PERCOBAAN 1A. Deoksihemoglobindanoksihemoglobin

Tujuan :Memperlihatkanbahwa hemoglobin dapatmengikatoksigenmenjadi HbO2 dansenyawainidapatteruraikembalumenjadideoksiHbdan O2 .

Teorisingkat :Dalamkeadaantereduksi, Fe dalam hemoglobin dapatmengikat O2 menjadi HbO2. Hb(Fe2+) + O2 Hb(Fe2+) O2 (deoksihemoglobin = Hb) (oksihemoglobin ==HbO2)

HbO2 akanmelepas O2 padapenambahanpereaksi stokes

Bahan : 1. Suspensidarah2. Pereaksi Stoke3. Larutan ammonium hidroksidaCara kerjaa. OksihemoglobinBAHANTabung

Tabung A

Suspensidarah1 mL

Akuades5 mL

Hasil : warna yang terbentukMerah kecoklatan

b. DeoksihemoglobinBAHANTABUNG

Tabung ATabung B

HasilPercobaan3 mL3 mL

Stokes (2 mL pereaksi Stokes + 2 tetes NH4OH)-Beberapatetes

Hasil : Warna yang terbentukMerahlebih terangMerahlebih gelap

Kocok KUAT-KUAT

Hasil : Warna yang terbentukMerahkecoklatanMerahkehitaman

PEMBAHASAN : Padapercobaanpertama, mula-mula suspense darahakandiambilsebanyak 1 mL kemudianditambahdenganaquades 5 mL.AquadesmerupakanAqua Purificata (air murni) H2O. Air murniadalah air yang dimurnikandengan proses destilasi. Karenasifatnya yang tidakberwarna, tidakberbau, tidakadarasa,pH 5-7 dapatmembantuuntukmemperjelashasilreaksidaripercobaan. Seperti yang kitatahubahwaviskositasdarahlebihbesardari air sebesar BJ : 1,041 1,065 sehinggalebihkentaldaripada air yang memilikiviskositas 1 (satu) . Jikadarahtidakdiencerkandenganaquades, makaakanmenyulitkanpengamatanperubahanwarnapadadarahsehinggadapatmenimbulkanmisinterpretation padapercobaan. Pemberianaquades 5 mL sebandingdenganpengenceranuntukdarahsebesar 1 mL.Dari hasilpenambahanaquadeskedalam suspense darah yang sudahdiambil, memperlihatkanwarnadarah yang mulanyapekatmenjadiberwarnamerahkecoklatan. Hemoglobin yang berikatandenganoksigen (oksihemoglobin)akanmembentukwarnamerahkecoklatan. Lain haljikaoksigenakandireduksidenganpereaksi stokes, padapercobaanakanterlihatmerahgelapkarenadidalamnyaterdapat unsure protein heme, porfirin, danjuga Fe. Warnamerah kecoklatanmenjadi parameter perubahandarireaksi yang akankitalakukanselanjutnya. Denganadanya parameter ini, dapatkitaketahuiapakahpada proses percobaanselanjutnya, warnadarahmenjadilebihpekatataulebihmuda.

TabungA :warnaMerahkecoklatan , darah 1 mL yang sudahdicampurdenganaquades 5 mL

Selanjutnyadarahakandibagidalam 2 tabung, tabungke 2 (diberi label B). Pereaksi Stokes harusdicampurkandengan NH4OH secukupnya. Campurankeduanyamenjadipereduksikuat. Kemudianberikanbeberapateteskedalamtabung B, kocokkuat-kuat agar homogeny.Denganmereduksi HbO2makadapatkitalihatperubahanwarnamenjadilebihpekat. Hal inidisebabkanoleh HbO2 tereduksisecarasempurnasehingga HbO2 akanmelepas O2. Hal inimembuktikanbahwaHb di sirkulasitubuhmampumelepaskanoksigensehinggajaringandapatmenggunakanoksigenuntukmetabolismedidalamjaringan.

PerbandinganTabung A danTabung B.TabungB :hasildaripenambahanpereaksi Stokes. WarnaMerahgelap

PERCOBAAN 2:

B. Karbonmonooksida hemoglobin (HbCO2)

Tujuan :

Memperlihatkanbahwa CO dapatmengikat hemoglobin menjadiHbCO

Teorisingkat :Bila HbO2 direaksikandengan CO, akanmenghasilkanHbCO yang berwarnamerahterangdantidakdapatdilepaskandenganpereaksi stokes karenakekuatanikatanHbCO 200x dari HbO2 sehinggasulitdilepaskan.

Bahan :1. Suspensidarah2. Sumber gas CO3. Pereaksi stokes 4. NH4OH Cara kerja : BAHANTABUNG

Tabung CTabung D

Suspensidarah (0,5 mL darah + 5,5 mL akuades) 3 mL3 mL

Alirkan gas CO (denganhati-hati)2 menit

Hasil : Warna yang terbentukMerah lebih terangMerahlebih terang

Stokes (2 mL pereaksi Stokes + 2 tetes NH4OH) BeberapatetesBeberapatetes

Hasil : warna yang terbentukMerahlebih terangMerahlebih gelap

Pembahasan : Padapercobaanini, dilakukanpemberiankarbonmonoksida (CO) kedalam suspense darah. Karbonmonoksidamerupakanhasildaripembakarantidaksempurnadarisenyawakarbonmemilikisifattidakberwarna, tidakberbaudantidakberasasehinggakeberadaansulituntukdideteksi. Pemberian CO padatabung C memberikanhasilwarnamerahlebih terang karenagugus O2 digantikanoleh CO padamasing-masinggugus hemoglobin. CO akanmembentukCarboxy Hemoglobin denganreaksisebagaiberikut : HbO2 + CO COHb + O2CO akanterikatsecara reversible dengan hemoglobin denganafinitas CO 250 kali lebihbesarterhadap hemoglobin dibandingdenganoksigen. Hal inimenyebabkanCarboxy hemoglobin lebihsulitteruraidibandingoksihemoglobin. Sifatinilah yang akankitabuktikan. Denganpenambahan CO kedalamtabung C akankitalihat, apakah CO akandapattereduksidenganpereaksi Stokes atautidak? Hasilnyadidapatkan, warnadarahmasihtetapsama. Dibandingkandengantabung D denganperlakuanberbeda yang tidakdiberi CO, menunjukanwarnamerahgelap, tabung C tetapberwarnamerahkecoklatan.Dari hasilpengamatandiatas, dapatdibuktikanbahwacarboxy hemoglobin merupakanikatankuatkarenaafinitas CO terhadap hemoglobin 250 x daripadaoksihemoglobinmeskipundiberikanpereduksikuat yang berasaldaricampuranpereaksi stokes dan NH4OH.

TABUNG C, yang diberi carbon monooksidaTabung A

Tabung D Tabung B