teknik pembuatan media kultur jaringan

7/25/2019 Teknik Pembuatan Media Kultur Jaringan

1/6

Teknik Pembuatan Media Kultur Jaringan

Published :22.07Author : ragil cahyo

Media Kultur Jaringan

Salah satu kesulitan dalam kultur jaringan tanaman adalah kebutuhan nutrisi untuk pertumbuhan optimum sangat berbeda pada tiap spesies, sehinggatidak ada media yang dapat direkomendasikan untuk semua tanaman. Penelitian penelitian yang intensif pada kultur jaringan selama 50 tahun terakhir

telah banyak mengembangkan media, beberapa diantaranya telah digunakan secara luas dalam kultur jaringan saat ini. Media ini diberikan pada Tabel

!.. "ahan kimia dalam media biasanya ditentukan, artinya hanya hara tertentu yang dimasukkan ke dalam media, atau media dapat juga mengandung

bahan tambahan kompleks seperti air kelapa atau jus jeruk yang mengandung #at pengatur tumbuh.

Komposisi Media Kultur Jaringan

Hara anorganik

$da ! hara mineral yang penting untuk pertumbuhan tanaman dan beberapa hara yang dilaporkan mempengaruhi pertumbuhan in %itro. &ntuk
http://ragil-cahyo.blogspot.com/2013/04/teknik-pembuatan-media-kultur-jaringan.htmlhttp://ragil-cahyo.blogspot.com/2013/04/teknik-pembuatan-media-kultur-jaringan.htmlhttp://www.blogger.com/profile/04931691569813583881http://www.blogger.com/profile/04931691569813583881http://ragil-cahyo.blogspot.com/2013/04/teknik-pembuatan-media-kultur-jaringan.html


2/6

pertumbuhan normal dalam kultur jaringan, unsur unsur penting ini harus dimasukkan dalam media kultur. Perbandingan 5 media pada Tabel !.

memperlihatkan bah'a unsur esensial ini dimasukkan pada masing masing media tapi konsentrasinya berbeda karena diberikan dalam bentuk yang

berbeda.

Hara organik

Tanaman yang tumbuh dalam kondisi normal bersifat autotrof dan dapat mensintesa semua kebutuhan bahan organiknya. Meskipun tanaman in %itro

dapat mensintesa senya'a ini, diperkirakan mereka tidak menghasilkan %itamin dalam jumlah yang cukup untuk pertumbuhan yang sehat dan satu atau

lebih %itamin mesti ditambahkan ke media. Thiamin merupakan %itamin yang penting, selain itu asam nikotin, piridoksin dan inositol biasanya

ditambahkan.Selain bahan organik tersebut, bahan kompleks seringkali ditambahkan, termasuk ekstrak ragi, casein hydrolysate, air kelapa, jus jeruk, jaringan pisang,

dan lain lain. Penambahan bahan kompleks ini menghasilkan media yang tak terdefinisi. (engan penelitian yang cukup, semestinya bahan kompleks

ini dapat diganti dengan #at tertentu, mungkin tambahan suatu %itamin atau asam amino.

Sumber karbon

Tanaman dalam kultur jaringan tumbuh secara heterotrof dan karena mereka tidak cukup mensintesa kebutuhan karbonnya, maka sukrosa harus

ditambahkan ke dalam media. Sumber karbon ini menyediakan energy bagi pertumbuhan tanaman dan juga sebagai bahan pembangun untuk

memproduksi molekul yang lebih besar yang diperlukan untuk tumbuh.

"iasanya sukrosa pada konsentrasi 5) digunakan sebagai sumber karbon tapi sumber karbon lain seperti glukosa, maltosa, galaktosa dan laktosa

juga digunakan. *etika sukrosa diautoklaf, terjadi hidrolisis untuk menghasilkan glukosa dan fruktosa yang dapat digunakan lebih efisien oleh tanamandalam kultur.

Agar

&mumnya jaringan dikulturkan pada media padat yang dibuat seperti gel dengan menggunakan agar atau pengganti agar sperti +elrite atau Phytagel.

*onsentrasi agar yang digunakan berkisar antara 0. .0). Pada konsentrasi tinggi agar menjadi sangat keras, sedikit sekali air yang tersedia,

sehingga difusi hara ke tanaman sangat buruk. $gar dengan kualitas tinggi seperti (ifco "iTek mahal harganya tapi lebih murni, tidak mengandung

bahan lain yang mungkin mengganggu pertumbuhan. Pengganti lain seperti gelatin kadang kadang digunakan pada lab komersial.

+el sintetis diketahui dapat menyebabkan hyperhidration -%itrifikasi yang merupakan problem fisiologis yang terjadi pada kultur. &ntuk mengatasi

masalah ini, produk baru bernaman $gargel telah diproduksi ole Sigma. Produk ini merupakan campuran agar dan gel sintetis dan mena'arkan

kelebihan kedua produk sekaligus mengurangi problem %itrifikasi. Produk ini dapat dibuat di lab dengan mencampurkan g +elrite -Phytagel dengan /

g agar sebagai agen pengental untuk media.

pH

p1 media biasanya diatur pada kisaran 5.2 5.3 tapi tanaman yang berbeda mungkin memerlukan p1 yang berbeda untuk pertumbuhan optimum. 4ika

p1 lebih tinggi dari 2.0, media mungkin menjadi terlalu keras dan jika p1 kurang dari 5.!, agar tidak dapat memadat.

Zat Pengatur Tumbuh

Pada media umumnya ditambahkan #at pengatur tumbuh. at pengatur tumbuh akan dibahas tersendiri pada minggu 6.


3/6

Air

$ir distilata biasanya digunakan dalam kultur jaringan, dan banyak lab menggunakan a7uabides -air destilata ganda. "eberapa lab, dengan alasan

ekonomi, menggunakan air hujan, tapi ini menyebabkan sulit mengontrol kandungan bahan organik dan non8organik pada media.

Pemilihan Media

4ika tidak ada informasi a'al, biasanya mulai dengan media MS -Murashige dan Skoog 92!. Media ini mengandung konsentrasi garam dan nitrat

yang lebih tinggi dibandingkan media lain, dan telah sukses digunakan pada berbagai tanaman dikotil. &ntuk inisiasi kalus, !./8( ditambahkan ke

media dengan konsentrasi 5 mg8. &ntuk multiplikasi tunas, sitokinin seperti "$P ditambahkan dan juga diberi auksin, seperti :$$ pada

konsentrasi yang rendah. &ntuk inisiasi akar, ;"$ pada konsentrasi ! mg8 ditambahkan.


4/6

Masukan media -MS, gula pasir, agar ke dalam gelas piala berisi air 500 ml satu persatu diaduk hingga rata. Tambahkan air hingga

mencapai liter.

Masak media hingga mendidih

Tuangkan media secara merata ke dalam botol8botol kultur jaringan

&ntuk botol kecil sebanyak 0 ml

&ntuk botol selai sebanyak !0 ml

&ntuk botol saus sebanyak 65 ml

"otol8botol yang sudah terisi media ditutup dengan menggunakan plastik dan karet

Media siap disterilisasi di dalam autoklaf

Media Alternati!" H#pone$%andasil ' atau itabloom '

Siapkan air dalam gelas piala sebanyak 500 ml

Timbang hipone@ ! gram?liter

Timbang gula pasir !0 gram?liter

Timbang agar 83 gram?liter

Masukkan hipone@, gula, agar ke dalam gelas piala berisi air 500 ml satu persatu diaduk hingga rata. Tambahkan air hingga mencapai liter.








Selain itu kita dapat membuat sendiri media tanam untuk kultur

Menggunakan media organik " kentang atau ubi untuk kultur jaringan anggrek


Siapkan air kelapa muda sebanyak 50 ml?liter


5/6

Timbang 500 gram kentang, kupas, cuci, potong

>ebus kentang ke dalam ,5 liter air hingga menyusut 600 ml

Saring air rebusan kentang



Timbang arang aktif 0,5 gram?liter

Masukkan air rebusan kentang, gula, agar, arang aktif, air kelapa ke dalam gelas piala berisi air 500 ml satu persatu diaduk hingga rata.

Tambahkan air hingga mencapai liter.

Masak media hingga mendidih Tuangkan media secara merata ke dalam botol8botol kultur jaringan






Menggunakan media organik" Tomat%Pisang raja%Pisang ambon


Siapkan air kelapa muda sebanyak 50 ml?liter

Timbang 600 gram tomat, potong, buang isinya, ambil daging buahnya d. "lender daging tomat, saring, ambil airnya.



Timbang arang aktif 0,5 gram?liter Masukkan air rebusan kentang, gula, agar, arang aktif, air kelapa ke dalam gelas piala berisi air 500 ml satu persatu diaduk hingga rata.

Tambahkan air hingga mencapai liter.








6/6


Kirimkan Ini lewat EmailBloghis!Berbagi ke witterBerbagi ke "acebookBagikan ke Pinterest#
http://www.blogger.com/email-post.g?blogID=6999524333722579091&postID=4804771004726823418http://www.blogger.com/share-post.g?blogID=6999524333722579091&postID=4804771004726823418&target=emailhttp://www.blogger.com/share-post.g?blogID=6999524333722579091&postID=4804771004726823418&target=emailhttp://www.blogger.com/share-post.g?blogID=6999524333722579091&postID=4804771004726823418&target=bloghttp://www.blogger.com/share-post.g?blogID=6999524333722579091&postID=4804771004726823418&target=bloghttp://www.blogger.com/share-post.g?blogID=6999524333722579091&postID=4804771004726823418&target=twitterhttp://www.blogger.com/share-post.g?blogID=6999524333722579091&postID=4804771004726823418&target=facebookhttp://www.blogger.com/share-post.g?blogID=6999524333722579091&postID=4804771004726823418&target=pinteresthttp://www.blogger.com/email-post.g?blogID=6999524333722579091&postID=4804771004726823418http://www.blogger.com/share-post.g?blogID=6999524333722579091&postID=4804771004726823418&target=emailhttp://www.blogger.com/share-post.g?blogID=6999524333722579091&postID=4804771004726823418&target=bloghttp://www.blogger.com/share-post.g?blogID=6999524333722579091&postID=4804771004726823418&target=twitterhttp://www.blogger.com/share-post.g?blogID=6999524333722579091&postID=4804771004726823418&target=facebookhttp://www.blogger.com/share-post.g?blogID=6999524333722579091&postID=4804771004726823418&target=pinterest

teknik pembuatan media kultur jaringan

Documents