PENGARUH PEMBERIAN VITAMIN E TERHADAP

PENURUNAN REACTIVE OXYGEN SPECIES (ROS)

PADA TIKUS ALBINO GALUR WISTAR (Rattus

norvegicus) DENGAN CEDERA OTAK TRAUMATIK

PROPOSALKARYA ILMIAH PARIPURNA

Diajukan dalam rangka untuk memenuhi sebagian persyaratan kelulusan

Program Pendidikan Dokter Spesialis Program Studi Ilmu Bedah di Fakultas

Kedokteran Universitas Gadjah Mada Yogyakarta

Diajukan oleh :

dr. Fadli Robby Amsriza, MMR.

BAGIAN ILMU BEDAH/SMF BEDAH

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS GAJAH MADA

RSUP DR. SARDJITO YOGYAKARTA

2015

LEMBAR PENGESAHAN

PROPOSAL

KARYA ILMIAH PARIPURNA

PENGARUH PEMBERIAN VITAMIN E TERHADAP

PENURUNAN REACTIVE OXYGEN SPECIES (ROS)

PADA TIKUS ALBINO GALUR WISTAR (Rattus

norvegicus) DENGAN CEDERA OTAK TRAUMATIK

Yang disusun oleh

dr. Fadli Robby Amsriza

Diseminarkan pada tanggal Dan dinyatakan telah memenuhi syarat

Pembimbing I Pembimbing II

dr. NIP.

Dr . NIP.

DAFTAR ISI

DAFTAR ISI.............................................................................................................. ii

DAFTAR TABEL...................................................................................................... iv

ii

DAFTAR GAMBAR................................................................................................. v

INTISARI................................................................................................................... vi

ABSTRACT............................................................................................................... vii

BAB I PENDAHULUAN ......................................................................................... 1

A. Latar Belakang Masalah...................................................................................... 1

B. Rumusan Masalah............................................................................................... 3

C. Tujuan Penelitian................................................................................................ 3

D. Manfaat Penelitian.............................................................................................. 3

E. Keaslian Penelitian.............................................................................................. 4

BAB II TUJUAN PUSTAKA ................................................................................... 5

A. Anatomi dan Fisiologi......................................................................................... 5

B. Epidemiologi....................................................................................................... 7

C. Etiologi dan Faktor Risiko.................................................................................. 8

D. Patologi............................................................................................................... 10

E. Prosedur Diagnostik............................................................................................ 12

F. Stadium............................................................................................................... 16

G. Penatalaksanaan.................................................................................................. 17

H. Prognosis............................................................................................................. 18

BAB III METODOLOGI PENELITIAN .................................................................. 20

A. Jenis penelitian.................................................................................................... 20

B. Lokasi Penelitian................................................................................................. 20

C. Waktu Penelitian................................................................................................. 20

D. Populasi dan Subjek Penelitian........................................................................... 20

iii

E. Kriteria Inklusi dan Eksklusi............................................................................... 20

F. Definisi Operasional........................................................................................... 21

G. Metode Pengambilan Sampel.............................................................................. 21

H. Pengolahan dan Analisis Data............................................................................. 21

BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN .......................................... 22

A. HASIL PENELITIAN......................................................................................... 22

B. PEMBAHASAN................................................................................................. 24

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN..................................................................... 29

A. KESIMPULAN................................................................................................... 29

B. SARAN............................................................................................................... 30

DAFTAR PUSTAKA................................................................................................ 31

iv

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1 Tabel Stadium Karsinoma Tiroid....................................................... 16

Gambar 2.2 Alogaritme Management Nodul Tiroid dengan Fasilitas

Potong Beku....................................................................................... 17

Gambar 2.3 Alogaritme Manajemen Nodul Tiroid dengan Fasilitas

Potong Beku....................................................................................... 18

Gambar 5.1 Distribusi Proporsi Penderita Kanker Tiroid Berdasarkan

Jenis Kelamin..................................................................................... 24

Gambar 5.2 Grafik Distribusi Proporsi Penderita Kanker Tiroid

Berdasarkan Usia................................................................................ 25

Gambar 5.3 Grafik Distribusi Proporsi Penderita Kanker Tiroid

Berdasarkan Daerah Asal................................................................... 26

Gambar 5.4 Distribusi Proporsi Penderita Kanker Tiroid

Berdasarkan Tipe Patologi.................................................................. 27

v

6

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah

Cedera otak traumatik adalah trauma mekanik pada kepala yang terjadi baik

secara langsung atau tidak langsung yang kemudian dapat berakibat pada gangguan

fungsi neurologis, fungsi fisik, kognitif, psikososial, yang dapat bersifat sementara

ataupun permanent. Cedera otak traumatik merupakan salah satu penyebab kematian

dan kecacatan utama pada kelompok usia produktif dan terjadi kurang lebih 0.5-1 juta

kasus per tahun. Di Indonesia kejadian cedera otak traumatik setiap tahunnya

diperkirakan mencapai 500.000 kasus. Dari jumlah diatas, 10% penderita meninggal

sebelum tiba di rumah sakit. Dari pasien yang sampai di rumah sakit, 80%

dikelompokan sebagai cedera otak traumatik ringan, 10 % termasuk sebagai cedera

otak traumatik sedang dan 10% termasuk sebagai cedera otak traumatik berat

(Iskandar, 2004; Salmond et al, 2005; Dikmen et al, 2009).

Di Amerika Serikat cedera otak traumatik menyebabkan 290.000 orang dirawat

di rumah sakit, 51.000 kematian dan 80.000 pasien dengan cacat, gangguan kognitif

dan perilaku. Di Inggris, insiden sebagai cedera otak traumatik yang dilaporkan

sekitar 400 per 100.000 orang tiap tahunnya. Cedera otak traumatik merupakan

penyebab utama kematian pada dewasa kurang dari 45 tahun dan pada anak-anak (1-

15 tahun). Cedera otak traumatik umumnya diklasifikasikan berdasarkan nilai

Glasgow Coma Scale (GCS). Kebanyakan cedera otak traumatik yang terjadi

7

diklasifikasikan sebagai cedera otak traumatik ringan, dan sekitar 8-10%

diklasifikasikan sebagai cedera otak traumatik sedang dan berat. Meskipun banyak

pasien kembali bekerja setelah menderita cedera otak traumatik ringan, sekitar 50%

pasien menderita kelumpuhan sedang atau berat dinilai dengan Glasgow Outcome

Scale (GOS). Untuk pasien dengan cedera otak traumatik berat prognosisnya lebih

buruk. Sekitar 30% pasien dengan skor GCS kurang dari 13 akan meninggal.

Mortalitas untuk pasien dengan GCS kurang dari 8 setelah resusitasi adalah sekitar

50%. Sedangkan pasien dengan skor GCS kurang dari 12, sekitar 8% akan meninggal

dalam 6 jam pertama, 2% dalam 1 jam pertama. Akibat jangka panjang pada pasien

dengan cedera otak traumatik berat lebih buruk dibandingkan cedera otak traumatik

ringan, hanya 20% yang sembuh sempurna.3 Frenchay Hospital di Bristol, Inggris,

mencatat pada 1997-2000, terdapat 452 pasien dengan cedera otak traumatik. Pasien

dengan GCS kurang dari 8 sebanyak 353 pasien (78%), umur rata-rata pasien 35,1

tahun, dan 215 pasien (47,6%) menjalani prosedur operasi. Sekitar 20% pasien

mendapat perawatan di ICU dan sisanya di ruang perawatan rumah sakit. Sekitar 94

pasien (20,8%) meninggal saat mendapat perawatan di ruang perawatan. Di ICU

setelah mendapat perawatan, 61 pasien (13,5%) meninggal dan 33 pasien (7,3%)

meninggal setelah keluar dari ICU. Rata-rata lama perawatan pasien di ruang

perawatan adalah 10 hari, di ICU adalah 3 hari (Clayton et al, 2004).

Radikal bebas adalah molekul yang sangat reaktif dihasilkan terutama selama

respirasi seluler dan metabolisme normal. Ketidakseimbangan antara produksi sel

radikal bebas dan kemampuan sel untuk mempertahankan diri mereka disebut sebagai

stress oksidatif. Stress oksidatif terlibat sebagai kontributor potensial untuk

8

patogenesis akut cedera sistem saraf pusat. Setelah cedera otak oleh stroke iskemik,

stroke perdarahan atau trauma kepala, produksi reaktif spesies oksigen (ROS) dapat

meningkat, kadang-kadang drastis, menyebabkan kerusakan jaringan melalui beberapa

jalur molekuler seluler berbeda. Radikal bisa menyebabkan kerusakan kardinal

komponen seluler seperti lipid, protein, dan asam nukleat (misalnya, DNA),

terkemuka kematian sel berikutnya oleh mode nekrosis atau apoptosis. Kerusakan

dapat menjadi lebih luas karena untuk melemah sistem pertahanan antioksidan seluler.

Selain itu, cedera otak akut meningkatkan kadar asam amino eksitotoksik (seperti

glutamat), yang juga memproduksi ROS, sehingga meningkatkan kehancuran

parenchymatous. Oleh karena itu, pengobatan dengan antioksidan secara teoritis dapat

bertindak untuk mencegah penyebaran kerusakan jaringan dan meningkatkan

kelangsungan hidup dan hasil neurologis (Sherki, et al, 2002). Vitamin E adalah salah

satu antioksidan yang dapat mengurangi ROS, yang memiliki potensi untuk

mengurangi kerusakan oksidatif ditemui setelah cedera otak traumatis (Wu, et al,

2013).

Berdasarkan latar belakang diatas, dimana cedera otak traumatik merupakan

salah satu penyebab kematian dan kecacatan utama pada kelompok usia produktif dan

terjadi kurang lebih 0.5-1 juta kasus per tahun.serta vitamin E memiliki potensi untuk

mengurangi kerusakan oksidatif ditemui setelah cedera otak traumatis, maka perlu

dilakukan penelitian dengan judul Pengaruh Pemberian Vitamin E Terhadap

Penurunan Reactive Oxygen Species (ROS) Pada Tikus Albino Galur Wistar

(Rattus norvegicus) Dengan Cedera Otak Traumatik.

9

B. Rumusan Masalah

Dari gambaran yang telah diuraikan pada latar belakang diatas, maka hasil

perumusan masalah adalah apakah vitamin E dapat berpengaruh secara signifikan

terhadap penurunan Reactive Oxygen Species (ROS) pada tikus albino galur wistar

(Rattus norvegicus) dengan cedera otak traumatik?

C. Tujuan Penelitian

Adapun tujuan dari penelitian ini adalah menganalisis pengaruh pemberian

vitamin E terhadap penurunan Reactive Oxygen Species (ROS) pada tikus albino galur

wistar (Rattus norvegicus) dengan cedera otak traumatik.

D. Manfaat Penelitian

Adapun manfaat penelitian yang dapat diperoleh dari penelitian ini ditujukan

bagi beberapa pihak sebagai berikut:

1. Bagi Rumah Sakit

- Memberikan masukan bagi rumah sakit mengenai pengaruh pemberian vitamin

E pada cedera otak traumatik.

- Dapat digunakan sebagai referensi oleh rumah sakit.

- Sebagai rujukan dan pengembang keilmuan di bidang Bedah Syaraf.

2. Bagi Masyarakat

- Meningkatkan kesadaran tentang cedera otak traumatik

- Memberikan informasi lebih terperinci pengaruh pemberian vitamin E pada

cedera otak traumatik

10

3. Bagi Peneliti

- Menambah ilmu pengetahuan tentang pengaruh pemberian vitamin E pada

cedera otak traumatik

- Sebagai data awal untuk melakukan penelitian lebih lanjut

E. Keaslian Penelitian

Peneliti belum pernah menemukan penulisan karya ilmiah sejenis mengenai

pengaruh pemberian vitamin E terhadap penurunan Reactive Oxygen Species (ROS)

pada tikus dengan cedera otak traumatik. Beberapa penelitian yang hampir sama

dengan penelitian ini adalah sebagai berikut:

PENELITI LOKASI

PENELITIAN

JUDUL

Indrasmoro, A.B (2015) RSUP DR. Sardjito Perbandingan Efek Antioksidan

Vitamin C dengan Metilprednisolon

dalam Kontusio Pulmoner.

Wu, et al. (2015) University of California

at Los Angeles

Vitamin E Protects Against Oxidative

Damage and Learning Disability After

Mild Traumatic Brain Injury in Rats

Razmkon, et al. (2011) RSUP Haji Adam Malik,

Medan

Administration of Vitamin C and

Vitamin E in Severe Head

Injury: A Randomized Double-blind

Controlled Trial

11

Tabel 1.1 Penelitian Serupa Tentang Pengaruh Pemberian Vitamin E pada Cedera

Otak Traumatik

12

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. Cedera Otak Traumatik

1. Definisi

Cedera otak traumatik adalah trauma mekanik pada kepala yang terjadi baik

secara langsung atau tidak langsung yang kemudian dapat berakibat pada gangguan

fungsi neurologis, fungsi fisik, kognitif, psikososial, yang dapat bersifat temporer

ataupun permanent. Menurut Brain Injury Assosiation of America, cedera otak

traumatik adalah suatu kerusakan pada kepala, bukan bersifat kongenital ataupun

degeneratif, tetapi disebabkan oleh serangan / benturan fisik dari luar, yang dapat

mengurangi atau mengubah kesadaran, sehingga menimbulkan kerusakan

kemampuan kognitif dan fungsi fisik (Iskandar, 2004).

2. Anatomi Kepala

a. Kulit Kepala

Kulit kepala terdiri dari 5 lapisan yang disebut sebagai SCALP yaitu:

Skin atau kulit

Connective tissue atau jaringan penyambung

Aponeuris atau galea aponeurotika yaitu jaringan ikat yang

berhbungan langsung dengan tengkorak

Loose areolar tissue tau jaringan penunjang longgar.

Perikranium

Jaringan penunjang longgar memisahkan galea aponeurotika dari perikranium

dan merupakan tempat yang biasa terjadinya perdarahan subgaleal. Kulit kepala

memiliki banyak pembuluh darah sehingga bila terjadi perdarahan akibat laserasi

kulit kepala akan menyebabkan banyak kehilangan darah terutama pada anak-anak

atau penderita dewasa yang cukup lama terperangkap sehingga membutuhkan waktu

Lama untuk mengeluarkannya (American college of surgeon, 1997).

13

b. Tulang Tengkorak

Terdiri dari kubah (kalvaria) dan basis kranii. Tulang tengkorak terdiri dari

beberapa tulang yaitu frontal, parietal, temporal dan oksipital. Kalvaria khususnya

diregio temporal adalah tipis, namun disini dilapisi oleh otot temporalis. Basis cranii

berbentuk tidak rata sehingga dapat melukai bagian dasar otak saat bergerak akibat

proses akselerasi dan deselerasi. Rongga tengkorak dasar dibagi atas 3 fosa yaitu

fosa anterior tempat lobus frontalis, fosa media tempat temporalis dan fosa posterior

ruang bagi bagian bawah batang otak dan serebelum (American college of surgeon,

1997).

c. Meninges

Selaput meninges menutupi seluruh permukaan otak dan terdiri dari 3 lapisan

yaitu :

1) Duramater

Duramater secara konvensional terdiri atas dua lapisan yaitu lapisan

endosteal dan lapisan meningeal.Duramater merupakan selaput yang keras, terdiri

atas jaringan ikat fibrisa yang melekat erat pada permukaan dalam dari kranium.

Karena tidak melekat pada selaput arachnoid di bawahnya, maka terdapat suatu

ruang potensial (ruang subdura) yang terletak antara duramater dan arachnoid,

dimana sering dijumpai perdarahan subdural (Iskandar, 2004)

Pada cedera otak, pembuluh-pembuluh vena yang berjalan pada permukaan

otak menuju sinus sagitalis superior di garis tengah atau disebut Bridging Veins,

dapat mengalami robekan dan menyebabkan perdarahan subdural. Sinus sagitalis

superior mengalirkan darah vena ke sinus transversus dan sinus sigmoideus. Laserasi

dari sinus-sinus ini dapat mengakibatkan perdarahan hebat (Iskandar, 2004).

Arteri meningea terletak antara duramater dan permukaan dalam dari

kranium (ruang epidural). Adanya fraktur dari tulang kepala dapat menyebabkan

laserasi pada arteri-arteri ini dan menyebabkan perdarahan epidural. Yang paling

14

sering mengalami cedera adalah arteri meningea media yang terletak pada fosa

temporalis (fosa media) (Iskandar, 2004).

2) Selaput Arakhnoid

Selaput arakhnoid merupakan lapisan yang tipis dan tembus pandang. Selaput

arakhnoid terletak antara pia mater sebelah dalam dan dura mater sebelah luar yang

meliputi otak. Selaput ini dipisahkan dari dura mater oleh ruang potensial, disebut

spatium subdural dan dari pia mater oleh spatium subarakhnoid yang terisi oleh

liquor serebrospinalis. Perdarahan sub arakhnoid umumnya disebabkan akibat

cedera otak traumatik (American college of surgeon,1997)

3) Pia mater

Pia mater melekat erat pada permukaan korteks serebri. Pia mater adarah

membrana vaskular yang dengan erat membungkus otak, meliputi gyri dan masuk

kedalam sulci yang paling dalam. Membrana ini membungkus saraf otak dan

menyatu dengan epineuriumnya. Arteri-arteri yang masuk kedalam substansi otak

juga diliputi oleh pia mater (American college of surgeon, 1997).

d. Otak

15

Otak merupakan suatu struktur gelatin dengan berat pada orang dewasa

sekitar 14 kg. Otak terdiri dari beberapa bagian yaitu proensefalon (otak depan)

terdiri dari serebrum dan diensefalon, mesensefalon (otak tengah) dan

rhombensefalon (otak belakang) terdiri dari pons, medula oblongata dan serebellum

(American college of surgeon, 1997).

Fisura membagi otak menjadi beberapa lobus. Lobus frontal berkaitan

dengan fungsi emosi, fungsi motorik dan pusat ekspresi bicara. Lobus parietal

berhubungan dengan fungsi sensorik dan orientasi ruang. Lobus temporal mengatur

fungsi memori tertentu. Lobus oksipital

bertanggung jawab dalam proses penglihatan. Mesensefalon dan pons bagian atas

berisi sistem aktivasi retikular yang berfungsi dalam kesadaran dan kewapadaan.

Pada medulla oblongata terdapat pusat kardiorespiratorik. Serebellum bertanggung

jawab dalam fungsi koordinasi dan keseimbangan (American college of surgeon,

1997).

e. Cairan serebrospinalis

Cairan serebrospinal (CSS) dihasilkan oleh plexus khoroideus dengan

kecepatan produksi sebanyak 20 ml/jam. CSS mengalir dari dari ventrikel

lateral melalui foramen monro menuju ventrikel III, dari akuaduktus sylvius

menuju ventrikel IV. CSS akan direabsorbsi ke dalam sirkulasi vena melalui

granulasio arakhnoid yang terdapat pada sinus sagitalis superior. Adanya

darah dalam CSS dapat menyumbat granulasio arakhnoid sehingga

mengganggu penyerapan CSS dan menyebabkan kenaikan takanan

intracranial. Angka rata-rata pada kelompok populasi dewasa volume CSS

sekitar 150 ml dan dihasilkan sekitar 500 ml CSS per hari (American college

of surgeon, 1997).

f. Tentorium

16

Tentorium serebeli membagi rongga tengkorak menjadi ruang

supratentorial (terdiri dari fosa kranii anterior dan fosa kranii media) dan

ruang infratentorial (berisi fosa kranii posterior) (American college of

surgeon, 1997).

g. Vaskularisasi Otak

Otak disuplai oleh dua arteri carotis interna dan dua arteri vertebralis.

Keempat arteri ini beranastomosis pada permukaan inferior otak dan

membentuk sirkulus Willisi. Vena-vena otak tidak mempunyai jaringan otot

didalam dindingnya yang sangat tipis dan tidak mempunyai katup. Vena

tersebut keluar dari otak dan bermuara ke dalam sinus venosus cranialis

(American college of surgeon, 1997).

3. Epidemiologi

Insiden tahunan cedera otak traumatik di Amerika Serikat diperkirakan

180-220 kasus per 100.000 penduduk. Di Amerika Serikat, dengan populasi

hampir 300 juta, kejadian cedera otak traumatik sekitar 600.000 per tahun

(Ainsword, 2015).

Cedera otak traumatik merupakan salah satu penyebab kematian dan

kecacatan utama pada kelompok usia produktif dan terjadi kurang lebih 0.5-1

juta kasus per tahun. Di Indonesia kajadian cedera otak traumatik setiap

tahunnya diperkirakan mencapai 500.000 kasus. Dari jumlah diatas, 10%

penderita meninggal sebelum tiba di rumah sakit. Dari pasien yang sampai di

rumah sakit, 80% dikelompokan sebagai cedera otak traumatik ringan, 10 %

termasuk cedera otak traumatik sedang dan 10% termasuk cedera otak

traumatik berat (Iskandar, 2004).

17

Rasio cedera otak traumatik laki-laki dan perempuan hampir 2: 1, dan

cedera otak traumatik jauh lebih umum pada orang yang lebih muda dari 35

tahun (Ainsword, 2015).

4. Etiologi

Penyebab paling umum cedera otak traumatik adalah kecelakaan

kendaraan bermotor (misalnya, tabrakan antara kendaraan, pejalan kaki

disambar kendaraan bermotor, kecelakaan sepeda), jatuh, serangan, cedera

olahraga terkait, dan trauma penetrasi (Ainsword, 2015).

Kecelakaan kendaraan bermotor menyumbang hampir setengah dari

cedera otak traumatik di Amerika Serikat. Di kota-kota dengan populasi lebih

dari 100.000 penduduk, serangan, jatuh, dan trauma penetrasi merupakan

etiologi lebih umum dari cedera otak traumatik (Ainsword, 2015).

5. Patofisiologi

Manajemen yang tepat dari cedera otak traumatik membutuhkan

pemahaman tentang patofisiologi cedera otak traumatik. Selain perbedaan

fungsional yang jelas, otak memiliki beberapa fitur yang membedakannya

dari sistem organ lain. Yang paling penting dari perbedaan-perbedaan ini

adalah bahwa otak terkandung dalam tengkorak, wadah kaku dan tidak

elastis. Karena otak terletak di dalam kontainer inelastis ini, hanya

peningkatan kecil dalam volume dalam kompartemen intrakranial dapat

18

ditoleransi sebelum tekanan dalam kompartemen meningkat secara dramatis.

Konsep ini didefinisikan oleh doktrin Monro-Kellie, yang menyatakan bahwa

total volume intrakranial adalah tetap karena sifat elastis tengkorak. Volume

intrakranial (V i / c) adalah sama dengan jumlah komponennya, sebagai

berikut:

V i / c = V (otak) + V (cairan serebrospinal) + V (darah)

Pada orang dewasa yang khas, volume intrakranial adalah sekitar 1500

mL, dari yang otak menyumbang 85-90%, intravaskular rekening volume

darah otak untuk 10%, dan cairan serebrospinal (CSF) menyumbang sisa

(<3%). Ketika cedera otak traumatik yang signifikan terjadi, edema serebral

sering berkembang, yang meningkatkan volume relatif dari otak. Karena

volume intrakranial adalah tetap, tekanan dalam kompartemen ini naik

kecuali beberapa tindakan kompensasi terjadi, seperti penurunan volume

salah satu komponen intrakranial lainnya. Hal ini terkait erat dengan konsep

kepatuhan intrakranial, yang didefinisikan sebagai perubahan tekanan akibat

perubahan volume (Ainsword, 2015).

Pada cedera otak traumatik , kerusakan otak dapat terjadi dalam dua

tahap yaitu cedera primer dan cedera sekunder. Cedera primer merupakan

cedera pada kepala sebagai akibat langsung dari suatu ruda paksa, dapat

disebabkan benturan langsung kepala dengan suatu benda keras maupun oleh

proses akselarasi deselarasi gerakan kepala (Marijata, 2006).

19

Dalam mekanisme cedera otak traumatik dapat terjadi peristiwa coup

dan contrecoup. Cedera primer yang diakibatkan oleh adanya benturan pada

tulang tengkorak dan daerah sekitarnya disebut lesi coup. Pada daerah yang

berlawanan dengan tempat benturan akan terjadi lesi yang disebut

contrecoup. Akselarasi-deselarasi terjadi karena kepala bergerak dan berhenti

secara mendadak dan kasar saat terjadi trauma. Perbedaan densitas antara

tulang tengkorak (substansi solid) dan otak (substansi semisolid)

menyebabkan tengkorak bergerak lebih cepat dari muatan intrakranialnya.

Bergeraknya isi dalam tengkorak memaksa otak membentur permukaan

dalam tengkorak pada tempat yang berlawanan dari benturan (contrecoup)

(Iskandar, 2004).

Cedera sekunder merupakan kerusakan otak yang timbul sebagai

komplikasi dari kerusakan primer termasuk kerusakan oleh hipoksisa,

iskemik, pembengkakan otak, peningkatan tekanan intracranial, hidrosefalus,

dan infeksi (Marijata, 2006).

6. Klasifikasi

Cedera otak traumatik diklasifikasikan dalam berbagai aspek. Secara

praktis dikenal 3 deskripsi kalsifikasi yaitu berdasarkan mekanisme, beratnya

cedera otak traumatik , dan morfologinya.

a. Mekanisme cedera otak traumatik

Berdasarkan mekanismenya cedera otak traumatik dibagi atas cedera

otak traumatik tumpul dan cedera otak traumatik tembus. Cedera otak

traumatik tumpul biasanya berkaitan dengan kecelakaan mobil atau motor,

20

jatuh atau terkena pukulan benda tumpul. Sedang cedera otak traumatik

tembus disebabkan oleh peluru atau tusukan (Bernath, 2009).

b. Beratnya cedera

Cedera otak traumatik diklasifikasikan berdasarkan nilai Glasgow

Coma Scale adalah sebagai berikut :

1) Nilai GCS sama atau kurang dari 8 didefenisikan sebagai cedera otak

traumatik berat.

2) Cedera otak traumatik sedang memiliki nilai GCS 9-13

3) Cedera otak traumatik ringan dengan nilai GCS 14-15.

Glasgow Glasgow Coma Scale nilai aiRespon membuka mata (E) Buka mata spontan 4Buka mata bila dipanggil/rangsangan suara 3Buka mata bila dirangsang nyeri 2Tak ada reaksi dengan rangsangan apapun 1

Respon verbal (V) Komunikasi verbal baik, jawaban tepat 5Bingung, disorientasi waktu, tempat, dan orang 4Kata-kata tidak teratur 3Suara tidak jelas 2Tak ada reaksi dengan rangsangan apapun 1

Respon motorik (M) Mengikuti perintah 6Dengan rangsangan nyeri, dapat mengetahui tempat rangsangan 5Dengan rangsangan nyeri, menarik anggota badan 4Dengan rangsangan nyeri, timbul reaksi fleksi abnormal 3Dengan rangsangan nyeri, timbul reaksi ekstensi abnormal 2Dengan rangsangan nyeri, tidak ada reaksi 1

(Kluwer, 2009)

c. Morfologi cedera

21

Secara morfologis cedera otak traumatik dapat dibagi atas fraktur

cranium dan lesiintrakranial.

1) Fraktur cranium

Fraktur cranim dapat terjadi pada atap atau dasar tengkorak, dan dapat

berbentuk garis atau bintang dan dapat pula terbuka atau tertutup. Fracture

dasar tengkorak biasanya memerlukan pemeriksaan CT Scan dengan dengan

teknik bone window untuk memperjelas garis frakturnya. Adanya tanda-tanda

klinis fraktur dasar tengkorak menjadikan petunjuk kecurigaan untuk

melakukan pemeriksaan lebih rinci.tanda-tanda tersebut antara lain ekimosis

periorbital (raccoon eye sign), ekimosis retroauikular (battle sign), kebocoran

CSS (Rhinorrhea, otorrhea) dan paresis nervus fasialis (Bernath, 2009)

Fraktur cranium terbuka atau komplikata mengakibatkan adanya

hubungan antara laserasi kulit kepala dan permukaan otak karena robeknya

selaput duramater. Keadaan ini membutuhkan tindakan dengan segera.

Adanya fraktur tengkorak merupakan petunjuk bahwa benturan yang terjadi

cukup berat sehingga mengakibatkan retaknya tulang tengkorak. Frekuensi

fraktura tengkorak bervariasi, lebih banyak fraktura ditemukan bila penelitian

dilakukan pada populasi yang lebih banyak mempunyai cedera berat.

Fraktura kalvaria linear mempertinggi risiko hematoma intrakranial sebesar

400 kali pada pasien yang sadar dan 20 kali pada pasien yang tidak sadar.

Fraktura kalvaria linear mempertinggi risiko hematoma intrakranial sebesar

400 kali pada pasien yang sadar dan 20 kali pada pasien yang tidak sadar.

Untuk alasan ini, adanya fraktura tengkorak mengharuskan pasien untuk

dirawat dirumah sakit untuk pengamatan (Bernath, 2009)

2) Lesi Intrakranial

Lesi intrakranial dapat diklasifikasikan sebagai fokal atau difusa,

walau kedua bentuk cedera ini sering terjadi bersamaan. Lesi fokal termasuk

hematoma epidural, hematoma subdural, dan kontusi (atau hematoma

22

intraserebral). Pasien pada kelompok cedera otak difusa, secara umum,

menunjukkan CT scan normal namun menunjukkan perubahan sensorium

atau bahkan koma dalam keadaan klinis (Bernath, 2009)

a) Hematoma Epidural

Epidural hematom (EDH) adalah perdarahan yang terbentuk di ruang

potensial antara tabula interna dan duramater dengan cirri berbentuk

bikonvek atau menyerupai lensa cembung. Paling sering terletak diregio

temporal atau temporoparietal dan sering akibat robeknya pembuluh

meningeal media. Perdarahan biasanya dianggap berasal arterial, namun

mungkin sekunder dari perdarahan vena pada sepertiga kasus. Kadang-

kadang, hematoma epidural akibat robeknya sinus vena, terutama diregio

parietal-oksipital atau fossa posterior.

Walau hematoma epidural relatif tidak terlalu sering (0.5% dari

keseluruhan atau 9% dari pasien koma cedera otak traumatik ), harus selalu

diingat saat menegakkan diagnosis dan ditindak segera. Bila ditindak segera,

prognosis biasanya baik karena penekan gumpalan darah yang terjadi tidak

berlangsungg lama. Keberhasilan pada penderita pendarahan epidural

berkaitan langsung denggan status neurologis penderita sebelum

pembedahan. Penderita dengan pendarahan epidural dapat menunjukan

adanya “lucid interval” yang klasik dimana penderita yang semula mampu

bicara lalu tiba-tiba meningggal (talk and die), keputusan perlunya tindakan

bedah memnang tidak mudah dan memerlukan pendapat dari seorang ahli

bedah saraf (Bernath, 2009).

Dengan pemeriksaan CT Scan akan tampak area hiperdens yang tidak

selalu homogeny, bentuknya biconvex sampai planoconvex, melekat pada

tabula interna dan mendesak ventrikel ke sisi kontralateral ( tanda space

occupying lesion ). Batas dengan corteks licin, densitas duramater biasanya

23

jelas, bila meragukan dapat diberikan injeksi media kontras secara intravena

sehingga tampak lebih jelas (Gazali, 2007).

24

b) Hematom Subdural

Hematoma subdural (SDH) adalah perdarahan yang terjadi di antara

duramater dan arakhnoid. SDH lebih sering terjadi dibandingkan EDH,

ditemukan sekitar 30% penderita dengan cedera otak traumatik berat. Terjadi

paling sering akibat robeknya vena bridging antara korteks serebral dan sinus

draining. Namun ia juga dapat berkaitan dengan laserasi permukaan atau

substansi otak. Fraktura tengkorak mungkin ada atau tidak (American college

of surgeon, 1997).

Selain itu, kerusakan otak yang mendasari hematoma subdural akuta

biasanya sangat lebih berat dan prognosisnya lebih buruk dari hematoma

epidural. Mortalitas umumnya 60%, namun mungkin diperkecil oleh tindakan

operasi yang sangat segera dan pengelolaan medis agresif. Subdural hematom

terbagi menjadi akut dan kronis.

i) SDH Akut

Pada CT Scan tampak gambaran hyperdens sickle ( seperti bulan

sabit ) dekat tabula interna, terkadang sulit dibedakan dengan epidural

hematom. Batas medial hematom seperti bergerigi. Adanya hematom di

25

daerah fissure interhemisfer dan tentorium juga menunjukan adanya hematom

subdural (Bernath, 2009).

ii) SDH Kronis

Pada CT Scan terlihat adanya komplek perlekatan, transudasi,

kalsifikasi yang disebabkan oleh bermacam- macam perubahan, oleh

karenanya tidak ada pola tertentu. Pada CT Scan akan tampak area hipodens,

isodens, atau sedikit hiperdens, berbentuk bikonveks, berbatas tegas melekat

pada tabula. Jadi pada prinsipnya, gambaran hematom subdural akut adalah

hiperdens, yang semakin lama densitas ini semakin menurun, sehingga terjadi

isodens, bahkan akhirnya menjadi hipodens (Ghazali, 2007)

c) Kontusi dan hematoma intraserebral.

Kontusi serebral murni bisanya jarang terjadi. Selanjutnya, kontusi

otak hampir selalu berkaitan dengan hematoma subdural akut. Majoritas

terbesar kontusi terjadi dilobus frontal dan temporal, walau dapat terjadi pada

setiap tempat termasuk serebelum dan batang otak. Perbedaan antara kontusi

dan hematoma intraserebral traumatika tidak jelas batasannya. Bagaimanapun,

terdapat zona peralihan, dan kontusi dapat secara lambat laun menjadi

hematoma intraserebral dalam beberapa hari.

Hematoma intraserebri adalah perdarahan yang terjadi dalam jaringan

(parenkim) otak sebagai akibat dari adanya robekan pembuluh darah.

Terutama melibatkan lobus frontal dan temporal (80-90%), tetapi dapat juga

melibatkan korpus kallosum, batang otak, dan ganglia basalis. Gejala dan

tanda juga ditentukan oleh ukuran dan lokasu hematoma (Marijata, 2006).

26

d) Cedera difus

Cedar otak difus merupakan kelanjutan kerusakan otak akibat cedera

akselerasi dan deselerasi, dan ini merupakan bentuk yang sering terjadi pada

cedera otak traumatik . Komosio cerebri ringan adalah keadaan cedera dimana

kesadaran tetap tidak terganggu namun terjadi disfungsi neurologis yang

bersifat sementara dalam berbagai derajat. Cedera ini sering terjadi, namun

karena ringan kerap kali tidak diperhatikan. Bentuk yang paling ringan dari

komosio ini adalah keadaan bingguung dan disorientasi tanpa amnesia.

Sindroma ini pulih kembali tanpa gejala sisa sama sekali.cedera komosio yang

lebih berat menyebabkan keadaan binggung disertai amnesia retrograde dan

amnesia antegrad (American college of surgeon, 1997).

Komosio cerebri klasik adalah cedera yang mengakibatkan

menurunnya atau hilanggnya kesadaran. Keadaan ini selalu disertai dengan

amnesia pasca trauma dan lamanya amnesia ini merupakan ukuran beratnya

cidera. Dalam bebberapa penderita dapat timbul defisist neurologis untuk

beberapa waktu. Edfisit neurologis itu misalnya kesulitan mengingat, pusing,

mual, anosmia, dan depresi serta gejala lain. Gejala-gajala ini dikenal sebagai

sindroma pasca komosio yang dapat cukup berat (American college of

surgeon,1997)

27

.

Cedera aksonal difus (Diffuse Axonal Injury, DAI) adalah keadaan

diman pendeerita mengalami koma pasca cedera yang berlangsung lama ddan

tidak diakibatkan oleh suatu lesi mas aatau serangan iskemik. Biasanya

penderita dalam keadaan kooma yang dalam dan tetap koma selama beberapa

waktuu. Penderita sering menuunjukan gejala dekortikasi atau deserebrasi dan

bila pulih sering tetap dalam keadaan cacat berat, itupun bila bertahan hidup.

Penderita seringg menunjukan gejala disfungsi otonom seperti hipotensi,

hiperhidrosis dan hiperpireksia dan dulu diduga akibat cedeera aksonal difus

dan cedeera otak kerena hiipoksiia secara klinis tidak mudah, dan memang dua

keadaan tersebut seringg terjadi bersamaan (American college of

surgeon,1997)

B. Antioksidan

Antioksidan adalah zat yang dapat melindungi sel-sel terhadap efek

radikal bebas. Radikal bebas adalah molekul yang sangat reaktif dihasilkan

terutama selama respirasi seluler dan metabolisme normal. Ketidakseimbangan

antara produksi sel radikal bebas dan kemampuan sel untuk mempertahankan

diri mereka disebut sebagai stress oksidatif. Stress oksidatif terlibat sebagai

kontributor potensial untuk patogenesis akut cedera sistem saraf pusat. Setelah

cedera otak oleh stroke iskemik, stroke perdarahan atau trauma kepala,

produksi reaktif spesies oksigen (ROS) dapat meningkat, kadang-kadang

drastis, menyebabkan kerusakan jaringan melalui beberapa jalur molekuler

seluler berbeda. Radikal bisa menyebabkan kerusakan kardinal komponen

seluler seperti lipid, protein, dan asam nukleat (misalnya, DNA), terkemuka

kematian sel berikutnya oleh mode nekrosis atau apoptosis. Kerusakan dapat

28

menjadi lebih luas karena untuk melemah sistem pertahanan antioksidan

seluler. Selain itu, cedera otak akut meningkatkan kadar asam amino

eksitotoksik (seperti glutamat), yang juga memproduksi ROS, sehingga

meningkatkan kehancuran parenchymatous. Oleh karena itu, pengobatan

dengan antioksidan secara teoritis dapat bertindak untuk mencegah

penyebaran kerusakan jaringan dan meningkatkan kelangsungan hidup dan

hasil neurologis (Sherki, et al, 2002). Vitamin E adalah salah satu antioksidan

yang dapat mengurangi ROS, yang memiliki potensi untuk mengurangi

kerusakan oksidatif ditemui setelah cedera otak traumatis (Wu, et al, 2013).

Dalam kepustakaan kedokteran pengertian oksidan dan radikal bebas

(free radicals) sering dibaurkan karena keduanya memiliki sifat-sifat yang

mirip. Aktivitas kedua jenis senyawa ini sering menghasilkan akibat yang

sama walaupun prosesnya berbeda (Halliwell, 1991).

Oksidan, dalam pengertian ilmu kimia, adalah senyawa penerima

elektron, (electron acceptor), yaitu senyawa-senyawa yang dapat menarik

elektron. Sebaliknya, dalam pengertian ilmu kimia, radikal bebas adalah atom

atau molekul (kumpulan atom) yang memiliki elektron yang tak berpasangan

(unpaired electron). Radikal bebas memiliki dua sifat, yaitu reaktivitas tinggi,

karena kecenderungan menarik electron, dan dapat mengubah suatu molekul

menjadi suatu radikal. Sifat radikal bebas yang mirip dengan oksidan terletak

pada kecenderungannya untuk menarik elektron.Jadi sama halnya dengan

oksidan, radikal bebas adalah penerima elektron. Itulah sebabnya dalam

kepustakaan kedokteran, radikal bebas digolongkan dalam oksidan. Namun

29

perlu diingat bahwa radikal bebas adalah oksidan tetapi tidak setiap oksidan

adalah radikal bebas (Halliwel, 1991).

Reactive oxygen species (ROS) adalah istilah yang meliputi semua yang

sangat reaktif, mengandung molekul oksigen, termasuk radikal bebas. Jenis ROS

termasuk radikal hidroksil, hipoklorit, dan berbagai lipid peroksida. Semua mampu

bereaksi dengan membran lipid, asam nukleat, protein dan enzim, dan molekul kecil

lainnya, yang mengakibatkan kerusakan sel. ROS dihasilkan oleh sejumlah jalur.

Sebagian besar oksidan diproduksi oleh sel terjadi sebagai suatu konsekuensi dari

metabolisme aerobik normal dimana sekitar 90% dari oksigen yang digunakan oleh

sel dikonsumsi oleh sistem transpor elektron mitokondria.; ledakan oksidatif dari

fagosit (sel darah putih) sebagai bagian dari mekanisme dimana bakteri dan virus

dibunuh, dan protein asing (antigen) yang didenaturasi; metabolisme xenobiotik,

yaitu, detoksifikasi zat beracun; hal-hal seperti olahraga berat, yang mempercepat

metabolisme selular, peradangan kronis, infeksi, dan penyakit lainnya, paparan

alergen dan paparan obat atau racun seperti asap rokok,polusi, pestisida, insektisida;

serta setelah cedera otak oleh stroke iskemik, stroke perdarahan atau trauma kepala

(Halliwel, 1991; Wu, et al, 2013).

C. Vitamin E

Vitamin E (tokoferol) merupakan suatu komponen lipid yang esensial

terdiri dari selaput-selaput biologi yang saling berhubungan dengan radikal

peroxyl yang berfungsi dalam mencegah perkembangan lipid peroxidan

(Jishage, et al., 2005). Lebih lanjut dijelaskan oleh Dutta-Roy (1994) vitamin

E merupakan vitamin yang larut dalam lemak yang terdiri dari campuran dan

30

substansi tokoferol (a, b, g, dan d) dan tokotrienol (a, b, g, dan d), pada

manusia a-tokoferol merupakan vitamin E yang paling penting untuk aktifitas

biologi tubuh. Bentuk vitamin E ini dibedakan berdasarkan letak berbagai

grup metil pada cincin fenil rantai cabang molekul dan ketidak jenuhan rantai

cabang.

         Menurut Dutta-Roy (1994) a-tokoferol merupakan bentuk vitamin E

yang paling aktif, berdasarkan penelitian pada rodentia dan anak ayam. Bentuk

d–tokoferol sangat lebih aktif daripada bentuk l. Grup hidroksil yang aktif

pada cincin fenil dapat diesterifikasi untuk aktivitasnya. Dl - a - tokoferol

asetat dapat digunakan untuk membuat definisi unit-unit internasional untuk

vitamin E, yaitu 1 mg = 1 IU, oleh karena 1 mg dl - a-tokoferol (tidak

diesterifikasi) = ± 1,36 IU dan 1 mg d - a - tokoferol = 1,49 IU.

 Vitamin E dapat mengendalikan peroksida lemak dengan

menyumbangkan hidrogen kedalam reaksi, menyekat aktivitas tambahan yang

dilakukan oleh peroksida, sehingga memutus reaksi berantai dan bersifat

membatasi kerusakan (Watson and Leonard, 1986). Peran vitamin E dan

antioksidan lain secara tepat masih dipelajari, untuk itu pada penelitian ini

akan dikaji tentang kemampuan vitamin E sebagai antioksidan terhadap

radikal bebas pada usia tua.

Vitamin E berfungsi untuk memutus rantai peroksida lemak dengan

menyumbangkan ion hidrogen ke dalam reaksi, sehingga dapat menurunkan

kadar lemak peroksida darah. Mekanisme kerja vitamin E dalam mendonorkan

ion hidrogen untuk menetralkan atau mengurangi kadar lemak peroksida darah

31

dimulai dengan kerja a-tocoferol radikal yang kemudian berubah menjadi a–

tocoferol perokside. Dari dua a-tocoferol radikal berubah menjadi a-tocoferol

dimer dan akhirnya menjadi a-tocoquinone yang oleh vitamin C dapat

diregenerasi kembali menjadi a-tocoferol (Frankel, 1998).

BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

A. Jenis penelitian.

Jenis penelitian adalah laboratorik eksperimental dengan rancangan acak

sederhana.

B. Lokasi Penelitian

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu

(LPPT) Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Gadjah Mada Yogyakarta. Proses

pengujian kadar Radikal Superoksida (O2•−) dilakukan di laboratorium Histologi

Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.

C. Waktu Penelitian

Penelitian ini dilakukan pada Agustus – November 2015

D. Subjek Penelitian.

Subyek penelitian berupa 40 ekor tikus albino galur wistar (Rattus norvegicus)

dengan berat badan 170-200 gram dan berumur 2-3 bulan. Tikus albino galur wistar

diperoleh dari unit pengembangan hewan percobaan Universitas Gajah Mada.

E. Kriteria Inklusi dan Eksklusi.

Kriteria inklusi penelitian ini adalah:

1. Tikus jantan berusia 2-3 bulan.

32

33

2. Berat badan 170-200 gram

3. Kondisi umum tikus baik dan aktif

4. Tidak ada luka atau jejas di kepala

Kriteria eksklusi penelitian ini adalah:

1. Sakit selama masa adaptasi 7 hari

2. Mengalami infeksi selama perlakuan beralangsung

3. Mati selama perlakuan berlangsung

F. Variabel Penelitian

1. Variabel dependen (terikat) : Cedera otak traumatik

2. Variabel independen (bebas): Vitamin E dosis 100 mg/KgBB

G. Definisi Operasional

1. Cedera otak traumatik adalah suatu kerusakan pada kepala, bukan bersifat

kongenital ataupun degeneratif, tetapi disebabkan oleh serangan / benturan fisik

dari luar, yang dapat mengurangi atau mengubah kesadaran, sehingga

menimbulkan kerusakan kemampuan kognitif dan fungsi fisik (Iskandar, 2004).

Cedera otak traumatik pada penelitian ini ditimbulkan dengan cara memberikan

trauma pada tulang tengkorak tikus sehingga menimbulkan kontusi otak,

kerusakan jaringan otak, robeknya pembuluh – pembuluh darah jembatan,

penurunan aliran darah otak, dan edema otak. Kontusi otak juga bisa terjadi

secara tidak langsung (contracoup) akibat trauma pada tulang tengkorak.

Cedera otak traumatik pada tikus diinduksi menggunakan Marmarou’s

weight drop model yang dipaparkan oleh Marmarou et al (1994). Tikus

34

dianestesi dengan menyuntikkan 100 mg/kgBB ketamine HCl secara

intramuskuler. Kulit tikus diinsisi secara midline agar kalvaria terlihat. Diskus

stainless steel dengan diameter 10 mm dan kedalaman 3 mm dilekatkan di

tengah kalvaria antara fisura lambda dan bregma dengan semen gigi. Fungsi

dari peletakkan diskus stainless steel tersebut untuk mencegah terjadinya

fraktur tulang tengkorak. Tikus diposisikan pronasi pada busa dengan

ketebalan 10 cm. Cedera traumatik pada otak tikus diinduksi dengan

menjatuhkan beban silindris kuningan seberat 80 g secara bebas searah

gravitasi dari ketinggian 1 m melalui tabung kaca (Plexiglas).

35

2. Vitamin E (tokoferol) merupakan suatu komponen lipid yang esensial terdiri

dari selaput-selaput biologi yang saling berhubungan dengan radikal peroxyl

yang berfungsi dalam mencegah perkembangan lipid peroxidan (Jishage, et al.,

2005). Vitamin E diberikan dengan dosis 100mg/kgBB melalui intravena yang

diberkan segera setelah model cedera otak traumatik dilakukan.

Dosis vitamin E pada tikus dengan berat 200 gram dihitung menjadi =

200/1000 X 100 mg/kgBB = 20 mg/tikus

H. Metode Pengambilan Sampel.

Sampel dipilih dari populasi dengan menggunakan teknik simple

random sampling (acak sederhana). Besar sampel ditetapkan dengan

menggunakan rumus Federer.

Dimana t = jumlah perlakuan

n = besar ulangan

Dari rumus di atas didapatkan sampel sebanyak :

(2-1) (n-1) ≥ 15,

n ≥ 16

Berdasarkan rumus diatas diperoleh jumlah minimal sampel adalah 16

dan dibulatkan menjadi 20 tiap kelompok. Jadi total sampel yang digunakan

adalah 40 tikus karena akan ada 2 kelompok yaitu 20 tikus untuk kelompok

perlakuan dengan vitamin E dan 20 tikus kelompok kontrol. Untuk

(t-1) (n-1) ≥ 15

36

menentukan anggota kelompok dari tikus tersebut dilakukan dengan

pengundian dengan menggunakan nomor undian.

I. RANCANGAN PENELITIAN

Instrumentasi Penelitian

1. Alat Penelitian

a. Kandang hewan percobaan

b. Timbangan hewan

c. Spuit Injeksi 1ml, 3 ml dan 5 ml

d. Pipet ukur

e. Labu takar

f. Alat bedah minor

g. Tabung dengan Heparin

2. Bahan penelitian

a. Bahan perlakuan : vitamin E 100 mg/kgBB

Subjek(Tikus dengan Cedera Otak)

Kelompok Perlakuan dengan vitamin E

Kelompok Kontrol

Pemeriksaan Radikal superoksida

Pemeriksaan Radikal superoksida

Uji Independen

t-test

37

b. Bahan yang akan diteliti : darah arteri tikus bisa diambil dari arteri

abdominalis atau dari aorta desendens untuk pemeriksaan radikal

superoksida.

J. CARA KERJA

1. Sebelum perlakuan

a. Hewan uji diadaptasi dengan kondisi laboratorium tempat penelitian

dilakukan selama kurang lebih 1 minggu.

b. Hewan uji dikelompokkan secara acak menjadi 2 kelompok sesuai

kriteria inklusi dan eksklusi. Masing-masing kelompok terdiri dari 20

ekor tikus.

2. Pemberian perlakuan

Tikus dibagi secara acak menjadi 2 kelompok. Kelompok 1 adalah

kelompok perlakuan dengan vitamin E, kelompok 2 adalah kelompok kontrol.

Semua tikus akan mendapatkan perlakuan sama untuk model cedera otak

traumatik. Kemudian masing-masing tikus tersebut dianestesi dengan injeksi

intramuskuler 100 mg/kgBB ketamine HCl (50 mg/ml, Ketalar®). Cedera otak

traumatik kemudian diberikan berdasarkan Marmarou’s weight drop model.

Setelah memberikan cedera, kelompok 2 segera diberikan vitamin E dengan

dosis 100 mg/kgBB. Analgesia yang diberikan berupa morfin sulfat (0,05

mg/kgBB) yang diberikan secara intramuskuler.

38

Setelah prosedur tersebut, semua kelompok dimasukkan ke dalam

kandang masing-masing. Tikus dipantau dengan diobservasi pernapasan,

perdarahan hidung, gerakan respiratorik, dan ritme jantungnya.

Sampel darah tikus untuk pemeriksaan radikal superoksida (O2•−)

diambil 24 jam setelah cedera otak traumatik. Midsternotomi dilakukan pada

tikus masing-masing kelompok. Sampel darah diambil dari aorta descendens

dengan spuit sebanyak 6 ml, kemudian darah didiamkan selama setengah jam.

Darah dipindahkan dalam tabung sentrifus dan disentrifus dengan kecepatan

3000 rpm selama 10 menit. Serum darah diambil kemudian dimasukkan dalam

vial dan disimpan dingin sebelum dilakukan percobaan selanjutnya yaitu

pemeriksaan radikal superoksida (O2•−).

Pemeriksaan radikal superoksida (O2•−)

Menyiapkan mikroplat U dan tempat sampel yang akan dimasukkan ditandai.

Pengenceran sebanyak 2 mg.ml p-Nitro Blue Tetrazolium Chlorida (NBT)

dalam Hank’s Balanced Salts Solution (HBSS) bebas fenol red 0,9%.

Pengenceran Superoxide Dismutase (SOD) sebanyak 200 μg/ml ke dalam

larutan HBSS bebas fenol red 0,9%. Sampel 100 μl dimasukkan ke dalam

sumur mikroplat kemudian 100 μl Simoxan 150 μg/ml juga dimasukkan pada

tiap sumuran yang terisi sampel dan diinkubasikan selama 10 menit. Terakhir

100 μl NBT dimasukkan pada setiap sumuran yang sudah terisi sampel.

Mikroplat ditutup dengan aluminium foil dan diinkubasi selama 30 menit pada

suhu kamar. Langkah terakhir dilakukan pembacaan hasil menggunakan

Adaptasi 7 hari

Simple Random Sampling

Kelompok Perlakuan dengan vitamin E

100mg/kgBB ( 20 ekor )

Kelompok kontrol (20 ekor )

Perlakuan model cedera otak traumatik

Kriteria Inklusi Kriteria Eksklusi

39

ELISA reader dengan panjang gelombang 450 nm dan diperoleh data nilai

Optical Density (OD) dari kadar Superoksida20 .

K. ALUR PENELITIAN

Hasil dianalisis dengan uji statistik

24 jam post perlakuantikus di lakukan

pemeriksaan radikal superoksida (O2•−)

24 jam post perlakuantikus di lakukan

pemeriksaan radikal superoksida (O2•−)

Data Data

Tikus albino galur wistar, Jantan, Umur 2-3 bulan

Berat Badan ± 170 – 200 g

40

.

L. Teknik Analisis data

Data yang diperoleh disajikan sebagai rerata ± standar deviasi. Data yang

diperoleh dianalisis secara statistik dengan menggunakan independent t-test untuk

membandingkan mean 2 kelompok yang diteliti dengan bantuan SPSS ver. 15.0.

Independent t-test digunakan untuk menguji apakah terdapat perbedaan signifikan

rerata pada dua kelompok.

41

DAFTAR PUSTAKA

Ainsword, CR. 2015. Head Trauma. Diakses pada 22 Juni 2015. Dari http://emedicine.medscape.com/article/433855-overview#a5

American College of Surgeons, 1997, Advance Trauma Life Suport. United States of America: Firs Impression

Bernath David, 2009, Head Injury, www.e-medicine.comClayton TJ, Nelson RJ, Manara AR. Reduction in mortality from severe head injury

following introduction of a protocol for intensive care management. British Journal of Anaesthesia; 2004. 93. h. 761–7.

Dikmen Sureyya S., PhD; John D. Corrigan, PhD, ABPP; Harvey S. Levin, PhD; Joan Machamer, MA; William Stiers, PhD, ABPP; Marc G. Weisskopf, PhD, ScD. 2009. Cognitive Outcome Following Traumatic Brain Injury. J Head Trauma Rehabil. Vol. 24, No. 6, pp. 430–438

Ghazali Malueka, 2007, Radiologi Diagnostik, Yogyakarta: Pustaka Cendekia.Iskandar, Japardi, 2004, Penatalaksanaan Cedera Kepala secara Operatif. Sumatra

Utara: USU Press. Diakses pada 20 Juni 2015. Dari: http://library.usu.ac.id/download/fk/bedahiskandar%20japardi61.pdf

Kluwer wolters, 2009, Trauma and acute care surgery, Philadelphia: Lippicott Williams and Wilkins

Prakash, A, et al. Antioxidant Activity. Diunduh dari:http://www.medlabs.com/downloads/antiox_acti_.pdf

Razmkon, et al. 2011. Administration of Vitamin C and Vitamin E in Severe HeadIndrasmoro, A.B. 2015. Perbandingan Efek Antioksidan Vitamin C dengan

Metilprednisolon dalam Kontusio Pulmoner. Yogyakarta: FK UGMInjury: A Randomized Double-blind Controlled Trial. Clinical Neurosurgery, Vol. 58,

2011.Salmond C.H, D.A.Chatfield, D.K.Menon, J.D.Pickard, B.J.Sahakian. 2005.

Cognitive sequelae of head injury: involvement of basal forebrain and associated structures. Brain Vol. 128 No.1 : 189–200

SHERKI, Y.G, ZIV ROSENBAUM, ELDAD MELAMED, AND DANIEL. 2002. Antioxidant Therapy in Acute Central Nervous System Injury: Current. Diakses pada 21 Juni2015, dari: http://pharmrev.aspetjournals.org/content/54/2/271k.full.pdf+html

Wu, Angio, Zhe Ying, BS, Fernando Gomez-Poinilla, PhD. 2013. Vitamin E Protects Against Oxidative Damage and Learning Disability After Mild Traumatic Brain Injury in Rats. Diakses pada 21 Juni 2015. Dari: http://nnr.sagepub.com/content/24/3/290.abstract

42