PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI ACARA VII UJI CEMARAN MIKROBIA ANGKA LEMPENG TOTAL (ALT) DAN ANGKA KAPANG KHAMIR (AKK)

PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI ACARA VIIUJI CEMARAN MIKROBIA ANGKA LEMPENG TOTAL (ALT) DAN ANGKA KAPANG KHAMIR (AKK)Evan Julian PG 148114121Satrio Cahya AdiPG 148114122Theodorus Garry PG 148114123Lucia Venty Ningrum148114123

tujuanMenghitung jumlah mikroba aerob mesofil yang terdapat dalam sampelMenguji bahwa sampel yang diuji tidak boleh mengandung mikroba melebihi batas yang ditetapkan kerena berbahaya bagi kesehatan manusia.

Landasan TeorijamurkhamirKapang ALTAKKJAMUR DAN BAKTERIkapangMultisellulerBerfilamenHifa -> miseliumBerspora

UnisellulerTidak berfilamenTidak memiliki hifaTidak memiliki sporakhamir Berfilamen Beberapa Memiliki hifa -> miseliumMutiselluler dan unisellulerHeterotrofjamurPembuatan media pCA

NGAPAIN AJA ???Penyiapan sampel uji

Persiapandan homogenisasi

Pengenceran sample uji untuk alt ( duplo)

Uji angka lempeng totalUji sterilitas mediaAlat dan bahanMedia plate count agarBuffered pepton waterSampel ujiPipet volumeColony counter

. Penyiapan Sampel UjiPersiapan dan homogenisasi

10 mL Sampel90 mL BPWLabu ukur 100 mLPengenceran 10 -1c. Pembuatan Media PCA

Pengenceran sample uji untuk alt ( duplo)1ml pengenceran 10 -19 ml BPW +1ml pengenceran 10 -1

Pengenceran 10 -2, dst Uji Angka Lempeng TotalDilakukan pada tiap pengenceranCawan Petri steril1 mL suspensi dari tiap pengenceran 15 mL media PCA12 Uji Sterilitas MediaCawan Petri steril15 mL media PCAmemadat Uji Sterilitas PengencerCawan Petri steril1 mL pengencer BPW15 mL media PCAmemadatkontrol dan perlakuan diinkubasi terbalik selama 1 hari dan di suhu 35 drajat celciusAlat dan bahanMedia potato Dextrose AgarLarutan Pengencer Pepton Dilution Fluid(PDF)Sampel UjiKloroamfenikol 100mg/ Liter mediaPipet Volume Colony Counter

. Penyiapan Sampel UjiDi buat sampel uji dari Jamu Gendong beras kencur . Kemudian sampel di ambil dan diteliti apakah beras kencur yang kita minum mikrobanya masih masuk dalam range toleransi atau tidakPembuatan Media PDATimbang 3,9 gram PDA

Larutkan PDA dalam 100 mlAquadest

kemudian panaskan di atas hot plate sampai media menjadi lebih jernih

Pembuatan Chloroamfenikol1 gram kloroamfenikolBeaker100 mL air suling sterilPersiapan dan homogenisasi

10 mL Sampel90 mL PDFLabu ukur 100 mLPengenceran 10 -13. Koloni dihitung setelah pengamatan yang dilakukan selama 5 hari2. Seluruh Cawan Petri diinkubasi terbalik pada suhu 25 derajat Celcius selama 5 haripembuatan Uji AKK1. Dilakukan pada tiap pengenceranCawan Petri steril1 mL suspensi dari tiap pengenceran 20 mL media PDA121 ml kloroamfenikol Uji Sterilitas MediaCawan Petri steril15 mL media PDAmemadat Uji Sterilitas PengencerCawan Petri steril1 mL pengencer PDF20mL media PDAmemadatData Pembahasan (ALT)

KONTROL KONTAMINASI MEDIA

KONTROL NEGATIFKONSENTRASI 10-1 (R1)

K. 10-1 (R2)K. 10-2 (R1)K. 10-2 (R2)K. 10-3 (R1)K.10-3 (R2)K. 10-4 (R1)

K. 10-4 (R2)K. 10-5 (R1)K. 10-5 (R2)Data Pembahasan AKK

K. KONTAMINASI MEDIAK. NEGATIFK. 10-1 (R1)K. 10-1 (R2)

K. 10-2 (R1)K. 10-2 (R2)

K. 10-5 (R1)K. 10-5 (R2)

Pembahasan dan diskusiTujuan praktikum1. Praktikum menghitung jumlah mikroba aerob mesofil yang terdapat dalam produk makanan dan menguji bahwa produk makanan yang diuji tidak mengandung mikroba yang melebihi batas yang ditetapkan sebab akan berbahaya bagi konsumen.WHY WE MUST DID THAT???Duplomendapatkan perhitungan yang lebih akuratHomogenisasi Supaya bisa mendapatkan kandungan/takaran pengenceran jamu yang rata agar data validPembuatan Kontrol media mengetahui kesterilan mediaPembuatan Kontrol Negatifmengetahui pengaruh pelarut yang digunakan terhadap hasil ( apakah dia mengandung mikroba kontaminan???)

Fungsi melakukan uji ini??ALT dan AKKMengetahui besar range tingkat pencemaran kontaminan mikrobia dalam produk

Kandungan PCA

0,5% Pepton0,25% yeast extract0,1% glukosa1,5% agarPembahasanTujuan dibuat pengenceran : untuk menurunkan jumlah mikroba di jamurnya, mendapatkan koloni terpisah, memudahkan perhitunganAKK ditambah kloramfenikol memastikan pertumbuhan kapang/khamir bukan bakteriStruktur :

KloroamfenikolFungsi : antibiotik yang menghambat pertumbuhan bakteriCara kerja: Melekat pada 50 s dan mengganggu pengikatan asam amino baru pada rantai peptidaSifat : bakteriostatik

Mekanisme kerja : Sbg antibakteri bersifat stereospesifikEfektif pada gram positif dan gram negatifMengikat subunit ribosom 50-s sel mikroba target terjadi hambatan pembentukan ikatan peptida dan biosintesis proteinBersifat bakteriostatik , pada konsentrasi bersifat bakterisida pada bakteri-bakteri tertentu

Inkubasi :ALT 1 hari kemampuan bakteri tumbuh cepatAKK 5 hari kemampuan jamur tumbuh lama

UJI AKKPrinsip : pertumbuhan kapang/khamir setelah diinokulasikan pada media yg sesuai dan diinkubasi pada suhu 20-25C.Media : PDA (Potato Dextrose Agar)VariabelALT AKKMediaPCAPDAwaktu24-48 jam5 hariSuhu inkubasi37 0C20-250C

koloni30-30010-150Pertumbuhan yang diamatibakteriKapang dan khamirVariabel Varibel1.Interpretasikan hasil percobaan yang telah anda lakukan dan simpulkan apakah sampel makanan yang telah anda analisis mengandung jumlah mikroba melebihi batas yang ditetapkan atau tidak! Jelaskan! (berdasarkan Peraturan Pemerintah / Keputusan Kepala Badan POM RI tentang persyaratan cemaran mikrobia pada makanan.Berdasarkan BPOM RI no HK: 00.06.1.52.4011 untuk uji ALT syarat batasan minimum cemaran mikroba adalah 1 x10 4 koloni/g .sedangkan untuk AKK 2 x10 4 koloni/gram. Berdasarkan hasil percobaan, sampel dinyatakan tidak layak konsumsi karena hasil pengamatan menunjukkan angka ?????? CFU/mL untuk ALT. Begitupula dengan AKK yaitu 1,6 x10 6 CFU/mLDari sini kita mendapatkan hasil selain uji ALT dan AKK sebagai parameter untuk mengukur cemaran mikroba pada produk obat atau makanan? Uji MPN (Most Probable Number2. Uji BADD (botulinum)Water and Surface microbial testing

KESIMPULAN Kapang & KhamirPENGENCERAN JUMLAK (CFU/mL)10-1(128+108)/210-2(13+36)/210-3(80+45)/210-4(68+52)/210-5(4+5)/2Nilai AKK 1,6 x10 6 CFU/mL2. Berdasarkan hasil penghitungan jumlah AKK dan ALT sampel tidak layak konsumsi karena batasan jumlah ALT adalah 10000 CFU/mL sedangkan hasil pengamatan menunjukkan angka ?????? CFU/mL. Begitupula dengan AKK yaitu 1,6 x10 6 CFU/mL padahal batasan AKK adalah 20000 CFU/mL.Terima kasihMaaf data kurang lengakap karena logbook yang masih di kumpul sorry!!!!