Praktikum 1

Isolasi Koloni dari Kultur CampuranTransfer Kultur Secara

Aseptik

Karakteristik Biakan Mikroorganisme

Isolasi Kultur Murni Pewarnaan diferensial

Alat dan Bahan• Kultur cair biakan bakteri• Kultur agar miring biakan bakteri• Medium agar plate biakan bakteri• Tabung reaksi berisi kaldu nutrisi• Tabung reaksi berisi agar Na• Jarum penanam• Pembakar bunsen

1. Transfer Kultur Secara Aseptik

1. Transfer Kultur Secara Aseptik

• Transfer medium cair ke kaldu nutrisi

• Transfer agar miring ke agar miring lainnya

1. Transfer Kultur Secara Aseptik

• Transfer agar plate ke agar miring

1. Transfer Kultur Secara Aseptik

2. Isolasi Dari Kultur CampuranAlat dan Bahan• Kultur Campuran 24-48 jam• Media agar Na• Pembakar bunsen• Jarum penanam• Batang gelas L• Alkhohol 95%• Cawan Petri

• Streak Plate

2. Isolasi Dari Kultur Campuran

Ambil suspensi bakteri dengan

jarum

Goreskan pada medium

Inkubasi 36 jam 25/27 o

Celcius

• Spread Plate

2. Isolasi Dari Kultur Campuran

Rendam batang gelas L dalam alkhohol

Tumpahkan suspensi bakteri pada agar dalam cawan petri

Batang gelas L yang telah direndam dibakar 10-15 detik

Biakan bakteri disebarkan dengan menggesekan batang gelas L ke semua arah

Inkubasi 36 jam 25/27o

Celcius

2. Isolasi Dari Kultur Campuran• Pour Plate

2. Isolasi Dari Kultur Campuran• Pour Plate

3. Isolasi kultur Murni

Pindahkan koloni dari percobaan sebelumnya ke agar miring secara

aseptik

Inkubasi 36 jam 25/27 o

Celcius

5. Karakteristik Biakan Mikroorganisme

Alat dan Bahan• Agar nutrisi• Gelatin Nutrisi• Kaldu nutrisi• Koloni bakteri• Jarum inokulasi• Pembakar bunsen

5. Karakteristik Biakan Mikroorganisme

Inokulasi setiap media

Inkubasi 36 jam 25/27 oC

Amati pertumbuhan mikroorganisme dengan melihat

karakteristik mikroorganisme

Inokulasi setiap media :• Agar nutrisi cawan petri : Gesek• Agar nutrisi miring : gores satu garis tunggal• Kaldu nutrisi : Goyang jarum beberapa kali• Gelatin nutrisi : Stab• Agar nutrisi tegak : stab

5. Karakteristik Biakan Mikroorganisme

5. Karakteristik Biakan Mikroorganisme

5. Karakteristik Biakan Mikroorganisme

5. Pewarnaan SederhanaPewarnaan positif• Bila menggunakan biakan cair maka pindahkan setetes biakan dengan

pipet tetes atau dapat juga dipindahkan dengan jarum inokulum. Jangan lupa biakan dikocok terlebih dahulu. Jika digunakan biakan padat, maka biakan dipindahkan dengan jarum inokulum, satu ulasan saja kemudian diberi akuades dan disebarkan supaya sel merata.

• Keringkan ulasan tersebut sambil memfiksasinya dengan api bunsen (lewatkan di atas api 2-3 kali)

• Setelah benar-benar kering dan tersebar selanjutnya ditetesi dengan pewarna (dapat digunakan Methylen blue, Safranin, Crystal Violet) dan tunggu kurang lebih 30 detik.

• Cuci dengan akuades kemudian keringkan dengan kertas tissue• Periksa dengan mikroskop (perbesaran 100 x 10).

5. Pewarnaan Sederhana

Pewarnaan negatif• Ambil dua object glass, teteskan nigrosin atau

tinta cina di ujung kanan salah satu object glass• Biakan diambil lalu diulaskan atau diteteskan

dalam tetesan nigrosin tadi, lalu dicampurkan• Tempelkan sisi object glass yang lain kemudian

gesekkan ke samping kiri • Biarkan preparat mengering di udara, jangan

difiksasi atau dipanaskan di atas api.

5. Pewarnaan Sederhana

5. Pewarnaan Sederhana

5. Pewarnaan Sederhana