BAB 1STERILISASI DAN PEMBUATAN MEDIUMPRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DAN VIROLOGI FARMASI 2010

TUJUAN Mengetahui tujuan dan cara-cara sterilisasi Melakukan sterilisasi dengan menggunakan autoklaf Mengetahui penggunaan dan macam medium Membuat medium

DASAR TEORISTERILISASI

Sterilisasi adalah suatu proses untuk memetikan semua organisme yang terdapat pada atau di dalam suatu bendaCara sterilisasi- sterilisasi scr fisik : dg pemanasan, sinar x, sinar uv, dst.- sterilisasi scr kimia : dg disinfektan, lart. Alkohol, formalin, dst.- sterilisasi scr mekanik : dg filtrsai atau penyaringan

PEMBUATAN MEDIUM

Medium adalah suatu bahan yang terdiri atas campuran nutrisi yang dipakai untuk menumbuhkan mikroba.Syarat medium :- mengandung semua nutrisi- mempunyai tekanan osmose, tegangan muka, pH yg sesuai- tidak mengandung zat yg dpt menghambat pertumbuhan- steril

CARA KERJASTERILISASI DENGAN AUTOKLAF

Tuangkan air secukupnya ke sterilisator

Tata alat-alat yang akan disterilkan

Letakkan tutup sterilisator pada tubuh sterilisator

Buka klep pengaman

Tutup klep apabila uap air mulai keluar dg deras

Pertahankan tekanan 1 atm selama 15-20menit

Matikan pemanasan dan tunggu sampai tekanan nol

Buka pengatur klep

Buang air yg tersisa dan keringkan semua bagiannya

Saat mencuci tutupnya jaga agar alat pengukur tidak terkena air

CARA KERJA

A. PEMBUATAN MEDIUM NUTRIEN CAIR

Bahan : Ekstrak daging Pepton NaCl Akuades

Cara Kerja :Larutkan 3gr ekstrak daging + 5gr pepton dg 1 L akuaest

Panaskan aelama 5 menit

Dinginkan

Netralkan dg NaOH 1N ad Ph 7,2, cek dg pH meter+ akuadest ad 1 Liter lagi

Saring larutan medium dg kain penyaring yg bersih

Sterilkan dg autoklaf, P=2 atm, T=121C, t=20 menit

PEMBUATAN MEDIUM NUTRIEN AGAR

Bahan :Ekstrak dagingPeptonAgar- agarAquadest

Cara Kerja :Medium nutrien cair + 15-20 gr agar untuk 1 liter aquadest

Masukkan agar2 ke dlm medium yg dipanaskan selama 20-30 menit

Kembalikan volume medium ad 1 liter kembali

Dlm keadan panas saring dengan kain saring bersih

Masukkan dlm tabung reaksi sterilMedium agar miring 5 mlMedium agar tegak 10 ml

Sterilkan dg autoklaf, P=2 atm, T=121C, t=20 menit

PEMBUATAN MEDIUM NUTRIEN TAOGE CAIR

Bahan :Taoge 100 grSukrosa 60 grAquadest ad 1 liter

Cara Kerja :Rebus taoge dengan aquadest ad 2 jam

Saring rebusan taoge, + sukrosa

Panaskan kembali ad larut

+ aquadest ad volumenya 1 liter

Sterilkan dg autoklaf, P=2 atm, T=121C, t=15 menit

PEMBUATAN MEDIUM TAOGE AGAR

Bahan :TaogeSukrosaAgar- agarAquadest

Cara Kerja :Medium nutrien cair + 15-20 gr agar untuk 1 liter aquadest

Masukkan agar2 ke dlm medium yg dipanaskan selama 20-30 menit

Kembalikan volume medium ad 1 liter kembali

Dlm keadan panas saring dengan kain saring bersih

Masukkan dlm tabung reaksi sterilMedium agar miring 5 mlMedium agar tegak 10 ml

Sterilkan dg autoklaf, P=2 atm, T=121C, t=20 menit

TERIMA KASIH

**