percobaan iv karbohidrat
TRANSCRIPT
LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA
PERCOBAAN IV
KARBOHIDRAT
Dosen :
Drs. Syahmani, M.Si
Dra. Sudarsih
Asisten Dosen :
Rahmat Eko Sanjaya
Uswati Husnun Nadiyya
Disusun oleh :
Nur Laily Anggraini
A1C309002
Kelompok 1
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIA
JURUSAN PENDIDIKAN MATEMATIKA DAN IPA
FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN
UNIVERSITAS LAMBUNG MANGKURAT
BANJARMASIN
APRIL 2013
PERCOBAAN IV
0
Judul : Karbohidrat
Tujuan : Untuk mengidentifikasi terdapatnya karbohidrat dalam suatu sampel
Hari/ Tanggal : Rabu, 3 April 2013
Tempat : Laboratorium Kimia FKIP UNLAM Banjarmasin
I. DASAR TEORI
Karbohidrat merupakan senyawa karbon yang mengandung hidrogen dan oksigen
yang secara empiris memiliki rumus Cx(H2O)y. Karbohidrat adalah polihidroksi dari
aldehida atau keton (Beran, 2000). Kelompok karbohidrat tersusun atas hidroksi aldehid,
alkohol, asam berupa turun-turunannya dan beberapa komponen yang dapat dihidrolisis
menjadi seperti gugusnya (Donald et al., 2002).
Karbohidrat merupakan bahan yang sangat diperlukan tubuh manusia, hewan dan
tumbuhan di samping lemak dan protein. Senyawa ini dalam jaringan merupakan
cadangan makanan atau energi yang disimpan dalam sel. Karbohidrat yang dihasilkan
oleh tumbuhan merupakan cadangan makanan yang disimpan dalam akar, batang, dan biji
sebagai pati (amilum). Karbohidrat dalam tubuh manusia dan hewan dibentuk dari
beberapa asam amino, gliserol lemak, dan sebagian besar diperoleh dari makanan yang
berasal dari tumbuh-tumbuhan (Sirajuddin dan Najamuddin, 2011).
Perbandingan antara hidrogen dan oksigen pada umumnya adalah 2:1 seperti
halnya dalam air. Oleh karena itu diberi nama karbohidrat. Dalam bentuk sederhana,
formula umum karbohidrat adalah CnH2nOn (Almatsier, 2001).
Karbohidrat mempunyai peranan penting dalam menentukan karakteristik bahan
makanan, misalnya rasa, warna, tekstur, dan lain-lain. Sedangkan dalam tubuh,
karbohidrat berguna untuk mencegah timbulnya ketosis, pemecahan protein tubuh yang
berlebihan, kehilangan mineral, dan berguna untuk membantu metabolisme lemak dan
protein (Winarno, 2002).
Karbohidrat didefinisikan sebagai polihidroksi-aldehid atau polihidroksi-keton dan
temuannya. Karbohidrat umumnya digolongkan menurut strukturnya yaitu monosakarida,
oligosakarida dan polisakarida. Monosakarida merupakan gula yang sederhana yang tidak
dapat dihidrolisis menjadi senyawa yang lebih sederhana walau dalam keadaan lunak
sekalipun. Monosakarida yang mengandung gugus aldehid disebut aldosa, yakni glukosa,
galaktosa, manosa, talosa, altrosa, alosa, gulosa, dan idosa. Monosakarida dengan gugus
keton dikenal sebagai ketosa, misalnya fruktosa.
1
Glukosa adalah suatu aldoheksosa dan sering disebut dekstrosa karena mempunyai
sifat dapat memutar cahaya terpolarisasi kearah kanan. Di alam, glukosa terdapat dalam
buah-buahan dan madu lebih. Berikut ini struktur dari glukosa :
Fruktosa adalah suatu ketoheksosa yang mempunyai sifat memutar cahaya
terpolarisasi ke kiri dan karenanya disebut levulosa. Fruktosa mempunyai rasa lebih manis
daripada glukosa, juga lebih manis daripada gula tebu atau sukrosa. Berikut ini struktur
dari fruktosa :
Galaktosa mempunyai rasa kurang manis daripada glukosa dan kurang larut dalam
air. Monosakarida ini jarang terdapat bebas dalam alam. umumnya berikatan dengan
glukosa dalam bentuk laktosa yaitu gula yang terdapat dalam susu. Galaktosa mempunyai
sifat memutar bidang cahaya terpolarisasi ke kanan.
Struktur galaktosa adalah :
2
Gambar 1. α-D-glukosa
Gambar 2. α-D-fruktosa
Gambar 3. α-D-galaktosa
Monosakarida mempunyai gugus fungsi aldehid dan alkohol dalam satu struktur, hal
ini dapat menyebabkan terjadinya reaksi pembentukan hemeasetalsiklis.
Oligosakarida mempunyai molekul yang terdiri atas beberapa molekul
monosakarida. Oligosakarida mengandung paling sedikit 2 dan biasanya 8 sampai 10
satuan monosakarida. Oligosakarida yang mengikat dua molekul monosakarida satu sama
lain disebut disakarida. Beberapa disakarida yang dikenal adalah laktosa, sukrosa, dan
maltosa.
Sukrosa ialah gula yang dikenal sehari-hari sebagai gula dari tebu ataupun dari bit.
Hidrolisis sukrosa akan terpecah dan menghasilkan glukosa dan fruktosa. Pada molekul
sukrosa terdapat ikatan antara molekul glukosa dan fruktosa yaitu antara atom karbon
nomor 1 pada glukosa dengan atom karbon nomor 2 pada fruktosa melalui atom oksigen.
Sukrosa mempunyai sifat memutar cahaya terpolarisasi ke kanan. Berikut ini struktur dari
sukrosa :
Laktosa dengan hidrolisis akan menghasilkan D-galaktosa dan D-glukosa. Ikatan
galaktosa dan glukosa terjadi antara atom karbon nomor 1 pada galaktosa dan atom
karbon nomor 4 pada glukosa. Laktosa mempunyai sifat mereduksi dan mutarotasi. Berikut
ini struktur dari laktosa :
3
Gambar 4. α-D-glukopiranosil-β-D-fruktofuranosida
Maltosa adalah suatu disakarida yang terbentuk dari dua molekul glukosa. Ikatan
yang terjadi ialah antara atom karbon nomor 1 dan atom karbon nomor 4, oleh karenanya
maltose masih mempunyai gugus –OH glikosidik dan dengan demikian masih mempunyai
sifat mereduksi. Maltosa mudah larut dalam air dan mempunyai rasa lebih manis daripada
laktosa tetapi kurang manis daripada sukrosa. Struktur maltosa yaitu :
Sedangkan polisakarida mengandung ratusan bahkan ribuan satuan monosakarida.
Beberapa polisakarida yang penting diantaranya ialah amilum, glikogen, dekstrin, dan
selulosa.
Amilum atau pati terdapat pada umbi, daun, batang dan biji-bijian sebagian besar
tumbuhan. Amilum terdiri atas dua macam polisakarida yang kedua-duanya adalah polimer
dari glukosa, yaitu amilosa (kira-kira 20-28%) dan sisanya amilopektin. Amilosa terdiri atas
250-300 unit D-glukosa yang terikat dengan ikatan α 1,4-glikosidik, jadi molekulnya
merupakan rantai terbuka. Amilopektin juga terdiri atas molekul D-glukosa yang sebagian
besar mempunyai ikatan 1,4-glikosidik dan sebagian lagi ikatan 1,6-glikosidik. Adanya
ikatan 1,6-glikosidik ini menyebabkan terjadinya cabang, sehingga molekul amilopektin
berbentuk rantai terbuka dan bercabang. sebagian dari struktur amilosa digambarkan di
bawah ini :
4
Gambar 5. α-D-galaktopiranosil-α-D-
glukopiranosa
Gambar 6. α-D-glukopiranosil-β-D-glukopiranosa
Gambar 7. unit glukosa dalam amilosa
Didalam dunia hayati kita mengenal berbagai jenis karbohidrat, baik yang
berfungsi sebagai pembangun struktur maupun yang berperan fungsional dalam proses
metabilisme. Berbagai uji telah dikembangkan untuk analisis baik kualitatif maupun
kuantitatif terhadap keberadaan karbohidrat. Mulai dari yang membedakan karbohidrat dari
senyawa lain sampai pada yang mampu membedakan jenis-jenis karbohidrat secara
spesifik.
Reaksi Pengenalan terhadap Karbohidrat
1. Uji Molisch
Uji Molisch adalah uji umum untuk karbohidrat yang sangat efektif untuk
senyawa-senyawa yang dapat didehidrasi oleh asam sulfat pekat menjadi senyawa
fulfural yang tersubstitusi, seperti hidroksilmetil fulfural. Pereaksi molisch terdiri dari
larutan 5% ά-naftol dalam alkohol 95%. Pereaksi ini berdasarkan pembentukan
furfural atau turunan-turunan dari karbohidrat yang dihedratasi oleh asam pekat.
Reaksi yang terjadi dengan ά-naftol akan membentuk persenyawaan berwarna.
Warna yang terjadi disebabkan kondensasi furfural atau derivatnya dengan α-
naftol menghasilkan Thymol. Thymol dapat dipakai sebagai pengganti α-naftol. Ia
juga lebih stabil dari α-naftol dan pada penyimpanannya yang lama tidak berubah
warna.
Monosakarida jenis pentosa akan mengalami dehidrasi dengan asam
tersebut menjadi furfural, semantara golongan heksisosa menjadi hidroksi-
multifurfural. Pereaksi molisch yang terdiri dari a-naftol dalam alkohol akan bereaksi
dengan furfural tersebut membentuk senyawa kompleks berwarna ungu. Uji ini bukan
uji spesifik untuk karbohidrat, walalupun hasil reaksi yang negatif menunjukkan bahwa
5
larutan yang diperiksa tidak mengandung karbohidrat. Warna ungu kemrah-merahan
menyatakan reaksi positif, sedangka warna hijau adalah negatif.
Berikut ini struktur pereaksi molisch :
2. Uji Antron
Uji Antron merupakan uji umum untuk karbohidrat. Antron yang merupakan
bentuk keton dari pada 9-hidroksiantraen, bereaksi dengan karbohidrat dan
menghasilkan suatu produk yang berwarna hijau atau hijau biru.
Timbulnya warna hijau atau hijau kebiruan menandakan adanya karbohidrat
dalam larutan contoh. Uji ini sangat sensitive sehingga juga dapat memberikan hasil
positif jika dilakukan pada kertas saring yang mengandung selulosa. Uji antron ini
telah dikembangkan untuk uji kuantitatif secara colorimetric bagi glikogen, inulin, dan
gula dalam darah (Winarno, 2008).
3. Uji Pikrat
Gula-gula pereduksi mengubah asam Pikrat menjadi asam Pikramat.
Reaksi Monosakarida Berdasarkan Sifat Reduksi :
Gugus aldehid mudah dioksidasi menjadi asam karboksilat, oleh pereaksi Tollens, uji
Benedict, dan uji Barfoed.
1. Uji Tollens
Uji dengan pereaksi Tollens didasarkan pada mudahnya gugus aldehid
dioksidasi menjadi asam karboksilat. Monosakarida mempunyai gugus aldehid yang
terbentuk dari reaksi reversible dari hemiasetal siklis monosakarida.
Uji ini untuk positif terhadap karbohidrat pentosa yang membedakannya
dengan heksosa. Aldehidadapat mereduksi pereaksi Tollens sehingga membebaskan
unsur perak (Ag).
Pereaksi tollens, pengoksidasi ringan yang digunakan dalam uji ini, adalah
larutan basa dari perak nitrat. Larutannya jernih dan tidak berwarna. Untuk mencegah
pengendapan ion perak sebagioksida pada suhu tinggi, maka ditambahkan beberapa
6
Gambar 8. α-naftol
tetes larutan amonia. Amonia membentuk kompleks larut air dengan ion
perak.Pereaksi Tollens mengandung ion diamminperak(I). Ion ini dibuat dari
larutanperak (I) nitrat. Caranya dengan memasukkan setetes larutan natrium
hidroksida ke dalam larutan perak (I) nitrat yang menghasilkan sebuah endapan perak
(I) oksida, dan selanjutnya tambahkan larutan amonia encer secukupnya untuk
melarutkan ulang endapan tersebut.
Pereaksi Tollens sering disebut sebagai perak amoniakal. Endapan perak pada
uji ini akan menempel pada tabung reaksi yang akan menjadi cermin perak. Oleh
karena itu PereaksiTollens sering juga disebut pereaksi cermin perak.
2. Uji Benedict
Uji Benedict dan uji Barfoed keduanya berdasarkan reduksi Cu++ menjadi Cu+.
Pada reduksi kupri di dalam suasana alkalis biasanya ditambahkan zat pengkompleks
seperti sitrat pada larutan Benedict atau tartrat pada larutan Fehling, hal ini dilakukan
untuk mencegah pengendapan CuCO3 dalam larutan natrium karbonat pada
Benedict, sedangkan pada Fehling untuk mencegah pengendapan Cu(OH)2 atau CuO
dalam larutan natrium hidroksida. Produk daripada oksidasi karbohidrat dalam larutan
alkalis sangat kompleks dan banyak jumlahnya, dan belum semuanya dapat
diidentifikasi. Tidak seperti maltose dan laktosa, sukrosa tidak dapat mereduksi
larutan Benedict, karena ia tidak memiliki gugus aldehid atau gugus keton bebas.
Pada uji benedict, teori yang mendasarinya adalah gula yang mengandung
gugus aldehida atau keton bebas akan mereduksi ion Cu2+ dalam suasana alkalis,
menjadi Cu+, yang mengendap sebagai Cu2O (kupro oksida) berwarna merah bata.
3. Uji Barfoed
Dengan menggunakan reagen Barfoed yang mengandung koper asetat di
dalam asam asetat, maka kita dapat membedakan monosakarida dari disakarida
dengan jalan mengontrol kondisi-kondisi, seperti pH dan waktu pemanasan.
Ion Cu2+ dari pereaksi Barfoed dalam suasana asam akan direduksi lebih cepat
oleh gula reduksi monosakarida dari pada disakarida dan menghasilkan Cu2O (kupro
oksida) berwarna merah bata.
II. ALAT DAN BAHAN
A. Alat-alat yang digunakan :
1. Tabung reaksi 7 buah
7
2. Rak tabung reaksi 1 buah
3. Penjepit tabung reaksi 1 buah
4. Penangas air 1 buah
5. Gelas ukur 10 mL 1 buah
6. Gelas ukur 100 mL 1 buah
7. Pipet tetes 2 buah
8. Gelas kimia 500 mL 1 buah
B. Bahan-bahan yang digunakan :
1. Akuades
2. H2SO4 pekat
3. Larutan amilum 1 %
4. Larutan Benedict
5. Larutan fruktosa 1 %
6. Larutan galaktosa 1 %
7. Larutan glukosa 1 %
8. Larutan laktosa 1 %
9. Larutan maltosa 1 %
10. Larutan sukrosa 1 %
11. Larutan Tollens
12. Na2CO3 1 M
13. Reagen Antron
14. Reagen Barfoed
15. Reagen Molisch
16. Reagen Pikrat
III. PROSEDUR KERJA
A. Uji Molisch
1. Menambahkan 2 tetes reagen Molisch ke dalam tabung-tabung reaksi yang
telah berisi 1 mL larutan-larutan : glukosa, fruktosa, galaktosa, maltosa,
laktosa, sukrosa dan amilum.
2. Mengaduk dengan baik.
8
3. Menambahkan 1 mL asam sulfat pekat dengan hati-hati dan perlahan ke
dalam masing-masing tabung reaksi melalui dinding tabung.
4. Mengamati perubahan warna yang terjadi. Uji positif ditunjukkan dengan
terbentuknya cincin ungu pada pertemuan kedua larutan.
B. Uji Antron
1. Menambahkan dengan hati-hati 2 mL reagen Antron ke dalam tabung-tabung
reaksi yang telah berisi 0,2 mL larutan-larutan : glukosa, fruktosa, galaktosa,
maltosa, laktosa, sukrosa dan amilum serta tabung yang berisi hancuran
kertas saring.
2. Mengocok setiap tabung dengan hati-hati dan membiarkan beberapa saat.
3. Memperhatikan perubahan warna yang terjadi.
4. Mengencerkan dengan asam sulfat 50% dan melakukannya dengan hati-hati
apabila menghasilkan produk berupa susu.
C. Uji Pikrat
1. Menambahkan 1 mL larutan asam pikrat jenuh dan 0,5 mL Na2CO3 1 M ke
dalam tabung-tabung reaksi yang telah berisi 2 mL larutan-larutan
karbohidrat.
2. Menginkubasi semua tabung di dalam penangas air didih sampai terlihat
perubahan warna.
D. Uji Tollens
1. Memasukkan 3 tetes cuplikan karbohidrat ke dalam tabung reaksi.
2. Menambahkan 2 mL pereaksi Tollens.
3. Mengamati apakah cermin perak terbentuk atau memanaskan campuran jika
tidak terjadi cermin perak.
E. Uji Benedict
1. Menambahkan 4 tetes dari setiap larutan karbohidrat ke dalam masing-
masing tabung reaksi yang telah berisi 2 mL reagen Benedict.
2. Mengocok.
3. Menempatkan semua tabung di dalam penangas air didih selama ± 3 menit.
4. Membiarkan dingin.
5. Membandingkan perubahan warna yang terjadi.
F. Uji Barfoed
9
1. Menambahkan 1 mL dari setiap larutan karbohidrat ke dalam masing-masing
tabung reaksi yang telah berisi 3 mL reagen Barfoed.
2. Menempatkan semua tabung di dalam penangas air mendidih selama 1 menit
atau lebih sampai terlihat adanya reduksi.
IV. HASIL PENGAMATAN
A. Uji Molisch
No Zat Uji Hasil Uji Molisch Keterangan (+/-)
1 Glukosa Terbentuk cincin ungu +
2 Fruktosa Terbentuk cincin ungu +
3 Galaktosa Terbentuk cincin ungu +
4 Maltosa Terbentuk cincin ungu +
5 Laktosa Terbentuk cincin ungu +
6 Sukrosa Terbentuk cincin ungu +
7 Amilum Terbentuk cincin ungu +
B. Uji Antron
No Zat Uji Hasil Uji Antron Keterangan (+/-)
1 GlukosaDua lapisan larutan ; hijau
pekat dan hijau bening+
2 Fruktosa Larutan hijau pekat +
3 Galaktosa Larutan hijau tua +
4 Maltosa Larutan hijau tua +
5 LaktosaDua lapisan larutan ; hijau
pekat dan hijau bening+
6 SukrosaDua lapisan larutan ; hijau
pekat dan hijau bening+
7 AmilumDua lapisan larutan ; hijau
pekat dan hijau bening+
8Kertas
saring
Larutan hijau bening, kertas
saring hancur+
C. Uji Pikrat
10
No Zat Uji Hasil Uji Pikrat Keterangan (+/-)
1 Glukosa Larutan merah tua +
2 Fruktosa Larutan oranye tua +
3 Galaktosa Larutan oranye tua +
4 Maltosa Larutan merah tua +
5 Laktosa Larutan merah tua +
6 Sukrosa Larutan oranye tua +
7 AmilumLarutan kuning berendapan
merah-
D. Uji Tollens
No Zat Uji Hasil Uji Tollens Keterangan (+/-)
1 Glukosa Tidak terbentuk cermin perak -
2 Fruktosa Tidak terbentuk cermin perak -
3 Galaktosa Terbentuk cermin perak +
4 Maltosa Tidak terbentuk cermin perak -
5 Laktosa Terbentuk cermin perak +
6 Sukrosa Terbentuk cermin perak +
7 Amilum Tidak terbentuk cermin perak -
E. Uji Benedict
No Zat Uji Hasil Uji Benedict Keterangan (+/-)
1 GlukosaLarutan biru berendapan
merah bata+
2 FruktosaLarutan biru berendapan
merah bata+
3 GalaktosaLarutan biru berendapan
merah bata+
4 MaltosaLarutan biru berendapan
merah bata+
5 LaktosaLarutan biru berendapan
merah bata+
11
6 Sukrosa Larutan biru tanpa endapan -
7 Amilum Larutan biru tanpa endapan -
F. Uji Barfoed
No Zat Uji Hasil Uji Barfoed Keterangan (+/-)
1 GlukosaLarutan biru berendapan
merah+
2 FruktosaLarutan biru berendapan
merah+
3 GalaktosaLarutan biru berendapan
merah+
4 Maltosa Larutan biru -
5 Laktosa Larutan biru -
6 Sukrosa Larutan biru -
7 Amilum Larutan biru -
V. ANALISIS DATA
A. Uji Molisch
Gugus yang bereaksi dengan uji molisch pada karbohidrat yaitu gugus
aldehid dan keton (karbonil) dan hampir semua karbohidrat memberikan reaksi (+)
jika direaksikan dengan reagen molisch, karena karbohidrat memiliki gugus keton
atau aldehid. Pada percobaan yang dilakukan, menggunakan larutan gula yaitu :
glukosa, fruktosa, galaktosa, maltosa, laktosa, sukrosa, dan amilum.
Berdasarkan percobaan ini diperoleh data bahwa semua larutan uji ketika
direaksikan dengan pereaksi Molisch, dapat membentuk kompleks cincin
berwarna ungu. Dengan bahan yang diujikan adalah glukosa, fruktosa, galaktosa,
maltosa, laktosa, sukrosa, amilum semuanya menunjukkan hasil yang positif. Hal
ini membuktikan adanya suatu karbohidrat dalam larutan tersebut.
Larutan uji yang telah dicampurkan dengan pereaksi Molisch, dialirkan
dengan larutan H2SO4 pekat dengan cara memiringkan tabung reaksi. Hal ini
dilakukan agar larutan H2SO4 tidak bercampur dengan larutan yang ada dalam
tabung, sehingga pada akhir reaksi diperoleh suatu pembentukan cincin berwarna
ungu pada batas antara kedua lapisan larutan dalam tabung. Terbentuknya
12
kompleks berwarna ungu ini karena pengaruh hasil dehidrasi monosakarida
(heksosa) yang menghasilkan hidroksimetil furfural dengan α-naftol dari pereaksi
Molisch. Berikut ini reaksi secara umum yang terjadi adalah :
Atau dapat dilihat pada reaksi berikut ini
Dengan terbentuknya cincin berwarna ungu, menandakan bahwa ketujuh
sampel larutan yang digunakan dalam percobaan memberikan hasil positif dengan
13
pereaksi Molisch atau mengandung karbohidrat. Uji ini biasanya digunakan
sebagai reaksi pendahuluan dalam analisis kualitatif karbohidrat.
B. Uji Antron
Pada uji ini, larutan karbohidrat yakni glukosa, fruktosa, galaktosa,
maltosa, laktosa, sukrosa dan amilum ditambahkan dengan reagen antron
sehingga menghasilkan warna hijau. Hal ini dikarenakan antron yang merupakan
bentuk keton dari 9-hidroksiantraen bereaksi dengan karbohidrat dan
menghasilkan suatu produk yang berwarna hijau atau hijau kebiruan.
Pada uji Antron oleh asam sulfat akan dihidrolisa menjadi monosakarida.
Selanjutnya akan mengalami dehidrasi dan menjadi furufural membentuk senyawa
kompleks hijau kebiruan.
C. Uji Pikrat
Pada uji ini, larutan karbohidrat yakni glukosa, fruktosa, galaktosa,
maltosa, laktosa, sukrosa dan amilum ditambahkan dengan reagen pikrat yang
merupakan asam pikrat dengan struktur sebagai berikut :
Hasil positif dengan uji ini jika terbentuk warna jingga atau cokelat tua
yang menunjukkan terbentuknya asam pikramat. Dari percobaan larutan glukosa,
fruktosa, galaktosa, maltosa, laktosa dan sukrosa mengalami perubahan warna
dari kuning menjadi orange tua atau merah sehingga dapat dikatakan bahwa
kelima larutan karbohidrat ini bereaksi positif dengan reagen pikrat. Perubahan
warna ini diakibatkan karena reaksi reduksi asam pikrat menjadi asam pikramat.
Sedangkan larutan amilum memberikan hasil uji negatif dengan reagen pikrat
karena amilum merupakan polisakarida yang tidak bersifat pereduksi sehingga
tidak mampu bereaksi dengan reagen pikrat.
Jadi, dapat dinyatakan bahwa kelima larutan karbohidrat tersebut
merupakan gula pereduksi. Padahal menurut literatur sukrosa bukan gula
pereduksi, tapi karena adanya pengaruh monomer fruktosa dan glukosa dalam
sukrosa sehingga dapat bereaksi dengan reagen pikrat. Pengaruh monomer ini
dapat terjadi karena sukrosa dapat terhidrolisis menjadi fruktoda dan glukosa.
14
Adapun penambahan natrium karbonat (Na2CO3) berfungsi sebagai katalis untuk
mempercepat reaksi larutan karbohidrat dengan asam pikrat.
Adapun reaksi yang terjadi adalah sebagai berikut.
Dari percobaan yang dilakukan diperoleh data bahwa larutan glukosa,
fruktosa, galaktosa, maltosa, dan laktosa mengalami perubahan warna dari kuning
menjadi merah tua atau warna yang serupa dengan orange. Sehingga dapat
dikatakan bahwa kelima larutan ini bereaksi positif terhadap uji pikrat. Perubahan
warna ini disebabkan karena terjadinya reduksi asam pikrat menjadi asam
pikramat. Jadi dapat disimpulkan bahwa kelima larutan karbohidrat tersebut
merupakan gula pereduksi.
Sedangkan larutan karbohidrat yang menunjukkan hasil negatif terhadap
uji pikrat adalah larutan amilum. Hasil ini sesuai dengan literatur yang ada bahwa
untuk larutan karbohidrat berupa sukrosa dan amilum memang tidak memberikan
hasil positif terhadap uji pikrat. Sedangkan untuk larutan amilum, ia tidak
memberikan hasil positif terhadap uji pikrat dikarenakan amilum merupakan
polisakarida yang tidak bersifat pereduksi sehingga ia tidak mampu bereaksi
dengan reagen pikrat.
D. Uji Tollens
Uji Tollens atau bisa juga disebut sebagai uji cermin perak merupakan
salah satu uji yang digunakan untuk membedakan mana yang termasuk senyawa
aldehid. Uji ini akan menunjukkan hasil positif pada aldehid dan menunjukkan hasil
negatif pada keton. Aldehida dapat dioksidasi oleh zat pengoksidasi yang sangat
lembut yaitu Ag+ atau Cu2+ yang disebut reagensia Tollens atau suatu larutan basa
yang berasal dari ion kompleks perak ammonia yang digunakan sebagai
reagensia uji untuk aldehid. Aldehid itu dioksidasi menjadi anion karboksilat, ion
Ag+ dalam reagensia Tollen’s direduksi menjadi logam Ag. Uji positif ditandai oleh
terbentuknya cermin perak pada dinding dalam tabung reaksi.
15
Na2CO3+
Pada percobaan ini, larutan karbohidrat yang menunjukkan reaksi positif
terhadap pereaksi Tollens adalah galaktosa, sukrosa dan laktosa. Sedangkan
glukosa, fruktosa, maltosa dan amilum bereaksi negatif. Padahal berdasarkan
literatur hanya sukrosa dan amilum yang menghasilkan reaksi negatif karena
keduanya bukan merupakan gula pereduksi. Untuk glukosan, fruktosa dan maltosa
yang tidak bereaksi positif terhadap pereaksi Tollens mungkin disebabkan karena
Sehingga reaksi yang terjadi pada percobaan ini adalah pada galaktosa
dan laktosa, yaitu
Galaktosa :
Laktosa :
E. Uji Benedict
Pada uji ini, larutan karbohidrat ditambahkan dengan pereaksi Benedict
kemudian memanaskan selama 3 menit. Uji ini digunakan untuk mengetahui sifat
16
O O || ||
R – C – H + Ag(NH3)2+ O⃗H
− R – C- + Ag
Cermin
O O || ||
R – C – H + Ag(NH3)2+ O⃗H
− R – C- + Ag
Cermin
reduksi dari karbohidrat. Pereaksi Benedict berupa larutan yang mengandung
kuprisulfat, natrium karbonat dan natrium sitrat. Adanya natrium karbonat dan
natrium sitrat membuat pereaksi Benedict bersifat basa lemah. Larutan ini
berwarna biru karena adanya ion kupri (Cu2+).
Pada percobaan ini mereaksikan larutan benedict dengan larutan glukosa,
fruktosa, galaktosa, maltosa, laktosa, sukrosa, dan amilum. Uji positif jika larutan
berubah setelah pemanasan yaitu larutan menjadi berwarna jingga (orange) dan
terdapat endapan merah bata. Terbentuknya warna merah bata ini adalah karena
karbohidrat yang tergolong gula pereduksi mampu mereduksi ion Cu2+ dari
kuprisitrat menjadi ion Cu+ yang kemudian mengendap sebagau Cu2O yang
berwarna merah. Adapun reaksi yang terjadi secara umum yaitu :
Maka dapat dilihat bahwa uji positif terjadi pada glukosa, fruktosa,
galaktosa, maltosa, dan laktosa karena merupakan gula pereduksi, sedangkan
pada sukrosa dan amilum tidak terjadi perubahan dan ini merupakan uji negatif
karena bukan merupakan gula pereduksi.
Monosakarida yang memiliki gugus aldehid seperti glukosa, fruktosa, dan
galaktosa sangat mudah dioksidasi menjadi suatu gugus karbonil dalam suasana
agak basa. Bentuk-bentuk hemiasetal siklik dari semua aldosa mudah dioksidasi
karena berada dalam kesetimbangan dengan bentuk aldehid rantai terbukanya.
Berikut ini reaksi yang terjadi :
Glukosa :
Galaktosa :
17
Namun, fruktosa yang memiliki gugus keton juga bisa dioksidasi karena
dalam larutan basa fruktosa berada dalam kesetimbangan dengan dua aldehid
diastereomerik serta penggunaan suatu zat antara tautometrik enadiol. Karena
adanya tautomerik inilah fruktosa bisa mereduksi ion kupri. Berikut ini zat antara
fruktosa :
Sedangkan untuk disakarida yakni laktosa dan maltosa dapat memberikan
hasil yang positif karena kedua disakarida ini juga bersifat mereduksi. Hal ini dapat
terjadi karena molekul laktosa dan maltosa masih mempunyai gugus –OH
glikosidik. Berikut ini reaksinya :
Laktosa :
Maltosa :
18
O ||
R – C – H + CuCH3COO ⃗ R – C – OH + Cu2O(s) + CH3COOHn-glukosa Endapan merah bata monosakarida
Larutan sukrosa dan amilum memberikan hasil negatif atau tidak bereaksi
dengan reagen Benedict sehingga larutan tidak berubah warna menjadi merah
menunjukkan bahwa kedua larutan tersebut tidak memiliki sifat pereduksi. Hal itu
disebabkan karena molekul sukrosa dan amilum tidak mempunyai gugus aldehid
atau keton bebas atau tidak mempunyai gugus –OH glikosidik sehingga tidak
mampu mereduksi ion-ion Cu2+.
F. Uji Barfoed
Pada percobaan uji Barfoed, karbohidrat direduksi pada suasana asam.
Dalam asam, polisakarida atau disakarida akan terhidrolisis parsial menjasi
sebagian kecil monomernya. Hal inilah yang menjadi dasar untuk membedakan
atara monosakarida, ologosakarida/disakarida dan polisakarida. Monomer gula
dalam hal ini bereaksi dengan fosmolibdat membentuk senyawa berwarna biru.
Dibanding dengan monosakarida, polisakarida yang terhidrolisis oleh asam
mempunyai kadar monosakarida yang lebih kecil dibandingkan dengan larutan
monosakarida. Disakarida juga akan memberikan hasil positif pada larutan dengan
memberikan warna biru dan bagian bawah terdapat endapan kemerahan bila
dididihkan cukup lama hingga terjadi hidrolisis.
Berdasarkan hasil percobaan, glukosa, fruktosa dan galaktosa bereaksi
positif terhadap reagen Barfoed dan menghasilkan endapan merah. Endapan
merah inilah yang menandakan bahwa larutan tersebut adalah monosakarida.
Sedangkan sukrosa, maltosa, laktosa dan amilum bereaksi negatif yang
menandakan bahwa sukrosa, maltosa dan laktosa merupakan disakarida. Jika
dididihkan lebih lama, mungkin disakarida tersebut dapat bereaksi positif. Untuk
amilum, karena merupakan polisakarida, maka lebih lama lagi proses reduksinya
sehingga diketahui bahwa amilum bukan monosakarida maupun disakarida.
VI. KESIMPULAN
1. Beberapa uji yang dapat dilakukan untuk menganalisa karbohidrat secara kualitatif
yakni uji Molisch, Antron, Pikrat, Tollens, Benedict dan Barfoed.
2. Uji Molisch digunakan untuk mengetahui adanya karbohidrat dengan memberikan
hasil positif berupa terbentuknya cincin ungu dalam larutan. Dari percobaan
19
larutan glukosa, fruktosa, galaktosa, maltosa, laktosa, sukrosa, dan amilum
memberikan hasil yang positif terhadap uji ini.
3. Uji Antron digunakan untuk mengetahui karbohidrat yang ditandai dengan
terbentuknya larutan hijau atau hijau kebiruan. Dari percobaan larutan glukosa,
fruktosa, galaktosa, maltosa, laktosa, sukrosa, dan amilum memberikan hasil yang
positif terhadap uji ini.
4. Uji Pikrat digunakan untuk mengetahui karbohidrat yang bersifat gula pereduksi
dengan mereduksi asam pikrat membentuk asam pikramat dimana uji positifnya
ditandai dengan perubahan warna larutan dari kuning menjadi berwarna coklat.
Melalui percobaan diperoleh hasil berupa larutan glukosa, fruktosa, galaktosa,
laktosa dan sukrosa bersifat mereduksi asam pikrat, sedangkan amilum
memberikan hasil yang negatif.
5. Uji Benedict berfungsi untuk identifikasi karbohidrat yang memiliki sifat pereduksi
dengan menunjukkan hasil positif berupa terbentuknya endapan merah bata.
Melalui percobaan yang tergolong gula pereduksi adalah galaktosa dan laktosa,
sedangkan glukosa, maltosa, sukrosa dan amilum bukan merupakan gula
pereduksi. Berdasarkan literatur Uji Benedict berfungsi untuk identifikasi
karbohidrat yang memiliki sifat pereduksi dengan menunjukkan hasil positif berupa
terbentuknya endapan merah bata. Melalui percobaan yang tergolong gula
pereduksi adalah glukosa, fruktosa, galaktosa, maltosa, laktosa, sedangkan
sukrosa dan amilum bukan merupakan gula pereduksi.
6. Uji Barfoed berfungsi untuk membedakan monosakarida dari disakarida dengan
menunjukkan hasil positif berupa larutan biru berendapan merah. Hasilnya adalah
glukosa, fruktosa dan galaktosa merupakan monosakarida.
DAFTAR PUSTAKA
Achmad. 2006. Pengantar Kimia Farmasi Analisis : Volumetri dan Gravimetri. Yogyakarta: Pustaka Pelajar.
Beran,J.A. 2000. Chemistry in the Laboratory. 2nd ed. New York: Jhon Willey and Sons,Inc.
Donald.et.al. 2002. Animal Nutrition Sixth Edition. England: Person Prentice Hall
20
Gilvery, M.C and Giddstein. 1996. Biokimia Suata Pendekatan dan Fungsional hal. 219. Surabaya: Airlangga University Press
Hart, Harold. 1983. Kimia Organik. Jakarta: Erlangga.
Lehninger. 1982. Dasar-dasar Biokimia. Jakarta: Erlangga.
Murray, R. K. dkk. 2009. Biokimia Harper. Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran
Sumantri, Abdul R. 2007. Analisis Makanan. Yogyakarta: UGM Press.
Sumardjo, Damin. Pengantar Kimia:Buku Panduan Kuliah Mahsiswa Kedokteran dan Program Strata 1 Fakultas Bioeksata. Jakarta: EGC Penerbit.
Syahmani dan Sudarsih. 2012. Petunjuk Praktikum Biokimia. Banjarmasin: FKIP Unlam
Banjarmasin.
LAMPIRAN I
TUGAS DAN PERTANYAAN
1. Lingkari dan beri label gugus hemiasetal dan gugus asetal pada karbohidrat berikut ini:
a) Sukrosa
b) Laktosa
2. Sukrosa adalah suatu gula non-pereduksi. Setelah hidrolisis asam selesai, akankah
ada gugus yang tereduksi ?
Jawaban :
1. Gugus hemiasetal dan gugus asetal pada karbohidrat berikut ini :
21
a) Sukrosa
b) Laktosa
2. Menurut literatur sukrosa bukan gula pereduksi, tapi karena adanya pengaruh
monomer fruktosa dan glukosa dalam sukrosa sehingga dapat bereaksi dengan
reagen pikrat. Adapun penambahan natrium karbonat (Na2CO3) berfungsi sebagai
katalis untuk mempercepat reaksi larutan karbohidrat dengan asam pikrat.
Adapun reaksi yang terjadi adalah:
22