pengaruh pemberian antioksidan thd cedera otak traumatik
Post on 15-Apr-2016
230 Views
Preview:
DESCRIPTION
TRANSCRIPT
PENGARUH PEMBERIAN VITAMIN E TERHADAP
PENURUNAN REACTIVE OXYGEN SPECIES (ROS)
PADA TIKUS ALBINO GALUR WISTAR (Rattus
norvegicus) DENGAN CEDERA OTAK TRAUMATIK
PROPOSALKARYA ILMIAH PARIPURNA
Diajukan dalam rangka untuk memenuhi sebagian persyaratan kelulusan
Program Pendidikan Dokter Spesialis Program Studi Ilmu Bedah di Fakultas
Kedokteran Universitas Gadjah Mada Yogyakarta
Diajukan oleh :
dr. Fadli Robby Amsriza, MMR.
BAGIAN ILMU BEDAH/SMF BEDAH
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS GAJAH MADA
RSUP DR. SARDJITO YOGYAKARTA
2015
LEMBAR PENGESAHAN
PROPOSAL
KARYA ILMIAH PARIPURNA
PENGARUH PEMBERIAN VITAMIN E TERHADAP
PENURUNAN REACTIVE OXYGEN SPECIES (ROS)
PADA TIKUS ALBINO GALUR WISTAR (Rattus
norvegicus) DENGAN CEDERA OTAK TRAUMATIK
Yang disusun oleh
dr. Fadli Robby Amsriza
Diseminarkan pada tanggal Dan dinyatakan telah memenuhi syarat
Pembimbing I Pembimbing II
dr. NIP.
Dr . NIP.
DAFTAR ISI
DAFTAR ISI.............................................................................................................. ii
DAFTAR TABEL...................................................................................................... iv
ii
DAFTAR GAMBAR................................................................................................. v
INTISARI................................................................................................................... vi
ABSTRACT............................................................................................................... vii
BAB I PENDAHULUAN ......................................................................................... 1
A. Latar Belakang Masalah...................................................................................... 1
B. Rumusan Masalah............................................................................................... 3
C. Tujuan Penelitian................................................................................................ 3
D. Manfaat Penelitian.............................................................................................. 3
E. Keaslian Penelitian.............................................................................................. 4
BAB II TUJUAN PUSTAKA ................................................................................... 5
A. Anatomi dan Fisiologi......................................................................................... 5
B. Epidemiologi....................................................................................................... 7
C. Etiologi dan Faktor Risiko.................................................................................. 8
D. Patologi............................................................................................................... 10
E. Prosedur Diagnostik............................................................................................ 12
F. Stadium............................................................................................................... 16
G. Penatalaksanaan.................................................................................................. 17
H. Prognosis............................................................................................................. 18
BAB III METODOLOGI PENELITIAN .................................................................. 20
A. Jenis penelitian.................................................................................................... 20
B. Lokasi Penelitian................................................................................................. 20
C. Waktu Penelitian................................................................................................. 20
D. Populasi dan Subjek Penelitian........................................................................... 20
iii
E. Kriteria Inklusi dan Eksklusi............................................................................... 20
F. Definisi Operasional........................................................................................... 21
G. Metode Pengambilan Sampel.............................................................................. 21
H. Pengolahan dan Analisis Data............................................................................. 21
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN .......................................... 22
A. HASIL PENELITIAN......................................................................................... 22
B. PEMBAHASAN................................................................................................. 24
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN..................................................................... 29
A. KESIMPULAN................................................................................................... 29
B. SARAN............................................................................................................... 30
DAFTAR PUSTAKA................................................................................................ 31
iv
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Tabel Stadium Karsinoma Tiroid....................................................... 16
Gambar 2.2 Alogaritme Management Nodul Tiroid dengan Fasilitas
Potong Beku....................................................................................... 17
Gambar 2.3 Alogaritme Manajemen Nodul Tiroid dengan Fasilitas
Potong Beku....................................................................................... 18
Gambar 5.1 Distribusi Proporsi Penderita Kanker Tiroid Berdasarkan
Jenis Kelamin..................................................................................... 24
Gambar 5.2 Grafik Distribusi Proporsi Penderita Kanker Tiroid
Berdasarkan Usia................................................................................ 25
Gambar 5.3 Grafik Distribusi Proporsi Penderita Kanker Tiroid
Berdasarkan Daerah Asal................................................................... 26
Gambar 5.4 Distribusi Proporsi Penderita Kanker Tiroid
Berdasarkan Tipe Patologi.................................................................. 27
v
6
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Masalah
Cedera otak traumatik adalah trauma mekanik pada kepala yang terjadi baik
secara langsung atau tidak langsung yang kemudian dapat berakibat pada gangguan
fungsi neurologis, fungsi fisik, kognitif, psikososial, yang dapat bersifat sementara
ataupun permanent. Cedera otak traumatik merupakan salah satu penyebab kematian
dan kecacatan utama pada kelompok usia produktif dan terjadi kurang lebih 0.5-1 juta
kasus per tahun. Di Indonesia kejadian cedera otak traumatik setiap tahunnya
diperkirakan mencapai 500.000 kasus. Dari jumlah diatas, 10% penderita meninggal
sebelum tiba di rumah sakit. Dari pasien yang sampai di rumah sakit, 80%
dikelompokan sebagai cedera otak traumatik ringan, 10 % termasuk sebagai cedera
otak traumatik sedang dan 10% termasuk sebagai cedera otak traumatik berat
(Iskandar, 2004; Salmond et al, 2005; Dikmen et al, 2009).
Di Amerika Serikat cedera otak traumatik menyebabkan 290.000 orang dirawat
di rumah sakit, 51.000 kematian dan 80.000 pasien dengan cacat, gangguan kognitif
dan perilaku. Di Inggris, insiden sebagai cedera otak traumatik yang dilaporkan
sekitar 400 per 100.000 orang tiap tahunnya. Cedera otak traumatik merupakan
penyebab utama kematian pada dewasa kurang dari 45 tahun dan pada anak-anak (1-
15 tahun). Cedera otak traumatik umumnya diklasifikasikan berdasarkan nilai
Glasgow Coma Scale (GCS). Kebanyakan cedera otak traumatik yang terjadi
7
diklasifikasikan sebagai cedera otak traumatik ringan, dan sekitar 8-10%
diklasifikasikan sebagai cedera otak traumatik sedang dan berat. Meskipun banyak
pasien kembali bekerja setelah menderita cedera otak traumatik ringan, sekitar 50%
pasien menderita kelumpuhan sedang atau berat dinilai dengan Glasgow Outcome
Scale (GOS). Untuk pasien dengan cedera otak traumatik berat prognosisnya lebih
buruk. Sekitar 30% pasien dengan skor GCS kurang dari 13 akan meninggal.
Mortalitas untuk pasien dengan GCS kurang dari 8 setelah resusitasi adalah sekitar
50%. Sedangkan pasien dengan skor GCS kurang dari 12, sekitar 8% akan meninggal
dalam 6 jam pertama, 2% dalam 1 jam pertama. Akibat jangka panjang pada pasien
dengan cedera otak traumatik berat lebih buruk dibandingkan cedera otak traumatik
ringan, hanya 20% yang sembuh sempurna.3 Frenchay Hospital di Bristol, Inggris,
mencatat pada 1997-2000, terdapat 452 pasien dengan cedera otak traumatik. Pasien
dengan GCS kurang dari 8 sebanyak 353 pasien (78%), umur rata-rata pasien 35,1
tahun, dan 215 pasien (47,6%) menjalani prosedur operasi. Sekitar 20% pasien
mendapat perawatan di ICU dan sisanya di ruang perawatan rumah sakit. Sekitar 94
pasien (20,8%) meninggal saat mendapat perawatan di ruang perawatan. Di ICU
setelah mendapat perawatan, 61 pasien (13,5%) meninggal dan 33 pasien (7,3%)
meninggal setelah keluar dari ICU. Rata-rata lama perawatan pasien di ruang
perawatan adalah 10 hari, di ICU adalah 3 hari (Clayton et al, 2004).
Radikal bebas adalah molekul yang sangat reaktif dihasilkan terutama selama
respirasi seluler dan metabolisme normal. Ketidakseimbangan antara produksi sel
radikal bebas dan kemampuan sel untuk mempertahankan diri mereka disebut sebagai
stress oksidatif. Stress oksidatif terlibat sebagai kontributor potensial untuk
8
patogenesis akut cedera sistem saraf pusat. Setelah cedera otak oleh stroke iskemik,
stroke perdarahan atau trauma kepala, produksi reaktif spesies oksigen (ROS) dapat
meningkat, kadang-kadang drastis, menyebabkan kerusakan jaringan melalui beberapa
jalur molekuler seluler berbeda. Radikal bisa menyebabkan kerusakan kardinal
komponen seluler seperti lipid, protein, dan asam nukleat (misalnya, DNA),
terkemuka kematian sel berikutnya oleh mode nekrosis atau apoptosis. Kerusakan
dapat menjadi lebih luas karena untuk melemah sistem pertahanan antioksidan seluler.
Selain itu, cedera otak akut meningkatkan kadar asam amino eksitotoksik (seperti
glutamat), yang juga memproduksi ROS, sehingga meningkatkan kehancuran
parenchymatous. Oleh karena itu, pengobatan dengan antioksidan secara teoritis dapat
bertindak untuk mencegah penyebaran kerusakan jaringan dan meningkatkan
kelangsungan hidup dan hasil neurologis (Sherki, et al, 2002). Vitamin E adalah salah
satu antioksidan yang dapat mengurangi ROS, yang memiliki potensi untuk
mengurangi kerusakan oksidatif ditemui setelah cedera otak traumatis (Wu, et al,
2013).
Berdasarkan latar belakang diatas, dimana cedera otak traumatik merupakan
salah satu penyebab kematian dan kecacatan utama pada kelompok usia produktif dan
terjadi kurang lebih 0.5-1 juta kasus per tahun.serta vitamin E memiliki potensi untuk
mengurangi kerusakan oksidatif ditemui setelah cedera otak traumatis, maka perlu
dilakukan penelitian dengan judul Pengaruh Pemberian Vitamin E Terhadap
Penurunan Reactive Oxygen Species (ROS) Pada Tikus Albino Galur Wistar
(Rattus norvegicus) Dengan Cedera Otak Traumatik.
9
B. Rumusan Masalah
Dari gambaran yang telah diuraikan pada latar belakang diatas, maka hasil
perumusan masalah adalah apakah vitamin E dapat berpengaruh secara signifikan
terhadap penurunan Reactive Oxygen Species (ROS) pada tikus albino galur wistar
(Rattus norvegicus) dengan cedera otak traumatik?
C. Tujuan Penelitian
Adapun tujuan dari penelitian ini adalah menganalisis pengaruh pemberian
vitamin E terhadap penurunan Reactive Oxygen Species (ROS) pada tikus albino galur
wistar (Rattus norvegicus) dengan cedera otak traumatik.
D. Manfaat Penelitian
Adapun manfaat penelitian yang dapat diperoleh dari penelitian ini ditujukan
bagi beberapa pihak sebagai berikut:
1. Bagi Rumah Sakit
- Memberikan masukan bagi rumah sakit mengenai pengaruh pemberian vitamin
E pada cedera otak traumatik.
- Dapat digunakan sebagai referensi oleh rumah sakit.
- Sebagai rujukan dan pengembang keilmuan di bidang Bedah Syaraf.
2. Bagi Masyarakat
- Meningkatkan kesadaran tentang cedera otak traumatik
- Memberikan informasi lebih terperinci pengaruh pemberian vitamin E pada
cedera otak traumatik
10
3. Bagi Peneliti
- Menambah ilmu pengetahuan tentang pengaruh pemberian vitamin E pada
cedera otak traumatik
- Sebagai data awal untuk melakukan penelitian lebih lanjut
E. Keaslian Penelitian
Peneliti belum pernah menemukan penulisan karya ilmiah sejenis mengenai
pengaruh pemberian vitamin E terhadap penurunan Reactive Oxygen Species (ROS)
pada tikus dengan cedera otak traumatik. Beberapa penelitian yang hampir sama
dengan penelitian ini adalah sebagai berikut:
PENELITI LOKASI
PENELITIAN
JUDUL
Indrasmoro, A.B (2015) RSUP DR. Sardjito Perbandingan Efek Antioksidan
Vitamin C dengan Metilprednisolon
dalam Kontusio Pulmoner.
Wu, et al. (2015) University of California
at Los Angeles
Vitamin E Protects Against Oxidative
Damage and Learning Disability After
Mild Traumatic Brain Injury in Rats
Razmkon, et al. (2011) RSUP Haji Adam Malik,
Medan
Administration of Vitamin C and
Vitamin E in Severe Head
Injury: A Randomized Double-blind
Controlled Trial
11
Tabel 1.1 Penelitian Serupa Tentang Pengaruh Pemberian Vitamin E pada Cedera
Otak Traumatik
12
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Cedera Otak Traumatik
1. Definisi
Cedera otak traumatik adalah trauma mekanik pada kepala yang terjadi baik
secara langsung atau tidak langsung yang kemudian dapat berakibat pada gangguan
fungsi neurologis, fungsi fisik, kognitif, psikososial, yang dapat bersifat temporer
ataupun permanent. Menurut Brain Injury Assosiation of America, cedera otak
traumatik adalah suatu kerusakan pada kepala, bukan bersifat kongenital ataupun
degeneratif, tetapi disebabkan oleh serangan / benturan fisik dari luar, yang dapat
mengurangi atau mengubah kesadaran, sehingga menimbulkan kerusakan
kemampuan kognitif dan fungsi fisik (Iskandar, 2004).
2. Anatomi Kepala
a. Kulit Kepala
Kulit kepala terdiri dari 5 lapisan yang disebut sebagai SCALP yaitu:
Skin atau kulit
Connective tissue atau jaringan penyambung
Aponeuris atau galea aponeurotika yaitu jaringan ikat yang
berhbungan langsung dengan tengkorak
Loose areolar tissue tau jaringan penunjang longgar.
Perikranium
Jaringan penunjang longgar memisahkan galea aponeurotika dari perikranium
dan merupakan tempat yang biasa terjadinya perdarahan subgaleal. Kulit kepala
memiliki banyak pembuluh darah sehingga bila terjadi perdarahan akibat laserasi
kulit kepala akan menyebabkan banyak kehilangan darah terutama pada anak-anak
atau penderita dewasa yang cukup lama terperangkap sehingga membutuhkan waktu
Lama untuk mengeluarkannya (American college of surgeon, 1997).
13
b. Tulang Tengkorak
Terdiri dari kubah (kalvaria) dan basis kranii. Tulang tengkorak terdiri dari
beberapa tulang yaitu frontal, parietal, temporal dan oksipital. Kalvaria khususnya
diregio temporal adalah tipis, namun disini dilapisi oleh otot temporalis. Basis cranii
berbentuk tidak rata sehingga dapat melukai bagian dasar otak saat bergerak akibat
proses akselerasi dan deselerasi. Rongga tengkorak dasar dibagi atas 3 fosa yaitu
fosa anterior tempat lobus frontalis, fosa media tempat temporalis dan fosa posterior
ruang bagi bagian bawah batang otak dan serebelum (American college of surgeon,
1997).
c. Meninges
Selaput meninges menutupi seluruh permukaan otak dan terdiri dari 3 lapisan
yaitu :
1) Duramater
Duramater secara konvensional terdiri atas dua lapisan yaitu lapisan
endosteal dan lapisan meningeal.Duramater merupakan selaput yang keras, terdiri
atas jaringan ikat fibrisa yang melekat erat pada permukaan dalam dari kranium.
Karena tidak melekat pada selaput arachnoid di bawahnya, maka terdapat suatu
ruang potensial (ruang subdura) yang terletak antara duramater dan arachnoid,
dimana sering dijumpai perdarahan subdural (Iskandar, 2004)
Pada cedera otak, pembuluh-pembuluh vena yang berjalan pada permukaan
otak menuju sinus sagitalis superior di garis tengah atau disebut Bridging Veins,
dapat mengalami robekan dan menyebabkan perdarahan subdural. Sinus sagitalis
superior mengalirkan darah vena ke sinus transversus dan sinus sigmoideus. Laserasi
dari sinus-sinus ini dapat mengakibatkan perdarahan hebat (Iskandar, 2004).
Arteri meningea terletak antara duramater dan permukaan dalam dari
kranium (ruang epidural). Adanya fraktur dari tulang kepala dapat menyebabkan
laserasi pada arteri-arteri ini dan menyebabkan perdarahan epidural. Yang paling
14
sering mengalami cedera adalah arteri meningea media yang terletak pada fosa
temporalis (fosa media) (Iskandar, 2004).
2) Selaput Arakhnoid
Selaput arakhnoid merupakan lapisan yang tipis dan tembus pandang. Selaput
arakhnoid terletak antara pia mater sebelah dalam dan dura mater sebelah luar yang
meliputi otak. Selaput ini dipisahkan dari dura mater oleh ruang potensial, disebut
spatium subdural dan dari pia mater oleh spatium subarakhnoid yang terisi oleh
liquor serebrospinalis. Perdarahan sub arakhnoid umumnya disebabkan akibat
cedera otak traumatik (American college of surgeon,1997)
3) Pia mater
Pia mater melekat erat pada permukaan korteks serebri. Pia mater adarah
membrana vaskular yang dengan erat membungkus otak, meliputi gyri dan masuk
kedalam sulci yang paling dalam. Membrana ini membungkus saraf otak dan
menyatu dengan epineuriumnya. Arteri-arteri yang masuk kedalam substansi otak
juga diliputi oleh pia mater (American college of surgeon, 1997).
d. Otak
15
Otak merupakan suatu struktur gelatin dengan berat pada orang dewasa
sekitar 14 kg. Otak terdiri dari beberapa bagian yaitu proensefalon (otak depan)
terdiri dari serebrum dan diensefalon, mesensefalon (otak tengah) dan
rhombensefalon (otak belakang) terdiri dari pons, medula oblongata dan serebellum
(American college of surgeon, 1997).
Fisura membagi otak menjadi beberapa lobus. Lobus frontal berkaitan
dengan fungsi emosi, fungsi motorik dan pusat ekspresi bicara. Lobus parietal
berhubungan dengan fungsi sensorik dan orientasi ruang. Lobus temporal mengatur
fungsi memori tertentu. Lobus oksipital
bertanggung jawab dalam proses penglihatan. Mesensefalon dan pons bagian atas
berisi sistem aktivasi retikular yang berfungsi dalam kesadaran dan kewapadaan.
Pada medulla oblongata terdapat pusat kardiorespiratorik. Serebellum bertanggung
jawab dalam fungsi koordinasi dan keseimbangan (American college of surgeon,
1997).
e. Cairan serebrospinalis
Cairan serebrospinal (CSS) dihasilkan oleh plexus khoroideus dengan
kecepatan produksi sebanyak 20 ml/jam. CSS mengalir dari dari ventrikel
lateral melalui foramen monro menuju ventrikel III, dari akuaduktus sylvius
menuju ventrikel IV. CSS akan direabsorbsi ke dalam sirkulasi vena melalui
granulasio arakhnoid yang terdapat pada sinus sagitalis superior. Adanya
darah dalam CSS dapat menyumbat granulasio arakhnoid sehingga
mengganggu penyerapan CSS dan menyebabkan kenaikan takanan
intracranial. Angka rata-rata pada kelompok populasi dewasa volume CSS
sekitar 150 ml dan dihasilkan sekitar 500 ml CSS per hari (American college
of surgeon, 1997).
f. Tentorium
16
Tentorium serebeli membagi rongga tengkorak menjadi ruang
supratentorial (terdiri dari fosa kranii anterior dan fosa kranii media) dan
ruang infratentorial (berisi fosa kranii posterior) (American college of
surgeon, 1997).
g. Vaskularisasi Otak
Otak disuplai oleh dua arteri carotis interna dan dua arteri vertebralis.
Keempat arteri ini beranastomosis pada permukaan inferior otak dan
membentuk sirkulus Willisi. Vena-vena otak tidak mempunyai jaringan otot
didalam dindingnya yang sangat tipis dan tidak mempunyai katup. Vena
tersebut keluar dari otak dan bermuara ke dalam sinus venosus cranialis
(American college of surgeon, 1997).
3. Epidemiologi
Insiden tahunan cedera otak traumatik di Amerika Serikat diperkirakan
180-220 kasus per 100.000 penduduk. Di Amerika Serikat, dengan populasi
hampir 300 juta, kejadian cedera otak traumatik sekitar 600.000 per tahun
(Ainsword, 2015).
Cedera otak traumatik merupakan salah satu penyebab kematian dan
kecacatan utama pada kelompok usia produktif dan terjadi kurang lebih 0.5-1
juta kasus per tahun. Di Indonesia kajadian cedera otak traumatik setiap
tahunnya diperkirakan mencapai 500.000 kasus. Dari jumlah diatas, 10%
penderita meninggal sebelum tiba di rumah sakit. Dari pasien yang sampai di
rumah sakit, 80% dikelompokan sebagai cedera otak traumatik ringan, 10 %
termasuk cedera otak traumatik sedang dan 10% termasuk cedera otak
traumatik berat (Iskandar, 2004).
17
Rasio cedera otak traumatik laki-laki dan perempuan hampir 2: 1, dan
cedera otak traumatik jauh lebih umum pada orang yang lebih muda dari 35
tahun (Ainsword, 2015).
4. Etiologi
Penyebab paling umum cedera otak traumatik adalah kecelakaan
kendaraan bermotor (misalnya, tabrakan antara kendaraan, pejalan kaki
disambar kendaraan bermotor, kecelakaan sepeda), jatuh, serangan, cedera
olahraga terkait, dan trauma penetrasi (Ainsword, 2015).
Kecelakaan kendaraan bermotor menyumbang hampir setengah dari
cedera otak traumatik di Amerika Serikat. Di kota-kota dengan populasi lebih
dari 100.000 penduduk, serangan, jatuh, dan trauma penetrasi merupakan
etiologi lebih umum dari cedera otak traumatik (Ainsword, 2015).
5. Patofisiologi
Manajemen yang tepat dari cedera otak traumatik membutuhkan
pemahaman tentang patofisiologi cedera otak traumatik. Selain perbedaan
fungsional yang jelas, otak memiliki beberapa fitur yang membedakannya
dari sistem organ lain. Yang paling penting dari perbedaan-perbedaan ini
adalah bahwa otak terkandung dalam tengkorak, wadah kaku dan tidak
elastis. Karena otak terletak di dalam kontainer inelastis ini, hanya
peningkatan kecil dalam volume dalam kompartemen intrakranial dapat
18
ditoleransi sebelum tekanan dalam kompartemen meningkat secara dramatis.
Konsep ini didefinisikan oleh doktrin Monro-Kellie, yang menyatakan bahwa
total volume intrakranial adalah tetap karena sifat elastis tengkorak. Volume
intrakranial (V i / c) adalah sama dengan jumlah komponennya, sebagai
berikut:
V i / c = V (otak) + V (cairan serebrospinal) + V (darah)
Pada orang dewasa yang khas, volume intrakranial adalah sekitar 1500
mL, dari yang otak menyumbang 85-90%, intravaskular rekening volume
darah otak untuk 10%, dan cairan serebrospinal (CSF) menyumbang sisa
(<3%). Ketika cedera otak traumatik yang signifikan terjadi, edema serebral
sering berkembang, yang meningkatkan volume relatif dari otak. Karena
volume intrakranial adalah tetap, tekanan dalam kompartemen ini naik
kecuali beberapa tindakan kompensasi terjadi, seperti penurunan volume
salah satu komponen intrakranial lainnya. Hal ini terkait erat dengan konsep
kepatuhan intrakranial, yang didefinisikan sebagai perubahan tekanan akibat
perubahan volume (Ainsword, 2015).
Pada cedera otak traumatik , kerusakan otak dapat terjadi dalam dua
tahap yaitu cedera primer dan cedera sekunder. Cedera primer merupakan
cedera pada kepala sebagai akibat langsung dari suatu ruda paksa, dapat
disebabkan benturan langsung kepala dengan suatu benda keras maupun oleh
proses akselarasi deselarasi gerakan kepala (Marijata, 2006).
19
Dalam mekanisme cedera otak traumatik dapat terjadi peristiwa coup
dan contrecoup. Cedera primer yang diakibatkan oleh adanya benturan pada
tulang tengkorak dan daerah sekitarnya disebut lesi coup. Pada daerah yang
berlawanan dengan tempat benturan akan terjadi lesi yang disebut
contrecoup. Akselarasi-deselarasi terjadi karena kepala bergerak dan berhenti
secara mendadak dan kasar saat terjadi trauma. Perbedaan densitas antara
tulang tengkorak (substansi solid) dan otak (substansi semisolid)
menyebabkan tengkorak bergerak lebih cepat dari muatan intrakranialnya.
Bergeraknya isi dalam tengkorak memaksa otak membentur permukaan
dalam tengkorak pada tempat yang berlawanan dari benturan (contrecoup)
(Iskandar, 2004).
Cedera sekunder merupakan kerusakan otak yang timbul sebagai
komplikasi dari kerusakan primer termasuk kerusakan oleh hipoksisa,
iskemik, pembengkakan otak, peningkatan tekanan intracranial, hidrosefalus,
dan infeksi (Marijata, 2006).
6. Klasifikasi
Cedera otak traumatik diklasifikasikan dalam berbagai aspek. Secara
praktis dikenal 3 deskripsi kalsifikasi yaitu berdasarkan mekanisme, beratnya
cedera otak traumatik , dan morfologinya.
a. Mekanisme cedera otak traumatik
Berdasarkan mekanismenya cedera otak traumatik dibagi atas cedera
otak traumatik tumpul dan cedera otak traumatik tembus. Cedera otak
traumatik tumpul biasanya berkaitan dengan kecelakaan mobil atau motor,
20
jatuh atau terkena pukulan benda tumpul. Sedang cedera otak traumatik
tembus disebabkan oleh peluru atau tusukan (Bernath, 2009).
b. Beratnya cedera
Cedera otak traumatik diklasifikasikan berdasarkan nilai Glasgow
Coma Scale adalah sebagai berikut :
1) Nilai GCS sama atau kurang dari 8 didefenisikan sebagai cedera otak
traumatik berat.
2) Cedera otak traumatik sedang memiliki nilai GCS 9-13
3) Cedera otak traumatik ringan dengan nilai GCS 14-15.
Glasgow Glasgow Coma Scale nilai aiRespon membuka mata (E) Buka mata spontan 4Buka mata bila dipanggil/rangsangan suara 3Buka mata bila dirangsang nyeri 2Tak ada reaksi dengan rangsangan apapun 1
Respon verbal (V) Komunikasi verbal baik, jawaban tepat 5Bingung, disorientasi waktu, tempat, dan orang 4Kata-kata tidak teratur 3Suara tidak jelas 2Tak ada reaksi dengan rangsangan apapun 1
Respon motorik (M) Mengikuti perintah 6Dengan rangsangan nyeri, dapat mengetahui tempat rangsangan 5Dengan rangsangan nyeri, menarik anggota badan 4Dengan rangsangan nyeri, timbul reaksi fleksi abnormal 3Dengan rangsangan nyeri, timbul reaksi ekstensi abnormal 2Dengan rangsangan nyeri, tidak ada reaksi 1
(Kluwer, 2009)
c. Morfologi cedera
21
Secara morfologis cedera otak traumatik dapat dibagi atas fraktur
cranium dan lesiintrakranial.
1) Fraktur cranium
Fraktur cranim dapat terjadi pada atap atau dasar tengkorak, dan dapat
berbentuk garis atau bintang dan dapat pula terbuka atau tertutup. Fracture
dasar tengkorak biasanya memerlukan pemeriksaan CT Scan dengan dengan
teknik bone window untuk memperjelas garis frakturnya. Adanya tanda-tanda
klinis fraktur dasar tengkorak menjadikan petunjuk kecurigaan untuk
melakukan pemeriksaan lebih rinci.tanda-tanda tersebut antara lain ekimosis
periorbital (raccoon eye sign), ekimosis retroauikular (battle sign), kebocoran
CSS (Rhinorrhea, otorrhea) dan paresis nervus fasialis (Bernath, 2009)
Fraktur cranium terbuka atau komplikata mengakibatkan adanya
hubungan antara laserasi kulit kepala dan permukaan otak karena robeknya
selaput duramater. Keadaan ini membutuhkan tindakan dengan segera.
Adanya fraktur tengkorak merupakan petunjuk bahwa benturan yang terjadi
cukup berat sehingga mengakibatkan retaknya tulang tengkorak. Frekuensi
fraktura tengkorak bervariasi, lebih banyak fraktura ditemukan bila penelitian
dilakukan pada populasi yang lebih banyak mempunyai cedera berat.
Fraktura kalvaria linear mempertinggi risiko hematoma intrakranial sebesar
400 kali pada pasien yang sadar dan 20 kali pada pasien yang tidak sadar.
Fraktura kalvaria linear mempertinggi risiko hematoma intrakranial sebesar
400 kali pada pasien yang sadar dan 20 kali pada pasien yang tidak sadar.
Untuk alasan ini, adanya fraktura tengkorak mengharuskan pasien untuk
dirawat dirumah sakit untuk pengamatan (Bernath, 2009)
2) Lesi Intrakranial
Lesi intrakranial dapat diklasifikasikan sebagai fokal atau difusa,
walau kedua bentuk cedera ini sering terjadi bersamaan. Lesi fokal termasuk
hematoma epidural, hematoma subdural, dan kontusi (atau hematoma
22
intraserebral). Pasien pada kelompok cedera otak difusa, secara umum,
menunjukkan CT scan normal namun menunjukkan perubahan sensorium
atau bahkan koma dalam keadaan klinis (Bernath, 2009)
a) Hematoma Epidural
Epidural hematom (EDH) adalah perdarahan yang terbentuk di ruang
potensial antara tabula interna dan duramater dengan cirri berbentuk
bikonvek atau menyerupai lensa cembung. Paling sering terletak diregio
temporal atau temporoparietal dan sering akibat robeknya pembuluh
meningeal media. Perdarahan biasanya dianggap berasal arterial, namun
mungkin sekunder dari perdarahan vena pada sepertiga kasus. Kadang-
kadang, hematoma epidural akibat robeknya sinus vena, terutama diregio
parietal-oksipital atau fossa posterior.
Walau hematoma epidural relatif tidak terlalu sering (0.5% dari
keseluruhan atau 9% dari pasien koma cedera otak traumatik ), harus selalu
diingat saat menegakkan diagnosis dan ditindak segera. Bila ditindak segera,
prognosis biasanya baik karena penekan gumpalan darah yang terjadi tidak
berlangsungg lama. Keberhasilan pada penderita pendarahan epidural
berkaitan langsung denggan status neurologis penderita sebelum
pembedahan. Penderita dengan pendarahan epidural dapat menunjukan
adanya “lucid interval” yang klasik dimana penderita yang semula mampu
bicara lalu tiba-tiba meningggal (talk and die), keputusan perlunya tindakan
bedah memnang tidak mudah dan memerlukan pendapat dari seorang ahli
bedah saraf (Bernath, 2009).
Dengan pemeriksaan CT Scan akan tampak area hiperdens yang tidak
selalu homogeny, bentuknya biconvex sampai planoconvex, melekat pada
tabula interna dan mendesak ventrikel ke sisi kontralateral ( tanda space
occupying lesion ). Batas dengan corteks licin, densitas duramater biasanya
23
jelas, bila meragukan dapat diberikan injeksi media kontras secara intravena
sehingga tampak lebih jelas (Gazali, 2007).
24
b) Hematom Subdural
Hematoma subdural (SDH) adalah perdarahan yang terjadi di antara
duramater dan arakhnoid. SDH lebih sering terjadi dibandingkan EDH,
ditemukan sekitar 30% penderita dengan cedera otak traumatik berat. Terjadi
paling sering akibat robeknya vena bridging antara korteks serebral dan sinus
draining. Namun ia juga dapat berkaitan dengan laserasi permukaan atau
substansi otak. Fraktura tengkorak mungkin ada atau tidak (American college
of surgeon, 1997).
Selain itu, kerusakan otak yang mendasari hematoma subdural akuta
biasanya sangat lebih berat dan prognosisnya lebih buruk dari hematoma
epidural. Mortalitas umumnya 60%, namun mungkin diperkecil oleh tindakan
operasi yang sangat segera dan pengelolaan medis agresif. Subdural hematom
terbagi menjadi akut dan kronis.
i) SDH Akut
Pada CT Scan tampak gambaran hyperdens sickle ( seperti bulan
sabit ) dekat tabula interna, terkadang sulit dibedakan dengan epidural
hematom. Batas medial hematom seperti bergerigi. Adanya hematom di
25
daerah fissure interhemisfer dan tentorium juga menunjukan adanya hematom
subdural (Bernath, 2009).
ii) SDH Kronis
Pada CT Scan terlihat adanya komplek perlekatan, transudasi,
kalsifikasi yang disebabkan oleh bermacam- macam perubahan, oleh
karenanya tidak ada pola tertentu. Pada CT Scan akan tampak area hipodens,
isodens, atau sedikit hiperdens, berbentuk bikonveks, berbatas tegas melekat
pada tabula. Jadi pada prinsipnya, gambaran hematom subdural akut adalah
hiperdens, yang semakin lama densitas ini semakin menurun, sehingga terjadi
isodens, bahkan akhirnya menjadi hipodens (Ghazali, 2007)
c) Kontusi dan hematoma intraserebral.
Kontusi serebral murni bisanya jarang terjadi. Selanjutnya, kontusi
otak hampir selalu berkaitan dengan hematoma subdural akut. Majoritas
terbesar kontusi terjadi dilobus frontal dan temporal, walau dapat terjadi pada
setiap tempat termasuk serebelum dan batang otak. Perbedaan antara kontusi
dan hematoma intraserebral traumatika tidak jelas batasannya. Bagaimanapun,
terdapat zona peralihan, dan kontusi dapat secara lambat laun menjadi
hematoma intraserebral dalam beberapa hari.
Hematoma intraserebri adalah perdarahan yang terjadi dalam jaringan
(parenkim) otak sebagai akibat dari adanya robekan pembuluh darah.
Terutama melibatkan lobus frontal dan temporal (80-90%), tetapi dapat juga
melibatkan korpus kallosum, batang otak, dan ganglia basalis. Gejala dan
tanda juga ditentukan oleh ukuran dan lokasu hematoma (Marijata, 2006).
26
d) Cedera difus
Cedar otak difus merupakan kelanjutan kerusakan otak akibat cedera
akselerasi dan deselerasi, dan ini merupakan bentuk yang sering terjadi pada
cedera otak traumatik . Komosio cerebri ringan adalah keadaan cedera dimana
kesadaran tetap tidak terganggu namun terjadi disfungsi neurologis yang
bersifat sementara dalam berbagai derajat. Cedera ini sering terjadi, namun
karena ringan kerap kali tidak diperhatikan. Bentuk yang paling ringan dari
komosio ini adalah keadaan bingguung dan disorientasi tanpa amnesia.
Sindroma ini pulih kembali tanpa gejala sisa sama sekali.cedera komosio yang
lebih berat menyebabkan keadaan binggung disertai amnesia retrograde dan
amnesia antegrad (American college of surgeon, 1997).
Komosio cerebri klasik adalah cedera yang mengakibatkan
menurunnya atau hilanggnya kesadaran. Keadaan ini selalu disertai dengan
amnesia pasca trauma dan lamanya amnesia ini merupakan ukuran beratnya
cidera. Dalam bebberapa penderita dapat timbul defisist neurologis untuk
beberapa waktu. Edfisit neurologis itu misalnya kesulitan mengingat, pusing,
mual, anosmia, dan depresi serta gejala lain. Gejala-gajala ini dikenal sebagai
sindroma pasca komosio yang dapat cukup berat (American college of
surgeon,1997)
27
.
Cedera aksonal difus (Diffuse Axonal Injury, DAI) adalah keadaan
diman pendeerita mengalami koma pasca cedera yang berlangsung lama ddan
tidak diakibatkan oleh suatu lesi mas aatau serangan iskemik. Biasanya
penderita dalam keadaan kooma yang dalam dan tetap koma selama beberapa
waktuu. Penderita sering menuunjukan gejala dekortikasi atau deserebrasi dan
bila pulih sering tetap dalam keadaan cacat berat, itupun bila bertahan hidup.
Penderita seringg menunjukan gejala disfungsi otonom seperti hipotensi,
hiperhidrosis dan hiperpireksia dan dulu diduga akibat cedeera aksonal difus
dan cedeera otak kerena hiipoksiia secara klinis tidak mudah, dan memang dua
keadaan tersebut seringg terjadi bersamaan (American college of
surgeon,1997)
B. Antioksidan
Antioksidan adalah zat yang dapat melindungi sel-sel terhadap efek
radikal bebas. Radikal bebas adalah molekul yang sangat reaktif dihasilkan
terutama selama respirasi seluler dan metabolisme normal. Ketidakseimbangan
antara produksi sel radikal bebas dan kemampuan sel untuk mempertahankan
diri mereka disebut sebagai stress oksidatif. Stress oksidatif terlibat sebagai
kontributor potensial untuk patogenesis akut cedera sistem saraf pusat. Setelah
cedera otak oleh stroke iskemik, stroke perdarahan atau trauma kepala,
produksi reaktif spesies oksigen (ROS) dapat meningkat, kadang-kadang
drastis, menyebabkan kerusakan jaringan melalui beberapa jalur molekuler
seluler berbeda. Radikal bisa menyebabkan kerusakan kardinal komponen
seluler seperti lipid, protein, dan asam nukleat (misalnya, DNA), terkemuka
kematian sel berikutnya oleh mode nekrosis atau apoptosis. Kerusakan dapat
28
menjadi lebih luas karena untuk melemah sistem pertahanan antioksidan
seluler. Selain itu, cedera otak akut meningkatkan kadar asam amino
eksitotoksik (seperti glutamat), yang juga memproduksi ROS, sehingga
meningkatkan kehancuran parenchymatous. Oleh karena itu, pengobatan
dengan antioksidan secara teoritis dapat bertindak untuk mencegah
penyebaran kerusakan jaringan dan meningkatkan kelangsungan hidup dan
hasil neurologis (Sherki, et al, 2002). Vitamin E adalah salah satu antioksidan
yang dapat mengurangi ROS, yang memiliki potensi untuk mengurangi
kerusakan oksidatif ditemui setelah cedera otak traumatis (Wu, et al, 2013).
Dalam kepustakaan kedokteran pengertian oksidan dan radikal bebas
(free radicals) sering dibaurkan karena keduanya memiliki sifat-sifat yang
mirip. Aktivitas kedua jenis senyawa ini sering menghasilkan akibat yang
sama walaupun prosesnya berbeda (Halliwell, 1991).
Oksidan, dalam pengertian ilmu kimia, adalah senyawa penerima
elektron, (electron acceptor), yaitu senyawa-senyawa yang dapat menarik
elektron. Sebaliknya, dalam pengertian ilmu kimia, radikal bebas adalah atom
atau molekul (kumpulan atom) yang memiliki elektron yang tak berpasangan
(unpaired electron). Radikal bebas memiliki dua sifat, yaitu reaktivitas tinggi,
karena kecenderungan menarik electron, dan dapat mengubah suatu molekul
menjadi suatu radikal. Sifat radikal bebas yang mirip dengan oksidan terletak
pada kecenderungannya untuk menarik elektron.Jadi sama halnya dengan
oksidan, radikal bebas adalah penerima elektron. Itulah sebabnya dalam
kepustakaan kedokteran, radikal bebas digolongkan dalam oksidan. Namun
29
perlu diingat bahwa radikal bebas adalah oksidan tetapi tidak setiap oksidan
adalah radikal bebas (Halliwel, 1991).
Reactive oxygen species (ROS) adalah istilah yang meliputi semua yang
sangat reaktif, mengandung molekul oksigen, termasuk radikal bebas. Jenis ROS
termasuk radikal hidroksil, hipoklorit, dan berbagai lipid peroksida. Semua mampu
bereaksi dengan membran lipid, asam nukleat, protein dan enzim, dan molekul kecil
lainnya, yang mengakibatkan kerusakan sel. ROS dihasilkan oleh sejumlah jalur.
Sebagian besar oksidan diproduksi oleh sel terjadi sebagai suatu konsekuensi dari
metabolisme aerobik normal dimana sekitar 90% dari oksigen yang digunakan oleh
sel dikonsumsi oleh sistem transpor elektron mitokondria.; ledakan oksidatif dari
fagosit (sel darah putih) sebagai bagian dari mekanisme dimana bakteri dan virus
dibunuh, dan protein asing (antigen) yang didenaturasi; metabolisme xenobiotik,
yaitu, detoksifikasi zat beracun; hal-hal seperti olahraga berat, yang mempercepat
metabolisme selular, peradangan kronis, infeksi, dan penyakit lainnya, paparan
alergen dan paparan obat atau racun seperti asap rokok,polusi, pestisida, insektisida;
serta setelah cedera otak oleh stroke iskemik, stroke perdarahan atau trauma kepala
(Halliwel, 1991; Wu, et al, 2013).
C. Vitamin E
Vitamin E (tokoferol) merupakan suatu komponen lipid yang esensial
terdiri dari selaput-selaput biologi yang saling berhubungan dengan radikal
peroxyl yang berfungsi dalam mencegah perkembangan lipid peroxidan
(Jishage, et al., 2005). Lebih lanjut dijelaskan oleh Dutta-Roy (1994) vitamin
E merupakan vitamin yang larut dalam lemak yang terdiri dari campuran dan
30
substansi tokoferol (a, b, g, dan d) dan tokotrienol (a, b, g, dan d), pada
manusia a-tokoferol merupakan vitamin E yang paling penting untuk aktifitas
biologi tubuh. Bentuk vitamin E ini dibedakan berdasarkan letak berbagai
grup metil pada cincin fenil rantai cabang molekul dan ketidak jenuhan rantai
cabang.
Menurut Dutta-Roy (1994) a-tokoferol merupakan bentuk vitamin E
yang paling aktif, berdasarkan penelitian pada rodentia dan anak ayam. Bentuk
d–tokoferol sangat lebih aktif daripada bentuk l. Grup hidroksil yang aktif
pada cincin fenil dapat diesterifikasi untuk aktivitasnya. Dl - a - tokoferol
asetat dapat digunakan untuk membuat definisi unit-unit internasional untuk
vitamin E, yaitu 1 mg = 1 IU, oleh karena 1 mg dl - a-tokoferol (tidak
diesterifikasi) = ± 1,36 IU dan 1 mg d - a - tokoferol = 1,49 IU.
Vitamin E dapat mengendalikan peroksida lemak dengan
menyumbangkan hidrogen kedalam reaksi, menyekat aktivitas tambahan yang
dilakukan oleh peroksida, sehingga memutus reaksi berantai dan bersifat
membatasi kerusakan (Watson and Leonard, 1986). Peran vitamin E dan
antioksidan lain secara tepat masih dipelajari, untuk itu pada penelitian ini
akan dikaji tentang kemampuan vitamin E sebagai antioksidan terhadap
radikal bebas pada usia tua.
Vitamin E berfungsi untuk memutus rantai peroksida lemak dengan
menyumbangkan ion hidrogen ke dalam reaksi, sehingga dapat menurunkan
kadar lemak peroksida darah. Mekanisme kerja vitamin E dalam mendonorkan
ion hidrogen untuk menetralkan atau mengurangi kadar lemak peroksida darah
31
dimulai dengan kerja a-tocoferol radikal yang kemudian berubah menjadi a–
tocoferol perokside. Dari dua a-tocoferol radikal berubah menjadi a-tocoferol
dimer dan akhirnya menjadi a-tocoquinone yang oleh vitamin C dapat
diregenerasi kembali menjadi a-tocoferol (Frankel, 1998).
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
A. Jenis penelitian.
Jenis penelitian adalah laboratorik eksperimental dengan rancangan acak
sederhana.
B. Lokasi Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu
(LPPT) Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Gadjah Mada Yogyakarta. Proses
pengujian kadar Radikal Superoksida (O2•−) dilakukan di laboratorium Histologi
Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.
C. Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan pada Agustus – November 2015
D. Subjek Penelitian.
Subyek penelitian berupa 40 ekor tikus albino galur wistar (Rattus norvegicus)
dengan berat badan 170-200 gram dan berumur 2-3 bulan. Tikus albino galur wistar
diperoleh dari unit pengembangan hewan percobaan Universitas Gajah Mada.
E. Kriteria Inklusi dan Eksklusi.
Kriteria inklusi penelitian ini adalah:
1. Tikus jantan berusia 2-3 bulan.
32
33
2. Berat badan 170-200 gram
3. Kondisi umum tikus baik dan aktif
4. Tidak ada luka atau jejas di kepala
Kriteria eksklusi penelitian ini adalah:
1. Sakit selama masa adaptasi 7 hari
2. Mengalami infeksi selama perlakuan beralangsung
3. Mati selama perlakuan berlangsung
F. Variabel Penelitian
1. Variabel dependen (terikat) : Cedera otak traumatik
2. Variabel independen (bebas): Vitamin E dosis 100 mg/KgBB
G. Definisi Operasional
1. Cedera otak traumatik adalah suatu kerusakan pada kepala, bukan bersifat
kongenital ataupun degeneratif, tetapi disebabkan oleh serangan / benturan fisik
dari luar, yang dapat mengurangi atau mengubah kesadaran, sehingga
menimbulkan kerusakan kemampuan kognitif dan fungsi fisik (Iskandar, 2004).
Cedera otak traumatik pada penelitian ini ditimbulkan dengan cara memberikan
trauma pada tulang tengkorak tikus sehingga menimbulkan kontusi otak,
kerusakan jaringan otak, robeknya pembuluh – pembuluh darah jembatan,
penurunan aliran darah otak, dan edema otak. Kontusi otak juga bisa terjadi
secara tidak langsung (contracoup) akibat trauma pada tulang tengkorak.
Cedera otak traumatik pada tikus diinduksi menggunakan Marmarou’s
weight drop model yang dipaparkan oleh Marmarou et al (1994). Tikus
34
dianestesi dengan menyuntikkan 100 mg/kgBB ketamine HCl secara
intramuskuler. Kulit tikus diinsisi secara midline agar kalvaria terlihat. Diskus
stainless steel dengan diameter 10 mm dan kedalaman 3 mm dilekatkan di
tengah kalvaria antara fisura lambda dan bregma dengan semen gigi. Fungsi
dari peletakkan diskus stainless steel tersebut untuk mencegah terjadinya
fraktur tulang tengkorak. Tikus diposisikan pronasi pada busa dengan
ketebalan 10 cm. Cedera traumatik pada otak tikus diinduksi dengan
menjatuhkan beban silindris kuningan seberat 80 g secara bebas searah
gravitasi dari ketinggian 1 m melalui tabung kaca (Plexiglas).
35
2. Vitamin E (tokoferol) merupakan suatu komponen lipid yang esensial terdiri
dari selaput-selaput biologi yang saling berhubungan dengan radikal peroxyl
yang berfungsi dalam mencegah perkembangan lipid peroxidan (Jishage, et al.,
2005). Vitamin E diberikan dengan dosis 100mg/kgBB melalui intravena yang
diberkan segera setelah model cedera otak traumatik dilakukan.
Dosis vitamin E pada tikus dengan berat 200 gram dihitung menjadi =
200/1000 X 100 mg/kgBB = 20 mg/tikus
H. Metode Pengambilan Sampel.
Sampel dipilih dari populasi dengan menggunakan teknik simple
random sampling (acak sederhana). Besar sampel ditetapkan dengan
menggunakan rumus Federer.
Dimana t = jumlah perlakuan
n = besar ulangan
Dari rumus di atas didapatkan sampel sebanyak :
(2-1) (n-1) ≥ 15,
n ≥ 16
Berdasarkan rumus diatas diperoleh jumlah minimal sampel adalah 16
dan dibulatkan menjadi 20 tiap kelompok. Jadi total sampel yang digunakan
adalah 40 tikus karena akan ada 2 kelompok yaitu 20 tikus untuk kelompok
perlakuan dengan vitamin E dan 20 tikus kelompok kontrol. Untuk
(t-1) (n-1) ≥ 15
36
menentukan anggota kelompok dari tikus tersebut dilakukan dengan
pengundian dengan menggunakan nomor undian.
I. RANCANGAN PENELITIAN
Instrumentasi Penelitian
1. Alat Penelitian
a. Kandang hewan percobaan
b. Timbangan hewan
c. Spuit Injeksi 1ml, 3 ml dan 5 ml
d. Pipet ukur
e. Labu takar
f. Alat bedah minor
g. Tabung dengan Heparin
2. Bahan penelitian
a. Bahan perlakuan : vitamin E 100 mg/kgBB
Subjek(Tikus dengan Cedera Otak)
Kelompok Perlakuan dengan vitamin E
Kelompok Kontrol
Pemeriksaan Radikal superoksida
Pemeriksaan Radikal superoksida
Uji Independen
t-test
37
b. Bahan yang akan diteliti : darah arteri tikus bisa diambil dari arteri
abdominalis atau dari aorta desendens untuk pemeriksaan radikal
superoksida.
J. CARA KERJA
1. Sebelum perlakuan
a. Hewan uji diadaptasi dengan kondisi laboratorium tempat penelitian
dilakukan selama kurang lebih 1 minggu.
b. Hewan uji dikelompokkan secara acak menjadi 2 kelompok sesuai
kriteria inklusi dan eksklusi. Masing-masing kelompok terdiri dari 20
ekor tikus.
2. Pemberian perlakuan
Tikus dibagi secara acak menjadi 2 kelompok. Kelompok 1 adalah
kelompok perlakuan dengan vitamin E, kelompok 2 adalah kelompok kontrol.
Semua tikus akan mendapatkan perlakuan sama untuk model cedera otak
traumatik. Kemudian masing-masing tikus tersebut dianestesi dengan injeksi
intramuskuler 100 mg/kgBB ketamine HCl (50 mg/ml, Ketalar®). Cedera otak
traumatik kemudian diberikan berdasarkan Marmarou’s weight drop model.
Setelah memberikan cedera, kelompok 2 segera diberikan vitamin E dengan
dosis 100 mg/kgBB. Analgesia yang diberikan berupa morfin sulfat (0,05
mg/kgBB) yang diberikan secara intramuskuler.
38
Setelah prosedur tersebut, semua kelompok dimasukkan ke dalam
kandang masing-masing. Tikus dipantau dengan diobservasi pernapasan,
perdarahan hidung, gerakan respiratorik, dan ritme jantungnya.
Sampel darah tikus untuk pemeriksaan radikal superoksida (O2•−)
diambil 24 jam setelah cedera otak traumatik. Midsternotomi dilakukan pada
tikus masing-masing kelompok. Sampel darah diambil dari aorta descendens
dengan spuit sebanyak 6 ml, kemudian darah didiamkan selama setengah jam.
Darah dipindahkan dalam tabung sentrifus dan disentrifus dengan kecepatan
3000 rpm selama 10 menit. Serum darah diambil kemudian dimasukkan dalam
vial dan disimpan dingin sebelum dilakukan percobaan selanjutnya yaitu
pemeriksaan radikal superoksida (O2•−).
Pemeriksaan radikal superoksida (O2•−)
Menyiapkan mikroplat U dan tempat sampel yang akan dimasukkan ditandai.
Pengenceran sebanyak 2 mg.ml p-Nitro Blue Tetrazolium Chlorida (NBT)
dalam Hank’s Balanced Salts Solution (HBSS) bebas fenol red 0,9%.
Pengenceran Superoxide Dismutase (SOD) sebanyak 200 μg/ml ke dalam
larutan HBSS bebas fenol red 0,9%. Sampel 100 μl dimasukkan ke dalam
sumur mikroplat kemudian 100 μl Simoxan 150 μg/ml juga dimasukkan pada
tiap sumuran yang terisi sampel dan diinkubasikan selama 10 menit. Terakhir
100 μl NBT dimasukkan pada setiap sumuran yang sudah terisi sampel.
Mikroplat ditutup dengan aluminium foil dan diinkubasi selama 30 menit pada
suhu kamar. Langkah terakhir dilakukan pembacaan hasil menggunakan
Adaptasi 7 hari
Simple Random Sampling
Kelompok Perlakuan dengan vitamin E
100mg/kgBB ( 20 ekor )
Kelompok kontrol (20 ekor )
Perlakuan model cedera otak traumatik
Kriteria Inklusi Kriteria Eksklusi
39
ELISA reader dengan panjang gelombang 450 nm dan diperoleh data nilai
Optical Density (OD) dari kadar Superoksida20 .
K. ALUR PENELITIAN
Hasil dianalisis dengan uji statistik
24 jam post perlakuantikus di lakukan
pemeriksaan radikal superoksida (O2•−)
24 jam post perlakuantikus di lakukan
pemeriksaan radikal superoksida (O2•−)
Data Data
Tikus albino galur wistar, Jantan, Umur 2-3 bulan
Berat Badan ± 170 – 200 g
40
.
L. Teknik Analisis data
Data yang diperoleh disajikan sebagai rerata ± standar deviasi. Data yang
diperoleh dianalisis secara statistik dengan menggunakan independent t-test untuk
membandingkan mean 2 kelompok yang diteliti dengan bantuan SPSS ver. 15.0.
Independent t-test digunakan untuk menguji apakah terdapat perbedaan signifikan
rerata pada dua kelompok.
41
DAFTAR PUSTAKA
Ainsword, CR. 2015. Head Trauma. Diakses pada 22 Juni 2015. Dari http://emedicine.medscape.com/article/433855-overview#a5
American College of Surgeons, 1997, Advance Trauma Life Suport. United States of America: Firs Impression
Bernath David, 2009, Head Injury, www.e-medicine.comClayton TJ, Nelson RJ, Manara AR. Reduction in mortality from severe head injury
following introduction of a protocol for intensive care management. British Journal of Anaesthesia; 2004. 93. h. 761–7.
Dikmen Sureyya S., PhD; John D. Corrigan, PhD, ABPP; Harvey S. Levin, PhD; Joan Machamer, MA; William Stiers, PhD, ABPP; Marc G. Weisskopf, PhD, ScD. 2009. Cognitive Outcome Following Traumatic Brain Injury. J Head Trauma Rehabil. Vol. 24, No. 6, pp. 430–438
Ghazali Malueka, 2007, Radiologi Diagnostik, Yogyakarta: Pustaka Cendekia.Iskandar, Japardi, 2004, Penatalaksanaan Cedera Kepala secara Operatif. Sumatra
Utara: USU Press. Diakses pada 20 Juni 2015. Dari: http://library.usu.ac.id/download/fk/bedahiskandar%20japardi61.pdf
Kluwer wolters, 2009, Trauma and acute care surgery, Philadelphia: Lippicott Williams and Wilkins
Prakash, A, et al. Antioxidant Activity. Diunduh dari:http://www.medlabs.com/downloads/antiox_acti_.pdf
Razmkon, et al. 2011. Administration of Vitamin C and Vitamin E in Severe HeadIndrasmoro, A.B. 2015. Perbandingan Efek Antioksidan Vitamin C dengan
Metilprednisolon dalam Kontusio Pulmoner. Yogyakarta: FK UGMInjury: A Randomized Double-blind Controlled Trial. Clinical Neurosurgery, Vol. 58,
2011.Salmond C.H, D.A.Chatfield, D.K.Menon, J.D.Pickard, B.J.Sahakian. 2005.
Cognitive sequelae of head injury: involvement of basal forebrain and associated structures. Brain Vol. 128 No.1 : 189–200
SHERKI, Y.G, ZIV ROSENBAUM, ELDAD MELAMED, AND DANIEL. 2002. Antioxidant Therapy in Acute Central Nervous System Injury: Current. Diakses pada 21 Juni2015, dari: http://pharmrev.aspetjournals.org/content/54/2/271k.full.pdf+html
Wu, Angio, Zhe Ying, BS, Fernando Gomez-Poinilla, PhD. 2013. Vitamin E Protects Against Oxidative Damage and Learning Disability After Mild Traumatic Brain Injury in Rats. Diakses pada 21 Juni 2015. Dari: http://nnr.sagepub.com/content/24/3/290.abstract
42
top related