TP Perhitungan Mikroorganisme1. tuliskan kekurangan dan kelebihan metode hitung cawan !

jawaban : Perhitungan pada cawan petri (Total plate count / TPC)Kelebihan : - Hanya sel yang hidup yang dapat dihitung. Dapat menghitung beberapa jenis renik sekaligus. lebih mudah dan praktis.

Kekurangan : - Hasil perhitungannya tidak menunjukkan jumlah sel yang sebenarnya, karena beberapa sel yang berdekatan mungkin membentuk satu koloni. Membutuhkan banyak Bahan. Medium dan kondisi inkubasi yang berbeda mungkin menghasilkan nilai yang berbeda.

Mikroba yang ditumbuhkan harus dapat tumbuh pada medium padat dan membentuk koloni yang kompak dan jelas.

2. Jelaskan pelaporan hasil dan perhitungan koloni di metode hitung cawan !Jawaban : Dalam percobaan tentang perhitungan jumlah mikroba digunakan metode total plate count (TPC).metode ini merupakan analisis untuk menguji cemaran mikroba dengan menggunakan metode pengenceran dan metode cawan tuang. Metode cawan tuang adalah metode per plate. Metode ini dilakukan dengan mengencerkan sumber isolate yang telah diketahui beratnya ke dalam 9 ml larutan garam fisiologis, larutan yang digunakan sekitar 1 ml suspense ke dalam cawan petri steril, dilanjutkan dengan menuangkan media penyubur (nutrient agar), NA / media penyubur merupakan nutrisi untuk makanan mikroba.

Prinsip metode cawanhitung(Plate Count) adalahjikasel mikroba yangmasihhidup ditumbuhkan pada medium agar, maka sel mikroba tersebut akan berkembang biakdan membentuk koloni yang dapat dilihat langsung dengan mata tanpa menggunakan mikroskop.

Jumlah koloni yang ada dalam contoh bahan makanan tersebut dapat dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut.Koloni per ml = jumlah koloni per cawan x 1/faktor pengenceran

Cara perhitungan koloni pada metode cawan ini adalah dengan menggunakanStandart Plate Count (SPC), caranya adalah sebagai berikut.1. Hasil yang dilaporkan hanya terdiri dari dua angka yaitu angka pertama (satuan) dan angka kedua (desimal). Jika angka yang ketiga sama dengan atau lebih besar dari lima, harus dibulatkan satu angka lebih tiinggi pada angka kedua.2. Jika pada semua pengenceran dihasilkan kurang dari 30 koloni mikroba pada cawan petri, berarti pengenceran yang dilakukan terlalu tinggi. Oleh karena itu jumlah koloni pada pengenceran yang terendah yang diukur/dihitung. Selanjutnya hasil yang kurang dari 30 dikalikan dengan besarnya pengenceran, tetapi jumlah yang sebenarnya harus dicantumkan di dalam tanda kurung.3. Jika pada semua pengenceran dihasilkan lebih dari 300 koloni pada medium, berarti pengeceran yang dilakukan terlalu rendah. Oleh karena itu jumlah koloni pada pengenceran yang tertinggi yang dihitung. Hasilnya dilaporkan kemudian dikalikan dengan faktor pengencernya, tetapi jumlah yang sebenarnya harus dicantumkan di dalam tanda kurung.4. Jika digunakan dua cawan petri per pengenceran, data yang diambil harus dari kedua cawan tersebut, tidak boleh diambil salah satu. Oleh karena itu harus dipilih tingkat pengenceran yang menghasilkan koloni diantara 30-300.

3. Jelaskan mengenai prinsip metode MPN dan interpresentasi hasilnya !Jawaban : Most Probable Number (MPN)

MPN adalah suatu metode enumerasi mikroorganisme yang menggunakan data dari hasil pertumbuhan mikroorganisme pada medium cair spesifik dalam seri tabung yang ditanam dari sampel padat atau cair yang ditanam berdasarkan jumlah sampel atau diencerkan menurut tingkat seri tabungnya sehingga dihasilkan kisaran jumlah mikroorganisme yang diuji dalam nilai MPN/satuan volume atau massa sampel.

Prinsip utama metode ini adalah mengencerkan sampel sampai tingkat tertentu sehingga didapatkan konsentrasi mikroorganisme yang pas/sesuai dan jika ditanam dalam tabung menghasilkaan frekensi pertumbuhan tabung positif.

Semakin besar jumlah sampel yang dimasukkan (semakin rendah pengenceran yang dilakukan) maka semakin sering tabung positif yang muncul. Semakin kecil jumlah sampel yang dimasukkan (semakin tinggi pengenceran yang dilakukan) maka semakin jarang tabung positif yang muncul. Jumlah sampel/pengenceran yang baik adalah yang menghasilkan dominan tabung positif .

Nilai MPN ternyata dapat dicari dengan rumus berikut (Thomas formula) :

Daftar Pustaka

Hans, G.S dan Karin, S. 1984, Mikrobiologi Umum, (terjemahan)Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.

Fardiaz S. 1992.Mikrobiologi Pangan1. Jakarta: Gramedia Pusaka Utama.

Dwidjoseputro. D.2005.Dasar-dasar Mikrobiologi.Jakarta : Djambatan.

Waluyo, lud.2004.Mikrobiologi Umum.Bandung : Universitas Muhammadiyah.

Irianto, koes.2006.Mikrobiologi menguak Dunia Mikroorganisme.Bandung : Yrama Widya.