Penetapan kadar fenolik totaldilakukan dengan menggunakan reagenFolin-Ciocalteau. Reagen FolinCiocalteau digunakan karena senyawafenolik dapat bereaksi dengan Folinmembentuk larutan berwarna yang dapatdiukur absorbansinya. Prinsip darimetode folin ciocalteau adalah terbentuknyasenyawa kompleks berwarnabiru yang dapat diukur pada panjanggelombang 765 nm. Pereaksi inimengoksidasi fenolat (garam alkali) ataugugus fenolik-hidroksi mereduksi asamheteropoli (fosfomolibdat-fosfotungstat)yang terdapat dalam pereaksi FolinCiocalteau menjadi suatu kompleksmolibdenum-tungsten. Senyawa fenolikbereaksi dengan reagen Folin Ciocalteauhanya dalam suasana basa agar terjadidisosiasi proton pada senyawa fenolikmenjadi ion fenolat. Untuk membuatkondisi basa digunakan Na2CO3 7,5%.Gugus hidroksil pada senyawa fenolikbereaksi dengan reagen Folin Ciocalteaumembentuk kompleks molibdenumtungstenberwarna biru yang dapatdideteksi dengan spektrofotometer.Semakin besar konsentrasi senyawafenolik maka semakin banyak ion fenolatyang akan mereduksi asam heteropoli(fosfomolibdat-fosfotungstat) menjadikompleks molibdenum-tungsten sehinggawarna biru yang dihasilkansemakin pekat.