naskah skripsi.pdf

i

EFEK PEMBERIAN KURKUMIN TERHADAP PENINGKATAN

PEMBENTUKAN KOLAGEN PADA SOKET GIGI

TIKUS WISTAR PASCA PENCABUTAN

SKRIPSI

Oleh

Shelvina Ayu Damayanti

NIM 091610101059

FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI

UNIVERSITAS JEMBER

2013

i




SKRIPSI

diajukan guna melengkapi tugas akhir dan memenuhi salah satu syarat

untuk menyelesaikan Program Studi Kedokteran Gigi (S1)

dan mencapai gelar Sarjana Kedokteran Gigi

Oleh


NIM 091610101059

FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI

UNIVERSITAS JEMBER

2013

ii

PERSEMBAHAN

Skripsi ini saya persembahkan untuk :

1. Allah SWT, atas ridho dan amanah-Nya sehingga mendapat kesempatan

untuk belajar semua ilmu yang luar biasa ini. Semoga barokah atas semua

yang saya kerjakan selama ini.

2. Rasulullah Muhammad SAW, yang telah membawa pencerahan sehingga saya

dapat sampai pada saat ini.

3. Kepada orang tuaku tercinta, Ayahanda Jarwanto dan Ibunda Sismiati atas

semua doa yang selalu menyertai di setiap waktunya, serta telah mendidik

saya menjadi manusia yang lebih bermanfaat.

4. Guru-guruku tercinta, yang telah mendidik saya untuk menjadi manusia yang

berilmu mulai dari taman kanak-kanak sampai di perguruan tinggi.

5. Almamater Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember atas seluruh

kesempatan menimba ilmu yang berharga ini.

iii

MOTTO

If A equals success, then the formula is: A=X+Y+Z. X is work. Y is play. Z is keep your mouth shut.

(Albert Einstein)

Aku tidak mengetahui kebenaran mutlak.

Tetapi aku menyadari kebodohanku itu,

dan disitulah terletak kehormatan dan pahalaku.

(Khalil Gibran)

iv

PERNYATAAN

Saya yang bertandatangan di bawah ini:

Nama : Shelvina Ayu Damayanti

NIM : 091610101059

menyatakan dengan sesungguhnya bahwa karya tulis ilmiah yang berjudul Efek

Pemberian Kurkumin terhadap Peningkatan Pembentukan Kolagen pada Soket Gigi

Tikus Wistar Pasca Pencabutan adalah benar-benar hasil karya sendiri, kecuali

kutipan yang sudah saya sebutkan sumbernya, belum pernah diajukan pada institusi

manapun, dan bukan karya jiplakan. Saya bertanggung jawab atas keabsahan dan

kebenaran isinya sesuai dengan sikap ilmiah yang harus dijunjung tinggi.

Demikian pernyataan ini saya buat dengan sebenarnya, tanpa adanya tekanan

dan paksaan dari pihak mana pun serta bersedia mendapat sanksi akademik jika

ternyata di kemudian hari pernyataan ini tidak benar.

Jember,

Yang menyatakan,


NIM 091610101059

v

SKRIPSI




Oleh:


NIM 091610101059

Pembimbing

Dosen Pembimbing Utama : drg. Budi Yuwono, M. Kes

Dosen Pembimbing Pendamping : drg. Dwi Merry Christmarini R, M.Kes

vi

PENGESAHAN

Skripsi berjudul Efek Pemberian Kurkumin terhadap Peningkatan Pembentukan

Kolagen pada Soket Gigi Tikus Wistar Pasca Pencabutan, telah diuji dan disahkan

pada:

hari, tanggal : Selasa, 29 Januari 2013

tempat : Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember

Dosen Penguji Ketua Dosen Penguji Anggota

Prof. drg. Mei Syafriadi, MD.Sc, Ph.D drg. Hengky Bowo A, MD.Sc

NIP 196805291994031003 NIP 197905052005012003

Dosen Pembimbing Utama Dosen Pembimbing Pendamping

drg. Budi Yuwono, M. Kes drg. Dwi Merry Ch Robin, M.Kes

NIP 196709141999031002 NIP 197712232008122002

Mengesahkan

Dekan Fakultas Kedokteran Gigi

Universitas Jember,

drg. Hj. Herniyati, M.Kes

NIP 195909061985032001

vii

RINGKASAN

Efek Pemberian Kurkumin terhadap Peningkatan Pembentukan Kolagen pada

Soket Gigi Tikus Wistar Pasca Pencabutan; Shelvina Ayu Damayanti,

091610101059; 2013: 42 halaman; Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember.

Salah satu tindakan yang dilakukan di bidang kedokteran gigi adalah

pencabutan yaitu merupakan tindakan yang dapat menimbulkan luka di soket gigi.

Respon dasar terhadap adanya kerusakan jaringan adalah peradangan yang kemudian

dilanjutkan dengan proses penyembuhan untuk mengganti bagian yang mengalami

kerusakan. Proses penyembuhan dimulai melalui migrasi dan proliferasi fibroblas dan

sel endotel. Selanjutnya muncul jaringan yang mencirikan terjadinya penyembuhan,

yang disebut jaringan granulasi yang secara histologis dapat dilihat proliferasi

fibroblas dan kapiler baru yang halus dalam matrik ekstraseluler yang longgar.

Fibroblas akan memulai mensintesa serabut kolagen (jaringan ikat), dan kemudian

terjadi regenerasi jaringan epitel seiring berjalannya waktu.

Beberapa tanaman herbal telah terbukti dapat mempercepat proses

penyembuhan luka, salah satunya adalah rimpang kunyit. Kurkumin merupakan

bagian terbesar pigmen kuning yang terdapat dalam rimpang kunyit. Sudah banyak

penelitian dilakukan terhadap kurkumin yang ternyata mempunyai aktivitas biologis

cukup luas. Pemberian kurkumin dapat mempercepat proliferasi sel dan sintesis

kolagen pada luka. Oleh karena itu peneliti ingin mengetahui efek pemberian

kurkumin terhadap kepadatan serabut kolagen pada soket gigi tikus Wistar pasca

pencabutan.

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental pada tikus wistar

menggunakan the post test only control group design yang dilaksanakan di

Laboratorium Biomedik FKG Universitas Jember. Sampel yang digunakan sebanyak

20 ekor tikus dibagi dalam dua kelompok yaitu kontrol (K) dan perlakuan (P). Pada

viii

hari pertama, dilakukan pencabutan gigi molar satu bawah kiri tikus. Selanjutnya

pemberian 0,5 ml larutan saline (placebo) untuk kelompok K dan kurkumin 9

mg/0,5ml saline untuk kelompok P, satu kali sehari secara intra gastrik menggunakan

sonde lambung. Setelah 7 dan 14 hari pasca pencabutan masing-masing kelompok

dikorbankan sebanyak 5 ekor tikus. Selanjutnya pembuatan preparat jaringan soket

gigi tikus, kemudian ditentukan ada tidaknya peningkatan pembentukan serabut

kolagen serta nilai peningkatan pembentukan serabut kolagen dengan cara

membandingkan gambaran serabut kolagen antara kelompok kontrol dan kelompok

perlakuan.

Hasil penelitian ini menunjukan pemberian kurkumin secara intraoral pasca

pencabutan gigi tikus dapat meningkatkan pembentukan jaringan granulasi yang

diikuti dengan meningkatnya proliferasi fibroblas dan deposisi serabut kolagen baik

pada hari ke-7 maupun ke-14 dibandingkan kelompok tanpa pemberian kurkumin,

Akan tetapi, pemberian kurkumin selama 14 hari pasca pencabutan gigi tidak

menunjukan adanya peningkatan pembentukan serabut kolagen dibandingkan

pemberian kurkumin selama 7 hari pasca pencabutan.

Kesimpulan yang dapat diambil dari penelitian ini adalah terdapat

peningkatan pembentukan kolagen pada soket gigi tikus Wistar setelah pemberian

kurkumin pasca pencabutan gigi tetapi tidak terdapat peningkatan pembentukan

kolagen pada soket gigi tikus Wistar berdasarkan variasi lama waktu pemberian

kurkumin pasca pencabutan

ix

PRAKATA

Puji Syukur diucapkan kepada Allah SWT karena berkat rahmat dan karunia-

Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini sampai dengan selesai. Skripsi

ini berjudul Efek Pemberian Kurkumin terhadap Peningkatan Pembentukan Kolagen

pada Soket Gigi Tikus Wistar Pasca Pencabutan. Skripsi ini disusun untuk

memenuhi persyaratan dalam menyelesaikan pendidikan strata satu (S1) Fakultas

Kedokteran Gigi Universitas Jember.

Penyusunan skripsi ini tidak lepas dari bantuan banyak pihak. Oleh karena itu,

penulis menyampaikan terima kasih kepada:

1. drg. Hj. Herniyati, M.Kes., selaku Dekan Fakultas Kedokteran Gigi Universitas

Jember atas segala fasilitas dan kesempatan yang diberikan selama menempuh

pendidikan kedokteran gigi di Universitas Jember;

2. drg. Budi Yuwono, M.Kes, selaku Dosen Pembimbing Utama dan drg. Dwi

Merry Christmarini Robin, M.Kes, selaku Dosen Pembimbing Pendamping yang

telah meluangkan waktu, pikiran, tenaga, dan perhatiannya dalam penulisan tugas

akhir ini;

3. Prof. drg. Mei Syafriadi, MD.Sc, PhD sebagai Dosen Penguji Ketua dan drg.

Hengky Bowo A, MD.Sc, sebagai Dosen Penguji Pendamping yang banyak

memberikan kritik, saran, dan masukan yang membangun dan menyempurnakan

penulisan skripsi ini.

4. Ayahanda Jarwanto dan Ibunda Sismiati tercinta atas dukungan moril, materi,

doa, dan semua curahan kasih sayang yang tak akan pernah putus;

5. Kakakku Vinda Ayu Prastica serta adikku Verina Ayu Anggara yang selalu

menghibur dan memberiku motivasi untuk menyelesaikan tugas akhir ini;

6. Masku M.Widiatmocho, atas motivasi, semangat, bantuan dan dukungannya

dalam penyelesaian skripsi ini;

x

7. Seluruh teman-teman angkatan 2009 yang telah berjuang bersama-sama demi

sebuah gelar Sarjana Kedokteran Gigi terutama Ema, Kiki, Rischa, Sintha, Ina,

Yunda, Eva, Ines, dan Sandya

8. Anak-anak Kos (K-25 Mastrip dan BB II/22) yang selalu menceriakan hari-hariku

disaat suntuk dalam mengerjakan skripsi ini;

9. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu.

Penulis juga menerima segala kritik dan saran yang membangun dari semua

pihak demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya penulis berharap, semoga skripsi ini

dapat bermanfaat.

Jember, 29 Januari 2013 Penulis

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ...................................................................................... i

HALAMAN PERSEMBAHAN .................................................................... ii

HALAMAN MOTTO .................................................................................... iii

HALAMAN PERNYATAAN ........................................................................ iv

HALAMAN PEMBIMBINGAN ................................................................... v

HALAMAN PENGESAHAN.................................................................. ...... vi

RINGKASAN ................................................................................................. vii

PRAKATA ...................................................................................................... ix

DAFTAR ISI ................................................................................................... xi

DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xiv

DAFTAR LAMPIRAN............................................................................ ...... xv

BAB 1. PENDAHULUAN ............................................................................. 1

1.1 Latar Belakang ............................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah .......................................................................... 3

1.3 Tujuan Penelitian ........................................................................... 3

1.4 Manfaat Penelitian............................................................................. 3

BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA .................................................................... 4

2.1 Pencabutan Gigi .............................................................................. 4

2.2 Reaksi Radang ................................................................................ 4

2.3 Penyembuhan Luka ........................................................................ 6

2.3.1 Penyembuhan Luka pada Jaringan Lunak ................................ 6

2.3.2 Penyembuhan Luka pada Jaringan Keras ................................. 9

2.4 Kolagen ............................................................................................ 12

2.4.1 Pengertian Kolagen ................................................................... 12

2.4.2 Struktur dan Macam Kolagen ................................................... 12

xii

2.4.3 Kolagen dalam Penyembuhan Luka ......................................... 14

2.5 Kurkumin ........................................................................................ 16

2.5.1 Deskripi Kurkumin ................................................................... 16

2.5.2 Manfaat Kurkumin .................................................................... 16

2.5.3 Kurkumin terhadap Proses Penyembuhan Luka ....................... 17

2.5.4 Kurkumin terhadap Serabut Kolagen ........................................ 17

2.6 Kerangka Konseptual Penelitian .................................................. 18

2.5 Hipotesis .......................................................................................... 19

BAB 3. METODOLOGI PENELITIAN ...................................................... 20

3.1 Jenis Penelitian................................................................................ 20

3.2 Tempat dan Waktu Penelitian ....................................................... 20

3.2.1 Tempat Penelitian ..................................................................... 20

3.2.1 Waktu Penelitian ....................................................................... 20

3.3 Variabel penelitian ......................................................................... 20

3.3.1 Variabel Bebas .......................................................................... 20

3.3.2 Variabel Terikat ........................................................................ 20

3.3.3 Variabel Terkendali .................................................................. 21

3.4 Definisi Operasional Penelitian ..................................................... 21

3.5 Sampel Penelitian ........................................................................... 21

3.5.1 Sampel Penelitian...................................................................... 21

3.5.2 Besar Sampel ............................................................................ 22

3.5.3 Kriteria Sampel ......................................................................... 22

3.6 Konversi Penghitungan Dosis ........................................................ 22

3.7 Alat dan Bahan ............................................................................... 23

3.7.1 Alat ............................................................................................ 23

3.7.2 Bahan ........................................................................................ 24

3.8 Prosedur Kerja................................................................................ 25

3.8.1 Persiapan Hewan Coba ............................................................. 25

3.8.2 Persiapan Kurkumin.................................................................. 25

xiii

3.8.3 Pengelompokan dan Perlakuan Hewan Coba ........................... 25

3.8.4 Tahap Pencabutan Gigi Tikus ................................................... 26

3.8.5 Tahap Pembuatan Preparat jaringan ......................................... 26

3.8.6 Tahap Pengecatan Trichrome Mallory ...................................... 29

3.8.7 Penghitungan Peningkatan Pembentukan Serabut Kolagen ..... 29

3.9 Alur Penelitian ................................................................................ 31

BAB 4. HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 32

4.1 Hasil Penelitian ............................................................................... 32

4.2 Pembahasan .................................................................................... 35

BAB 5. KESIMPULAN DAN SARAN........................................................... 38

5.1 Kesimpulan.. .................................................................................... 38

5.2 Saran ................................................................................................ 38

DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 39

LAMPIRAN .................................................................................................... 43

xiv

DAFTAR GAMBAR

Halaman

2.1 Peran TGF terhadap proses penyembuhan luka ...................................... 8

2.2 Kolagen dengan pewarnaan Trichrome Mallory........................................ 13

2.3 Kolagen dalam penyembuhan luka ............................................................ 15

2.4 Struktur kimia kurkuminoid ....................................................................... 16

3.1 Serabut kolagen berdasarkan kriteria ......................................................... 30

4.1 Kepadatan Serabut kolagen (perbesaran 400x) .......................................... 33

A.1 Kelompok kontrol hari ke-7 ................................................................. 33

A.2 Kelompok perlakuan hari ke-7 ............................................................. 33

A.3 Kelompok kontrol hari ke-14 ............................................................... 33

A.4 Kelompok perlakuan hari ke-14 ........................................................... 33

4.2 Kepadatan Serabut kolagen (perbesaran 400x) .......................................... 34

B.1 Kelompok kontrol hari ke-7 ................................................................. 34

B.2 Kelompok perlakuan hari ke-7 ............................................................. 34

B.3 Kelompok kontrol hari ke-14 ............................................................... 34

B.4 Kelompok perlakuan hari ke-14 ........................................................... 34

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

A. Penghitungan Besar Sampel ....................................................................... 43

B. Nilai Peningkatan Pembentukan Serabut Kolagen ..................................... 44

C. Alat dan Bahan yang Digunakan dalam Penelitian .................................... 45

1

BAB 1. PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Salah satu tindakan yang dilakukan di bidang kedokteran gigi adalah

pencabutan yaitu merupakan tindakan yang dapat menimbulkan luka di soket gigi.

(Howe,1995:1). Respon dasar terhadap adanya kerusakan atau kehilangan jaringan

adalah dengan mengganti bagian yang hilang atau mengalami kerusakan yang disebut

peradangan, yaitu suatu proses yang melibatkan rangkaian aktifitas enzim, pelepasan

mediator, ekstravasasi cairan, dan perbaikan jaringan (Vane dan Botting dalam

Orbaniyah et al, 2003). Respon tersebut selanjutnya diteruskan ke proses

penyembuhan luka.

Penyembuhan luka merupakan suatu proses perbaikan jaringan yaitu

penggantian sel mati oleh sel hidup atau jaringan fibrosa (Lawler et al, 1992:15).

Proses penyembuhan luka didahului dengan respon radang, kemudian pemulihan

jaringan yang dimulai melalui migrasi dan proliferasi fibroblas dan sel endotel.

Selanjutnya muncul jaringan yang mencirikan terjadinya penyembuhan, yang disebut

jaringan granulasi yang secara histologis dapat dilihat proliferasi fibroblas dan kapiler

baru yang halus dalam matriks ekstraseluler yang longgar (Robbin et al., 2007:76).

Fibroblas akan memulai mensintesis serabut kolagen (jaringan ikat), dan kemudian

terjadi regenerasi jaringan epitel sesuai perjalanan waktu (Mulawarmanti, 2005).

Serabut kolagen adalah serabut yang paling banyak dijumpai dalam jaringan

penyambung. Serabut kolagen dapat ditemukan pada jaringan ikat yang berkembang

atau dalam pemulihan. Menurut Randolph et al. (dalam Mawardi 2002), keberadaan

serabut kolagen ini diperlukan pada keadaan-keadaan penyembuhan luka,

pembentukan jaringan parut, dan pembentukan matriks tulang. Peranan serabut

kolagen berhubungan dengan memberikan kemampuan pada jaringan melakukan

perbaikan serta pembentukan jaringan baru pada proses penyembuhan.

2

Beberapa tanaman telah terbukti dapat mempercepat proses penyembuhan

luka, antara lain propolis, mahkota dewa, binahong, dan tanaman rimpang-

rimpangan. Kurkumin merupakan pigmen kuning yang terdapat dalam tanaman

rimpang-rimpangan. Kandungan kurkumin terbesar dapat diperoleh dari rimpang

kunyit dan temulawak. Sudah banyak penelitian dilakukan terhadap kurkumin yang

ternyata mempunyai aktivitas biologis cukup luas. Kandungan kurkumin inilah yang

menyebabkan tanaman rimpang seperti kunyit maupun temulawak digunakan sebagai

obat-obatan (Rukmana, 2001:16).

Penelitian Sidhu et al. (1998) menunjukkan pemberian kurkumin dapat

mempercepat proses penyembuhan luka pada hewan. Penutupan luka pada hewan

yang diberi kurkumin lebih cepat dibandingkan dengan kelompok kontrol atau tidak

diberi kurkumin. Biopsi luka menunjukkan peningkatan migrasi makrofag, migrasi

dan proliferasi fibroblas dan sintesis kolagen di jaringan yang mengalami luka. Luka

kulit yang dirawat dengan kurkumin juga menunjukkan peningkatan

reepithelialization, kontraksi luka dan kekuatan tarik pada luka (Suguna et al., 2006).

Kurkumin juga merupakan antioksidan yang dapat melindungi sel-sel dari efek

berbahaya radikal bebas. Hal yang paling menarik dari kurkumin adalah kurangnya

efek samping pada organ pencernaan (Kohli et al., 2004).

Pada proses penyembuhan luka pasca pencabutan, pembentukan kolagen

sangat penting untuk mendukung kekuatan jaringan pada tempat terjadinya luka.

Berdasarkan latar belakang di atas, peneliti ingin mengetahui bagaimana pengaruh

pemberian kurkumin terhadap pembentukan serabut kolagen pada soket gigi tikus

Wistar pasca pencabutan.

3

1.2 Rumusan Masalah

1. Apakah terdapat peningkatan pembentukan kolagen pada soket gigi tikus

Wistar setelah pemberian kurkumin pasca pencabutan?

2. Apakah terdapat peningkatan pembentukan kolagen pada soket gigi tikus

Wistar pasca pencabutan berdasarkan variasi lama pemberian kurkumin?

1.3 Tujuan Penelitian

1. Untuk mengetahui apakah terdapat peningkatan pembentukan kolagen pada

soket gigi tikus Wistar setelah pemberian kurkumin pasca pencabutan

2. Untuk mengetahui apakah terdapat peningkatan pembentukan kolagen pada

soket gigi tikus Wistar berdasarkan variasi lama pemberian kurkumin pasca

pencabutan

1.4 Manfaat Penelitian

1. Peneliti dapat memahami manfaat pemberian kurkumin terhadap

pembentukan serabut kolagen pada soket gigi tikus Wistar pasca pencabutan

2. Memberikan informasi kepada masyarakat tentang manfaat penggunaan

kurkumin pada masa penyembuhan luka pasca pencabutan gigi

3. Mendukung pengembangan obat tradisional sebagai alternatif pengobatan

luka dalam upaya peningkatan kesehatan gigi dan mulut dan sebagai bahan

acuan untuk penelitian lebih lanjut

4

BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Pencabutan Gigi

Pencabutan gigi merupakan tindakan yang dapat menimbulkan luka di soket

gigi. Pencabutan yang ideal adalah pencabutan tanpa rasa sakit yang meminimalisir

trauma sehingga proses penyembuhan bekas pencabutan berjalan sempurna

(Howe,1995:1). Tindakan pencabutan gigi mempengaruhi besarnya trauma pada

jaringan sehingga dapat menghambat proses penyembuhan jaringan (Ardhiyanto,

2007).

Pencabutan gigi pada dasarnya hanya terdapat dua metode yaitu pencabutan

menggunakan tang atau elevator (bein) atau keduanya (forceps extraction) dan

pembedahan (surgical method). Metode pertama, yaitu dengan menekan instrumen

masuk ke dalam membran periodontal antara akar dan soket. Metode ini cukup

memadai dan sering digunakan pada sebagian besar kasus pencabutan gigi atau akar

gigi. Sedangkan metode kedua yaitu dengan pembelahan gigi atau akar gigi dari

perlekatan tulangnya. Pemisahan ini dilakukan dengan cara membuang sebagian

tulang yang melekat atau menutupi akar gigi, selanjutnya pengambilan gigi

menggunakan tang atau elevator (Howe, 1995:2).

2.2 Keradangan (Inflamasi)

Keradangan adalah reaksi tubuh terhadap invasi agen infeksi, antigen lain atau

kerusakan jaringan (Wahab,2002:3). Lawler et al. (1992:9) menambahkan respon ini

merupakan mekanisme pertahanan alam paling penting dan sungguh-sungguh yang

merupakan respon tubuh terhadap luka pada jaringan. Keradangan pada umumnya

dibagi dalam dua fase yaitu radang akut dan radang kronis.

5

a. Radang akut

Merupakan respon awal dari luka jaringan yang biasanya mendahului

perkembangan respon imun. Radang ini terjadi dalam beberapa jam atau hari dan

menunjukan awal usaha tubuh untuk menghancurkan agen penyebab

(Katzung,1997:558). Menurut Lawler et al. (1992:10), tanda-tanda utama dari proses

ini meliputi tumor (pembengkakan), rubor (kemerahan), kalor (panas setempat

berlebihan) dan dolor (rasa sakit). Selain itu dapat juga terjadi functiolaesa

(hilangnya fungsi).

b. Radang kronis

Merupakan usaha tubuh untuk melokalisasi agen penyebab dan memperbaiki

kerusakan yang terjadi. Proses ini dapat berlangsung sampai berminggu-minggu,

bulan atau bahkan bertahun-tahun. Salah satu hal yang perlu diperhatikan adalah

terjadinya fibrosis yang berlebihan, sehingga dapat menyebabkan perubahan bentuk

(deformitas) atau imobilisasi jaringan dan organ (Lawler et al., 1992:9-12).

Patogenesis keradangan dimulai oleh adanya sel yang rusak, kemudian terjadi

aktifitas enzim fosfolipase A2 yang bertanggung jawab pada pembentukan asam

arakhidonat, yang merupakan prekusor dari beberapa mediator inflamasi. Asam

arakhidonat yang terbentuk selanjutnya diubah menjadi senyawa mediator melalui

dua jalur utama yaitu jalur lipooksigenase dan jalur siklooksigenase. Siklooksigenase

merupakan enzim terikat membran yang telah ditemukan dalam retikulum

endoplasmik dan membran inti. Hasil dari jalur siklooksigenase adalah suatu

prostaglandin endoperoksida (PGG2) dan tromboksan, sedangkan LT (leukotrin) dan

HPETE (asam hidroperoksieikosatetraenoat) dihasilkan melalui jalur lipooksigenase

(Katzung, 1997:306).

Prostaglandin adalah mediator kuat berbagai proses fisiologis. Prostaglandin

merupakan kelompok asam-asam lemak hidroksi rantai panjang yang mampu

mengendalikan inflamasi. Prostaglandin mempunyai banyak efek terhadap pembuluh

darah, ujung saraf, dan juga sel yang terlibat dalam proses radang

(Dorland,2002:1783). Menurut Katzung (1997:312-313), salah satu aktivitasnya

6

adalah memudahkan vasodilatasi dengan mengaktifkan adenilil siklase, sehingga

memungkinkan molekul-molekul besar seperti antibodi, komplemen, dan sistem

enzim plasma lain melewati endotel untuk mencapai lokasi peradangan (Wahab,

2002:3).

2.3 Penyembuhan Luka

Penyembuhan adalah proses penggantian sel mati oleh sel hidup atau jaringan

fibrosa, dan terjadi melalui regenerasi atau organisasi. Hasil akhir penyembuhan

tergantung dari keseimbangan lokal diantara kedua faktor tersebut (Lawler et al.,

1992:15). Penyembuhan luka pada jaringan merupakan kelanjutan dari reaksi

keradangan dikarenakan kejadianya tidak dapat dipisahkan dari reaksi pembuluh

darah yang mendahuluinya maupun reaksi seluler sebagai respon jaringan tubuh

terhadap suatu trauma. Luka dapat terjadi pada jaringan lunak maupun jaringan keras.

Pada proses penyembuhan jaringan tergantung pada berat luka, kedalaman luka,

kesehatan umum secara menyeluruh dan status nutrisi dari individu

(Mulawarmanti,2005).

2.3.1 Penyembuhan Luka pada Jaringan Lunak

Penyembuhan luka yang dimaksud merupakan proses perbaikan jaringan

akibat adanya rangsangan pada mukosa atau jaringan lunak. Penyembuhan luka

terjadi melalui pemulihan kembali jaringan ikat dan pembentukan fibrosis. Pada

dasarnya proses penyembuhan luka pada jaringan lunak dapat dibagi menjadi tiga

fase dasar, yaitu fase inflamasi, fase fibroplastik dan fase remodeling

(Peterson,1998:58).

a. Fase Inflamasi

Fase ini dimulai dari pertama kalinya terjadi trauma atau perlukaan. Bekuan

darah membangun kembali hemostasis dan menyediakan matriks ekstraseluler

sementara untuk migrasi sel. Trombosit tidak hanya memfasilitasi proses pembekuan

7

tetapi juga mengeluarkan beberapa mediator penyembuhan luka seperti faktor

pertumbuhan trombosit yang dapat menarik dan mengaktifkan makrofag. infiltrasi

neutrofil membersihkan area luka dari partikel asing dan bakteri dan kemudian

difagositosis oleh makrofag (Leibovich dalam Singer dan Clark, 1999). Makrofag

merupakan unsur sel yang penting pada jaringan granulasi dan selain membersihkan

debris ekstrasel dan fibrin pada tempat yang mengalami luka, makrofag juga berperan

dalam menginduksi proliferasi fibroblas dan produksi matriks ekstraseluler (Robbins

et al., 2007:77)

b. Fase Fibroplastik

Untaian benang fibrin yang berasal dari koagulasi darah yang saling-silang

pada luka membentuk anyaman dimana fibroblas akan menyusun substansi dasar dan

tropokolagen. Fibroblas berubah lokalis dan mulai memproduksi tropokolagen pada

hari ke 3 atau ke 4 setelah perlukaan (Peterson, 1998:58). Fibroblas menyimpan

tropokolagen yang nantinya digunakan untuk produksi kolagen. Keberadaan serabut

kolagen yang cukup diperlukan dalam penyembuhan luka. Banyak faktor

pertumbuhan yang mengatur proliferasi fibroblas juga berperan serta dalam sintesis

kolagen. Pembentukan kolagen diinduksi oleh sejumlah molekul meliputi faktor

pertumbuhan seperti Platelet Derived Growth factor (PDGF) maupun Transforming

Growth Factor 1 (TGF -1) (Robbins et al., 2007:78).

Proses produksi kolagen dimulai pada minggu pertama dan meningkat drastis

pada minggu ke-2 sampai ke-3. Proses produksi ini banyak bergantung pada

vaskularisasi di daerah luka. Terbentuknya serabut kolagen yang matang, akan

menyebabkan kekuatan luka menahan regangan meningkat (Lawler et al., 1992).

Secara klinis luka pada akhir tahap fibroplastik akan kaku karena jumlah kolagen

yang berlebih, dan erythematosus karena tingkat vaskularisasi yang tinggi dan

mampu menahan tekanan 70-80% kekuatan jaringan tanpa perlukaan atau jaringan

normal (Peterson, 1998:59-60).

8

Gambar 2.1. Peran TGF terhadap proses penyembuhan luka

(Sumber: Singer dan Clark, 2007)

c. Fase Remodeling

Tahap akhir penyembuhan luka adalah tahap remodeling atau wound

maturation. Selama tahap ini sebagian besar serabut kolagen yag terbentuk akan

dihancurkan dan diganti dengan serabut kolagen yang baru yang lebih baik dan cukup

kuat terhadap tekanan yang mengenai luka yaitu 40-70% dari kekuatan jaringan

normal. Proses ini dapat dicapai dalam waktu 4 minggu (Miller dan MacKay, 2003).

Untuk efisiensi maka kelebihan kolagen akan dibuang sehingga menjadi jaringan

parut. Setelah itu metabolisme jaringan akan berkurang sehingga terjadi penurunan

vaskularisasi pada jaringan yang terluka. Selama proses penyembuhan, elastin pada

jaringan normal tidak diganti sehingga jaringan yang mengalami perlukaan akan

kehilangan fleksibilitasnya (Peterson,1998:60). Proses remodeling pada

penyembuhan luka akan berlanjut sampai 2 tahun (Miller dan MacKay, 2003).

9

2.3.2 Penyembuhan Luka pada Jaringan Keras ( Luka Pasca Pencabutan Gigi)

Soket yang terjadi karena pencabutan gigi dapat dianggap sebagai bentuk

fraktur tulang (Lawler et al., 1992:17). Penyembuhan fraktur tulang adalah proses

regenerasi sel-sel tulang setelah terjadi luka atau trauma yang dipengaruhi oleh

beberapa faktor salah satunya suplai pembuluh darah dan mediator kimiawi yang

dilepaskan oleh sel-sel tulang, jaringan ikat, dan sel-sel inflamasi pada daerah yang

mengalami luka atau fraktur (Lukman,1997). Menurut Weinman dan Sicher, proses

penyembuhan tulang dibagi menjadi 6 tahap yaitu:

1. Penjendalan darah dari hematoma

Pada waktu terjadi luka, pembuluh darah dari sumsum tulang, cortex,

periosteum, otot-otot di sekitarnya dan jaringan lunak di dekatnya menjadi rusak atau

robek, sehingga terjadi hematoma yang memenuhi ujung-ujung tulang yang patah dan

meluas ke dalam sumsum tulang sampai kedalam jaringan lunak. Hematoma berisi

fragmen-fragmen dari periosteum, otot, fascia, tulang dan sumsum tulang. Fase ini

terjadi 6-8 jam sesudah trauma. Pada saat yang bersamaan tahap keradangan muncul

yang ditandai migrasi sel-sel inflamasi meliputi sel leukosit PMN sebagai fagositosis

bakteri yang dapat mengkontaminasi luka. Sel-sel nekrotik, jaringan, beserta serpihan

tulang yang mati akan dihancurkan oleh neutrofil dan osteoklas (Peterson, 1998:63,

Ardhiyanto,2007).

2. Organisasi darah dari hematoma

Terjadi pelepasan faktor pembekuan oleh trombosit sehingga terbentuklah

benang-benang fibrin yang akan membentuk hematoma pada celah di antara fragmen-

fragmen fraktur (Buckwalter dan Cruess dalam Lukman,1997). Tunas kapiler halus

yang baru terbentuk melakukan penetrasi ke tengah jendalan darah membentuk

neurovaskularisasi yang baru dalam waktu 24 48 jam. Proliferasi pembuluh darah

ini merupakan ciri khas dari permulaan organisasi hematoma. Kapiler-kapiler di

dalam sumsum tulang, kortex, dan periosteum akan menjadi ateri-arteri yang kecil

untuk memvaskularisasi tempat terjadinya luka. Jumlah ion Ca otomatis akan

bertambah oleh karena adanya kapiler yang banyak tersebut.

10

3. Pembentukan kallus fibrous

Proses penyembuhan terus berlangsung, jaringan granulasi yang akan

dibentuk dalam waktu 10 hari setelah terjadi luka. Jaringan granulasi ini terbentuk

oleh aktivitas fagositosis dan akan mengalami transformasi membentuk jaringan ikat

yang terdiri dari serabut-serabut kolagen. Jaringan ikat ini lebih kuat lagi

dibandingkan jaringan granulasi. Akhir dari fase ini adalah hiperemi dan ditandai

dengan pengurangan jumlah sel-sel fibroblas. Fibroblas peranannya akan lebih

penting yaitu memproduksi matriks fibrous di sekeliling ujung tulang yang rusak

yang terdiri dari serabut-serabut kolagen yang disebut kallus fibrous.

4. Pembentukan kallus primer

Kallus primer terbentuk antara 10-30 hari setelah terjadi kerusakan tulang. Sel

pembentuk tulang spesifik (osteoblas) mulai meletakan osteoid baru sebagai anyaman

tidak teratur yang kemudian mengalami mineralisasi untuk membentuk anyaman

tulang (kallus sementara) (Lawler et al.,1992:16). Kadar Ca pada kallus primer masih

sedikit, dikarenakan anyaman tulang ini akan digantikan kallus sekunder

(sebenarnya). Kallus primer dapat dibedakan berdasarkan tempat dan fungsinya,

yaitu:

a. Anchoring callus

Merupakan kallus yang terdapat pada permukaan luar tulang di dekat

periosteum, sedikit meluas dari tempat luka. Terdiri dari sel-sel jaringan ikat

fibrous yang baru dan berdiferensiasi menjadi osteoblas yang akan

membentuk tulang spongiosa

b. Sealing callus

Yaitu kallus yang terdapat pada permukaan dalam dari tulang dan akan

mengisi ruang sumsum. Kallus ini dibentuk dari proliferasi endosteal.

c. Bridging callus

Merupakan kallus yang terdapat di permukaan sebelah luar tulang, antara

anchoring callus pada dua ujung patahan. Kallus ini merupakan satu-satunya

unsur awal terbentuknya kartilago

11

d. Uniting callus

Merupakan kallus yang terdapat di antara ujung-ujung tulang dan di antara

tempat kallus primer yang telah terbentuk pada kedua ujung patahan. Kallus

ini terbentuk setelah kallus lainnya terbentuk dan pembentukannya yaitu

dengan kalsifikasi secara langsung

Resorbsi yang luas dari ujung tulang yang patah terjadi pada fase ini, tetapi

karena proses penulangan dari jaringan ikat lebih banyak pada tempat fraktur, dan

uniting callus terbentuk pada tempat resorbsi, sehingga terjadi penyambungan yang

baik pada ujung-ujung tulang yang rusak.

5. Pembentukan kallus sekunder

Kallus ini merupakan suatu tulang yang sudah mendekati sempurna sebagai

kelanjutan dari kallus primer. Kallus ini terbentuk melalui proses proliferasi sel-sel

osteoprogenitor (Hulth dalam Lukman,1997). Pada fase ini terjadi kalsifikasi tulang

yang sempurna sehingga pada rontgen foto sudah dapat dilihat gambaran radiopak

dari tulang. Kallus ini terdiri dari tulang beralur yang tahan terhadap tekanan. Proses

pembentukan kallus ini antara 20-60 hari setelah perlukaan.

6. Pembangunan fungsional dari tulang yang rusak (Remodelling)

Pembangunan dan penyempurnaan penyambungan tulang-tulang yang rusak

atau patah membutuhkan waktu berbulan-bulan, bahkan bertahun-tahun tergantung

pada tempat kerusakan, baik secara histologis maupun anatomis. Tahap ini

merupakan tahap penyembuhan luka yang terakhir. Deposit dan pembentukan tulang

dilakukan untuk mengisi soket alveolar. Tidak sampai 4-6 bulan setelah ekstraksi,

tepi tulang kortikal soket selesai diabsorbsi. Hal tersebut dapat dilihat dari

pemeriksaan radiografi dimana hilangnya lamina dura dan secara rontgenografi sudah

dapat dibedakan gambaran tulang baru dan tulang sekitar soket pasca pencabutan.

Setelah 1 tahun, yang terlihat dari soket adalah tepi soket dengan vaskularisasi dan

jaringan parut di daerah edentulous (Peterson, 1998:63).

12

2.4 Kolagen

2.4.1 Pengertian Kolagen

Kolagen merupakan komponen terbesar yang memperkuat dan mendukung

jaringan ekstraseluler, tersusun dari asam amino dan hidroksiprolin yang berperan

sebagai unsur biokimia jaringan kolagen (Robbins et al.,2007). Kolagen adalah

sekelompok protein struktural yang dimodifikasi secara bervariasi dalam hal derajat

kekakuan, kekenyalan, dan kekuatannya, bergantung pada pengaruh lingkungan dan

kebutuhan fungsional organ yang bersangkutan. Junqueira (1997:91) menambahkan,

kolagen merupakan salah satu komponen matriks jaringan penyambung yang juga

berperan dalam pertahanan organisme sebagai sawar fisik, yaitu mencegah

penyebaran mikroorganisme yang berhasil menembus epitel. Kolagen banyak

dijumpai pada tubuh manusia 30% dari berat keringnya (Junquiera et al.,1997:96).

Kolagen didapatkan pada semua jenis jaringan ikat dan terdiri atas protein kolagen

(Leeson et al., 1989:106).

2.4.2 Struktur dan Macam Kolagen

Pada sediaan tidak dipulas, kolagen berupa benang-benang tidak berwarna

berdiameter bervariasi antara 0,5 -10 m dengan panjang tidak terbatas, walaupun

beberapa serat dapat bergabung bersama membentuk suatu berkas yang berukuran

lebih besar. Sifat serabut kolagen lurus atau sedikit bergelombang, panjangnya tidak

tentu dan bisa dalam gabungan longgar atau padat tergantung tempat dan fungsinya.

Dalam keadaan segar kolagen bersifat lunak dan mudah dibengkokan, relatif tidak

elastis dan sangat kuat (Leeson et al., 1989:107). Pada sediaan histologi, kolagen

terpulas merah muda oleh eosin, biru dengan Trichrome Mallory, dan hijau dengan

pulasan Trichrome Masson (Fawcett, 2002:120).

Asam amino utama yang membentuk kolagen adalah glisin (33,5%), prolin

(12%), dan hidroksiprolin (10%). Hidroksiprolin dan hidroksilisin adalah 2 asam

amino yang khas pada kolagen. Unit protein berpolimerisasi membentuk serabut

13

kolagen merupakan molekul panjang yang disebut tropokolagen. Panjang molekul ini

280 nm, sedangkan lebarnya 1,5 nm yang terdiri dari 3 rantai subunit polipeptida

terpilin. Perbedaan struktur kimia inilah yang menyebabkan ada berbagai tipe kolagen

(Junqueira et al., 1997:96).

Gambar 2.2. Kolagen dengan warna biru menggunakan

pewarnaan Trichrome Mallory (Perbesaran 400x).

(Sumber: http://ars.els-cdn.com/content/image/1-s.jpg)

Menurut Fawcett (2002: 122-126), telah ditetapkan ada 12 tipe kolagen yaitu:

a. Tipe I, adalah kolagen yang terdapat di dermis, tulang, dan tendo. Serabut ini

berdiameter 50-90 nm, beragregrasi membentuk serat dan berkas dengan berbagai

ukuran. Seratnya fleksibel namun tahan terhadap regangan.

b. Tipe II, terdapat dalam tulang rawan hialin dan elastik. Kolagen ini berupa

serabut sangat halus terbenam dalam banyak substansi dasar

c. Tipe III, banyak terdapat pada jaringan ikat longgar, dinding pembuluh darah,

stroma bagian kelenjar, limpa, ginjal, dan uterus. Kolagen tipe I, II, dan III

membentuk serat yang tampak dengan mikroskop disebut dengan kolagen

interstsisial.

d. Tipe IV, merupakan bentukan khusus yang terdapat pada lamina basal epitel.

Bersama laminin dan proteoglikan heparan sulfat membentuk rapat filamen halus

yang merupakan penyokong fisik dari epitel dan sawar filtrasi selektif bagi

makromolekul.

14

e. Tipe V, tersebar luas tetapi hanya dalam jumlah kecil, berhubungan dengan

lamina sel otot dan pembuluh darah.

f. Tipe VI, molekul rantai pendek yang terdiri dari segmen tripel heliks dengan

panjang 100 nm. Kolagen ini terdapat dalam jumlah kecil yang dapat ditemukan

dalam ginjal, hati dan uterus.

g. Tipe VII, berhubungan dengan lamina basal banyak epitel, namun paling banyak

pada batas dermis dan epidermis. Molekunya terbesar dari famili kolagen yaitu

mencapai panjang 800 nm.

h. Tipe VIII, ditemukan pada produk sekresi sel endotel dan kadang-kadang disebut

kolagen endotelial. Kolagen ini berhubungan erat dengan permukaan sel, tetapi

manfaatnya masih belum jelas.

i. Tipe IX, terutama terdapat dalam tulang rawan. Kolagen ini mendampingi serat

kolagen tipe II dari jaringan ikat. Kolagen ini diduga mempertahankan susunan

tiga dimensi dari serat kolagen tipe II dalam matriks yang berfungsi sebagai

pengikat pada tempat pertemuan.

j. Tipe X, kolagen ini juga terdapat pada tulang rawan dan ditemukan dalam matriks

yang terlibat dalam pembentukan tulang endokondral dan diduga mengawali

kalsifikasi matriks.

k. Tipe XI, berhubungan dengan kolagen tipe II dalam tulang rawan namun

fungsinya belum diketahui secara jelas.

l. Tipe XII, tipe ini baru saja ditemukan menyerupai kolagen tipe IX namun sedikit

yang diketahui tentang lokasi dalam jaringan dan juga fungsinya.

2.4.3 Kolagen dalam Penyembuhan Luka

Kolagen disintesis di permukaan luka dalam jaringan granulasi. Secara

khusus, sintesis kolagen sangat penting untuk pengembangan kekuatan pada tempat

penyembuhan luka. Sintesis kolagen oleh fibroblas dimulai sejak awal proses

penyembuhan luka dan berlanjut selama beberapa minggu, bergantung pada ukuran

15

luka. Banyak faktor yang mengatur proliferasi fibloblas juga berperan dalam sintesis

serabut kolagen. Sintesis kolagen diinduksi oleh sejumlah molekul, meliputi faktor

pertumbuhan (PDGF dan TGF 1) (Robbins et al., 2007:78).

Pada awal penyembuhan luka, fibroblas akan mensintesa serabut kolagen tipe

III dan tipe V yang didapatkan pada daerah jaringan ikat dan pembuluh darah, tetapi

serabut kolagen tipe ini akan digantikan oleh serabut kolagen yang lebih kuat

menahan tekanan, yaitu tipe I melalui fase remodeling (Ostrum dalam Lukman,

1997). Selama proses penyembuhan, harus terjadi keseimbangan yang baik antara

pembentukan dan penghancuran kolagen (remodeling). Degradasi kolagen

diperantarai oleh enzim kolagenase, yang disekresikan oleh banyak sel seperti

makrofag dan sel epitel (Fonseca, 1997:29).

Gambar 2.3. Kolagen dalam penyembuhan luka

(Sumber: http://dentosca.wordpress.com/2011/04/18)

16

2.5 Kurkumin

2.5.2 Deskripsi Kurkumin

Kurkumin adalah zat warna kuning yang terdapat pada rimpang kunyit

maupun temulawak. Kurkumin mempunyai aroma khas, tidak toksik (tidak beracun),

dan berbentuk serbuk dengan rasa sedikit pahit. Dalam suasana asam, kurkumin

berwarna kuning atau jingga dan dalam suasana basa berwarna merah (Afifah,

2003:7-9).

Gambar 2.4. Struktur kimia kurkuminoid

(Sumber: http://hadyherbs.files.wordpress.com)

2.5.3 Manfaat Kurkumin

Kurkumin mempunyai aktivitas biologi bersprektum luas diantaranya

antibakteri, antioksidan, dan antihepatotoksik (Rukmana, 1994:16). Selain itu zat

aktif ini dapat juga digunakan sebagai obat analgetik dan antiinflamasi (Syukur dan

Hernani, 2001:76). Kurkumin terbukti dapat digunakan sebagai antiinflamasi pada

mencit yang diinduksi karagen. Efek antiinflamasi ditunjukan dengan berkurangnya

volume edema kelompok yang diberi kurkumin dibandingkan kelompok tanpa

17

kurkumin. Hal tersebut membuktikan sifat kurkumin sebagai salah satu bahan aktif

yang dapat menekan reaksi radang (Yanwirasti,2007). Melalui aktifitas anti-

inflamasinya, kurkumin efektif untuk mengobati penyakit radang sendi, rematik, atau

atritis rematik (Afifah, 2003:10). Kemampuan kurkumin sebagai antiinflamasi yaitu

melalui penghambatan enzim siklooksigenase yang berperan dalam metabolisme

asam arakhidonat menjadi prostaglandin sehingga menekan reaksi radang (Dewhirst

dalam Orbaniyah et al., 2003).

2.5.4 Kurkumin terhadap Proses Penyembuhan Luka

Perawatan menggunakan kurkumin pada proses penyembuhan luka pada

hewan terbukti meningkatkan jumlah makrofag, neutrofil, dan fibroblas dibandingkan

hewan tanpa perawatan sehingga dapat menunjang proses reepitelisasi pada jaringan

yang mengalami luka (Sidhu et al., 1998). Penelitian lain juga menunjukan

pemberian salep yang mengandung kurkumin dapat mempercepat proses

penyembuhan luka pada mencit yang diinduksi diabetes. Pemberian salep tersebut

terbukti dapat mengurangi proses peradangan, mempercepat pembentukan pembuluh

darah baru (neurovaskularisasi), proses reepitelisasi dan pembentukan jaringan ikat

(Winarsih et al., 2009).

2.5.5 Kurkumin terhadap Serabut Kolagen

Kurkumin merupakan agen terapeutik berspektrum yang luas yang banyak

digunakan pada proses penyembuhan luka. Kurkumin berinteraksi dengan

meningkatkan kolagen pada kulit (Dhathathreyan et al., 2009). Pewarnaan Trichrome

Masson menunjukkan deposisi kolagen yang lebih besar dalam luka yang diobati

kurkumin. Terjadi peningkatan transkrip mRNA membentuk faktor pertumbuhan

beta1 (TGF 1) dan fibronektin pada luka yang diobati kurkumin. Dikarenakan

pembentukan faktor pertumbuhan beta-1 dikenal meningkatkan penyembuhan luka,

dimungkinkan bahwa perubahan pembentukan faktor pertumbuhan beta-1 inilah yang

18

berperan penting dalam peningkatan penyembuhan luka dengan kurkumin. Hal

tersebut ditunjukan dengan semakin meningkatnya pembentukan serabut kolagen

pada proses penyembuhan luka (Sidhu et al., 1998).

2.6 Kerangka Konseptual Penelitian

Keterangan:

= mengakibatkan

= pemberian

Trauma (Kerusakan Jaringan)

Pencabutan gigi

Proses penyembuhan

Fase Inflamasi

Fase Fibroplastik

Fase Remodeling

Ekstrak Kurkumin

Meningkatkan

TGF 1

Pembentukan

Serabut Kolagen +++

Respon Tubuh

19

Salah satu tindakan bedah yang sering dijumpai di klinik kedokteran gigi

adalah ekstraksi yang dapat menimbulkan kerusakan pada jaringan sekitarnya.

Kemudian tubuh akan merespon yang dinamakan peradangan, yaitu suatu proses

yang melibatkan rangkaian aktifitas enzim, pelepasan mediator, ekstravasasi cairan,

dan perbaikan jaringan. Kemudian dilanjutkan tahap penyembuhan yang cukup

kompleks karena melewati beberapa fase antara lain, fase inflamasi, fase fibroplastik,

dan fase remodeling.

Rimpang kunyit mengandung kurkumin yang mempunyai aktivitas biologi

bersprektum luas yang rendah efek samping (Rukmana, 1994). Dalam hal ini

pemberian kurkumin secara tidak langsung dapat berpengaruh terhadap proses

penyembuhan jaringan dikarenakan kurkumin dapat meningkatan pembentukan

faktor pertumbuhan beta1 (TGF 1) dan fibronektin pada luka. Kolagen merupakan

bagian utama jaringan ikat yang diperlukan pada keadaan penyembuhan luka,

pembentukan jaringan parut, serta pembentukan matriks tulang.

2.7 Hipotesis

1. Terdapat peningkatan pembentukan kolagen pada soket gigi tikus Wistar

setelah pemberian kurkumin pasca pencabutan


berdasarkan variasi lama pemberian kurkumin pasca pencabutan

20

BAB 3. METODE PENELITIAN

3.1 Jenis Penelitian

Penelitian ini merupakan penilitian eksperimental laboratoris. Rancangan

penelitian ini adalah post test only control group design yaitu melakukan

pengukuran setelah perlakuan diberikan, kemudian hasilnya dibandingkan dengan

kelompok kontrol (Notoatmodjo, 2002:167).

3.2 Tempat dan Waktu Penelitian

3.2.1 Tempat Penelitian

Penelitian dilakukan di Laboratorium Biomedik Fakultas Kedokteran Gigi

Universitas Jember

3.2.2 Waktu Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Oktober 2012 Desember 2012

3.3 Variabel Penelitian

3.3.1 Variabel Bebas

a. Pemberian kurkumin

b. Lama pemberian kurkumin

3.3.2 Variabel Terikat

Kepadatan serabut kolagen pada soket pasca pencabutan gigi

21

3.3.3 Variabel Terkendali

a. Kurkumin

b. Kriteria sampel

c. Prosedur penelitian

3.4 Definisi Operasional Penelitian

a. Kurkumin adalah ekstrak pigmen kuning yang diperoleh dari kunyit atau

temulawak. Kurkumin yang digunakan dalam penelitian ini berbentuk serbuk

sudah jadi dalam kemasan yaitu Curcumin for synthesis merk Schuchardt

OHG 85662 buatan Jerman, kemudian diencerkan dengan larutan salin tiap 1

hari sekali.

b. Pencabutan gigi adalah tindakan pengambilan gigi dari soketnya. Dalam

penelitian ini dilakukan pencabutan gigi molar 1 kiri bawah tikus wistar

jantan menggunakan sonde, ekskavator dan pinset. Gigi diungkit dengan

sonde dan ekskavator setelah tikus dianastesi.

c. Kepadatan serabut kolagen adalah gambaran mikroskopik serabut kolagen

dengan warna biru yang terlihat pada sediaan yang dibuat dari soket atau

jaringan granulasi pasca pencabutan dengan pewarnaan Trichrome Mallory

perbesaran 400x.

3.5 Sampel Penelitian

3.5.1 Sampel Penelitian

Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus Wistar jenis kelamin

jantan yang dipelihara di Laboratorium Biomedik FKG Universitas Jember.

22

3.5.2 Besar Sampel

Jumlah sampel yang digunakan dalam penelitian ini berdasarkan rumus

Daniel (2005)

n = Z

d

Keterangan:

n = Besar sampel minimun

= Standart deviasi sampel

d = Kesalahan yang masih dapat ditoleransi, diasumsikan d=

Z = Konstanta pada tingkat kesalahan tertentu, jika =0.05 maka Z=1,96

Sampel minimal yang digunakan dalam penelitian ini berdasarkan rumus di atas

adalah 4 (Lampiran A). Untuk meminimalisir resiko kematian 20%, pada masing-

masing kelompok ditambahkan 1 sampel lagi sehingga didapatkan masing-masing

kelompok berjumlah 5 sampel dan total sampel menjadi 20 ekor.

3.5.3 Kriteria sampel

Kriteria sampel dalam penilitian ini adalah:

a. Tikus putih jantan galur Wistar

b. Tikus dengan umur 2-3 bulan

c. Tikus dengan berat badan 200-250 gram

d. Tikus dalam keadaan sehat

3.6 Konversi Penghitungan Dosis

Menurut penelitian yang dilakukan Robin (2006), kurkumin dengan dosis

9mg/0,2ml salin, 2x sehari dapat memacu terjadinya regenerasi jaringan tulang rawan

yang rusak pada tikus yang terinduksi osteoatritis. Sedangkan menurut penelitian

Cheng et al. (dalam Wang et al, 2007) pemberian 50-800 mg/hari kurkumin secara

oral memberikan efek farmakokinetik terhadap pasien resiko tumor mukosa rongga

23

mulut. Tonessen dan Karisen (dalam Robin, 2006) melaporkan kurkumin dengan

dosis 750 mg/kg BB tidak menimbulkan efek toksik. Sehingga dalam penelitian ini,

menggunakan dosis tengah yaitu 500 mg/hari.

Dosis kurkumin:

Konversi dosis manusia (70kg) ke tikus (200gr) = 0,018

Dosis kurkumin manusia per hari = 500 mg

Dosis kurkumin pada tikus per hari = 0,018 x 500 mg

= 9 mg/200gr BB

Dosis Ketalar:

Menggunakan Ketamin 1000 (KTM 1000)

Dosis yang diberikan pada tikus yaitu 20-40 mg/kg BB (Kusumawati, 2004:99)

Berat tikus yang digunakan = 200 250g

Dosis ketalar = 20 40 mg x 200 250g/1000

= 4 10 mg

= 0,004 0,01g

= 0,004 0,01ml

Jadi dosis ketalar yang diberikan pada tikus dengan berat badan 200 250 gram

adalah 0,004 0,01ml

3.7 Alat dan Bahan

3.7.1 Alat

a. Kandang tikus

b. Timbangan Berat badan tikus (OneMed)

c. Timbangan digital (Boeco Germany)

d. Sarung tangan Latex dan masker

e. Gelas ukur (Pyrex)

f. Sonde lambung

24

g. Disposible syringe (Terumo)

h. Eskavator (Caredent)

i. Sonde lurus dan setengah bulat (Dentica)

j. Scalpel dan blade (OneMed)

k. Pinset kedokteran gigi (Dentica)

l. Tempat jaringan

m. Cotton pellet

n. Deck glass dan object glass

o. Mikroskop binokuler (Leica)

p. Peralatan untuk pembuatan preparat jaringan

3.7.2 Bahan

a. Kurkumin (Schuchardt OHG 8566)

b. Saline steril pH netral

c. Tikus Wistar jantan

d. Larutan ketalar (KTM 1000)

e. Aquades steril

f. Alkohol

g. Trichrome Mallory

h. Formalin 10%

i. Parafin

j. Meyer egg albumin

k. Canada balsam

l. Asam formiat 10%

25

3.8 Prosedur Kerja

3.8.1 Persiapan Hewan Coba

Tikus Wistar terlebih dahulu diadaptasikan dengan kondisi lingkungan. Tikus

ditempatkan di sebuah kandang dan diberi makanan standar selama 1 minggu.

3.8.2 Persiapan Kurkumin

Kurkumin sudah tersedia dalam bentuk serbuk yaitu Curcumin for synthesis

(merk Schuchardt OHG 85662) buatan Jerman. Kurkumin diencerkan sesuai dosis

yang sudah ditentukan, yaitu sebanyak 9 mg/200gram BB menggunakan 0,5ml

saline/sonde.

3.8.3 Pengelompokan dan Perlakuan Hewan Coba

Tikus Wistar jantan dengan berat 200-250 gram dan berumur 2-3 bulan

sebanyak 20 ekor dibagi menjadi 2 kelompok, yaitu:

1. Kelompok I, merupakan kelompok kontrol yang terdiri dari 10 ekor tikus Wistar

jantan yang dibagi menjadi 2 sub kelompok, masing-masing sub kelompok terdiri

dari 5 ekor tikus. Pada hari pertama, tikus dianastesi general dengan injeksi

ketalar di sekitar paha, kemudian dilakukan pencabutan gigi molar satu bawah

kirinya dan diberi larutan saline (placebo), satu kali sehari selama 7 hari untuk

sub kelompok Ia dan 14 hari untuk sub kelompok Ib secara intra gastrik dengan

menggunakan sonde lambung.

Sub kelompok Ia : pada hari ke-7, 5 hewan coba didekaputasi, kemudian

diambil rahang bawah kirinya, selanjutnya dibuat sediaan

jaringan.

Sub kelompok Ib : pada hari ke-14, 5 hewan coba didekaputasi, kemudian


jaringan.

26

2. Kelompok II, merupakan kelompok perlakuan yang terdiri dari 10 ekor tikus

Wistar jantan yang dibagi menjadi 2 sub kelompok, masing-masing sub kelompok

terdiri dari 5 ekor tikus. Pada hari pertama tikus dianastesi general dengan injeksi

ketalar di sekitar paha kemudian dilakukan pencabutan gigi molar satu bawah

kirinya dan diberi kurkumin, satu kali sehari selama 7 hari untuk sub kelompok

IIa dan 14 hari untuk sub kelompok IIb secara intra gastrik dengan menggunakan

sonde lambung.

Sub kelompok IIa : pada hari ke-7, 5 hewan coba didekaputasi, kemudian


jaringan.

Sub kelompok IIb : pada hari ke-14, 5 hewan coba didekaputasi, kemudian

diambil rahang bawahnya, selanjutnya dibuat sediaan

jaringan.

3.8.4 Tahap Pencabutan Gigi Tikus

Pencabutan gigi molar bawah rahang kiri dilakukan pada masing-masing

kelompok yang ditentukan dibawah pengaruh anastesi ketalar. Anastesi yang

digunakan adalah anastesi secara general yang dilakukan dengan cara injeksi ketalar

menggunakan disposible syringe insulin di sekitar paha tikus. Pencabutan gigi

dilakukan menggunakan ekskavator dan sonde setengah bulat, dilakukan secara hati-

hati dengan arah dan gerakan yang menimbulkan trauma minimal dan gigi dapat

tercabut secara sempurna (Risqah,2007).

3.8.5 Tahap Pembuatan Preparat Jaringan

a. Dilakukan pengambilan rahang bawah kiri tikus pasca pencabutan gigi molar

satu bawah kiri untuk dibuat preparat jaringan.

b. Jaringan difiksasi menggunakan larutan formalin 10% untuk mempertahankan

morfologi sel dan mencegah pertumbuhan jamur

27

c. Proses dekalsifikasi menggunakan larutan asam formiat 10% selama 7 hari

untuk melepaskan bahan anorganik tulang tanpa merusak protein yang ada.

Setelah proses dekalsifikasi selesai, maka dilakukan pencucian dengan air

untuk menghilangkan bekas bahan dekalsifikasi.

d. Dehidrasi menggunakan alkohol yang konsentrasinya meningkat sampai

alkohol absolut. Tahapan dehidrasi antara lain:

alkohol 70% : 15 menit

alkohol 80% : 1 jam

alkohol 95% : 2 jam

alkohol 100% : 1 jam

alkohol 100% : 1 jam

e. Proses clearing yaitu proses penjernihan jaringan menggunakan bahan-bahan

clearing. Bahan yang digunakan di Laboratorium Histologi Fakultas

Kedokteran Gigi Universitas Jember yaitu xylol. Tahap ini dilakukan

sebanyak tiga kali pada tiga tabung yang berbeda dengan ketentuan waktu

sebagai berikut:

Xylol I : 1 jam

Xylol II : 2 jam

Xylol III : 2 jam

f. Tahap Impregnasi yaitu proses infiltrasi bahan embedding ke dalam jaringan

pada suhu 56-60C. Caranya jaringan dibungkus menggunakan kertas saring

yang sudah diberi label, kemudian dimasukan kedalam paraffin cair (TD 56-

60C). Tahapan impregnasi antara lain :

Paraffin 1 : 2 jam

Paraffin 2 : 2 jam

Paraffin 3 : 2 jam

28

g. Penanaman dalam parafin (Embedding)

Merupakan proses penanaman jaringan ke dalam suatu bahan embedding.

Laboratorium Histologi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember

menggunakan paraffin sebagai bahan untuk embedding. Tahapan embedding

antara lain:

1) Alat cetak yang terbuat dari logam berbentuk siku-siku disusun diatas

permukaan kaca. Alat diolesi gliserin untuk mempermudah pemisahan alat

cetak dengan blok parafin yang sudah beku.

2) Parafin cair dalam dua wadah, yaitu untuk bahan embedding dan parafin

sebagai media penyesuaian temperatur yang akan ditanam.

3) Parafin cair pada tempat pertama dituangkan ke dalam alat cetak hingga

penuh kemudian jaringan ditanam pada posisi sedemikian rupa sehingga

didapatkan penampang jaringan dengan arah pemotongan secara koronal.

h. Tahap penyayatan jaringan

1) Penyayatan menggunakan mikrotom, sebelumnya bersihkan pisau

mikrotom dengan kasa/kertas saring yang telah dibasahi dengan xylol

dengan arah tegak lurus.

2) Mengatur ketebalan sayatan mikrotom sebesar 6 mikron

3) Mengambil sayatan yang telah diperoleh dengan kuas kemudian sayatan

diletakkan diatas permukaan air waterbath dengan temperatur 56-60C

hingga sayatan mekar. Sayatan yang diambil oleh peneliti adalah

potongan ke-5, ke-6, dan ke-7 untuk mendapatkan keseragaman,

4) Mengambil sayatan yang sudah mekar menggunakan object glass yang

telah diolesi dengan meyer egg albumin. Selanjutnya dikeringkan dengan

slide warmer minimal 12 jam dengan suhu 30-35C

(Syafriadi et al., 2007)

29

3.8.6 Tahap Pewarnaan Trichrome Mallory

Tahapan pewarnaan dengan Mallory adalah sebagai berikut:

a. Sediaan dilakukan deparafinisasi dengan menggunakan larutan clearing yaitu

sediaan dimasukkan kedalam xylol dalam 3 wadah masing-masing selama 3

menit

b. Kemudian dilakukan rehidrasi yaitu sediaan dimasukan ke dalam alkohol

bertingkat (100%, 90%, 70%) masing-masing selama 3 menit dan kemudian

dicuci dengan air mengalir

c. Object glass direndam ke dalam larutan Mallory 1 yang berisi acid fuchsine

0,5gr dan aquades 100cc selama 3 menit kemudian dicuci dengan air mengalir

d. Object glass kemudian direndam ke dalam larutan Mallory 2 yang berisi

Phosphomolibdic acid 1gr dan aquades 100cc selama 5 menit kemudian

dicuci dengan air mengalir

e. Object glass kemudian direndam ke dalam larutan Mallory 3 yang berisi

aniline blue 0,5gr, orange G 2,0gr, oxalic acid 1,0gr dan aquades 100cc

selama 2 menit kemudian dicuci dengan air mengalir

f. Irisan jaringan dilakukan dehidrasi dengan alkohol bertingkat 70%, 95%, dan

100% , selanjutnya dikeringkan

g. Proses clearing pada jaringan dengan cara direndam dalam xylol, tiga kali

dalam wadah yang berbeda masing-masing selama 3 menit

h. Proses mounting menggunakan Canada balsem dan ditutup dengan gelas

penutup

(Ardiyanto, 2012)

3.8.7 Penghitungan Peningkatan Pembentukan Serabut Kolagen

Data diperoleh dari pengamatan preparat histologis dengan bantuan

mikroskop binokuler. Pertama-tama menentukan daerah soket menggunakan

perbesaran 40x, selanjutnya menentukan daerah yang diamati menggunakan

30

perbesaran 400x, dilihat pada daerah 1/3 apikal soket. Penilaian dilakukan dengan

cara membandingkan gambaran histologis serabut kolagen antara kelompok kontrol

dan perlakuan. Gambaran pada kelompok kontrol digunakan sebagai indikator

menentukan ada tidaknya peningkatan pembentukan serabut kolagen. Selanjutnya

peningkatan pembentukan serabut kolagen dimasukan kriteria skor yang sudah

ditentukan sebagai berikut (Robin,2006):

Skor 0 =Tidak terjadi peningkatan pembentukan serabut kolagen (sama dengan

kelompok kontrol)

Skor 1 =Terjadi peningkatan pembentukan serabut kolagen sedikit; apabila ketebalan

serabut kolagen kurang dari lebar jarak antar serabut kolagen

Skor 2 =Terjadi peningkatan pembentukan serabut kolagen sedang; apabila ketebalan

serabut kolagen sama dengan lebar jarak antar serabut kolagen

Skor 3 =Terjadi peningkatan pembentukan serabut kolagen banyak; apabila ketebalan

serabut kolagen lebih lebar daripada lebar jarak antar serabut kolagen

Skor 1 Skor 2 Skor 3

Gambar 3.1. Serabut kolagen berdasarkan kriteria (perbesaran 40x)

(Sumber: Rachmawati et al.dan Robin,2006)

31

3.9 Alur Penelitian

5 ekor

hari ke7

5 ekor

hari ke14

5 ekor

hari ke14

5 ekor

hari ke7

Pengambilan

Jaringan

Diberi Larutan saline

(plasebo) tiap hari

Populasi Tikus Wistar

(20 ekor)

Pencabutan hari ke1

Kelompok Kontrol

(10 ekor tikus putih)

Dekaputasi

Kelompok Perlakuan

(10 ekor tikus putih)

Pencabutan hari ke1

Diberi Ekstrak

Kurkumin tiap hari

Dekaputasi

Pengamatan

Pembuatan Preparat Jaringan

Analisis Data

Kesimpulan

32

BAB 4. HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Oktober-Desember 2012 di

Laboratorium Biomedik Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember. Sampel

penelitian berjumlah 20 ekor tikus wistar jantan yang dibagi menjadi 2 kelompok

yaitu kelompok pertama yang dilakukan pencabutan gigi, kemudian diberi larutan

saline (plasebo) sebagai kontrol dan kelompok kedua yaitu kelompok perlakuan yang

diberi kurkumin secara sondasi sebanyak 9 mg/200gBB/0,5ml saline. Kemudian

dilakukan pengamatan terhadap 20 preparat histologis dengan dengan cara

membandingkan gambaran histologis serabut kolagen antara kelompok kontrol dan

kelompok perlakuan pada pengamatan hari ke-7 maupun hari ke-14. Gambaran

histologis serabut kolagen pada kelompok kontrol digunakan sebagai indikator

menentukan terjadinya peningkatan pembentukan kolagen atau tidak pada kelompok

perlakuan. Sedangkan untuk menentukan terjadinya peningkatan pembentukan

serabut kolagen berdasarkan lamanya waktu pemberian kurkumin menggunakan

gambaran histologis serabut kolagen pada hari ke-7 sebagai indikator. Kemudian

peningkatan pembentukan kolagen yang terjadi dimasukkan dalam kriteria yang

sudah ditentukan. Hasil pengamatan tersebut didapatkan gambaran sebagai berikut:

33

A.1 A.2

A.3 A.4

Gambar 4.1.Kepadatan serabut kolagen pada kelompok kontrol hari ke-7 (A.1), kelompok

perlakuan hari ke-7 (A.2), kelompok kontrol hari ke-14 (A.3), dan kelompok

perlakuan hari ke-14 (A.4) (perbesaran 400x)

Pada gambar 4.1 terlihat adanya perbedaan kepadatan serabut kolagen antara

kelompok kontrol dan perlakuan baik pada pengamatan hari ke-7 maupun hari ke-14.

Gambaran histologis serabut kolagen pada kelompok kontrol terlihat lebih tipis

dibandingkan serabut kolagen pada kelompok perlakuan pada hari yang sama. Hal

ini menunjukan terdapat peningkatan pembentukan serabut kolagen. Setelah

dilakukan pengukuran terhadap tebal dan jarak antar serabut kolagen, didapatkan

hasil yaitu tebal serabut kolagen = jarak antar serabut kolagen. Artinya terjadi

peningkatan pembentukan serabut kolagen kategori sedang.

Kelompok perlakuan pada hari ke-7 dan hari ke-14 tidak terlihat adanya

perbedaan kepadatan serabut kolagen. Walaupun pada pengamatan hari ke-14 serabut

34

kolagen yang terbentuk terlihat lebih tebal dibandingkan pengamatan hari ke-7 tetapi

jarak antar serabut juga lebih lebar. Hal ini menunjukan tidak terdapat peningkatan

pembentukan serabut kolagen berdasarkan lama waktu pemberian kurkumin.

B.1 B.2

B.3 B.4

Gambar 4.2.Kepadatan serabut kolagen pada kelompok kontrol hari ke-7 (B.1), kelompok

perlakuan hari ke-7 (B.2), kelompok kontrol hari ke-14 (B.3), dan kelompok

perlakuan hari ke-14 (B.4) (perbesaran 400x)

Pada gambar 4.2 juga terlihat adanya perbedaan kepadatan serabut kolagen

antara kelompok kontrol dan kelompok perlakuan pada pengamatan hari ke-7 dan

hari ke-14, tetapi kepadatan serabut kolagen pada kelompok perlakuan pada setiap

sampel terlihat bervariasi (gambar A.2 dan B.2) pembentukan kolagen hari ke-7 dan

variasi pembentukan kolagen hari ke-14 (gambar A.4 dan B.4). Serabut kolagen pada

gambar B.2 dan B.4 lebih tebal dibandingkan serabut kolagen pada gambar A.2 dan

35

A.4. Gambaran histologis serabut kolagen seperti di atas di dapatkan pada beberapa

sampel perlakuan yang diamati. Hal ini menunjukan terjadi peningkatan

pembentukan serabut kolagen tetapi dalam kategori banyak yaitu tebal serabut

kolagen > jarak antar serabut kolagen. Sedangkan antara kelompok perlakuan hari ke-

7 dan ke-14 tidak didapatkan perbedaan kepadatan serabut kolagen. Artinya tidak

terdapat peningkatan pembentukan serabut kolagen berdasarkan lama waktu

pemberian kurkumin.

4.2 Pembahasan

Setelah pencabutan gigi, soket gigi pasca pencabutan yang terdiri dari tulang

korteks dilapisi ligamen periodontal yang rusak dengan epitel gingiva yang berada di

bagian koronal, akan terisi oleh darah yang berkoagulasi, dan proses perbaikan

jaringan akan dimulai (Peterson,1998). Nayak (2006) menyatakan bahwa proses

perbaikan jaringan yang luka tergantung pada sirkulasi darah di daerah yang

mengalami luka tersebut. Pada proses penyembuhan luka, akan terbentuk proliferasi

jaringan fibroblas yang diikuti dengan pembentukan dan deposisi kolagen. Pada

jaringan normal serabut kolagen dibentuk dan didegradasi dalam keadaan seimbang.

Setelah terjadi luka tingkat sintesis serabut kolagen akan meningkat, kemudian proses

degradasi dan penyimpanan serabut kolagen akan dilakukan untuk memberikan

kekuatan dan integritas luka tanpa menimbulkan jaringan parut yang berlebihan

(fibrosis) (Fonseca, 1997).

Pada pengamatan secara histologis, jika dibandingkan antara kelompok

kontrol dan kelompok perlakuan pada pengamatan hari ke-7 dan ke-14 terlihat adanya

perbedaan ekspresi pembentukan serabut kolagen, dimana pada kelompok kontrol

serabut kolagen hari ke-7 sampai dengan hari ke-14 terlihat masih tipis (skor 1 s/d

skor 2), sedangkan pada kelompok perlakuan mulai hari ke-7 sampai dengan hari ke-

14 serabut kolagen terlihat dari agak padat sampai dengan padat (skor 2 s/d skor 3).

Hal ini disebabkan oleh efek dari pemberian kurkumin setelah pencabutan.

36

Pemberian kurkumin diduga berperan dalam proses pembentukan serabut

kolagen pada soket pasca pencabutan. Hal tersebut sesuai dengan penelitian Sidhu et

al. (1998) dan Suguna et al. (2006), kurkumin mampu menstimulasi produksi faktor

pertumbuhan (TGF 1) oleh makrofag. TGF 1 ini akan berfungsi meningkatkan

migrasi dan proliferasi sel fibroblas pada daerah luka. Keberadaan fibroblas inilah

yang bertanggung jawab meningkatan produksi fibronektin dan pembentukan serabut

kolagen. Selain itu TGF 1 juga menyebabkan meningkatnya formasi jaringan

granulasi pada awal penyembuhan luka (Ostrum et al. dalam Lukman, 1997), hal ini

terlihat pada gambaran histologis B.2 (kelompok perlakuan). Terlihat jaringan

granulasi dengan pembentukan kapiler-kapiler yang banyak dibandingkan kelompok

kontrol hari sampai hari ke-7 (gambar B.1).

Transforming Growth Factor 1 (TGF 1) memiliki berbagai fungsi yaitu

antara lain menstimulasi pembentukan pembuluh darah, sintesis matriks

ekstraselluler, inhibisi pertumbuhan sel, dan juga migrasi sel (Robbins et al., 2007).

TGF 1 memperluas ekspresi gen matriks secara spesifik dengan menghambat

aktifitas produksi dan aktifitas kolagenase sehingga terjadi stimulasi deposisi kolagen

(Schwartz, 1994). Hal tersebut dapat menyebabkan terbentuk serabut kolagen yang

kuat dan matang pada luka yang diterapi dengan kurkumin (Suguna et al.,2006).

Berdasarkan lama pemberian kurkumin pada proses penyembuhan luka,

antara 7 hari dibanding 14 hari pemberian menunjukan tidak terdapat perbedaan

gambaran histologis kepadatan serabut kolagen. Beberapa sampel menunjukan

gambaran histologis serabut kolagen yang agak padat dan beberapa menunjukan

kolagen yang padat baik pada pengamatan hari ke-7 maupun hari ke-14. Walaupun

serabut kolagen pada pengamatan hari ke-14 (gambar B.4) terlihat lebih teratur

dengan varkularisasi yang berkurang dibandingkan pengamatan hari ke-7 (gambar

B.2 ), tetapi pembentukan serabut kolagen tidak menunjukan terjadinya peningkatan.

Hal ini diduga pada hari ke-7 maupun hari ke-14 pasca pencabutan, pembentukan

matriks fibrous di soket pasca pencabutan yang terdiri dari serabut-serabut kolagen

yang disebut callus fibrous sudah cukup, sehingga yang terjadi setelah 14 hari pasca

37

pencabutan adalah fase maturasi jaringan (Peterson,1998:63; Ardhiyanto,2007). Fase

ini akan dilanjutkan ke fase penyembuhan berikutnya seiring berjalanya waktu

dimana akan dibentuk soft callus maupun hard callus (Hult dalam Lukman,1997).

Hasil penelitian ini menunjukan pemberian kurkumin secara intraoral pasca

pencabutan gigi tikus dapat meningkatkan pembentukan jaringan granulasi yang

diikuti dengan meningkatnya proliferasi fibroblas dan deposisi serabut kolagen baik

pada hari ke-7 maupun ke-14 dibandingkan kelompok tanpa pemberian kurkumin,

artinya hipotesis alternatif yang disimpulkan peneliti diterima. Akan tetapi,

pemberian kurkumin selama 14 hari pasca pencabutan gigi tidak menunjukan adanya

peningkatan pembentukan serabut kolagen dibandingkan pemberian kurkumin selama

7 hari pasca pencabutan. Hal ini tidak sesuai dengan dugaan sementara (hipotesis)

yang disimpulkan peneliti sebelum penelitian dilaksanakan.

38

BAB 5. KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan


setelah pemberian kurkumin pasca pencabutan gigi. Mekanisme pembentukan

serabut kolagen pada soket gigi oleh kurkumin melalui aktifitas TGF 1.

2. Tidak terdapat peningkatan pembentukan kolagen pada soket gigi tikus Wistar

berdasarkan variasi lama waktu pemberian kurkumin pasca pencabutan

5.2 Saran

1. Hasil penelitian ini diharapkan dapat digunakan sebagai pertimbangan

pengembangan kurkumin sebagai alternatif pengobatan luka dalam upaya

meningkatkan kesehatan gigi dan mulut

2. Perlu penelitian lebih lanjut terhadap durasi waktu pemberian kurkumin yang

efektif pada masa penyembuhan luka pasca pencabutan gigi

DAFTAR BACAAN

Afifah, E. 2003. Khasiat dan Manfaat Temulawak. Jakarta: AgroMedia Pustaka.

Ardhiyanto, H.B. 2007. Proses Penyembuhan Luka Post Ekstraksi Gigi.

Stomatognatic (J.K.G), 4 (2): 60-65.

Chen, Kasper, Heck, dan Nakagawa. 2005. Tissue Factor as a Link between

Wounding and Tissue Repair. Diabetes, 54.

Daniel, W.W. 2005. Biostatistic a Foundation for Analysis in the health Science,

eight edition. Georgia: John Willey dan Sons, Inc.

Dhathathreyan, Fathima, Devi, dan Rekha. 2009. Collagen curcumin interaction A physic chemical study. J.Chem.Sci. 121 (4), 509-514. Indian Academy of Sciences.

Dorland, W.A.N. 2002. Kamus Kedokteran Dorland. Edisi 29. Alih Bahasa:

Huriawati H., dkk. Jakarta: EGC.

Fawcett, D.W. 2002. Buku Ajar Histologi. Ed.12. Alih Bahasa: Jan Tambayong.

Judul Asli: A Textbook of Histology. Jakarta: EGC.

Fonseca, R.J dan Walker, R.V. 1997. Oral dan Maxillofacial Trauma. 2nd

Edition.

Philadelphia: W.B.Sounders Company.

Howe, G.L. 1995. Pencabutan Gigi Geligi. Ed.2. Alih Bahasa: Sianita. Judul Asli:

The Extraction of Teeth. Jakarta: EGC.

Junqueira, L.C, Carneiro, J., Kelley, R.O. 1997. Histologi Dasar. Ed.8. Alih Bahasa:

Jan Tambayong. Judul Asli: Basic Histology. Jakarta: EGC.

Katzung, B.G. 1997. Farmakologi Dasar dan Klinik. Ed.6. Alih Bahasa: Staf Dosen

Farmakologi Fakultas Kedokteran UNSRI. Judul Asli: Basic dan Clinical

Pharmacology. Jakarta: EGC.

Kohli, Ali, Ansari, dan Raheman. 2005. Curcumin: A natural antiinflammatory agent.

Indian J Pharmacol. 37 (3): 141-147.

Kusumawati, D. 2004. Bersahabat dengan Hewan Coba. Yogyakarta; Gadjah Mada

University Press.

Lawler, W., Ahmed, A., dan Hume, W.J. 1992. Buku Pintar Patologi untuk

Kedokteran Gigi. Cetakan I. Alih bahasa: Agus Djaya. Jakarta: EGC.

40

Leeson C.R, Leeson T.S, dan Paparo A.A. 1989. Buku Teks Histologi. Ed.5. Alih

Bahasa: Yan Tambayong, dkk. Jakarta: EGC.

Lukman, K. 1997. Penyembuhan Patah Tulang Ditinjau dari Sudut Ilmu Biologi

Molekuler. Buletin IKABI, 4 (1): 29-46. Jawa Barat: UNPAD.

Mawardi, H., Dalimi, L., dan Darmosumarto, S. 2002. Pengaruh Pemberian Ekstrak

Propolis Secara Lokal pada Proses Pembentukan Serabut Kolagen Pasca

Pencabutan Gigi marmot (Cavia cobaya). Sains Kesehatan, 15 (2): 171-184.

Yogyakarta: UGM.

Miller, A.L. dan MacKay, D. 2003. Nutrional Support for Wound Healing.

Alternative Medicine Riview, 8 (4): 359-377.

Mulawarmanti, D. 2005. Fungsi Arginin dalam Proses Penyembuhan Luka di

Jaringan Rongga Mulut. Majalah Kedokteran Gigi. Edisi Khusus Temu Ilmiah

Nasional IV: 175-178. Surabaya: FKG Hang Tuah.

Nayak, B. S. dan Pereira, L. M. 2006. Catharanthus Roseus Flower Extract Has

Wound-healing Activity in Sprague Dawley Rats. Complementary &

Alternative Medicine. http://www.biomedcentral.com/1472-6882/6/41

Notoatmodjo, S. 2002. Metodologi Penelitian Kesehatan. Jakarta: Rineka Cipta.

Orbaniyah, S., Ismadi, M., dan Oetari. 2003. Kemampuan Menghambat dan Sifat

Hambatan Analog Kurkumin terhadap Aktivitas Enzim Siklooksigenase. Sains

Kesehatan, 16 (1): 29-39. Yogyakarta: UGM.

Peterson, L.J. 1998. Contemporary Oral dan Maxillofacial Surgery. 3rd

edition.

Editor: Edward E, James R.H, Myron R.T. USA: Von Hoffman Press.

Rachmawati, Setyaningsih, Mandala, Dewi, Novita. Reepitelisasi, Kepadatan

Fibroblas dan Serabut Kolagen pada Proses Penyembuhan Luka Gingiva Labial

Tikus Sparague dawley Setelah pemberian Topikal Ekstrak Buah Adas

(Foeniculum vulgare Mill.) 50%. Yogyakarta: UGM.

Rizqah, N. 2007. Kepadatan Kolagen Jaringan Granulasi Pasca Pencabutan Gigi

Tikus Wistar Jantan pada Pemberian seduhan Mahkota Dewa (Phaleria

papuana Warb. Var. Wichanii (Val.) Back). Skripsi. UNEJ: FKG.

Robbins, S.L. dan Kumar, V.1992. Buku Ajar Patologi 1. Edisi 4. Jakarta:EGC.

Robbins, S.L, Cotran, R.S, dan Kumar, V. 2007. Buku Ajar Patologi Robbins. Edisi

7. Alih bahasa: Awal Prasetyo, Brahm U dan Toni Priliono. Jakarta: EGC.

41

Robin, D.M.C. 2006. Pengaruh Kurkuminoid terhadap Perbaikan Tulang Rawan

Sendi Temporomdanibula Tikus yang Terinduksi Osteoatritis. Stomatognatic

(Jurnal Kedokteran Gigi). Edisi Khusus Forkinas 2: 55-59. Jember: UNEJ.

Rukmana, R. 2001. Kunyit. Yogyakarta: Kanisius.

Schwartz, S I. 1994. Intisari Prinsip-prinsip Ilmu Bedah. Edisi 6. Alih Bahasa: Linda

Chandranata. Jakarta: EGC

Sidhu, Singh, Thaloor, Banaudha, Patnaik, Srimal, dan Maheswari. 1998.

Enhancement of wound healing by curcumin in animals. Abstrak. 6(2):167-77.

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9776860.

Singer, A.J. dan Clark, R.A.F. 1999. Cutaneus Wound Healing. The New England

Journal of Medicine. New York:

Suguna, Panchatcharam, Miriyala, dan Gayathri. 2006. Curcumin Improves Wound

Healing by Modulating Collagen dan Decreasing Reactive Oxygen Species.

Abstrak. Molecular dan Cellular Biochemistry Journal. 290:87-96.

Syafriadi, Kusumawardani, Setyorini, dan Joelianto. 2007. Petunjuk Praktikum Patologi Anatomi: Degenerasi dan Radang. Tidak Diterbitkan. Buku Petunjuk Praktikum. Jember: Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember.

Syukur, C. dan Hernani. 2001. Budidaya Tanaman Obat Komersial. Jakarta:

Swadaya.

Wahab, A.S. dan Julia, M. 2002. Sistem Imun, Imunisasi, dan Penuyakit Imun.

Jakarta: Widya Medika.

Wang, Jacob, Wu, dan Zhou. 2007. Mechanism of the Anti-inflamatory Effect of

Curcumin: PPAR- Activation. PPAR Research. Vol.2007. Hindawi Publishing Corporation.

Winarsih, Handharyani, Estuningsih, dan Widhyari. 2009. Kajian aktivitas Ekstrak

Rimpang Kunyit (Curcuma tonga) dalam Proses Persembuhan Luka pada

Mencit sebagai Model Penderita Diabetes. Seminar Hasil Penelitian. Bandung:

IPB.

Yanwirasti, Rustam, E., dan Atmasari, I. 2007. Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol

Kunyit (Curcuma domestica Val.) pada Tikus Putih Galur Wistar. Jurnal Sains

dan Teknologi Farmasi, 12 (2): 112-115. Universitas Danalas.

http://hadyherbs.files.wordpress.com/2011/12/kurkuminoid-1.jpg

http://labspace.open.ac.uk/mod/resource/view.php?id=388786

42

http://dentosca.wordpress.com/2011/04/18/peran-fibroblas-pada-proses-

penyembuhan-luka/

http://ars.els-cdn.com/content/image/1-s.jpg

43

Lampiran A. Penghitungan Besar Sampel

Penghitungan besar sampel penelitian menggunakan rumus (Daniel, 1991),

yaitu:

n = Z

d

Keterangan:

n = Besar sampel minimun

= Standart deviasi sampel

d = Kesalahan yang masih dapat ditoleransi, diasumsikan d=

Z = Konstanta pada tingkat kesalahan tertentu, jika =0.05 maka Z=1,96

Sehingga jika dihitung sebagai berikut:

n = Z

n = (1,96)

n = 3,84

n = 4 (dibulatkan)

44

Lampiran B

B.1. Nilai peningkatan pembentukan serabut kolagen pada soket pasca

pencabutan pada pengamatan hari ke-7 dan ke-14 setelah pemberian

kurkumin

Kelompok Kode

sampel

Tebal

Serabut

Kolagen

dalam cm

(t)

Jarak antar

Serabut

Kolagen

dalam cm

(r)

Keterangan

Nilai

Peningkatan

Pembentukan

Serabut

Kolagen

Perlakuan

hari ke-7

7f 0, 40 0, 40 t = r 2

7g 0, 30 0, 30 t = r 2

7h 0, 70 0, 23 t > r 3

7i 0, 36 0, 36 t = r 2

7j 0, 79 0, 26 t > r 3

Perlakuan

hari ke-14

14f 0, 53 0, 26 t > r 3

14g 0, 43 0, 43 t = r 2

14h 0, 59 0, 40 t > r 3

14i 0, 43 0, 43 t = r 2

14j 0, 83 0, 40 t > r 3

Keterangan: pengukuran tebal dan jarak serabut kolagen dilakukan menggunakan

program CorelDRAW Graphich Suite 12 pada foto preparat perbesaran

400x

45

Lampiran C. Alat dan bahan yang digunakan dalam penelitian

Timbangan analitik Timbangan neraca

Catatan :

a. Ketamin b. Cottonroll c. Pinset d. Ekskavator e. Sonde setengah lingkaran

f. Parafin g. Sonde lambung h. Disposible syringe insulin 1ml i. Gunting j. Pinset anatomis k. Scalpel

46

Catatan :

1. Haematoksilin 2. Meyer egg albumin 3. Entelan 4. Eosin 5. Object glass 6. Deck glass 7. Xylol

8. parafin 9. formalin 10. alkohol 11. gliserin 12. spirtus

Catatan :

1. Pinset 2. Holder 3. Kuas 4. Gunting 5. Embedding cassette

6. Sampel 7. Histologycal basket 8. Bunsen 9. Counter 10. Cassette

47

Kurkumin yang digunakan Trichrome Mallory

dalam penelitian

Mikrotom Waterbath Inkubator

Slide warmer Mikroskop binokuler

48

Tikus wistar umur 2 bulan Penyuntikan Ketamin

Pencabutan molar kiri rahang bawah Gigi tikus yang diambil dari soket

pada tikus

Keadaan intraoral tikus Keadaan ekstraoral tikus

pasca pencabutan pasca pencabutan

naskah skripsi.pdf

Documents