2.2. Larutan standar metronidazole

Sebanyak 10 mg Metronidazol IP ditimbang dan dimasukkan ke labu ukur 100 ml. Dilarutkan dalam 50 ml 0,1 (M) HCl dan kemudian volume di ad sampai tanda batas dengan 0,1 (M) Hcl (Solusi) (0.1mg / ml). 5 ml larutan stok (0.1mg / ml) dipindahkan ke labu ukur 100 ml dan diencerkan sampai 100 ml dengan 0,1 solusi (M) HCl. Larutan ini digunakan untuk larutan standar.

2.3. Penentuan λ max dan kurva kalibrasi

Larutan stok (0.1mg / ml) diencerkan dengan 0,1 (M) HCl untuk mendapatkan solusi konsentrasi 0.01mg / ml. Absorbansi yang dihasilkan dari spektrometer UV dalam kisaran 200 - 400nm. Absorbansi maksimum ditemukan pada panjang gelombang di sekitar 277 nm.

Pada panjang gelombang maksimum ini, kurva kalibrasi ditarik oleh merencanakan

grafik antara absorbansi dan konsentrasi (2-10 mg / ml)

3.1. linearitas

Linearitas diamati dalam 2μg / ml dan 10μg / ml Konsentrasi batas yang dapat diterima, itu harus linier dalam kisaran tertentu dan koefisien korelasi tidak boleh kurang dari korelasi 0.99.The 2 koefisien, R = 0,9987. Oleh karena itu hubungan antara konsentrasi dan absorbansi metronidazol menunjukkan linearitas.

Definisi

Validasi metoda analisis adalah suatu tindakan penilaian terhadap parameter tertentu, berdasarkan percobaan laboratorium, untuk membuktikan bahwa parameter tersebut memenuhi persyaratan untuk penggunaannya.

Linearitas adalah kemampuan metode analisis yang memberikan respon yang secara langsung atau dengan bantuan transformasi matematik yang baik, proporsional terhadap konsentrasi analit dalam sampel. Rentang metode adalah pernyataan batas terendah dan tertinggi analit yang sudah ditunjukkan dapat ditetapkan dengan kecermatan, keseksamaan, dan linearitas yang dapat diterima.

Cara penentuan:

Linearitas biasanya dinyatakan dalam istilah variansi sekitar arah garis regresi yang dihitung berdasarkan persamaan matematik data yang diperoleh dari hasil uji analit dalam sampel dengan berbagai konsentrasi analit. Perlakuan matematik dalam pengujian linearitas adalah melalui persamaan garis lurus dengan metode kuadrat terkecil antara hasil analisis terhadap konsentrasi analit. Dalam beberapa kasus, untuk memperoleh hubungan proporsional antara hasil pengukuran dengan konsentrasi analit, data yang diperoleh diolah melalui transformasi matematik dulu sebelum dibuat analisis regresinya.

Dalam praktek, digunakan satu seri larutan yang berbeda konsentrasinya antara 50 – 150% kadar analit dalam sampel. Di dalam pustaka, sering ditemukan rentang konsentrasi yang digunakan antara 0 – 200%. Jumlah sampel yang dianalisis sekurang-kurangnya delapan buah sampel blanko. Sebagai parameter adanya hubungan linier digunakan koefisien korelasi r pada analisis regresi linier Y = a + bX.

Hubungan linier yang ideal dicapai jika nilai b = 0 dan r = +1 atau –1 bergantung pada arah garis. Sedangkan nilai a menunjukkan kepekaan analisis terutama instrumen yang digunakan. Parameter lain yang harus dihitung adalah simpangan baku residual (Sy). Dengan menggunakan kalkulator atau perangkat lunak komputer, semua perhitungan matematik tersebut dapat diukur:

DAPUS

Harmita, 2004. Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode Dan Cara Perhitungannyamajalah Ilmu Kefarmasian, Vol. I, No.3 : 12-13