skripsi -...

OPTIMASI KONSENTRASI DNA PLASMID pCAMBIA 1301 PADA TRANSFORMASI LANGSUNG

TIGA GENOTIPE JARAK PAGAR (Jatropha curcas L.)

SKRIPSI

Diajukan Untuk Memenuhi Sebagian Persyaratan

Mencapai Derajat Sarjana Strata Satu (S-1) Program Studi Agroteknologi

Diajukan Oleh:

NURNANINGSIH (201110200311055)

PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI

FAKULTAS PERTANIAN PETERNAKAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

MALANG

2015

SKRIPSI

OPTIMASI KONSENTRASI DNA PLASMID pCAMBIA 1301 PADA TRANSFORMASI LANGSUNG


Dipersiapkan dan disusun oleh:

NURNANINGSIH (Nim. 201110200311055)

Telah dipertahankan di depan Dewan Penguji

Pada tanggal 18 Agustus 2015

Susunan Dewan Penguji

Ketua Dewan Penguji/ Pembimbing Utama, Dr. Ir. Fatimah Nursandi, M.Si. NIP.19660129 199103 2 004

Anggota Dewan Penguji II, Dr. Ir. Maftuchah, MP. NIP.196803121 99212 1 002

Anggota Dewan Penguji I/ Pembimbing Pendamping, Ir. Agus Zainudin, MP. NIP.105.9109.0238

Anggota Dewan Penguji III,

Dr. Ir. Erny Ishartati, MP. NIP.105.8809.0080

Skripsi ini telah diterima sebagai salah satu persyaratan

Untuk memperoleh gelar Sarjana Pertanian Jurusan Agronomi Fakultas Pertanian Peternakan

Universitas Muhammadiyah Malang

Malang, .....................

Dekan,

Dr. Ir. Damat, MP. NIP.19640228 199003 1 003

Ketua Jurusan,

Dr. Ir. Ali Ikhwan, MP. NIP. 19641020 199101 1 001

HALAMAN PENGESAHAN

NAMA : NURNANINGSIH

NIM : 201110200311055

PROGRAM STUDI : AGROTEKNOLOGI

JURUSAN : AGRONOMI

FAKULTAS : PERTANIAN-PETERNAKAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

JUDUL :OPTIMASI KONSENTRASI DNA PLASMID pCAMBIA

1301 PADA TRANSFORMASI LANGSUNG


Skripsi ini telah diterima sebagai persyaratan untuk memperoleh gelar Sarjana Pertanian

pada Program Studi Agroteknologi Jurusan Agronomi Fakultas Pertanian Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang

Mengesahkan, Dekan,

Dr. Ir. Damat, MP. NIP.19640228 199003 1 003

Ketua Jurusan,

Dr. Ir. Ali Ikhwan, MP. NIP. 19641020 199101 1 001

SURAT PERNYATAAN

Saya yang bertanda tangan dibawah ini :

Nama : Nurnaningsih

NIM : 201110200311055

Jurusan/ Prodi : Agronomi/Agroteknologi

Fakultas : Pertanian Peternakan

Menyatakan bahwa Karya Ilmiah yang berjudul : “Optimasi Konsentrasi DNA Plasmid

pCambia 1301 Pada Transformasi Langsung Tiga Genotipe Jarak Pagar (Jatropha

curcas L.)” adalah bukan karya orang lain, baik sebagian maupun keseluruhan kecuali

dalam bentuk kutipan yang diacu dalam naskah ini dan telah disebut sumbernya. Namun

karena ide dan biaya dari program penelitian yang diketuai oleh Ir. Agus Zainudin, MP.

maka saya tidak berhak untuk mempublikasikan sebagai penulis pertama.

Demikian pernyataan ini saya buat dengan sebenar-benarnya dan apabila pernyataan ini

tidak benar maka saya berhak mendapatkan sanksi akademik.

Malang, 18 Agustus 2015

Mengetahui,

Pembimbing pendamping,

Ir. Agus Zainudin, MP.

Yang Menyatakan,

Nurnaningsih

SURAT PERNYATAAN HAK KEKAYAAN INTELEKTUAL

DAN HAK PUBLIKASI Yang bertanda tangan di bawah ini: Nama : Nurnaningsih NIM : 201110200311055 Jurusan/Prodi : Agronomi/Agroteknologi Fakultas : Fakultas Pertanian dan Peternakan Perguruan Tinggi : Universitas Muhammadiyah Malang Dengan ini menyatakan bahwa penelitian untuk skripsi berjudul ”Optimasi Konsentrasi DNA Plasmid pCambia 1301 Pada Transformasi Langsung Tiga Genotipe Jarak Pagar (Jathropa curcas L.)” ini merupakan bagian dari program Penelitian Hibah Bersaing (PHB) berjudul “Pengembangan Metode Transformasi Langsung pada Tanaman Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) Menggunakan Gen OsDREB1A Melalui Jalur Tabung Polen (Pollen Tube Pathway)” tahun 2014 di bawah tanggung jawab Bapak Ir. Agus Zainudin, MP. (Ketua Peneliti) dan Ibu Dr. Ir. Maftuchah, MP. (Anggota Peneliti). Karena itu, semua bentuk perlindungan kekayaan intelektual dan publikasi ilmiah baik seluruh dan/atau sebagian dari hasil penelitian tersebut menjadi hak dan harus sepengetahuan, persetujuan serta keterlibatan Bapak Ir. Agus Zainudin, MP. dan Ibu Dr. Ir. Maftuchah, MP. Demikian pernyataan ini dibuat dengan sebenar-benarnya dan tanpa ada pemaksaan dari pihak manapun.


Yang menyatakan,

Nurnaningsih NIM. 201110200311055

Mengetahui:

Ketua Peneliti PHB/ Anggota Peneliti PHB, Pembimbing I Skripsi, Pembimbing II Skripsi, Ir. Agus Zainudin, MP. Dr. Ir. Maftuchah, MP. Dr. Ir. Fatimah Nursandi,M.Si.

Mengetahui:

Ketua Jurusan/Prodi Agroteknologi FPP UMM,

Dr. Ir. Ali Ikhwan, MP.

RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan pada tanggal 07 Desember 1993 di Blitar

Jawa Timur, sebagai putri kedua dari dua bersaudara. Ayahanda

bernama Gimun Hadiyanto, Ibunda Tumini dan Ayunda Indah

Fitriana. Penulis menyelesaikan pendidikan Taman Kanak-Kanak

Raudhatul Adfal (RA) Perwanida Tegalasri lulus tahun 1999,

Sekolah Dasar di Madrasah Ibtidaiyah Negeri (MIN) Tegalasri Wlingi Kabupaten Blitar

Pada Tahun 2005, kemudian melanjutkan ke jenjang Sekolah Menengah Pertama di

Madrasah Tsanawiyah (MTs) Darul Huda Wlingi Kabupaten Blitar lulus tahun 2008, dan

masuk Sekolah Menengah Atas di Madrasah Aliyah Negeri (MAN) Wlingi Kabupaten

Blitar lulus tahun 2011.

Penulis melanjutkan pendidikan di Program Studi Agroteknologi, Jurusan

Agronomi Fakultas Pertanian Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang pada tahun

2011. Semasa perkuliahan penulis aktif dalam Himpunan Mahasiswa Jurusan Agronomi

tahun 2012/2013. Selain aktif pada kegiatan organisasi, penulis juga aktif sebagai asisten

praktikum Laboratorium Agronomi semester genap Tahun 2012/2013, asisten praktikum

Laboratorium Agribisnis semester ganjil Tahun 2013/2014. Selain itu penulis juga pernah

mendapat kesempatan lolos Program Karya Tulis Ilmiah (PKM) bidang penelitian tahun

2015 dengan judul “Efektivitas Introduksi Gen OsDREB1A Pada Transformasi Tiga

Genotip Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) Melalui Jalur Tabung Polen”. Penulis juga

menjadi tenaga parttime selama 2 semester pada Tahun 2014/2015.

PERSEMBAHAN

“Sesungguhnya bersama kesukaran itu ada keringanan. Karena itu bila kau sudah selesai (mengerjakan yang lain). Dan berharaplah kepada Tuhanmu (Q.S. Al Insyirah :

6-8)

Jika ingin mencapai tujuan yang sangat besar, maka harus belajar untuk jatuh cinta pada kerja keras. Merry Riana

Karya kecil ini kupersembahkan untuk:

Syukur alhamdulilah kepada Allah SWT, taburan kasih sayangMu telah

memberiku kekuatan akhirnya skripsi ini dapat terselesaikan.

Sebagai tanda bukti, hormat dan rasa terimakasih kepada Ayahanda Gimun

Hadiyanto, Ibunda Tumini yang telah memberikan kasih sayang, do’a, semangat

dan segala dukungan baik moril maupun materil.

Sebagai tanda bakti dan terimakasihku kepada “Ukhty Indah Fitriana” yang setia

memberikan alunan do’a, semangat dan segala dukungan baik moril maupun

materil.

Sahabat-sahabatku Susi Maetasari, Lutfiyah Ariana, Fazat Fairuzia, Vebrina Reza,

Alifya Sita, terimakasih atas bantuannya, do’a, semangat, dan celotehannya.

Sebagai ucapan terimakasih teman-teman Agronomi 2011 telah memberikan

semangat dan motivasi serta kebersamaannya selama ini.

Keluarga Besar Sentra HKI UMM, terimakasih atas bantuan dan dukungannya

KATA PENGANTAR Assalamu’alaikum warahmatullahi wabarakatuh Syukur Alhamdulilah penulis panjatkan kepada Allah SWT yang telah

melimpahkan rahmat, taufik serta hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyeleaikan

laporan penelitian yang berjudul “Optimasi Konsentrasi DNA Plasmid pCambia 1301

Pada Transformasi Langsung Tanaman Jarak Pagar (Jatropha curcas L.)”.

Tersusunnya laporan penelitian ini merupakan salah satu persyaratan untuk

menyelesaikan pendidikan tingkat Sarjana pada Jurusan Agronomi Fakultas Pertanian

Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang. Pada kesempatan kali ini, penulis ingin

mengucapkan terima kasih kepada:

1) Kedua orang tua Ayah Gimun Hadianto dan Ibu Tumini serta kakak Indah Fitiana

2) Ibu Dr. Ir. Fatimah Nursandi, M.Si. selaku Pembimbing Utama yang telah bersedia

mengarahkan dan membimbing dalam penyusunan skripsi ini.

3) Bapak Ir. Agus Zainudin, MP. selaku Pembimbing Pendamping yang telah sabar

membimbing dan mendampingi pada proses penyusunan skripsi ini.

4) Ibu Dr. Ir. Maftuchah, MP. dan Dr. Ir. Erny Ishartati, MP. selaku dosen penguji yang

telah memberikan kritikan dan saran dalam penyusunan skripsi.

5) Serta semua pihak yang telah membantu yang tidak dapat saya sebutkan satu persatu.

Penulis menyadari bahwa penulisan laporan penelitian ini

masih kurang sempurna dan terdapat kekurangan. Oleh karena itu, penulis sangat

mengharapkan adanya masukkan,baik saran maupun kritik yang bersifat membangun dari

semua pihak. Semoga laporan ini bisa bermanfaat, khususnya bagi penulis sendiri,

umumnya bagi pembaca. Sekian terimakasih.

Wassalamu’alaikum warahmatullahi wabarakatuh


Penulis

DAFTAR ISI

Isi Halaman

KATA PENGANTAR.................................................................................. i

DAFTAR ISI................................................................................................ ii

DAFTAR TABEL........................................................................................ iv

DAFTAR GAMBAR.................................................................................... v

DAFTAR LAMPIRAN................................................................................ vi

RINGKASAN............................................................................................... vii

I. PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang ................................................................................ 1

1.2 Rumusan Masalah........................................................................... 3

1.3 Tujuan............................................................................................. 3

1.4 Hipotesa.......................................................................................... 4

II. TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Pengembangan Tanaman Jarak Pagar............................................. 5

2.2 Vektor Pada Transformasi Gen....................................................... 8

2.3 Transformasi pada Tanaman J.curcas............................................. 9

2.4 Transformasi Langsung Melalui Jalur Tabung Serbuk sari............ 12

III. METODE PELAKSANAAN

3.1 Alat dan Bahan................................................................................ 14

3.1.1 Alat............................................................................................. 14

3.1.2 Bahan......................................................................................... 14

3.2 Metode Kerja................................................................................... 14

3.4 Parameter Pengamatan.................................................................... 18

3.5 Denah Penelitian............................................................................. 20

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil................................................................................................. 22

4.1.1 Rerata umur panen, panjang buah, diameter besar buah, dan diameter kecil buah....................................................................

22

4.1.2 Rerata jumlah buah, jumlah biji, dan berat kering biji .............. 23

4.1.3 Rerata saat muncul radikula, daya kecambah benih, dan saat kecambah terangkat...................................................................

24

4.1.4 Rerata saat saat muncul daun, dan jumlah daun ....................... 25 ii

4.1.5 Hasil uji hpt II dan uji gus-A pada daun.................................... 26

4.1.6 Karakter kuantitatif pada tanaman transgenik putative........... 30

4.2 Pembahasan..................................................................................... 36

4.2.1 Pengaruh beberapa konsentrasi plasmid terhadap umur panen, panjang buah, diameter besar buah, diameter kecil buah, jumlah buah, jumlah biji, dan berat kering biji……………..

36

4.2.2 Pengaruh beberapa konsentrasi terhadap saat muncul radikula, daya kecambah, saat kecambah terangkat, saat muncul daun, dan jumlah daun ........................................................................

39

4.2.3 Hasil uji hpt II dan uji gus-A pada daun ................................... 41

4.2.4 Karakter kuantitatif pada tanaman transgenik putative.............. 44

V. KESIMPULAN

5.1 Kesimpulan...................................................................................... 46

5.2 Saran................................................................................................ 47

DAFTAR PUSTAKA................................................................................. 48

LAMPIRAN................................................................................................ 54

DAFTAR TABEL

Nomor Teks Halaman

1. Beberapa konsentrasi plasmid DNA yang berhasil diintroduksi melalui tabung serbuk sari..................................................................

13

2. Rerata umur panen, jumlah buah, diameter besar buah dan diameter kecil buah.............................................................................................

23

3. Rerata panjang buah, jumlah biji, dan berak kering biji ..................... 24

4. Rerata saat muncul radikula, presentase kecambah, saat kecambah terangkat ..............................................................................................

25

5. Rerata Saat Saat Muncul Daun, dan Jumlah daun ............................. 25

6. Hasil Uji hpt II dan Uji gus-A Pada Daun.......... 28

7. Jumlah Sampel Tanaman yang Lolos uji hpt II dan Uji gus-A........... 29

DAFTAR GAMBAR

Nomor Teks Halaman

1 Plasmid DNA pCambia 1301................................................................ 9

2 Denah penelitian di lapang................................................................... 20

3 Denah penelitian di persemaian............................................................ 20

4 Diagram Alur Penelitian....................................................................... 21

5 Kenampakan hasil uji ketahanan higromisin pada daun jarak pagar... 26

6 Kenampakan hasil uji gus-A pada daun jarak pagar............................ 27

7 Hasil Analisis Rerata (Analysis of Mean) Tinggi Tanaman.................. 30

8 Hasil Analisis Rerata (Analysis of Mean) Panjang Daun...................... 31

9 Hasil Analisis Rerata (Analysis of Mean) Jumlah Lekukan Daun........ 32

10 Hasil Analisis Rerata (Analysis of Mean) Lebar Daun......................... 33

11 Hasil Analisis Rerata (Analysis of Mean) Panjang Tangkai................. 34

12 Hasil Analisis Rerata (Analysis of Mean) Diameter Batang................. 35

v

DAFTAR LAMPIRAN

Nomor Teks Halaman

1a. Hasil Analisis Ragam Umur Panen Buah....................................... 54 1b. Hasil Analisis Ragam Jumlah Buah Yang Dipanen....................... 54 1c. Hasil Analisis Ragam Diameter Buah Kecil................................... 54 1d. Hasil Analisis Ragam Diameter Buah Besar.................................. 55 1e. Hasil Analisis Ragam Panjang Buah ............................................. 55 2a. Hasil Analisis Ragam Berat Kering Biji Per Buah......................... 56 2b. Hasil Analisis Ragam Berat Kering Biji Per Buah......................... 56 3a. Hasil Analisis Ragam Saat Muncul Radikula................................. 57 3b. Hasil Analisis Ragam Daya Kecambah.......................................... 57 3c. Hasil Analisis Ragam Saat Kecambah Terangkat.......................... 57 3d. Hasil Analisis Ragam Saat Muncul Daun....................................... 58 3e. Hasil Analisis Ragam Jumlah Daun............................................... 58 4. Proses Penyisipan plasmid Melalui Tabung Serbuk sari................ 59 5a. Kenampakan Buah JCUMM5 yang dipanen.................................. 60 5b. Kenampakan Buah JCUMM6 yang dipanen.................................. 61 5c. Kenampakan Buah JCUMM7 yang dipanen.................................. 62 6. Proses Penetesan pengujian hpt II pada daun tanaman jarak pagar 63 7. Hasil Uji hpt II................................................................................ 64 8. Hasil Uji gus-A............................................................................... 66

DAFTAR PUSTAKA Adikarsih, R., dan J. Hartono. 2007. Pengaruh kemasakan buah terhadap mutu benih

jarak pagar (Jatropha curcas L.). Prosiding Lokakarya II Status Teknologi Tanaman Jarak Pagar Jatropha curcas L., Bogor: Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian, Pusat Penelitian dan Pengembangan Perkebunan. Vol 2: 143-148

Afandi, Rofiq. 2009. Keberhasilan Reproduksi Jarak Pagar: Penyerbukan Alami dan

Buatan. Prodi Pemuliaan dan Teknologi Benih. Fakultas Pertanian. Institut Pertanian Bogor. Bogor

Anggriawan, Arik. 2012. Analisis Tanaman Jarak Pagar Transgenik (Jatropha Curcas L)

Menggunakan Primer Gen GusA.Jurusan Agronomi. Fakultas Pertanian-Peternakan. Universitas Muhammadiyah Malang.

Arisanti, Yusi. 2010. Analisis Karakter Agronomi dan Pita Isozim Jarak Pagar (Jatropha

curcas L.) di Daerah Beriklim Basah. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Basha, S.D. and M. Sujatha. 2009. Genetic analysis of Jatropha spesies and interspesific

hybrids of Jatropha curcas using nuclear and organelle specific markers. Euphytica 168 : 197-214

Bibi, Noreen. Fan, Kai. Yuan, Shuna. Ni, Mi. Ahmed, Imrul Mosaddek. Malik, Waqas.

Wang, Xuede. 2013. An efficient and highly reproducible approach for the selection of upland transgenic cotton produced by pollen tube pathway method. Department of Plant Breeding and Genetics, Bahauddin Zakariya University, Multan, Pakistan. AJCS 7(11):1714-1722

Cambia Labs. 2006. pCAMBIA vectors. 2006. 12 hlm.

http://www.cambia.org/daisy/cambia/585.html. (Diakses tanggal 1September 2015 jam 08.58).

Chaidamsari, T., A. Suwanto, L. Winata, dan D. Santoso. 1999. Transformasi dan

Ekspresi Gen gus pada Beberapa Jaringan Tanaman Kakao. Bogor: Unit penelitian bioteknologi perkebunan. Jurnal Bioteknologi Pertanian, Vol 4, No.1, 1999, pp 28-35

Chawla HS. 2002. Introduction to Plant Biotechnology 2nd Edition. New Hampshire

(US): Science Publishers Inc Divakara BN, Upadhyaya HD, Wani SP, Laxmipathi Gowda CL. 2009. Biology and

genetic improvement of Jatropha curcas L.: A review. Applied Energy 87:732-742

Divakara BN, Upadhyaya HD, Wani SP, Laxmipathi Gowda CL., 2009. Biology And

Genetic Improvement Of Jatropha curcas L. dalam Dyah Rully dkk, Induksi 48

Perakaran Tunas Invitro Jarak Pagar (Jatropha Curcas L.) Pada Berbagai Komposisi Media. Balai Penelitian Tanaman Tembakau dan Serat, Malang.

Farhanudin. 2009. Dalam Makkar, H. P. S and K. Becker,. Potential of J. curcas seed

meal as a prote supplement to livestock feed. Constrains to its utilization and possible srategies to overcome constraints. Procedings of Jatropha. Internationa Symposium on Biofuel and Industrial Products from Jatropha curcas an Other Tropical Oil Seed Plant. Managua, Nicaragua, Mexico.

Hambali, E., A. Suryani, Dadang, Hariyadi, H. Hanafie, I. K. Reksowardjojo, M. Rivai,

M. Ihsanur, P. Suryadarma, T. Prawitasari, T. Prakoso, W. Purnama. 2006. Jarak Pagar Tanaman Penghasil Biodesel. Penebar Swadaya. Jakarta. 132 hal.

Hartati, Rr Sri dan H, Bambang. 2011. Keragaan F1 Jarak Pagar (Jatropha Curcas L.) Di

Pakuwon, Sukabumi. Pusat Penelitian dan Pengembangan Perkebunan Bogor. Balai Penelitian Tanaman Pemanis dan Serat Alam.

Hasnam dan Z. Mahmud. 2006. Panduan umum perbenihan jarak pagar (Jatropha curcas

L). Bogor, Puslitbangbun. 26 hlm. Hasnam et al. 2007. Pengadaan bahan tanam jarak pagar di Indonesia ; Desa mandiri

energi serta strategi penelitian di masa datang. Makalah pada Lokakarya Nasional Jarak Pagar III di Balittas Malang, 5 Nopember 2007

Heller, J. 1996. Physic Nut, Jatropha curcas L. – Promoting the Conservation and Use

of Underutilized and Neglected Crop 1. International Plant Genetic Resources Institure. Rome. 66p.

Henning, R. 2000. The Jatropha Booklet. A Guide to The Jatropha System and Its

Dissemination in Zambia, produced for GTZ-Support-Project Southern Province, Zambia. http//www.jatropha.de/documents/jcl- booklet.pdf [Januari 2006].

Hiei Y, Komari T, dan Kubo T. 1997. Transformation of ricemediated by Agrobacterium

tumefaciens. Plant Mol Biol 35:205-218 Islam AKMA, Anuar N, Yaakob Z, Osman M. 2011. Heterosis of Seed yield and its

components in Jatropha (Jatropha curcas L.). International Journal of Plant Breeding 5(2): 74-79

Jefferson, R. A. 1987. Assaying Chimeric Genes in Plant : The GUS gene Fusion System.

Plant Molekuler Biology Reporter. Volume 5, Number 4 : 387-405. Joshi M, Mishra A, Jha B. 2011. Efficient genetic transformation of Jatropha curcas L.

by microprojectile bombardment using embryo axes. Ind Crops and Prod. 33:67–77. doi:10.1016/j.indcrop.2010.09.002.

Jouanin L, Brasileiro ACM, Leple JC, Pilate G, Cornu D (1993) Genetic transformation: a short review of methods and their application, results and perspectives for forest trees. Annals of Forest Science 50: 325-336

Kasuga M, Miura S, Shinozaki K and Yamaguchi-Shinozaki K. 2004. A Combination of

the Arabidopsis DREB1A Gene and Stress Inducible rd29A Promoter Improved Drought- and Low Temperature Stress Tolerance in Tobacco by Gene Transfer. Biological Resources Division, Japan International Research Center for Agricultural Sciences (JIRCAS). Japan. Plant Cell Physiol. 45(3): 346–350

Kumar N, Anand KGV, Pamidimarri DVNS, Sarkar T, Reddy MP, Radhakrishnan T,

Kaul T, Reddy MK, Sopori SK. 2010. Stable genetic transformation of Jatropha curcas via Agrobacterium tumefaciens-mediated gene transfer using leaf explants. Ind Crops and Prod. 32:41-47. doi:10.1016/j.indcrop.2010.03.002

Lal da Lal, 1993. Cit. Maftuchah. 2008. Transformasi Genetik Padi Indica. Malang :

UMM Press. Lei BJ, Yin GC, Lu CH, Qian H, Zhang KW, Zhou SJ, Wang SL (1991) Study of

exogenous DNA directly transfered into soybean. Soybean Sci 1: 008. Lele, S. 2005. The Cultivation of J. curcas. Res: J-22, Sector, Vashi, Navi Mumbai,

400703, India. Li M, Li H, Jiang H, Pan X, Wu G. 2008. Establishment of an Agrobacterium-mediated

cotyledon disc tranformation method for Jatropha curcas. Plant Cell Tissue Organ Cult. 92:173-181. doi:10.1007/s11240-007-9320-6.

Listanto. E., G.A .Watimena, N.M. Armini, M.S .Sinaga, E. Sofiari dan M. Herman.

2009. Regenerasi Beberapa Kultivar Kentang dan Transformasi Kentang dengan Gen RB Melalui Agrobacterium tumefaciens. Hortikultuortikultura. 9(2):137- 147.

Liu D, Yuan Y, Sun H (1992) A study of exogenous DNA introduction into cultivated

soybean. Adv Mol Breed Res Agri. 134-140. Luo, Zhong-xun and Ray Wu. 1988. A Simple Methodfor the Transformation of RiceVia

the Pollen-Tube Pathway. Section of Biochemistry, Molecular and Cell Biology CornelI University, Ithaca, New York. Plant Molecular Biology Reporter.Vol 6(3) 1988. 165-174

Maftuchah. 2008.Transformasi Genetik Padi Indica. Malang : UMM Press. Maftuchah, 2012. Rekayasa Genetik Padi Indica. Buku Litera Jogjakarta. Jogjakarta. Hal

43-44 Maftuchah, Z. Agus, S.Hadi, I.Mohammad. 2014. Stabilitas Daya Hasil Beberapa Nomor

Unggul Hasil Persilangan Tanaman Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) Pada Lahan Kering

Mahmud Z. 2006. Infotek Jarak Pagar. Pusat Penelitian dan Pengembangan Perkebunan,

Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian. Martin N,Forgeois P, Picard E.1992. Investigations on transformingTriticum aestivum via

the pollen tube pathway INRA-UPS-CNRS, Station de Génétique Végétale, Ferme du Moulon, 91190, Gif-sur-Yvette, France. 12, 537-544

Melisa, 2011. Karakterisasi Morfologi dan Agronomi 13 Aksesi Jarak Pagar (Jatropha

curcas L.). Institut Pertanian Bogor. Bogor. Misra M, Misra AN. 2010. Jatropha : the biodiesel plant biology, tissue culture and

genetic transformation – a review. Int J Pure Appl Sci Technol [Internet]. Diunduh pada 11 Oktober 2014; 09:53:24 Malang. Terdapat pada http://jatropha.pro/PDF_bestanden/The_biodiesel_plant_biology.pdf

Mulyaningsih, E.S. dan H. Aswiginoor. 2010. Pewarisan Gen Penanda HPT (hygromicin

fosfotranferase test) berdasarkan analisa PCR dan ekspresinya pada Populasi Padi transforman mengoverekspresikan gen HD ZIP Pshox-6. Jurnal penelitian Pasca Sarjana. ITB

NCBI (National Center for Biotechnology Information).n2008. Binary vector pCAMBIA-

1301, complete sequence. 29 April 2008. 6 hlm. Nicholl, D.S.T. 2002. An introduction to genetic engineering. 2nd ed. Cambridge

Universiry Press, New York: xi+292 hlm. Nugrahani, Ratri Ariatmi. 2008. Perancangan Proses Pembuatan Pelumas Dasar Sintetis

Dari Minyak Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) Melalui Modifikasi Kimiawi. Sekolah Pasca Sarjana. Institut Pertanian Bogor. Bogor

Nurcholis, M. dan S. Sumarsih. 2007. Jarak Pagar dan Pembuatan Biodiesel. Kanisius.

Yogyakarta. 83 hal. Nuryani Y. 2007. Pemanfaatan jarak pagar sebagai obat. Infotek Jarak Pagar 2:3 Pambudi, A. 2009.Teknik Transformasi Genetik Beberapa Tanaman Menggunakan

Agrobacterium Tumefaciens. Bogor :Institut Pertanian Bogor. Abstrak G09. Parthiban, K.T, Kumar, R.S, Thiyagarajan P, V. Subbulakshmi, S. Vennila and M.

Govinda Rao. 2009. Hybrid Progenies In Jatropha – A New Development Forest College and Research Institute, Tamil Nadu Agricultural University, Mettupalayam 641 301, India.

Perry, D.A. 1979. Seed Vigour and Seedling Establishment. Advance in Research and

Technology of Seeds, 2:62-85.

Prihanda, R dan R, Hendroko. 2006. Petunjuk Budi Daya Jarak Pagar. Jakarta: AgroMedia Pusataka

Puslitbangbun]. 2009. Populasi Komposit Jarak Pagar IP3-A dan IP3-B telah Dirilis.

www.perkebunan.litang.deptan.go.id Santoso, Bambang Budi. 2009. Karakterisasi Morfo-Ekotipe dan Kajian Beberapa Aspek

Agronomi Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) Di Nusa Tenggara Barat. Institut Pertanian Bogor. Bogor.

Satifah, Siti dan Darjanto. 1990. Pengetahuan Dasar Biologi Bunga dan Teknik

Penyerbukan Silang Buatan. Gramedia. Jakarta Pusat. Shan, Wenying. Zhao, Cong. Fan, Jianguang. Cong, Hongzi. Liang, Shicai. Yu, Xiyan.

2012. Antisense Suppression Of Alcohol Acetyltransferase Gene In Ripening Melon Fruit Alters Volatile Composition. State Key Laboratory of Crop Biology, College of Horticulture Science and Engineering, Shandong Agricultural University, Tai’an, Shandong 271018, PR China

Sharma S, Kumar N, Reddy MP. 2011. Regeneration in Jatropha curcas: factors

affecting the efficiency of in vitro regeneration. Ind Crops and Prod. 34: 943– 951. doi:10.1016/j.indcrop.2011.02.017.

Singh A, Reddy MP, Chikara J, Singh S. 2010. A simple regeneration protocol from stem

explants of Jatropha curcas - A biodiesel plant. Ind Crops and Prod. 31:209–213. doi:10.1016/j.indcrop.2009.10.007.

Siregar, Novita R. Andriany. 2013 dalam Chahal GS, Gosal SS. Principles and

Procedures of Plant Breeding. India (IN): Alpha Science International Ltd. Stomp, A.M., C.A. Loopstra, W.S. Chilton, R.R. Sederoff, L.W. Moore. 1990. Extended

Host Range of Agrobacterium tumefaciens in The Genus Pinus. Plant Physiol 92:1226-1232.

Sudarmo, H. dan M. Machfud. 2009. Keragaan fenotipa F-1 hasil persilangan jarak pagar

(Jatropha curcas L.) Prosiding Lokakarya Nasional V. Inovasi Teknologi dan Cluster Pioneer menuju DME berbasis jarak pagar. Malang, 4 November 2009. Hlm 44-49.

Sulistyaningsih YC. 2012. Rekayasa ekspresi gen pembungaan HD3A pada tanaman

jarak pagar (Jatropha curcas L.) [Disertasi]. Bogor (ID) : IPB. USDA,2014.Plants Database. http://plants.usda.gov/core/profile?symbol=JACU2.

Diakses pada tanggal 18 September 2014.

Utomo, Bambang Priyo, 2008. Fenologi Pembungaan dan Pembuahan Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) Fakultas Pertanian. Institut Pertanian Bogor. Bogor

Wu et al., 1988. dalam Wen-Shaw Chen. Gene Transfer Via Pollen Tube Pathway For Anti-Fusarium Wilt In Watermelon. Departement of Biological Scienses, National Sun Yat-sen University, Kaohsiung City, Taiwan, Republic Of China. : Vol.46 No.6

Xu, Huini. Sun, Xudong. Wang, Xiufeng. Shi, Qinghua. Yang, Xiaoyu. Yang, Fengjuan.

2011. Involvement of a cucumber MAPK gene (CsNMAPK) in positive regulation of ROS scavengence and osmotic adjustment under salt stress. Biotechnology Research Centre, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650224, PR China

Xu, Y.,Zhou, C., Wang, C. and Li, B. (1991) dalam Wen-Shaw Chen.1998. Gene

Transfer Via Pollen Tube Pathway For Anti-Fusarium Wilt In Watermelon Zainudin, Agus dan Maftuchah. 2010. Pengembangan Metode Isolasi DNA Genom Pada

Tanaman Jarak Pagar (Jatropha Curcas). Fakultas Pertanian. Universitas Muhammadiyah Malang

Zhou GY, Weng J, Zeng Y, Huang J, Qian S, Liu G.1983. Introduction of exogenous

DNA into cotton embryos. Methods Enzymol. 101: 433-481 Zong Hua, W. Shenghua, O.Chao, D. Xinlin, L. Liang, L. Junqiang And C.

Fang.2010.Agrobacterium-mediated Transformation of Jatropha curcas Young Leaf Explants with Lateral Shoot-Inducing Factor (LIF). Department of Bioengineering, Yibin Vocational and Technical College, Yibin 644003, China.

skripsi -...

Documents