Prinsip kerja HDL metode langsung

Kilomikron, VLDL dan LDL dihancurkan secara khusus melalui reaksi

enzimatik. Kolesterol yang tertinggal dari fraksi HDL diukur melalui reaksi

enzimatik khusus oleh adanya surfactant spesifik HDL. Kombinasi ini membuat

lebih spesifik untuk HDL dari metode lain.

Cara kerja HDL metode langsung (manual)

Disiapkan 3 tabung reaksi untuk blanko reagen (RB), sampel,dan standar.

Kemudian pada tabung pertama dipipet 10 µl aquadest dan 750 µl reagen 1 (R1)

campur dengan hati-hati, inkubasi 5 menit pada suhu 37˚C. setelah itu tambahkan

dengan reagen 2 (R2) sebanyak 250 µl, campur dengan hati-hati kemudian inkubasi

selama 5 menit. Selanjutnya pada tabung kedua dipipet standar sebanyak 10 µl dan

reagen 1 (R1) sebanyak 750 µl kemudian campur dengan hati-hati, inkubasi selama

5 menit pada suhu 37˚C. Setelah diinkubasi tambahkan reagen 2 (R2) sebanyak 250

µl, campur dengan hati-hati kemudian inkubasi selama 5 menit pada suhu 37˚C.

dan yang terakhir pada tabung ketiga, dipipet sampel sebanyak 10 µl dan reagen 1

(R1) sebanyak 750 µl kemudian dicampur dengan hati-hati, diinkubasi selama 5

menit pada suhu 37˚C. Setelah diinkubasi ditambahkan reagen 2 (R2) sebanyak 250

µl, campur dengan hati-hati kemudian diinkubasi selama 5 menit pada suhu 37˚C.

Setelah ketiga tabung diinkubasi selama 5 menit, dibaca blanko, standar dan sampel

berurutan pada panjang gelombang 578 nm.