INDAH MIFTAKHUL JANAH

INDAH MIFTAKHUL JANAH

12/331306/PA/14577

SENTRIFUGASI

Sentrifugasi merupakan suatu metode yang digunakan dalam pencapaian sedimentasi dimana partikel-partikel yang ada di dalam suatu bahan yang dipisahklan dari fluida oleh gaya sentrifugal yang dikenakan pada partikel Sentrifugasi adalah metode yang umum diterapkan untuk memisahkan sel, organel dan senyawa biomolekul berdasarkan adanya daya sedimentasi yang ditimbulkan oleh alat sentrifuge

Apabila suatu partikel bergerak melingkar dengan radius (r) dan kecepatan angular () tertentu, maka partikel tersebut akan mendapatkan gaya sentrifugasi (Fc) yang besarnya merupakan hasil kali medan sentrifugal ( 2r) dengan massa efektif partikel tersebut

Prinsip Kerja

Dimana objek diputar secara horizontal pd jarak radial dan titik dimana titik tersebut dikenakan gaya. Pada saat objek diputar, partikel2 yg ada akan berpisah dan berpencar sesuai berat jenis msg2 partikel.

Apabila objek berotasi didalam tabung/silinder yg berisi campuran cairan dan partikel,

maka campuran tsb dapat bergerak sesuai pusat rotasi namun hal tsb tdk terjadi krn adanya gaya yg berlawanan yg menuju kearah dinding luar silinder atau tabung. Gaya yg paling berperan adlh gaya sentrifugal. Gaya inilah yg menyebabkan partikel2 menuju dinding tabung dan terakumulasi membentuk endapan

Penerapan Teknik Sentrifugasi

Teknik sentrifugasi sering dipergunakan untuk pemisahan senyawa biomolekul Berdasarkan berat molekul dan densitasnya: Pemisahan sel, baik sel hewan, tumbuhan maupun mikrobia (yeast, bakteri) Pemisahan organel sel, misalnya: inti sel, mitokondria, kloroplas dll Pemisahan biomolekul, misalnya:antibodi, DNA, plasmid dll, yang umumnya menggunakan teknik tambahan, misalnya: - tehnik gradien sentrifugasi isopicnic (gradien sukrosa) untuk pemisahan protein tertentu - teknik gradien equilibrium (gradien CsCl) untuk pemisahan DNA, RNA dan plasmid

Alat Sentrifuge

merupakan alat pemisah yang digunakan untuk memisahkan campuran padat-cair atau cair-cair yang tidak saling larut akibat gaya sentrifugal dengan cara diputar dengan kecepatan tinggiBerdasarkan kecepatan putarannya:

a) Sentrifuge kecepatan sedang hingga 6000 rpm

b) Sentrifuge kecepatan tinggi hingga 20.000 rpm

c) Ultrasentrifuge kecepatan hingga 100.000 rpm (atau lebih)

Berdasarkan temperatur untuk pemisahan

Sentrifuge tanpa pengatur suhu (suhu ruangan), biasanya untuk sentrifuge kecepatan sedang

b) Sentrifuge dengan pengatur suhu (refrigerated centrifuge)

Komponen penting alat sentrifuge

a) Rotor tempat untuk meletakkan tabung sampel yang akan dipisahkan. Rotor tersebut dihubungkan dengan motor pemutar

b)Ruangan (chamber) sentrifuge yang berisi rotor dan motor pemutar

c)Tombol pengatur kecepatan, suhu dan waktu (timer) dll

Menurut hukum Stokes, apabila partikel bulat berada dalam suatu cairan, maka partikel tersebut akan bergerak kedasar dengan kecepatan:

V = kecepatan mengendap

r = jari-jari partikel

b = berat benda bm = berat jenis cairan

n = kekentalan a = percepatan gaya tarik bumi (gaya sentrifugal atau Fc)

Nilai r dan b dalam suatu eksperimen umumnya adalah tetap, sedangkan nilai n dan bm jarang berubah, sehingga supaya kecepatan mengendapnya tinggi dilakukan usaha untuk menaikkan nilai a

Untuk menaikkan nilai a dengan memberikan gaya yang besar bila benda tersebut ditempatkan dalam medan sentrifugal (a = 2r) Kecepatan alat untuk menempatkan benda (rotor) berputar adalah ekuivalen dengan 2 x radius, maka kecepatan sudut rotor dalam berputar per menit adalah:

Gaya sentrifugal bila ditulis dalam satuan gravitasi atau RCF (relative centrifuge field) dengan konstanta gravitasi 980 cm det-1 adalah: Keterangan: RCF dalam satuan g (gravitasi) N = gaya dalam rpm r = jarak rotor ke pusat putaran

Untuk mengkonversikan satuan rpm kedalam g dapat dilakukan dengan menggunakan skala yang sangat ditentukan oleh jarak rotor ke pusat putaran (dalam cm) dapat dilihat pada skala di Gambar berikut:

Konversi kecepatan putar dari RCF (g) ke RPM (rpm) berdasarkan diameter rotor (cm)