propionat Digesta Tikus

Keterangan :


Asam propionat merupakan satu-saltunya SCFA yang dapat menjadi sumber

utama sintesa glukosa di dalam sel (glukoneogenesis). Kok et al., (1996) dalam

Tungland (2002) asam propionat hasil fermentasi mampu menurunkan sintesa asam

1emak pada tubuh melalui penghambatan aktivitas enzim utamanya yaitu gliserol 3

fosfat acyltransferase dan fatty acid sintetase. Ketika asam. propionat diserap o!eh

tubuh, maka tubuh akan menggunakannya untuk reaksi glukoneogenesis atau untuk

menghasilkan energi reaksi siklus 'TCA (Khattak, 2002).

2.763.02

3.21

0

1

2

3

4

K F1 F2Tota

l Asa

m P

ropi

onat

(mg/

g)

Formula Pakan

Pengaruh Formula Pakan terhadapTotal Asam Propionat Digesta Tikus

K

F1

F2

92

c. Asam Butirat

Rerata kandungan asam butirat tertinggi dari digesta tikus adalah perlakuan

formula 2 (F2) dengan nilai sebesar 1,66 m/g, sedangkan terendah pada kontrol

sekitar 1,04 mg/g. Menurut Pelezar dan Chan ((986) jalur pembentukan asam butirat

meliputi tahap pemecahan karbohidrat menjadi glukoba, setelah itu menjadi piruvat.

Sebelum terbentuk asam butirat melalui 2 senyawa antara yaitu berturut-turut asetil –

CoA dan asam asetoasetat.

Gambar 23 . Pengaruh Formula Pakan terhadap Total Asam Butirat Digesta Tikus

Keterangan :


Di dalam tubuh, asam butirat mempunyai peranan penting lerhadap kesehatan

usus besar. Asam butirat mampu menstimulasi pertumbuhan sel (Wasan dan

Coodland 1996 dalam Tungland.(2002), menyediakan sumber energi utama bagi sel

1.04

1.63 1.66

0

1

2

3

4

K F1 F2Tota

l Asa

m B

utir

at (m

g/g)

Formula Pakan

Pengaruh Formula Pakan terhadap Total Asam Butirat Digesta Tikus

K

F1

F2

93

usus besar, mempunyai peranan penting dalam menkan radang usus. Serta mencegah

tumbuhnya tumor ganas (antitumor) yang meliputi induksi terhadap penyebaran sel

tumor dan apoptosis (Cuff dan Shrirazi, 2004).

4. 3. 2. Analisa Feses Tikus

Analisa feses pada tikus bertujuan untuk mengetahui viabilitas bakteri asam

laktat (BAL) pada saluran pencernaan tikus. Feses yang dianalisa merupakan feses

segar atau baru. Hasil yang diperoleh dari analisa feses merupakan proyeksi dari

keadaan saluran pencernaan (digesta caecum). Analisa yang dilakukan pada feses

tikus meliputi analisa total BAL dan pH.

4. 3. 2. 1. Analisa Bakteri Asam Laktat (BAL) Feses Tikus

Rerata total bakteri asam laktat (BAL) feses tikus setelah pemberian

formula pakan selama 30 hari berkisar antara 8,735 Log CFU/g (5,48 x 108CFU/g) -

8,935 Log CFU/g (9,78x108

CFU/g) , yang dapat dilihat pada Gambar 24.

94

Gambar 24 . Pengaruh Formula Pakan Terhadap Total Bakteri Asam Laktat (BAL) Feses Tikus

Keterangan :


Dari Gambar. 24 Diketahui bahwa feses tikus yang menggunakan formula

pakan standart dengan es krim sinbiotik (F2) memiliki nilai total bakteri asam laktat

(BAL) tertinggi yaitu sebesar 8,983 Log CFU/g (9,78x108

CFU/g), yang kemudian

diikuti oleh formula pakan standart dengan es krim probiotik (es krim kontrol)

sebesar 6,35 x108 CFU/g, dan yang terendah formula pakan standart saja (kontrol)

dengan total BAL sebesar 8,735 Log CFU/g (5,48 x 108 CFU/g).

Total BAL feses tikus yang diberi perlakuan pakan standart saja (Kontrol)

memiliki jumlah BAL terendah yaitu sebesar 8,735 Log CFU/g (5,48 x 108 CFU/g)

diduga karena tikus dengan perlakuan tersebut tidak mendapatkan asupan yang

8.718.73

8.718.73

8.78

8.98

8.558.608.658.708.758.808.858.908.959.009.05

K F1 F2

Total BAL Log (CFU/g)

Hari Ke-

Pengaruh Formula Pakan terhadap Total Baketri Asam Laktat (BAL) Feses Tikus

Hari Ke-0

Hari Ke-30

95

mengandung probiotik maupun prebiotik seperti perlakuan-perlakuan yang lain.

Asupan probiotik dari es krim diharapkan mampu menambah probiotik di dalam

saluran pencernaan tikus, yang dikorelasika dengan ketersediaan prebiotik gum arab.

Prebiotik gum arab diharapkan mampu menstimulasi pertumbuhan probiotik (jenis

BAL) di saluran pencernaan. Menurut Matteuzi et al., (2003) konsumsi prebiotik

seperti gum arab yang kaya akan arabinogalaktan dan galaktooligosakarida tak

tercerna lainnya mampu meningkatkan jumlah probiotik indigenus feses

(Lactobacillus dan Bifidobacterium).

Tikus yang diberi perlakuan pakan dengan pakan standart dan es krim

probiotik (es krim kontrol) (F1) memiliki jumlah BAL pada urutan kedua dari ketiga

perlakuan. Pada perlakuan ini, selain pakan standart tikus hanya diberi asupan es krim

probiotik tanpa prebiotik seperti pada perlakuan formula 3 (F3). Asupan yang

mengandung isolat probiotik hidup dari es krim ini diduga menambah jumlah

probiotik dalam saluran pencernaan tikus, yang kemudian ikut terbawa kotoran dalam

feses tikus.

Tikus yang diberi perlakuan pakan dengan pakan standart dan es krim

sinbiotik (F3) memiliki nilai jumlah BAL tertinggi. Hal ini karena terdapatnya

probiotik sekaligus prebiotik gum arab dalam es krim sinbiotik. Tikus yang mendapat

asupan probiotik tambahan dari pakan akan membuat jumlah probiotik khususnya

bakteri asam laktat (BAL) di saluran pencernaannya meningkat/bertambah.

Ketersedian asupan prebiotik gum arab juga berperan mampu menstimulasi BAL

dalam usus besar. Menurut Matteuzi et al., (2003) pemberian pakan yang

mengandung serat pangan seperti gum arab (prebiotik) selama 20 hari atau lebih pada

hewan percobaan dapat meningkatkan jumlah probiotik indigenus feses

96

(Lactobacillus dan Bifidobacterium). Suskovic et al., (2001) menambahkan efek

sinbiotik atau kombinasi probiotik dan prebiotik mempengaruhi mikroflora feses

tikus. Efek ini berpengaruh terhadap meningkatnya mikrobia anaerob dan genus

Lactobacillus.

4. 3. 4.2. Analisa pH Feses Tikus

Penurunan derajat keasaman merupakan salah satu akibat dari proses

fermentasi kolonik oleh mikroba yang mengakumulasi asam organik. Rerata pH feses

tikus pada penelitian invino ini berkisar antara 6,13 – 6,41. Penurunan derajat

keasaman (pH) feses tikus akibat pemberian formula pakan (pakan standart, pakan

standart + es krim probiotik, dan pakan standart + es krim sinbiotik) dapat dilihat

pada Gambar 25.

Gambar 25. Histogram Penurunan pH Feses Tikus Setelah Pemberian Formula Pakan yang Berbeda-beda selama 30 Hari

Dari Gambar 25. diketahui bahwa feses tikus yang diberi perlakuan formula

6.61

6.51

6.416.47

6.34

6.25

6.55

6.27

6.14

6

6.2

6.4

6.6

6.8

7

1 15 30

pH

Hari Ke -

Pengaruh Formula Paka terhadap pH Feses Tikus

KF1F2

97

pakan standart saja (Kontrol) memiliki nilai pH tertinggi (6,41). Nilai pH feses tikus

yang diberikan perlakuan formula pakan standart dengan es krim probiotik kontrol

(F1) berada di urutan kedua (6,253). Sedangkan feses tikus yang diberikan perlakuan

formula pakan standart dengan es krim sinbiotik (F2) memiliki nilai pH terendah

(6,13). Berdasarkan uji beda nyata tidak ditemukan perbedaan yang sangat nyata

antar perlakuan.

Nilai pH feses tikus pada perlakuan formula pakan standart saja paling tinggi

daripada perlakuan lainnya. Penyebabnya diduga karena tikus dengan perlakuan

pakan standart saja tidak mendapatkan asupan probiotik maupun prebiotik gum arab.

Ketersedian isolat probiotik diharapkan mampu memfermentasi serat-serat di dalam

kolon menghasilkan fermentatif memproduksi asam-asam organik untuk menjaga pH

kolon agar tetap asam yang mendukung pertumbuhan dan aktifitasnya. Ketersediaan

prebiotik gum arab mampu menstimulasi pertmbuhan BAL, sehingga memicu

terjadinya penurunan pH. Menurut Matteuzi et al., (2003) konsumsi prebiotik selama

20 hari atau lebih pada tikus dapat menurunkan 0,4 unit pH feses.

Formula 1 memperlihatkan pH feses tikus lebih rendah dibandingkan kontrol

yakni berkisar 6,253. Hal ini berkorelasi dengan jumlah BAL, feses formula 1 yang

lebih tinggi sehingga senyawa antimikroba seperti asam-asam organik yang

dihasilkan lebih banyak. Akumulasi asam menyebabkan pH turun.

Formula 2 memperlihatkan pH feses tikus paling rendah dibandingkan

perlakuan yang lainnya, yaitu sebesar 6,13. Hal ini sesuai dengan nilai total BAL

feses pada perlakuan pakan formula 2 (F2) tertinggi. Sejalan dengan pertumbuhan sel

bakteri maka akan terjadi penurunan pH lingkungan yang disebabkan oleh asam

organik yang dihasilkan akibat metabolisme mikroba dalam usus, diantaranya asam

98

laktat. Senyawa ini akan mengkondisikan pH kolon alami yang asam. Sesuai

penelitian Richard et al (2005) juga menyatakan bahwa kombinasi sinbiotik pati

resisten dengan bifidobacterium menunjukkan nilai pH kolon dan peningkatan SCFA

kolon pada analisa ragam P<0,01.

4. 4. Pemilihan Perlakuan Terbaik untuk Pengujian In Vivo

Pemilihan perlakuan terbaik dilakukan untuk mengetahui apakah ada efek

sinbiotik dari es krim sinbiotik rendah lemak berbasis gum arab. Pemilihan perlakuan

terbaik menggunakan metode rangking (De Garmo, et. al., 1984). Dan dari metode

tersebut perlakuan pakan Formula 2 (F2) yang menggunakan pakan standart dengan

es krim sinbiotik, menjadi perlakuan formula pakan terbaik pertama dengan nilai

0,575. Penilaian tersebut berdasarkan pada kemampuan perlakuan Formula Pakan F2

menghasilkan nilai tertinggi pada parameter-parameter efek sinbiotik, seperti total

BAL Digesta Tikus, Total pH Digesta Tikus, total asam digesta tikus, Total SCFA

digesta tikus, total BAL feses tikus, dan total pH Feses tikus.

Tabel 16. Hasil Perlakuan Terbaik Pengujian In Vivo

Parameter F2 F1 K Tot. BAL Digesta (Log CFU/g) 8,895 8,7325 8,5475 PH Digesta Tikus 5,9425 6,2525 6,555 Tot. Asam Digesta Tikus (%) 0,155 0,1425 0,1075 Tot. Asam Asetat Digesta Tikus (mg/g) 7,322603 6,6085 5,7099 Tot. Asam Propionat Digesta Tikus (mg/g) 3,214661 3,01953 2,7614 Tot. Asam Butirat Digesta Tikus (mg/g) 1,248388 1,22304 1,0411 Total BAL Feses Tikus (Log CFU/g) 8,985 8,785 8,7325 PH Feses Tikus 6,13 6,25333 6,41 Nilai Perlakuan Terbaik 0,575 0,536 0,502 Perlakuan Terbaik 1 2 3

99

V. KESIMPULAN DAN SARAN

5. 1. Kesimpulan

5. 1. 1. Kesimpulan untuk Penelitian Es Krim Sinbiotik Rendah Lemak

Hasil penelitian es krim sinbiotik rendah lemak berbasis gum arab

menunjukkan bahwa penggunaan gum arab sebagai bahan pengganti lemak dan

prebiotik, yang mensubtitusi penggunaan whipping cream, berpengaruh nyata pada

overrun dan kecepatan meleleh es krim sinbiotik rendah lemak (ά = 0,05), serta

berpengaruh sangat nyata terhadap total lemak dan total bakteri asam laktat (BAL)

produk (ά = 0,01). Akan tetapi perlakuan-perlakuan yang diujikan dalam penelitian

ini tidak berpengaruh nyata (tidak berpengaruh secara signifikan) terhadap total asam

dan pH es krim sinbiotik rendah lemak.

Es krim pada perlakuan P1, yang menggunakan proporsi gum arab : whipping

cream (6:4) merupakan perlakuan terbaik dengan overrun sebesar 19,83% , kecepatan

meleleh sebesar 2,45 g/menit , total asam sebesar 1,4 % , pH sebesar 5,22 , total

lemak sebesar 3,9% , dan total bakteri asam laktat (BAL) sebesar 6,66x108 CFU/g.

5. 1. 2. Kesimpulan untuk Penelitian In Vivo

Hasil penelitian secara in vivo yang diujikan selama 30 hari menunjukkan

bahwa jenis formula perlakuan yang diberikan pada kelompok tikus memberikan

nyata pada total bakteri asam laktat (BAL) digesta, asam butirat digesta dan total

BAL Feses (ά = 0,05), serta berpengaruh sangat nyata pada pH digesta tikus, asam

asetat digesta , asam propionat digesta (ά = 0,01). Akan tetapi formula-formula pakan

tikus tidak berpengaruh nyata terhadap total asam digesta dan pH digesta tikus.

100

Formula Pakan 2 (F2) (pakan standart + es krim sinbiotik) merupakan

perlakuan terbaik dengan total BAL digesta , total asam digesta , pH digesta, total

SCFA (asam asetat mg/g, asam propionat mg/g, asam butirat mg/g), total BAL

feses tikus , pH feses tikus .

Formula Pakan 2 (F2) (pakan standart + es krim sinbiotik) merupakan

perlakuan terbaik dengan total BAL digesta 9,78x108 , total asam digesta 0,155% ,

pH digesta 6,55, total SCFA 12,20 mg/g (asam asetat 7,32 mg/g, asam propionat 3,03

mg/g, asam butirat 1,66 mg/g), total BAL feses tikus 9,78x108

CFU/g , pH feses tikus

6,41.

5. 2. Saran

5. 2. 1. Saran untuk Penelitian Es Krim Sinbiotik Rendah Lemak

1. Perlu dicari bahan alternatif lain selain gum arab sebagai bahan pengganti

lemak dan prebiotik untuk aplikasi pembuatan es krim sinbiotik rendah lemak

2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang pengaruh gum arab sebagai

bahan pengganti lemak berbasis prebiotik terhadap sifat fisikokimia dan

viabilitas probiotik dari es krim sinbiotik rendah lemak selama penyimpanan

(suhu rendah).

5. 2. 2. Saran untuk Penelitian In Vivo

1. Perlu dilakukan pengujian in vivo dalam jangka yang lebih lama dari

penelitian ini. Misalkan hingga hari ke-30 yang bisa meliputi 3 fase penelitian

(fase pengujian awal di hari ke-0, fase pengujian perlakuan di hari ke-30, dan

tahap pengujian setelah perlakuan ditiadakan pada hari ke-60, untuk

mengetahui lebih lanjut efek dari perlakuan, serta efek setelah perlakuan tidak

101

lagi diberikan).

2. Perlu dilakukan penelitian in vivo tambahan untuk mengetahui efek sinbiotik

es krim sinbiotik rendah lemak pada penelitian ini terhadap kolesterol dan

gula darah.

102

DAFTAR PUSTAKA

��

Annonymous. 1998. Gambar Lactobacillus acidophillus. Http://images.google.co.id/imgress?imgurl=http://www.schudnij.com.pl/pliki/acidophilus.jpg&imgrefull

��

�� !��

Annonymous. 2005. Lechitin. Http://www.food-

chemical.com/search?q=lechitin+molecule+dehqi? Annonymousa). 2008. Awal Pengklasifikasian Bifidobacetria.

Http://renik.4t.com.html Annonymousb). 2008. Ice Cream Probiotic. Http://www.food-

chemical.com/search?q=lechitin+molecule+dehqi? Annonymousc). 2008. Maltodextrin. Http://www.global-b2b-

network.com/direct/dbimage/50014498 Annonymousd). 2010. Apa Itu Whipping Cream?.

http://artikelkuliner.blogspot.com/2010/08/apa-itu-whipping-cream.html. Diakses tanggal 12 Januari 2010

Annonymouse) .2007. Modified Cellulose Ether, diakses dari

http://www.baustoffchemie .de/en/additives/cellulose-ether/modified.html pada tanggal 17 Desember 2009

Ardiansyah. 2008. Pangan Fungsional.

Http://ardiansyah.wordpress.com/2008/1/pangan_fungsional_html Arrington, L. R and Shirley, R.L. 2002. Utilization of Inorganic Ortho, Meta, and

Pyrophosphates by Lambs and Cellulolytic Rumen Microorganisms In Vitro. J Anim Sci. 24:355-363

Buckle, et. al., Terjemahan Hari Purnomo dan Adiono. 1987. Ilmu Pangan.

Universitas Indonesia Press. Jakarta Blancard, P. H. and F. R. Katz. 1995. Starch Hydrolisis in Food Polysaccharides

and Their Application. Marcell Dekker, Inc. New York

http://www.global-b2b-network.com/direct/dbimage/500

http://www.global-b2b-network.com/direct/dbimage/500

http://artikelkuliner.blogspot.com/2010/08/apa-itu-whipping-cream.html

103

Chronakis IS. On the molecular characteristics, compositional properties, and structural-functional mechanisms of maltodextrins: a review. Crit Rev Food Sci Nutr. 1998 Oct;38(7):599-637

Clark D. 1994. Fat replacers and fat substitutes. Food Technol. 48(12): 86. Clark S. 2000. Dairy products laboratory handouts. Washington State University.

Pullman, WA. Defiguideredo, M, P. and Don.F.Splittstoiser. 1976. Food Microbiology Public

Health and Spoilage Aspect. The AVI Publishing Company. London Eckles, E.H., W.B. Combs and H. Macy. 1984. Milk and and Milk Product. Mc

Graw Hill Book Co Inc. New York Fardiaz, Srikandi. 1993. Analisa Mikrobiologi Pangan. PT. Raja Grafindo Persada.

Jakarta Foodsci. 2001. Yoghurt. (Http://www.foodsci.voguelph.co/dairy.edu/yoghurt.html) Giese J. 1996. Fats, oils, and fat replacers. Food Technol. 50(4): 78-84. Glicksman M. 1991. Hydrocolloids and the search for the “oily grail”. Food

Technol., 45(10): 94-102 �

"�##�$%��%&'(��)�'��&�� *��&+�,�'-�(�'+��

�#� "��.�/� �&�&�&�� -&'�&0�� #(��

�++.�11222�#��'��*��.��&1�&'(��1'��(�&��+��

Godersca, Kamila. 2007. Effect of Prebiotic Additives to Carrot Juice on The

Survivability of Lactobacillus and Bifididovacterium Bacteria. Institute of Food Technology of Plant Origin, Agricultural University of Poznań, POLOGNE

Gibson GR, Roberfroid MB. 2008. Dietary modulation of the human colonic

microflora: introducing the concept of prebiotics. J Nutr 125:1401–12. Gibson GR, Beatty EB, Wang X. 1995. Cummings JH. Selective stimulation of

bifidobacteria in the human colon by oligofructose and inulin. Gastroenterology 1995;108:975–82

Ganapathi, G. Vengadesan. 2002. In vitro propagation of Acacia species. Volume

163, Issue 4. Halaman 663-671 Hadiwiyoto, S. 1994. Teori dan Prosedur Pengujian Mutu Susu dan Hasil

Olahannya. Cetakan Pertama. Liberty. Yogyakarta.

http://www.foodsci.voguelph.co/dairy.edu/yoghurt.html

http://www.sciencedirect.com/science?_ob=PublicationURL&_tockey=%23TOC%235143%232002%23998369995%23344829%23FLA%23&_cdi=5143&_pubType=J&view=c&_auth=y&_acct=C000050221&_version=1&_urlVersion=0&_userid=10&md5=6bb002eb70a1a87a88d6e660ab860abf

http://www.sciencedirect.com/science?_ob=PublicationURL&_tockey=%23TOC%235143%232002%23998369995%23344829%23FLA%23&_cdi=5143&_pubType=J&view=c&_auth=y&_acct=C000050221&_version=1&_urlVersion=0&_userid=10&md5=6bb002eb70a1a87a88d6e660ab860abf

104

Handayani, E; Ngatirah; E. Rahayu: T. Utami. 2000. Ketahanan dan Viabilitas

Probiotik Bakteri Asam Laktat selama Proses Pembuatan Kultur Kering dengan Metode Freeze dan Spray Drying. Himpunan Makalah Seminar Nasional Teknologi Pangan, Semarang

Harsono, A., Wardoyo, R. and Otani, H. 1989. Microbial Flora in Dadih, A

Traditional Fermented Milk in Indonesia. Lebensm Wiss. U.Technol.22:20-24

Hatchwell LC. 1994. Overcoming flavor challenges in lowfat frozen desserts. Food

Technol. 48(2): 98-102. Hekmat, Sharareh and Donald J. McMahon. 1992. Surival of Lactobacillus

acidophilus and Bifidobacterium bifidum in Ice Cream for Use as a Probiotic Food. Western Dairy Foods Research Center DeparbTlent of Nubition and Food Science Utah State University Logan 8432287130

Hyde GM. 2001. Ice cream. Department of Biological Systems Engineering,

Washington State University, Pullman, WA Available from http://www.wsu.edu/~gmhyde/433_web_pages/433webpages2001/ICE%20Cream2.htm Accessed Nov. 20. 2006.

Hunter, R.H.F. 1995. Fisiologi dan Teknik. Reproduksi flewan Betina Domestik.

Terjemahan: Putra H. ITB dan Univ Udayana, Bandung. Idris, S. 1992. Pengantar Teknologi Pengolahan Susu. Fakultas Peternakan

Universitas Brawijaya. Malang Ismunandar. 2010. Di Balik Lembutnya Es Krim. Departemen Kimia FMIPA IPB.

http://www.kimianet.lipi.go.id/utama.cgi?artikel&1102121768&1. Tanggal Akses 22 Maret 2010

Jay, M. James. 1992. Modern Food Microbiology. 6th Edition. Modern Asia Editor.

New York Jayanata, Christoper. E. 2008. Probiotik, Prebiotik, dan Simbiotik.

Http://duniapangankita.files.wordpress.com/2008/03/probiotik-prebiotik-dan-sinbiotik.doc

Jeremiah, L.E. 1996. Freezing Effect on of Food Quality. Marcell Decker Inc. New

York Jones SA. 1996. Physical, chemical and sensory aspects of fat replacement. In:

Roller S, Jones SA. editors. Handbook of fat replacers. Boca Raton: CRC Press. P 3-26.

http://www.wsu.edu/~gmhyde/433_web_pages/433webpages2001/

http://www.kimianet.lipi.go.id/utama.cgi?artikel&1102121768&1

105

Kimberley, J. Decker. 2008. Prebiotics and Probiotics: Banking on Synergism. University of California. Davis Klahorst SJ. 1997. Ice cream: combination chemistry. Food Prod. Des. August.

Available from: (http://www.foodproductdesign.com/archive/1997/0897AP.html)

Kompas. 2002. Probiotik dan Prebiotik untuk Kesehatan. Indonesian Nutrition

Network (INN). Jakarta Kompas. 2010. Probiotik Tingkatkan Kesehatan Tubuh.

http://kesehatan.kompas.com/read/2010/03/25/12155454/Probiotik.Tingkatkan.Kekebalan.Tubuh. Diakses tanggal 02 November 2010 (01:48)

Kuntz LA. 1996. Where is fat reduction going? Food Prod. Des. March, 24-47.

Available from (http://www.foodproductdesign.com/archive/1996/0396CS.html)

Kwantes, J. 1998. Modern Food Microbiology. Van Nostrand Reinhold Company.

New York LaBarge RG. 1988. The search for a low-calorie oil. Food Technol. 42(1): 84-90. Marshall RT. 1991. Fat in ice cream. Dairy Field. 74: 32. Marshall RT, Arbuckle WS. 1996. Ice Cream, 5th ed. Chapman and Hall, New York,

NY. 349 p. Marshall RT, Goff HD. 2003. Formulating and manufacturing ice cream and

other frozen desserts. Food Technol. 57(5): 32-45. Marshall RT, Goff HD, Hartel RW. 2003a. Chapter 2. Composition and properties. In

”Ice cream”, 6th ed. Kluwer Academic/Plenum Publishers, NY. p 11-50. Marshall, RT, Goff, HD, Hartel RW. 2003b. Chapter 3. Ice Cream Ingredients. In

”Ice cream”, 6th ed. Kluwer Academic/Plenum Publishers, NY. p 51-86. Matteuzi D., Swennen E., Rossi M., Hartman T., Lebet V., 2004. Prebiotic effects of

a wheat germ preperation in human healthy subjects. Food Microbiol. 21, 119-124

Nutrition Data. 2010. Nutrition of : Cream, Whipped, Cream Topping,

Pressurized. http://nutritiondata.self.com/facts/dairy-and-egg-products/52/2 Tanggal askes 19 Desember 2009

Purwati, S. 1999. Pengaruh Jenis dan Konsentrasi Sumber Gula Terhadap Sifat

Fisik, Kimia dan Organoleptik Soygurt. Skripsi. Fakultas Teknologi

106

Pertanian. Universitas Brawijaya. Malang Padaga, M dan M, E, Sawitri. 2005. Es Krim yang Sehat. Trubus Agrisarana.

Surabaya Queenca. 2008. CMC. Http://queenca.wordpress.com/2008/01/CMC Ray, B. 1996. Fundamental Food Microbiology, dalam Purwanhani, N. S., E.S,

Rahayu dan Eni, H. 2000. Isolasi Lactobacillus yang Berpotensi Sebagai Kandidat Probiotik. Seminar Nasional Industri Pangan 2000. Volume 1: 125-133

Richard et. al. 2005. A Synbiotic Combination of Resistant Starch and Bifidobacterium lactis Facilitates Apoptotic Deletion of Carcinogen-Damaged Cells in Rat Colon. The American Society for Nutritional Sciences J. Nutr. 135:996-1001

Salem, Moussa. 2005. Production of Ice Cream Proiotic. INIST-CNSR. South

Africa Salminen, S. and A.V. Wright. (Ed). 1998. Lactid Acid Bacteria Microbiology and

Functional Aspects. Marcel Decker Inc. London Sandrou DK, Arvanitoyannis IS. 2000. Low-fat/calorie foods: current state and

perspectives. Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 40(5): 427-47. Scardovi, V. Genus Bifidobacterium in Peter, S., Mair N., Sharpe M.E., Holt J. G.,

eds. Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, Vol 2. Baltimore. William and Wilikins, 1986: 1418-1435

Schmidt K, Lundy A, Reynolds J, Yee LN. 1993. Carbohydrate or protein based

fat mimicker effects on ice milk properties. J. Food Sci. 58(4): 761-3 Sudarmono. 2000. Pencermatan terhadap Probiotik.

Http://www.pediatrik.com/pojok_khusus/kontribusi_prebiotik.doc Tensika. 2008. Serat Makanan. Jurusan Teknologi Industri Pangan Fakultas

Teknologi Pertanian Universitas Padjadjaran. Bandung Tortora, G. J., B. R. Funke and C. L. Case. 2001.. Microbiology An Introdution.

Addition Wesley Longman Inc. New York Tranggono, dkk. 1989. Bahan Tambahan Pangan (Food Additive). Pusat Antar

Universitas Pangan dan Gizi. UGM. Yogyakarta Webb, B. and E. O. Whitties. 1970. By Product From Milk. The AVI Publishing

http://queenca.wordpress.com/2008/01/CMC

http://jn.nutrition.org/misc/terms.shtml

107

Company Inc. Westport-Connecticut Widiatmoko, M. C. dan A, J, Hartomo. 1992. Emulsi dan Pangan Instan Berlesitin.

Andi Offset. Yogyakarta Winarno, F. G. 1995. Kimia Pangan dan Gizi. P.T. Gramedia. Jakarta 3&��4�/��5��

�� !�

Yusri, Adhi Riyadi. 2008. Es Krim. http://chemistrywan.blogspot.com/2008/02/es-

krim.html. Tanggal akses 21 Desember 2008

http://chemistrywan.blogspot.com/2008/02/es-krim.html

http://chemistrywan.blogspot.com/2008/02/es-krim.html

108

Lampiran 1. Prosedur Analisa Mikrobiologis dan Kimia

1. 1. Analisa “Overrun” (Idris, 1992)

l Wadah es krim yang mempunyai berat tertentu ditimbang

l ICM dimasukkan sampai mencapai volume tertentu (misalnya 100 ml)

kemudian ditimbang

l ICM diolah sesuai dengan prosedur penelitian

l Wadah es krim disiapkan lagi dengan wadah yang sama dan ditimbang

l ICM yang telah diolah dimasukkan dalam wadah tersebut dan dibekukan

l Setelah proses pembekuan selesai, permukaan es krim dalam wadah diratakan

sehingga volumenya tinggal 100 ml

l “Overrun” dihitung dengan persamaan berikut:

% Overrun = (Berat ICM – Berat Es Krim) x 100%

Berat Es Krim

1. 2. Analisa Kecepatan Leleh (Nelson and Trout, 1965)

l Diukur suhu dan kelembaban ruangan

l Diambil sebagian es krim dari “ice cream maker” dengan menggunakan skop

es krim sehingga diperoleh sampel dengan berat seseragam mungkin (kurang

lebih 100 gram) dan dimasukkan dalam cawan petri kemudian dibekukan

dalam “freezer” selama 24 jam.

l Sampel dari “freezer” diambil dan diletakkan pada suhu kamar dan dibiarkan

sampai semua meleleh.

l Waktu yang dibutuhkan sampai semua meleleh dicatat dan selanjutnya

dianalisis statistik.

109

1. 3. Analisa Total Bakteri Asam Laktat (Lay, 1994)

• Tabung reaksi yang berisi larutan pengencer steril ditandai I, II dan III, dan

ditandai pula masing-masing cawan petri dengan nilai pengencerannya.

• Suspensi/biakan yang akan dihitung jumlah bakterinya dikocok dan diambil

1 mL contoh, kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi I yang berisi 9

mL larutan pengencer.

• Tabung reaksi I dikocok sehingga bakteri tersebar dan terlepas dari

rantainya.

• Dipindahkan 1 mL dari tabung reaksi I ke tabung reaksi II yang berisi 9 ml

larutan pengencer, kemudian dikocok. Dari tabung reaksi II dipindahkan 1

mL ke cawan petri bertanda 10-2.

• Dipindahkan 1 mL dari tabung reaksi II ke tabung reaksi III, kemudian

dikocok. Dari tabung reaksi III dipindahkan 1 mL ke cawan petri yang

bertanda 10-3 dan seterusnya sampai pengenceran 10-9.

• Medium steril bersuhu 40°C dituang ke dalam setiap cawan petri, kemudian

digoyang secara perlahan-lahan sehingga biakan tercampur dengan baik.

• Setelah medium membeku, cawan petri dibalik dan dimasukkan ke dalam

inkubator selama 24 jam pada suhu 37°C.

• Perhitungan jumlah koloni menggunakan “Quebec Colony Counter”.

• Dilakukan duplo setiap kali pengenceran.

• Untuk biakan kering juga diambil 5 gr contoh kemudian dimasukkan dalam

45 ml larutan pengencer.

110

1. 4. Analisa pH dengan pH Meter (Apriyantono, 1989)

§ Standarisasi pH meter

• pH meter dinyalakan dan dibiarkan stabil selama 15-30 menit

• Untuk standansasi rutin, biasanya pH meter dikalibrasi dengan dua

macam buffer yaitu buffer pH 4 dan buffer pH 7

• Elektrode pH meter dikalibrasi ke dalam larutan buffer pH 4, kemudian

dibilas dengan akuades dan dikalibrasi dalam larutan buffer pH 7 lalu

dibilas dengan akuades kembali

• Elektrode dikeringkan dengan kertas tisu

• Elektrode dicelupkan dalam larutan buffer

• Elektrode dibiarkan beberapa saat sampai setimbang dengan larutan

buffer sehingga diperoleh pencapaian yang stabil

• Ditekan tombol kalibrasi sampai diperoleh angka pH yang sesuai dengan

pH buffer

§ Penetapan pH

• pH meter dinyalakan, dibiarkan stabil selama 15-30 menit

• Elektrode dibilas dengan alikuot sample atau aquades (jika menggunakan

aquades, keringkan elektrode dengan kertas tisu)

• Elektrode dicelupkan pada larutan sampel (sampel hasil pengenceran

dengan aquades)

• Elektrode dicelup beberapa saat, sampai diperoleh pembacaan yang stabil

• Angka stabil yang ditunjukkan pH meter merupakan nilai pH sampel

• Setiap kali akan mengukur pH sampel lain, sebelumnya elektrode pH

111

meter dibersihkan dengan akuades terlebih dahulu

1. 5. Analisa Total Asam (Ranggana, 1977)

• 10 mL sample dimasukkan ke dalam labu ukur 100 mL, lalu ditambahkan

aquades sampai tanda batas lalu dihomogenkan dan disaring

• Filtrat diambil 10 mL dan dimasukkan ke dalam erlemenyer

• Ditambahkan 2-3 tetes larutan 1% indicator pp

• Dititrasi dengan larutan 0,1 N NaOH sampai warna larutan berubah menjadi

merah muda dan warna tersebut tidak hilang selama 30 detik

• Pada akhir titrasi dihitung jumlah NaOH yang digunakan

Total asam (%) = (V NaOH x N NaOH x FP x BM asam laktat)/W x 100%

Keterangan:

FP = faktor pengenceran (100/0)

V = volume larutan NaOH (mL)

N = Normalitas larutan NaOH

W = Berat cuplikan (mg)

Standarisasi larutan NaOH 0,1 N

o Ditimbang 0,1 g asam oksalat dengan BM = 126

o Dimasukkan ke dalam erlemenyer 250 mL

o Ditambahkan aquades sebanyak 25 mL

o Ditambahkan larutan indikator pp sebanyak 2-3 tetes

o Dititrasi dengan larutan NaOH sampai terbentuk warna merah jambu

o Diulangi sebanyak 3 kali ulangan

Perhitungan : N NaOH = (gram asam oksalat x 2)/(0,126 x mL NaOH)

112

1. 6. Analisa Total Asam Digesta Caecum Tikus Wistar

o Sampel (Caecum Wistar) dimasukan dalam penghancur (mincer)

o Setelah diperoleh filtrat sampel ditimbang sesuai dengan keperluan

pengujian

o Sampel yang telah ditimbang ditambah dengan 3 tetes indicator pp

o Dititrasi dengan larutan NaOH 0,1 N hingga tanda akhir titrasi (TAT)

menjadi warna merah jambu

o Dilakukan Perhitungan dilakukan dengan rumus di bawah ini

% Acidity =

1. 7. Prosedur Analisa Lemak Susu Cara Babcock (Sudarmadji dkk, 1997)

• Ditimbang 18 gram susu dalam botol Babcock dan ditambahkan 17,5 mL

H2S04 ± 95% (BJ = 1,82-1,83). Kemudian dicampur dengan

menggoyangkan botol sampai gumpalan susu tercampur semua.

• Botol Babcock dipasang dalam sentrifuge dan jangan lupa botol Babcock

yang sama beratnya dipasang untuk keseimbangan. Lalu diputar selama 5

menit.

• Ditambahkan air panas (60°C) sampai labu dari botol Babcock terisi penuh.

Dilanjutkan sentrifugasi selama 2 menit lagi. Kemudian ditambahkan air

panas lagi sampai lemak cair terletak dalam leher botol (kolom) yang

berskala. Sentrifuge lagi selama 1 menit.

9xsamplebobot

NaOHNxlitermlAcidity =

100%xsampelW

Laktat As. BE x NaOH N x NaOH mL

113

• Botol dimasukkan dalam air hangat (55-60°C) selama 3 menit atau lebih.

• Diusahakan permukaan lemak dalam botol sama dengan permukaan air

pemanas.

• Diambil dan dikeringkan botol dan kolom lemak diukur dari ujung bawah

sampai meniscus atas dengan pengukur kapiler atau lainnya. Kemudian

dinyatakan kadar lemak dalam % berat.

1.9. Analisa Total Gula

• Pereaksi

o Dibuat pereaksi Anthrone 0.1% dalam asam sulfat pekat.

o Dibuat Larutan glucosa standar 0,2 mg/mL. 200 mg glucosa dilarutkan

dalam 100 mL aquades. Diambil 10 mL dan diencerkan menjadi 100 mL

(1 mL = 0,2 mg glukosa).

• Cara Kerja

o Dipipet ke dalam tabung reaksi 0,0 (blanko); 0.2; 0.4; 0.6; 0.8; 1.0 mL

larutan glucosa standar. Lalu ditambahkan aquades sampai total volume

masing-masing tabung reaksi 10 mL.

o Ditambahkan dengan cepat 5 mL pereaksi Anthrone ke dalam masing-

masing tabung reaksi.

o Tabung reaksi ditutup dan dikocok.

o Dipanaskan dalam air mendidih selama 12 menit.

o Didinginkan dengan cepat menggunakan air mengalir.

o Larutan dipindahkan dalam kuvet dan baca absorbansinya pada λ = 630

nm.

114

o Kemudian dibuat kurva hubungan antara absorbansi dengan konsentrasi

glukosa.

1.10. Analisa SCFA (Tigtgemeyer, et al., 1991)

Massa padat pada digesta di caecum tikus dipisahkan dengan cara

sentrifugasi dengan kecepatan 6.750 G selama 15 menit. Supernatan diambil,

kemudian ditambahkan asam metafosforat 25% dengan perbandingan 4 : 1,

selanjutnya disentrifugas lagi dengan kecepatan 31.000 G selama 30 menit.

Supernatan hasil sentrifugasi dianalisis dengan gas chromatography (GC),

dengan kondisi kolom GP 10% sp 1200/1% H3PO4 pada 80/100 mesg

chromosorb WAW. Suhu kolom 1300 C, suhu injector 220°c, tekanan gas

nitrogen 0,98.

1. 11. Pemilihan Perlakuan Terbaik (De Garmo et. al., 1979)

Untuk menentukan kombinasi perlakuan terbaik digunakan metode indeks e

fektivitas dengan prosedur pembobotan, sebagai berikut:

l Dikelompokkan parameter

l Diberikan bobot 0 – 1 pada setiap parameter pada masing-masing kelompok.

Bobot yang diberikan sesuai dengan tingkat kepentingan setiap parameter

dalam mempengaruhi tingkat penerimaan konsumen yang diawali oleh panelis

Pembobotan = Nilai Total setiap Parameter Nilai Total Parameter

l Dihitung Nilai Efektivitas (NE) dengan rumus:

NE = Np – Ntj Ntb – Ntj

115

Keterangan:

NE = Nilai efektivitas ; Ntj = Nilai terjelek

NP = Nilai Perlakuan ; Ntb = Nilai terbaik

Untuk parameter dengan rerata semakin besar semakin baik, maka nilai

terendah sebagai salah nilai terjelek dan nilai tertinggi sebagai nilai terbaik.

Sebaliknya untuk parameter dengan nilai semakin kecil semakin baik, maka

nilai tertinggi sebagai nilai terjelek dan nilai terendah sebagai nilai terbaik.

l Dihitung Nilai Produk (NP)

Nilai produk diperoleh dari perkalian Nilai Efektivitas dengan bobot nilai.

l Dijumlahkan nilai produk dari semua parameter pada setiap kelompok.

Kelompok yang mempunyai nilai produk teringgi adalah perlakuan terbaik

pada kelompok parameter.

l Kelompok terbaik dipilih dengan perlakuan yang memiliki Nilai Produk

tertinggi untuk parameter organoleptik.

116

Lampiran 2. Dokumentasi Penelitian

Proses Pencampuran Bahan Awal Pasteurisasi Campuran Awal Es Krim

Wadah yang digunakan untuk Fermentasi Campuran Es Krim yang sudah diberi

Kultur Starter Campuran dalam

Wadah Steril

Proses Inkubasi Setelah Proses Inkubasi

117

Produk Es Krim Sinbiotik Rendah Lemak Berbasis Gum Arab setelah Proses

Pembuihan di Ice Cream Maker (Es Krim yang menggunakan gum arab 9%)

Es Krim Sinbiotik Berbasis Gum Arab Penyimpanan Es Krim di Lemari Es

118

Foto Dokumentasi Tikus Wistar dan Proses Anastesi

119

Lampira 3. Data Hasil Penelitian

3. 1. Overrun

% Overrun = (Berat ICM – Berat Es Krim) x 100%

Berat Es Krim

P U B1 B2 [B2-B1][B2 – B1]

Overrun[B1]

PO

I 200 241,76 41,76 0,2088 20,88II 200 236,52 36,52 0,1826 18,26III 200 245,24 45,24 0,2262 22,62IV 200 246,24 46,24 0,2312 23,12

P1

I 200 239,64 39,64 0,1982 19,82II 200 240,44 40,44 0,2022 20,22III 200 241,64 41,64 0,2082 20,82IV 200 236,92 36,92 0,1846 18,46

P2

I 200 237,96 37,96 0,1898 18,98II 200 238,56 38,56 0,1928 19,28III 200 237,8 37,8 0,1890 18,9IV 200 237,84 37,84 0,1892 18,92

P3

I 200 237,28 37,28 0,1864 18,64II 200 239,36 39,36 0,1968 19,68III 200 237,12 37,12 0,1856 18,56IV 200 237,44 37,44 0,1872 18,72

P4

I 200 238,56 38,56 0,1928 19,28II 200 237,28 37,28 0,1864 18,64III 200 236,52 36,52 0,1826 18,26IV 200 236,88 36,88 0,1844 18,44

120

3. 2. Kecepatan Meleleh Produk

P U B (g) T (menit)

Kec. Meleleh (g/menit) [B]

[T]

PO

I 10 2,3 4,35II 10 2,8 3,57III 10 4 2,5IV 10 3,7 2,7

P1

I 10 4,3 2,33II 10 4 2,5III 10 4,3 2,33IV 10 3,8 2,63

P2

I 10 4 2,5II 10 4,2 2,38III 10 4,4 2,27IV 10 4,2 2,38

P3

I 10 4,8 2,08II 10 4,1 2,44III 10 4,3 2,33IV 10 3,9 2,56

P4

I 10 3,6 2,78II 10 4,5 2,22III 10 4,8 2,08IV 10 4,3 2,33

121

3. 3. Total Asam Produk

P U B (g) N NaOH (N) Be As Laktat FP V NaOH (ml)

Total AsamN x Be x FP x V

B

PO

I 8 0,1 90,8 0,1 14,27 1,62II 8 0,1 90,8 0,1 13,92 1,58III 8 0,1 90,8 0,1 12,78 1,45IV 8 0,1 90,8 0,1 13,22 1,5

P1

I 8 0,1 90,8 0,1 12,16 1,38II 8 0,1 90,8 0,1 12,51 1,42III 8 0,1 90,8 0,1 11,81 1,34IV 8 0,1 90,8 0,1 12,51 1,42

P2

I 8 0,1 90,8 0,1 15,15 1,72II 8 0,1 90,8 0,1 14,8 1,68III 8 0,1 90,8 0,1 12,16 1,38IV 8 0,1 90,8 0,1 14,27 1,62

P3

I 8 0,1 90,8 0,1 12,69 1,44II 8 0,1 90,8 0,1 14,27 1,62III 8 0,1 90,8 0,1 16,04 1,82IV 8 0,1 90,8 0,1 13,04 1,48

P4

I 8 0,1 90,8 0,1 13,04 1,48II 8 0,1 90,8 0,1 15,86 1,8III 8 0,1 90,8 0,1 14,54 1,65IV 8 0,1 90,8 0,1 14,8 1,68

122

3. 4. Total BAL Produk

3. 5. Total Asam Digesta Produk

P U 10 10 10

SPC SPC Keterangan B

A B C A

PO

I 64 26 2 640000000 6,40E+008 > 30 - < 300 hanya A II 53 34 4 530000000 5,30E+008 B/A > 2 sehingga yg dipakai A 6,42III 44 13 2 440000000 4,40E+008 > 30 - < 300 hanya A IV 72 24 5 720000000 7,20E+008 > 30 - < 300 hanya A

P1

I 69 14 9 690000000 6,90E+008 > 30 - < 300 hanya A II 84 9 2 840000000 8,40E+008 > 30 - < 300 hanya A III 77 22 5 770000000 7,70E+008 > 30 - < 300 hanya A IV 88 18 12 880000000 8,80E+008 > 30 - < 300 hanya A

P2

I 72 32 15 720000000 7,20E+008 B/A > 2 sehingga yg dipakai A 4,44II 112 39 6 1120000000 1,12E+009 B/A > 2 sehingga yg dipakai A 3,48III 99 31 8 990000000 9,90E+008 B/A > 2 sehingga yg dipakai A 3,13IV 68 14 23 680000000 6,80E+008 > 30 - < 300 hanya A

P3

I 90 9 14 900000000 9,00E+008 > 30 - < 300 hanya A II 57 12 16 570000000 5,70E+008 > 30 - < 300 hanya A III 132 28 24 1320000000 1,32E+009 > 30 - < 300 hanya A IV 83 19 12 830000000 8,30E+008 > 30 - < 300 hanya A I 94 12 16 940000000 9,40E+008 > 30 - < 300 hanya A II 76 21 12 760000000 7,60E+008 > 30 - < 300 hanya A III 115 34 22 1150000000 1,15E+009 B/A > 2 sehingga yg dipakai A 2,96

P U B (g) N NaOH (N) Be Asam Laktat FP V NaOH (ml)

Total AsamN x Be x FP x V

B

PO

I 8 0,1 90,8 0,1 0,7 0,08II 8 0,1 90,8 0,1 1,06 0,12III 8 0,1 90,8 0,1 1,32 0,15IV 8 0,1 90,8 0,1 0,7 0,08

P1

I 8 0,1 90,8 0,1 1,32 0,15II 8 0,1 90,8 0,1 1,23 0,14III 8 0,1 90,8 0,1 1,67 0,19IV 8 0,1 90,8 0,1 0,79 0,09I 8 0,1 90,8 0,1 1,32 0,15II 8 0,1 90,8 0,1 1,67 0,19III 8 0,1 90,8 0,1 1,41 0,16

123

3. 6. Total BAL Digesta Tikus (Uji Invivo 30 Hari)

3. 7. Total BAL Feses Tikus (Uji Ivivo 30 Hari)

P U 10 10 10

SPC SPC Keterangan Log SPCA B C

PO

I 58 7 2 580000000 5,80E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,76II 44 5 1 440000000 4,40E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,64III 55 13 4 550000000 5,50E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,74IV 62 16 1 620000000 6,20E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,79

P1

I 74 3 1 740000000 7,40E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,87II 85 11 2 850000000 8,50E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,93III 38 5 5 380000000 3,80E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,58IV 57 17 3 570000000 5,70E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,76I 99 21 1 990000000 9,90E+008 > 30 - < 300 hanya A 9II 75 8 2 750000000 7,50E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,88

P U 10 10 10

SPC SPC Keterangan Log SPCA B C

PO

I 35 11 3 350000000 3,50E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,54II 42 5 2 420000000 4,20E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,62III 33 18 2 330000000 3,30E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,52IV 32 4 3 320000000 3,20E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,51

P1

I 55 15 1 550000000 5,50E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,74II 64 9 2 640000000 6,40E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,81III 59 10 5 590000000 5,90E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,77IV 72 16 3 720000000 7,20E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,86I 66 4 1 660000000 6,60E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,82II 84 8 5 840000000 8,40E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,92III 62 19 1 620000000 6,20E+008 > 30 - < 300 hanya A 8,79

124

Lampiran 4. Data Analisa Penelitian 1. Data Analisa Sidik Ragam dan Uji Beda Nyata Terkecil (BNT) Es Krim Sinbiotik Rendah Lemak

1. 1. Overrun a). Data Analisa Overrun Produk (%)

b). Analisa Sidik Ragam

Keterangan : * Berbeda Nyata pada T 5 % c). Uji BNT 5%

PerlakuanUlangan

Total RerataI II III IV

P0 20,88 18,26 22,62 23,12 84,88 21,22P1 19,82 20,22 20,82 18,46 79,32 19,83P2 18,98 19,28 18,9 18,92 76,08 19,02P3 18,64 19,68 18,56 18,72 75,6 18,9P4 19,28 18,64 18,26 18,44 74,62 18,66

Total 97,6 96,08 99,16 97,66 390,5 97,63

SK DB JK KT F HITUNGF TABEL

Keterangan (Notasi)5% 1%Perlakuan 4 17,47 4,37 3,45 3,2 5,41 * Galat 15 18,97 1,26Total 19 36,44

18,66 18,9 19,02 19,83 21,22 KTG BNT 5%

1,26 1,69P4 P3 P2 P1 P0

Aa Aa Aa Aa Bb

125

1. 2. Kecepatan Meleleh a). Data analisa kecepatan meleleh es krim (10 gram/menit)


Keterangan : * Berbeda Nyata pada T 5 % c). Uji BNT 5%

P0 18,66 a0,24

0,36

<1,69

P1 18,9 a0,12

P3 19,02 a0,81 1,17

P2 19,83 a1,39 2,56

P4 21,22 b >1,69

2,35 2,35 2,38 2,45 3,28 KTG BNT 0,5%

Aa Bb Bb Bb

0,17703 0,03P4 P3 P2 P1 P0

Aa Aa Aa Bb

Cc

Dd


Ket (Notasi)5% 1%Perlakuan 4 2,6 0,64924 3,67 3,2 5,41 * Galat 15 2,66 0,17703Total 19 5,25

PerlakuanUlangan


P0 4,348 3,571 2,500 2,703 13,12 3,28P1 2,326 2,500 2,326 2,632 9,78 2,45P2 2,500 2,381 2,273 2,381 9,53 2,38P3 2,083 2,439 2,326 2,564 9,41 2,35P4 2,778 2,222 2,083 2,326 9,41 2,35

Total 14,03 13,11 11,51 12,605 51,26 12,82

126

1. 3. pH a). Data analisa pH es krim


Keterangan : Tn = Tidak Nyata (Tidak berbeda nyata antar perlakuan)

PerlakuanUlangan


P0 5,3 5,26 5,18 5,24 20,98 5,25P1 5,18 5,2 5,24 5,29 20,91 5,23P2 5,16 5,45 5,15 5,06 20,82 5,21P3 5,12 5,15 5,22 5,24 20,73 5,18P4 5,06 5,12 5,14 5,13 20,45 5,11

Total 25,82 26,18 25,93 25,96 103,89 25,97


Keterangan (Notasi)5% 1%Perlakuan 4 0,04 0,01 1,39 3,2 5,41 TnGalat 15 0,11 0,01Total 19 0,16

P0 2,350

P1 2,350,03

P3 2,380,06

P2 2,450,83

P4 3,28

127

1. 4. Total Asam a). Data analisa Total Asam Produk (%)


Keterangan : Tn = Tidak Nyata (Tidak berbeda nyata antar perlakuan)

1. 5. Total Lemak a). Data analisa total lemak produk (%)


PerlakuanUlangan


P0 9,88 9,72 9,82 10,15 39,57 9,89P1 3,8 3,62 3,88 4,28 15,58 3,9P2 3,1 2,98 2,86 2,66 11,6 2,9P3 1,93 2,12 1,86 1,72 7,63 1,91P4 0,84 0,56 0,65 1,2 3,25 0,81

Total 19,55 19 19,07 20,01 77,63 19,41

PerlakuanUlangan

Total RerataI II III IVP0 1,62 1,58 1,45 1,5 6,15 1,54P1 1,38 1,42 1,34 1,42 5,56 1,39P2 1,72 1,68 1,38 1,62 6,4 1,6P3 1,44 1,62 1,82 1,48 6,36 1,59P4 1,48 1,8 1,65 1,68 6,61 1,65

Total 7,64 8,1 7,64 7,7 31,08 7,77


Keterangan (Notasi)5% 1%Perlakuan 4 201,64 50,41 989,33 3,2 5,41 **Galat 15 0,76 0,05Total 19 202,41


Keterangan (Notasi)5% 1%Perlakuan 4 0,16 0,04 2,6 3,2 5,41 Tn Galat 15 0,23 0,02Total 19 0,39

128

PerlakuanUlangan

Total RerataI II III IVP0 6,40E+08 5,30E+08 4,40E+08 7,20E+08 2,33E+09 4,66E+08P1 8,40E+08 8,40E+08 7,70E+08 8,80E+08 3,33E+09 6,66E+08P2 7,20E+08 1,12E+09 9,90E+08 6,80E+08 3,51E+09 7,02E+08P3 9,00E+08 5,70E+08 1,32E+09 8,30E+08 3,62E+09 7,24E+08P4 9,40E+08 7,60E+08 1,15E+09 9,50E+08 3,80E+09 7,60E+08

Total 4,04E+009 3,82E+009 4,67E+009 4,06E+09 1,66E+10 3,32E+09

Keterangan : * Berbeda Sangat Nyata pada T 1 % c). Uji BNT 1%

P0 0,81 a1,10

2,09P1 1,91 b

0,99P3 2,9 c

1 3,09P2 3,9 d

6 9,09P4 9,89 e

0,81 1,91 2,9 3,9 9,89 KTG BNT 0,1%

0,051 0,41P4 P3 P2 P1 P0

Aa Bb Cc Dd Ee

129

1. 6. Total Bakteri Asam Laktat (BAL) Produk a). Data Analisa Total BAL Produk (CFU/100 Gram) b). Data Analisa Total BAL Produk ( log CFU/100 g )

c). Analisa Sidik Ragam

Keterangan : Tn = Tidak ada perbedaan yg nyata antar perlakuan 3. Data Analisa Sidik Ragam dan Uji BNT DigestaTikus dan Feses Tikus (Uji Invivo 30 Hari) yang Diformulasi dengan Pakan Kontrol dan Tambahan Es Krim Sinbiotik Rendah Lemak

2. 1. Total Bakteri Asam Laktat (BAL) Digesta Tikus

a). Data analisa Total BAL Digesta Tikus (CFU/100 Gram)

PerlakuanUlangan

Total RerataI II III IVP0 8,81 8,72 8,64 8,86 35,03 8,76P1 8,92 8,92 8,89 8,94 35,68 8,92P2 8,86 9,05 9 8,83 35,73 8,93P3 8,95 8,76 9,12 8,92 35,75 8,94P4 8,97 8,88 9,06 8,98 35,89 8,97

Total 44,52 44,33 44,71 44,53 178,09 44,52

PerlakuanUlangan

Total RerataI II III IVK 3,50E+08 4,20E+08 3,30E+08 3,20E+08 1,07E+09 3,57E+08F1 3,10E+08 6,40E+08 5,90E+08 7,20E+08 1,95E+09 6,50E+08F2 6,60E+08 8,40E+08 6,20E+08 1,12E+09 2,58E+09 8,60E+08

SK DB JK KT F HitF TABEL

Ket (Notasi)5% 1%Perlakuan 4 0,11 0,03 2,94 3,2 5,41 TnGalat 15 0,14 0,009653Total 19 0,26

130

b). Data analisa Total BAL Digesta Tikus ( LogCFU/100 Gram)


Keterangan : * Terdapat perbedaan yang nyata T 5 % d). Uji BNT 5%

2. 2. Total Asam Digesta Tikus

a). Data analisa Total Asam Digesta Tikus (%)

b). Analisa sidik ragam

PerlakuanUlangan

Total RerataI II III IVK 0,08 0,12 0,15 0,08 0,43 0,11F1 0,15 0,14 0,19 0,09 0,57 0,14F2 0,15 0,19 0,16 0,12 0,62 0,16


Keterangan (Notasi)5% 1% Perlakuan 2 0,005 0,002 1,975 4,26 8,02 Tn Galat 9 0,016 0,001 Total 11 0,021

8,55 8,73 8,90 KTG BNT 0,5%

0,02 0,23K F1 F2

Aa Aa

Bb


Ket (Notasi)5% 1%Perlakuan 2 0,24 0,12 5,62 5,14 10,92 * Galat 6 0,37 0,02Total 8 0,62

K 8,55 a0,18

F1 8,73 a0,16

F2 8,90 b

PerlakuanUlangan


131

Keterangan : Tn = tidak terdapat perbedaan yang nyata antar perlakuan 2. 3. Total pH Digesta Tikus a). Data analisa pH Digesta Tikus


Keterangan : ** Terdapat perbedaan yg sangat nyata ( BNT 1%) c). Uji BNT

2. 4. Total Bakteri Asam Laktat (BAL) Feses Tikus

a). Data analisa total BAL feses tikus (30 hari perlakuan ) (CFU/100 gram)

b). Data analisa total BAL feses tikus (30 hari perlakuan ) (Log CFU/100 gram)

PerlakuanUlangan


PerlakuanUlangan

Total RerataI II III IVK 5,80E+08 4,40E+08 5,50E+08 6,20E+08 2,19E+09 5,48E+08F1 7,40E+08 8,50E+08 3,80E+08 5,70E+08 2,54E+09 6,35E+08F2 9,90E+08 7,50E+08 9,40E+08 1,23E+09 3,91E+09 9,78E+08


Keterangan (Notasi)5% 1%Perlakuan 2 0,75 0,38 8,47 4,26 8,02 * *Galat 9 1,15 0,04Total 11 1,90

PerlakuanUlangan


5,94 6,25 6,56 KTG BNT 0,1%

0,04 0,68F2 F1 K

Aa Aa Aa

K 5,940,31

F1 6,250,30

F2 6,56

132


Keterangan : * Terdapat perbedaan yg nyata (BNT 5%) d). Uji BNT 5%

2. 5. Total pH Feses Tikus a). Data analisa total pH feses tikus


Keterangan : Tn = tidak ada perbedaan yg nyata antar perlakuan

PerlakuanUlangan



Keterangan (Notasi)5% 1%Perlakuan 2 88,42 44,21 3,37 4,26 8,02 TnGalat 9 206,47 13,12Total 11 294,89


Keterangan (Notasi)5% 1%Perlakuan 2 0,14 0,07 5,85 4,26 8,02 * Galat 9 0,25 0,01Total 11 0,38

K 8,730,05

F1 8,780,20

F2 8,98

8,73 8,78 8,98 KTG BNT 0,1%

0,01 0,17K F1 F2

A a A a B b B b

133

2. 6. Total Asam Asetat (mg/mg = mmol) (Kromatografi Ekstrak Digesta Tikus) a). Data analisa Total Asam Asetat (mg/mg = mmol)


Keterangan : ** terdapat perbedaan yang sangat nyata (BNT 1%) c). Uji BNT 1%

2. 7. Total Asam Propionat (mg/mg = mmol) (Kromatografi Ekstrak Digesta Tikus)

a). Data analisa total asam propionat (mg/mg = mmol)

PerlakuanUlangan


Total 18,64 19,420 18,990 20,120 78,56 19,64

PerlakuanUlangan




K 5,71 a0,9

F1 6,61 a0,71

F2 7,32 b

5,71 6,61 7,32 KTG BNT 1 %

0,169 0,95K F1 F2

Aa Aa Bb

134


Keterangan : ** Terdapat perbedaan yang sangat nyata (BNT 1 %) c). Uji BNT 1 %

2. 8. Total Asam Butirat (mg/mg = mmol) (Kromatografi Ekstrak Digesta Tikus) a). Data analisa Total Asam Butirat (ml/mg = mmol)


Keterangan : * terdapat perbedaan yang nyata (BNT 5%)

PerlakuanUlangan


K 2,76 a0,26

0,45F1 3,02 a

0,19F2 3,21 b

2,76 3,02 3,21 KTG BNT 1 %

0,022 0,34K F1 F2

Aa Aa Bb




Keterangan (Notasi)5% 1%Perlakuan 2 0,102 0,051 5,374 4,26 8,02 *Galat 9 0,188 0,010Total 11 0,290

135

c). Uji BNT 5%

1,04 1,63 1,66 KTG BNT 5 %

0,051 0,36K F1 F2

Aa Bb Bb

K 2,76 a0,59

0,45F1 3,02 b

0,03F2 3,21 b

137

b). Penentuan Nilai Efektivitas

Parameter Perlakuan Np Ntb Ntj

NE Np – Ntj Ntb – Ntj

Overrun

P0 21,22 23,12 18,26 0,61P1 19,83 20,82 18,46 0,58P2 19,02 19,28 18,9 0,32P3 18,9 19,68 18,56 0,3P4 18,66 19,28 18,26 0,39

Kec. Meleleh

P0 0,39 0,418 0,366 0,48P1 0,41 0,425 0,376 0,6P2 0,43 0,442 0,402 0,59P3 0,42 0,442 0,388 0,54P4 0,45 0,480 0,428 0,38

Total pH

P0 5,25 5,3 5,18 0,54P1 5,23 5,29 5,18 0,43P2 5,21 5,45 5,06 0,37P3 5,18 5,24 5,12 0,52P4 5,11 5,14 5,06 0,66

Total Asam

P0 1,54 1,62 1,45 0,51P1 1,39 1,42 1,34 0,63P2 1,6 1,72 1,38 0,65P3 1,59 1,82 1,44 0,39P4 1,65 1,8 1,48 0,54

Total lemak

P0 9,89 10,15 9,72 0,4P1 3,9 4,28 3,62 0,42P2 2,9 3,1 2,66 0,55P3 1,91 2,12 1,72 0,47P4 0,81 1,2 0,56 0,39

Total BAL

P0 8,76 8,86 8,64 0,53P1 8,92 8,94 8,89 0,58P2 8,93 9,05 8,83 0,47P3 8,94 8,95 8,76 0,92P4 8,97 9,06 8,88 0,51

139

b). Penentuan Nilai Efektivitas

140

Parameter Perlakuan Np Ntb Ntj

NE Np – Ntj Ntb – Ntj

Tot. BAL Digesta

K 8,55 8,62 8,51 0,341F1 8,73 8,86 8,49 0,655F2 8,9 9,05 8,79 0,404

PH Digesta Tikus

K 6,56 6,82 6,24 0,543F1 6,25 6,44 6,13 0,395F2 5,94 6,12 5,65 0,622

Tot. Asam Digesta Tikus

K 0,11 0,15 0,08 0,393F1 0,14 0,19 0,09 0,525F2 0,16 0,19 0,12 0,500

Tot. As. Asetat Digesta Tikus

K 5,71 5,91 5,59 0,378F1 6,61 7,02 6,18 0,509F2 7,32 7,88 6,57 0,573

Tot. As. Propionat Digesta Tikus

K 2,76 2,81 2,72 0,450F1 3,02 3,15 2,86 0,552F2 3,21 3,43 2,91 0,577

Tot. As. Butirat Digesta Tikus

K 1,04 1,1 0,99 0,455F1 1,22 1,29 1,19 0,364F2 1,25 1,39 1,1 0,508

Total BAL Feses Tikus

K 8,73 8,79 8,64 0,617F1 8,79 8,93 8,58 0,586F2 8,99 9,09 8,88 0,500

PH Feses Tikus

K 6,41 6,48 6,23 0,720F1 6,25 6,38 6,09 0,563F2 6,13 6,44 5,44 0,690

bab iv v dapus lampiran

Documents