3/17/2011

1

PERTEMUAN 2

Kromatografi ? Manfaat teknik kromatografi? Parameter dalam kromatografi ? Elusi, eluat, eluen?

3/17/2011

2

Pemisahan campuran IdentifikasiAnalisis kuantitatifAnalisis preparatif

4

Waktu retensi (tr), menit

inte

nsit

as

A B

Parameter yang digunakan:

• waktu retensi (tr)

• volume retensi (Vr)

3/17/2011

3

Waktu retensi (tr) Volume retensi (Vr) Faktor kapasitas (k’) Efisiensi kolom (N, H) Faktor pemisahan/

selektivitas (α) Resolusi (R)

Waktu retensi (tr), menit

I/

A

A B

Soal :

tr (1) = 2,3 menitTr (2) = 5,3 menitTr (3) = 10,7 menitTr(0) = 0,97 menit

Hitung faktorkapasitas masing-masing.

Apa artinya?

Faktor kapasitas, k`

)0(

)0(`

rt

rt

rt

k

tr(o)= waktu retensi senyawa yang tidak

tertahan dalam kolom

= waktu retensi fasa gerak

3/17/2011

4

Soal :

Ukuran efisiensi:

Jumlah pelat (N) atauH (HETP)

Puncak (1) :Tr (1) = 2,5 menitW (1) = 5 menit

Tr (2) = 2,5 menitW (2) = 0,2 menit

L = 12,5 cm

Puncak mana yg menghasilkanefisien kolom yang lebih baik?

Efisiensi kolom

Tr = 2,5 menit Tr = 2,5 menit

2

2/1

2 )(54,5)(16w

t

W

tN rr

HETP = L/N

High Equivalent to Teoritical Plate

= tinggi pelat teori

Kolom efisien: N besar, HETP kecil

3/17/2011

5

Perbedaan distribusi komponendiantara fasa gerak dan fasa diamyang menyebabkan migrasi diferensialkomponen-komponen analit dalam kolomkromatografi

Kemampuan kolom untuk

membedakan suatu komponen dari

komponen lain

Dasar : perbedaan harga faktor

kapasitas

3/17/2011

6

11

1. Faktor Selektivitas ( )

1

2

K

K

K adalah Koef partisi komponen1 dan 2

)0()1(

)0()2(

'1

'

2

rt

rt

rt

rt

rt

rt

Untuk Pemisahan:

>>1

12

Tr, menit

I 3,2 4,5T0= 0,99

:………………………………

menjamin pemisahan bagian atas (puncak)

kromatogram

Tidak memperhitungkan overlap puncak-

puncak

Parameter lain : R (resolusi)

3/17/2011

7

Soal

Bagaimana kalaupuncaknya seperti ini?

1 2

w

RESOLUSI

)(2

121

)1()2(

ww

ttRs

rr

14

w

W1/2

)(699,1

)(2

)2(2/1)1(2/1

)1()2(

ww

ttRs

rr

Rs ideal = 1,25

(97,5% terpisah)

3/17/2011

8

15

Cara lain menghitung Rs :

memperhitungkan

selektivitas

efisiensi

faktor kapasitas

Nk

kR )

1)(

`1

`(

4

1

Faktor

kapasitas

Faktor

selektivitas

Faktor

efisiensi

Data retensi campuran 3 senyawa adalah sebagaiberikut:

(1) (2) (3) (0)

Tr 3,50 4,9 6,8 0,23

W1/2 0,04 0,5 0,8

N

α

k’

R