SELAMAT DATANGANDA MEMASUKI KAWASAN TERTIBDISIPLINMANDIRI

DI DUNIA PRAKTIKUM AOMK

PRAKTIKUM ANALISIS OBAT, MAKANAN DAN KOSMETIKJENIS PRAKTIKKUM : LABORATORY/EXPERIMENTALPRAKTIKUM MANDIRI/SEMI MANDIRI (1-2 ORANG/KELOMPOK)DURASI 6 JAMTIAP KELOMPOK MEMPEROLEH MATERI : SEDIAAN MAKANAN/MINUMAN, OBAT DAN KOSMETIKMAHASISWA MEMBAWA SAMPEL SENDIRISAMPEL DIBAWA PADA SAAT PRETES DAN PRAKTIKUM.

TUGAS & KEWAJIBAN PRAKTIKANLULUS PRETESPersiapan :1. buat laporan sementara berupa : materi, metode, 7an prakt, dasar teori, mekanisme reaksi ,cara kerja skematis ( analisis kuali & kuantitatif, pembuatan larutn maupun yg lainya, perhitungan ( sampel dibawa saat pretes u/ memudahkan perhitungan ) 2. literatur standart jangan ketinggalan. Harus di bawa !3. Belajar & bisa jawab pertanyaan dgn benar.

PADA SAAT PRAKTIKUM:MEMAKAI PAKAIAN YANG SESUAI SYARI : TIDAK KETAT, PANJANG, TIDAK TRANSPARAN, DSBDATANG 10 MENIT SEBELUM PRAKTIKUM DIMULAI, TOLERANSI KETERLAMBATAN DENGAN ALASAN YANG DAPAT DITERIMA MAX 15 MENITMEMAKAI SEPATU, BUKAN SANDAL ATAU SEPATU SANDALMEMAKAI JAS PRAKTIKUMMEMBAWA SAMPEL

LANJUTAN BERLAKU SOPAN TIDAK MEROKOKMEMBAWA BEKAL MAKAN/MINUMAN SECUKUPNYA (JANGAN SAMPAI KELAPARAN SAAT PRAKTIKUM APALAGI SAMPAI PINGSAN KARENA LAPAR)

PRAKTIKUM YUUK ALAT-ALAT SEDERHANA, MISAL : PIPET TETES, TABUNG REAKSI (KALO PUNYA) DIBAWA SENDIRI

WAJIB BAWA LAP/SERBET & TISU

SEMUA PEREAKSI DIBUAT SENDIRI OLEH MAHASISWA. AND .

CARA BUAT & JML KEBUTUHAN DISIAPKAN DARI RMH ( BESERTA HITUNG2ANNYA)VOLUME PEREAKSI YANG DIBUAT SESUAI KEBUTUHANLARUTAN BAKU UNTUK TITRASI MAX 250 MLFASE GERAK UNTUK DENSITOMETRI MAX 20ML

Penimbangan :

Tablet ; hitung keseragaman bobot tablet sesuai FI III, jumlah yang dibutuhkan disesuaikan.Cairan ....? Jika lotion, salep,gel,penimbangan menggunakan wadah langsung.

BEDA PRAKTIKUM AOMK & KAPRAKTIKUM KA :PROSEDUR KERJA ADA DI BUKU PETUNJUK PRAKTIKUMPEREAKSI DISEDIAKANPRAKTIKUM AOMK PROSEDUR KERJA, MAHASISWA MENCARI SENDIRIPEREAKSI DIBUAT SENDIRI

REFERENSIFARMAKOPE INDONESIA, USP, BPEKSTRA FARMAKOPEAOACSNINEWS BURGER (KOSMETIK)KODEKS KOSMETIKAKODEKS MAKANANJURNAL

PERSIAPAN PRETES ?PELAJARI

TENTANG SAMPELNYA SENDIRI (FUNGSI, SIFAT, DLL)TENTANG SEMUA METODE PK YANG MUNGKIN DILAKUKAN BESERTA ALASANMETODE PK TERPILIH + ALASAN (MENGACU PADA KRITERIA METODE)DETAIL METODE TERPILIHCARA KERJAMAKSUD LANGKAH KERJACARA NGITUNG KADARREAKSI

RESPONSI ???BERUPA PRAKTIKUMMANDIRI (SENDIRI-SENDIRI)SAMPEL DIUNDIBAHAN ??? ADA 2 ALTERNATIF : MAHASISWA BELI SENDIRI, OR MaHaSiSwA IURAN KOLEKTIF tapi PENGADAAN DIBANTU LABPENILAIAN . ???PRAKTIKUM, HASIL (KETEPATAN)

MATA KULIAH TERKAITKAKOAOMKKROMATOGRAFISPEKTRO & ELEKTROKIMIAFTS (SEDIKIT)

Contoh sampelParacetamol syrup obat flu (SFL)Curcumin dlm minuman instan (D)Hidrokinon dalam krim pemutih (S)Paracetamol dalam jamu (K)Kofein dlm minuman berenergi (D)Nitrit dalam sosis (S)Vit C dalam suplemen (K)Sulfametoksazol dlm tablet (K)OMS dalam lotion (D)Ibuprofen syrup (SFL)

BAHAN TAMBAHAN MAKANAN (BTM)YANG DIIZINKAN(PerMenKes No : 722/Menkes/Per/IX/88)

Antioksidan : Vitamin C, Vitamin E, PG, BHA, BHTAntikempal : Ca-silikat, MgCO3, Al-silikatPengatur keasaman : Amonium karbonat, As asetat glasial, As sitratPemanis buatan : Sakarin, Siklamat, Sorbitol, AspartamPemutih dan Pematang tepung: Vitamin C, KBrO3, Na-stearil fumaratPengemulsi, Pemantap, Pengental : Pektin, Agar, Dekstrin, CMC, Amm alginat, Karagen, GelatinPengawet : Asam benzoat, Asam sorbat, K-nitrat atau nitrit, SO2Pengeras : Al-K-sulfat, Ca-glukonat, Ca-laktatPewarna : -Karoten, Kurkumin. Karamel, Klorofil, Karmin, Titanium dioksida, Biru berlian, Coklat HT, Tartrazin Penyedap rasa dan aroma, Penguat rasa : L-mentol, Asam l-glutamat, VanilinSekuestran : Asam sitrat, Di-Na-edetat, Na-fosfatBatas maksimum Lampiran 1 PerMenKes No : 722/Menkes/Per/IX/88

BAHAN TAMBAHAN YANG DILARANG DIGUNAKAN DALAM MAKANAN(Lampiran II PerMenKes No : 722/Menkes/Per/IX/88)

1. Asam borat (Boric Acid) dan senyawanya2. Asam salisilat dan garamnya (Salicylic Acid and its salt)3. Dietilpirokarbonat (Diethylpirocarbonate, DEPC)4. Dulsin (Dulcin)5. Kalium klorat (Potassium chlorate)6. Kloramfenikol (Chloramphenicol)7. Minyak nabati yang dibrominasi (Brominated vegetable oils)8. Nitrofurazon (Nitrofurazone)9. Formalin (formaldehyde)

(Lampiran II. PerMenKes No : 1168/Menkes/Per/X/1999)

Senyawa pada poin 1-9 tetap dilarang, ditambah : 10. Kalium bromat (Potassium bromate) (Berdasarkan hasil penelitian, penggunaan kalium bromat dalam makanan dan minuman dapat membahayakan kesehatan karena bersifat karsinogenik, oleh karena itu perlu dilarang penggunaannya)

A. BAHAN PENGAWETBahan pengawet

a. An-organik, antara lain : SO2, nitrat, nitritb. Organik, antara lain : asam sorbat, asam benzoat, paraben

I. Asam benzoat dan garamnya

Analisis kualitatif Uji dengan FeCl3

Analisis kuantitatif 1. Alkalimetri Sampel : kecap, jeli, jam, ikan kering dan ikan asin 2. Spektrofotometri UV asam benzoat diperiksa pada 265-280 nm Sampel : kecap, produk tomat lainnya, jeli, minuman ringan beralkohol, soft drink, dan jus buah-buahan. Tidak dapat untuk sampel padat. 3. Kolorimetri, HPLC

II. SO2

Digunakan dalam bentuk gas; dalam larutan sebagai sulphurous acid, atau sebagai Na, K atau Ca-sulfit; bisulfit, dan metabisulfit

Analisis kualitatif sulfit dan free sulfurous acid Dapat dipelajari pada AOAC dan Pearsons Chem.An.of Foods Analisis kuantitatif sulfurous acid

1. SO2 Kolorimetri

Sampel + air, diblender. Blenderan + NaOH 0,5N, dicampur, diaduk. Tambahkan H2SO4 0,5N, + reagen merkurat, dilarutkan dengan air, diencerkan. Enceran + reagen rosanilin + formeldehid 0,015%, dicampur, dibiarkan 30 menit. Absorbansi ditentukan pada 550 nm vs blanko. Kurva standar dibuat dan SO2 dikonversi dalam ppm. Sampel : buah-buahan yang telah dikeringkan.

2. Titrimetri

a. Refluks-alkalimetri

Sampel dalam labu destilasi + akuades + metanol, dicampur. Ke penampung destilat dimasukkan H2O2, akuades dan indikator, + NaOH 0,01 N hingga berwarna hijau, dst..

H2O2 + SO2 H2O + SO3

H2SO4 dititrasi dengan NaOH

b. Iodimetri

IV. Nitrit dan Nitrat

Garam nitrit dan nitrat umumnya digunakan pada proses curing daging untuk memperoleh warna yang baik, dan untuk mencegah pertumbuhan C. Butolinum

Analisis kuantitatif

1. Nitrit titrimetri2. Nitrit modified Griess reagent

Sampel + H2O bebas nitrit , dipanaskan diatas water bath, didiamkan 2 jam, diaduk. Tambahkan larutan HgCl2 jenuh, dicampur, dinginkan, disaring.

Filtrat + campuran as sulfanilat dalam asam asetat dan -naftilamin dalam asam asetat, didiamkan 1 jam. Absorbansi diukur pada 520 nm vs blanko.

3. Nitrat metode xilenol (dalam daging)

II. Sakarin

Analisis kualitatif

1. Uji organoleptis 2. Konversi menjadi asam salisilat 3. Uji fenol-asam sulfat

Uji untuk sakarin :

a. Uji dengan resorsinol

Sakarin memberikan warna hijau fluoresens jika direaksikan dengan resorsinol dan NaOH berlebih.

b. Uji KLT

Sakarin memberikan warna jingga muda dengan -naftilamin di bawah sinar UV

Analisis kuantitatif

1. Dengan pereaksi Nessler

khusus minuman tidak beralkohol

2. Gravimetri

3. TBA

Kadar baku pembanding untuk na-sakarin ditetapkan secara titrasi bebas air

4. Alkalimetri

Sakarin-Na destruksi N total

5. HPTLC

Analisis pemanis buatan (campuran aspartam, sakarin dan acesulfam)Sediaan : lemonades (soft drinks) dan sediaan oral cairPreparasi : soft drink yang biasanya mangandung 100 g/ml digunakan langsung setelah dibebaskan dari CO2 (asam karbonat). Untuk tablet, dilarutkan, disaring. Untuk keju dan Yoghurt, sampel disuspensi dengan air dan disaring. Kondisi KromatografiPlat: silikagel 60F254 (SILG-25UV254) M & N, 20X20 cm (untuk sejumlah besar sampel)Tehnik: ascendenF gerak: Xylene- asetat-n-propanol-asam formiat (45:7:6:2)Migrasi: 45 mm, 10 menitDeteksi: UVScanning densitometri (Camag Scanner II)Mode: absorbansi : 215/370 nmHasil kromatografiHRf: Aspartam 12, acesulfam 36, sakarin 58 (calculated from recorded chromatogram)

III. Vitamin C

Dalam keadaan kering cukup stabilDalam larutan cepat dioksidasi oleh udara dan dipercepat oleh adanya ion-ion logam berat (Cu, Fe)pengaruh sinar matahari berubah jadi coklat

IodimetriVitamin C dlm air bebas CO2 + H2SO4 encer

Titrasi dg lar I2 0,1 N 1 ml I2 0,1 N ~ 8,808 mg Vitamin C

2. Dengan larutan 2,6-diklorofenol indofenol (DCPIP) Sifat mereduksi vitamin C thdp lar DCPIP dari biru jadi tdk berwarna/merah jambuVitamin C dlm asam metafosfat 20 %, encerkan dg air ad vol tertentu titrasi dg lar baku DCPIP ad merah jambu mantap. Lakukan titrasi blangko

3. Kolorimetri Vitamin C + hasil diazotasi dari 4-metoksi-2-nitro anilin

Biru

570 nm4. Spektrofotometri Vitamin C

265 nm

245 nm

Dalam air netralDalam asam mineral

Vitamin C FI Edisi IV iodimetri Injeksi Vitamin C dan tablet DCPIP

penting untuk kosmetik R Formula BM Tocopherol H C29H5002 430,72 Tocopherol asetat CH3CO C31H5203 472,76

Vitamin E alami bersifat dextrorotarory (d) Vitamin E sintetik merupakan campuran (d l) Tocopherol , dan aktivitas biologis

Sbg -tocopherolPenetapan Kadar Sampel dlm alkohol refluks dg lar H2SO4 alkoholik 5 N + 3 jam, terlindung dari matahari. Didinginkan, + alkohol absolut ad vol tertentu. Sejumlah tertentu aliquat di atas, vol tertentu + H2SO4 alkoholik 0,5 N, air dan indikator 2 tetes lar difenilamin. Larutan ini dititrasi dg lar Ce(SO4)2 0,01 N ad warna biru mantap + 10.

Lakukan titrasi blangko 1 ml larutan Ce(SO4)2 0,01 N ~ 2,363 mg C31H5203 1 ml larutan Ce(SO4)2 0,01 N ~ 2,154 mg C29H5002

Penetapan total tocopherol asetat Dilakukan saponifikasi yakni sampel dalam alkohol absolut direfluks dgn KOH + 20 menit terlindung dari cahaya, + HCl pekat tetes demi tetes dinginkan Dimasukkan dalam corong pisah + airEkstraksi beberapa kali dengan eter

Fase eter dikumpulkan sisa + alkohol absolut, encerkan ad vol tertentu dg alkohol absolut larutan sampelLar sampel vol tertentu + 1 ml FeCl3 0,2% dlm alkohol absolut + 1 ml lar .-dipyridyl 5% dlm alkohol absolut encerkan dg alkohol absolut ad vol tertentu gojog ad homogen warna merah A 520Lar blangko A 520 (sbg koreksi)

Total tocopherol = asetat (mg/g) 1010Ak X 32,01 X CI X C

Tocopherol (mg/g) =

Keterangan : AK : As 520 AB 520 (terkoreksi) I : tebal kuvet (cm)C : konsentrasi sampel (g/100 ml lar sampel)Ak X 32,0I X C

TURUNAN ANILIN DAN p-AMINOFENOL

I. Parasetamol Penetapan kadar1. N - total/Kjeldahl (FI III untuk bahan baku) Dasar : destruksi/digesti 2. Nitrimetri

3. Spektrofotometri UV Untuk sediaan (tablet, sirup, eliksir) tunggal, spektrum parasetamol di-scan pada 240-350 nm. Kadar baku pembanding untuk parasetamol juga dapat ditetapkan secara spektrofotometri UV. Pelarut yang digunakan : metanol-air.4. HPLC atau KCKT Untuk uji parasetamol dalam tablet, sediaan berupa larutan dan suspensi oral

5. HPTLC Sediaan: tablet, kapsul [parasetamol, kaffein, vit C, fenilefrin-HCl] Preparasi: diekstraksi dengan etanol 80 % Kondisi Kromatografi Plat : HPTLC pre-coated, silika gel 60 F254 glass, 10X20 cm Tehnik: horizontal F gerak: (i) metilen klorida-etilasetat-etanol-asam formiat (35:20:40:5, v/v); (ii) metilen klorida-etilasetat-etanol (50:50:10, v/v) Migrasi: 50 mm, 25 menit Deteksi: UV Scanning densitometri (Camag Scanner II) Mode: absorbansi : parasetamol dan kaffein 254 nm; fenilefrin-HCl 274 nm; vit C 264 nm Komentar : metode ini dapat dipakai untuk menilai stabilitas parasetamol; produk dekomposisi utama: p-aminofenol

ASAM HIDROKSIBENZOATDAN TURUNANNYA

Sifat kimia

Asam yang cukup kuat digunakan sebagai standar primerGugus OH pada posisi ortho menaikkan ionisasi COOH menjadi 100 X ionisasi COOH (a)Gugus OH pada posisi meta dan para mempunyai ionisasi seperti (a)Substitusi pada gugus OH oleh gugus alkil atau asil tidak berpengaruh besar pada ionisasi asam

Berdasarkan keterangan 2, 3 dan 4 dapat disimpulkan :semua asam hidroksi benzoat dan derivat dengan gugus karboksil tidak tersubstitusi dapat ditetapkan kadarnyadengan cara titrasi langsung dengan basa kuat menggunakan indikator phenophthalein (pp)I. Asam benzoat

1. HPTLC Sediaan: lotion, ointment [asam salisilat (AS) dan asam benzoat (AB)] Preparasi: diekstrak atau diencerkan dengan metanol atau benzen Kondisi Kromatografi Plat: HPTLC pre-coated, silikagel 60 F254, 10X10 cm Tehnik: ascenden (menaik) F gerak: etil asetat-aseton (9:2, v/v) 11 ml; PE-asam asetat (9:1, v/v) 10 ml Migrasi: - Deteksi: UV Scanning densitometri (Camag Scanner II) Mode: absorbansi : AS dan AB 267 nm; AB 223 nm, AS 295 nm

Catatan: kromatogram dapat di-scan pada 223 nm dan 295 nm masing-masing untuk serapan maksimum AS dan AB, kendati demikian 267 nm dipilih sebagai the iso-absorption point Penetapan Kadar

2. HPTLC Sediaan: kosmetik, sun screen lotion, tanning lotion, liquid dosage form (oral), tablet, soft gelatin capsules [methyl paraben (MP), propyl paraben (PP), p-hydroxybenzoic acid (PHB), p-methoxycinnamic acid (PMC)] Preparasi: larutkan atau suspensikan sampel dalam 40 ml aseton-etil asetat (2:1), sonikasi pada 40 oC, dinginkan, saring, cuci residu sampai diperoleh filtrat 50 ml Kondisi Kromatografi Plat: HPTLC pre-coated, silikagel 60 F254, 20X10 cm Tehnik: ascenden (menaik) F gerak: (i) PE-dietilketon-asam asetat (88:5:12, v/v) (ii) Pentan-diklorometan-asam asetat (25:25:3, v/v) Migrasi: 40 mm; (i) 10 menit (ii) 18 menit Deteksi: UV Scanning densitometri (Camag Scanner II) Mode: absorbansi : 254 nm PHB, MP dan PP; 310 nm PMC

3. TBA Na-benzoat dititrasi dengan HClO4/CH3COOH Na salisilat

4. Iodometri

Asam salisilat

5. Asidi-/alkalimetri

Titrasi langsung :Asam salisilatAsetosal

Titrasi kembali :AsetosalMetil salisilat

6. Spektrofotometri UV

- asetosal dalam pelarut CHCl3 maks = 278 nm - as salisilat dalam pelarut CHCl3 maks = 308 nm

Asam salisilat sering terdapat dalam sampel asetosal. Keduanya dianalisis pada daerah UV

Asetosal dalam kloroform absorbansi diukur pada (tablet/kapsul) maks 308 dan 278 7. Bromometri - Asam salisilat- Paraben

Untuk nipagin, gugus ester dihidrolisis sebelum dibrominasi

8. Spektrofotometri Vis

as salisilat + Fe(NO3)3 kompleks ferri-salisilat (dalam etanol-air) pH tertentu (violet) = 525 nm

9. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)/HPLC

Sediaan : tablet (asetosal) Kondisi Kromatografi Fase gerak : 2 g Na-1-heptana sulfonat dalam - 850 ml air - 150 ml asetonitril + asam asetat glasial hingga pH 3,4 Pengencer : asetonitril-asam format (99:1) Kolom : ukuran 4,0 mm X 30 cm, isi oktadesil silana (ODS) Detektor : UV 280 nm Laju alir : 2 ml/menit

DEMIKIAN SEKILAS INFOSELAMAT BERJUANG JUJURLAH DALAM BEKERJA

TERIMA KASIH

THANK YOUMATUR NUWUNKAMSYA