multiplikasi tunas suweg (amorphophallus paeoniifolius ... · tumbuhan kebun raya bogor, selama 4...

47
MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius (Dennst.) Nicolson) DENGAN ZAT PENGATUR TUMBUH BAP DAN NAA SECARA KULTUR JARINGAN TANTRI ANDARI DEPARTEMEN KONSERVASI SUMBERDAYA HUTAN DAN EKOWISATA FAKULTAS KEHUTANAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2013

Upload: hoangnguyet

Post on 08-Mar-2019

273 views

Category:

Documents


9 download

TRANSCRIPT

Page 1: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

MULTIPLIKASI TUNAS

SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius (Dennst.) Nicolson)

DENGAN ZAT PENGATUR TUMBUH BAP DAN NAA

SECARA KULTUR JARINGAN

TANTRI ANDARI

DEPARTEMEN

KONSERVASI SUMBERDAYA HUTAN DAN EKOWISATA

FAKULTAS KEHUTANAN

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

2013

Page 2: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

RINGKASAN

TANTRI ANDARI. Multiplikasi Tunas Suweg (Amorphophallus paeoniifolius

(Dennst.) Nicolson) dengan Zat Pengatur Tumbuh BAP dan NAA Secara

Kultur Jaringan. Dibimbing oleh EDHI SANDRA dan YUPI ISNAINI.

Pemanfaatan suweg (Amorphophallus paeoniifolius) di Indonesia dikenal

sejak masa penjajahan Jepang sebagai bahan pangan alternatif sumber

karbohidrat. Suweg bermanfaat untuk penderita diabetes, pencernaan, stimulan

hati (liver), dan menambah nafsu makan. Pembudidayaan suweg dilakukan

dengan menanam mata tunas pada kulit umbi, mata tunas utama dari umbi, umbi

seutuhnya, anakan dari umbi, dan tanaman muda suweg. Namun terdapat kendala

dengan cara tersebut yaitu habitat tempat tumbuh, waktu penanaman, dan kualitas

yang dihasilkan tidak seragam. Sehingga perlu upaya budidaya lain yaitu dengan

teknik kultur jaringan. Berdasarkan penelitian Isnaini et al. (2012), kultur jaringan

suweg menghasilkan tunas yang sedikit sehingga perlu diteliti lebih lanjut agar

menghasilkan tunas yang banyak dalam satu kalus. Penelitian dilakukan dengan

penambahan Zat Pengatur Tumbuh (ZPT) NAA dan BAP yang berpotensi untuk

pertumbuhan tunas lebih banyak. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui

pengaruh pemberian ZPT BAP dan NAA dalam multiplikasi tunas suweg.

Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan Pusat Konservasi

Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga

September 2012. Percobaan ini dirancang dengan menggunakan rancangan

percobaan faktorial dua faktor dengan dasar rancangan acak lengkap (RAL).

Faktor pertama adalah konsentrasi BAP dengan empat taraf yaitu 0 mg/l, 1 mg/l, 2

mg/l, dan 3 mg/l. Faktor yang kedua yakni konsentrasi NAA dengan empat taraf

yaitu 0 mg/l, 0.25 mg/l, 0.5 mg/l, dan 0.75 mg/l. Pengamatan yang dilakukan yaitu

eksplan yang mengalami pencoklatan, kontaminasi (bakteri dan jamur), warna

kalus, tekstur kalus, jumlah tunas, dan jumlah akar.

Hasil penelitian menunjukkan persentase keberhasilan eksplan hidup

sebesar 94.17% atau 226 eksplan. Kontaminasi oleh bakteri dan jamur sebesar

2.08% atau 5 eksplan, serta pencoklatan sebesar 3.75% atau 9 eksplan. Eksplan

bertekstur kompak sebesar 34.58% dan tekstur remah sebesar 63.33%.

Pertumbuhan akar terbanyak terdapat pada perlakuan 1 mg/l BAP + 0.75 mg/l

NAA sejumlah 2.87 akar/minggu. Jumlah tunas terbanyak pada perlakuan 1 mg/l

BAP + 0.25 mg/l NAA yaitu 0.47 tunas/minggu.

Kesimpulan penelitian ini bahwa multiplikasi tunas terjadi pada tiga

eksplan yaitu pada perlakuan 1 mg/l BAP + 0.25 mg/l NAA, 3 mg/l BAP + 0.5

mg/l NAA, dan 3 mg/l BAP + 0.75 mg/l NAA.

Kata kunci: suweg, kultur jaringan, BAP, NAA, tunas.

Page 3: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

SUMMARY

TANTRI ANDARI. Multiplication of Suweg’s Shoot (Amorphophallus

paeoniifolius (Dennst.) Nicolson) with Plant Growth Regulators BAP and

NAA According to Tissue Culture. Under supervision of EDHI SANDRA and

YUPI ISNAINI.

The utilization of suweg (Amorphophallus paeoniifolius) in Indonesia has

been known since the Japanese colonial period as source of carbohydrate. Suweg

is beneficial for diabetes, digestion, liver, and increase appetite. The cultivation of

suweg is by planting its eye shoot of tuber’s skin, the main eye shoot of tuber, the

whole tuber, sapling from the tuber, and seedling. But, there are some problems

with that technique which are the habitat where it grows, planting time, and the

quality of the result is not uniform. So another cultivation effort is needed which

is tissue culture. Based on Isnaini et al. (2012), tissue culture of suweg produces

few shoots so it needs further study in order to produce many shoots in a callus.

This research was done by the addition of Plant Growth Regulators (PGR) NAA

and BAP that is potential for shoot growth. The aim of this study is to determine

the effect of BAP and NAA in suweg shoot multiplication.

This research was conducted at the Laboratory of Plant Tissue Culture

Conservation Centre Bogor Botanical Garden, from June until September 2012.

The research was designed by using a two-factor factorial experimental design on

the basis of completely randomized design (CRD). The first factor is the

concentration of BAP with four levels which are 0 mg/l, 1 mg/l, 2 mg/l, and 3

mg/l. The second factor is the NAA concentrations with four levels which are 0

mg/l, 0.25 mg/l, 0.5 mg/l, and 0.75 mg/l. Observed was done to explants

browning, contamination (bacteria and fungi), callus color, callus texture, number

of shoot, and the number of roots.

The result shows the percentage of successful explant survival is 94.17%

or 226 explants. Contamination by bacteria and fungi are 2.08 or 5 explants, and

browning are 3.75% or 9 explants. Explant with compact texture is 34.58% and

explant with crumb texture is 63.33%. The most root growth was found in the

treatment of 1 mg /1 BAP + 0.75 mg/l NAA is 2.87 root/ week. The highest

number of shoot in the treatment of 1 mg/l BAP + 0.25 mg/l NAA is 0,47 shoot/

week.

The conclusion of this study is that the shoot multiplication was occurred

in three explants, which are in the treatment of 1 mg l BAP + 0.25 mg/l NAA, 3

m/l BAP + 0.5 mg/l NAA and 3 mg/l BAP + 0.75 mg/l NAA.

Keywords : suweg, tissue culture, BAP, NAA, shoots.

Page 4: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

MULTIPLIKASI TUNAS

SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius (Dennst.) Nicolson)

DENGAN ZAT PENGATUR TUMBUH BAP DAN NAA

SECARA KULTUR JARINGAN

TANTRI ANDARI

Skripsi

Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kehutanan pada

Departemen Konservasi Sumberdaya Hutan dan Ekowisata

Fakultas Kehutanan Institut Pertanian Bogor

DEPARTEMEN

KONSERVASI SUMBERDAYA HUTAN DAN EKOWISATA

FAKULTAS KEHUTANAN

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

2013

Page 5: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

PERNYATAAN

Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi yang berjudul Multiplikasi

Tunas Suweg (Amorphophallus paeoniifolius (Dennst.) Nicolson) dengan Zat

Pengatur Tumbuh BAP dan NAA secara Kultur Jaringan adalah benar-benar hasil

karya saya sendiri dengan bimbingan dosen pembimbing dan belum pernah

digunakan sebagai karya ilmiah pada perguruan tinggi atau lembaga manapun.

Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun

tidak diterbitkan dari penulis telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam

daftar pustaka di bagian akhir skripsi ini.

Bogor, Februari 2013

Tantri Andari

E34080047

Page 6: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

Judul Skripsi : Multiplikasi Tunas Suweg (Amorphophallus paeoniifolius

(Dennst.) Nicolson) dengan Zat Pengatur Tumbuh BAP dan

NAA secara Kultur Jaringan Nama : Tantri Andari

NIM : E34080047

Menyetujui,

Mengetahui,

Ketua Departemen Konservasi Sumberdaya Hutan dan Ekowisata

Fakultas Kehutanan Institut Pertanian Bogor,

Prof. Dr. Ir. Sambas Basuni, MS.

NIP. 19580915 198403 1 003

Tanggal Lulus :

Pembimbing I,

Ir. Edhi Sandra, M.Si

NIP. 19661019 199303 1 002

Pembimbing II,

Yupi Isnaini, S.Si, M.Si

NIP. 19711227 200604 2 002

Page 7: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT karena berkat

rahmat dan karunia-Nya, penulis mampu menyelesaikan skripsi yang berjudul

Multiplikasi Tunas Suweg (Amorphophallus paeoniifolius (Dennst.) Nicolson)

dengan Zat Pengatur Tumbuh BAP dan NAA secara Kultur Jaringan. Skripsi ini

disusun guna memenuhi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana

Kehutanan pada Departemen Konservasi Sumberdaya Hutan dan Ekowisata,

Fakultas Kehutanan, Institut Pertanian Bogor.

Penyusunan skripsi ini diharapkan dapat memberikan informasi mengenai

pengaruh pemberian zat pengatur tumbuh BAP dan NAA dalam multiplikasi

tunas. Selain itu, juga memberikan acuan mengenai konsentrasi zat pengatur

tumbuh BAP dan NAA yang efektif untuk keberhasilan tumbuh tunas.

Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan dalam penulisan

skripsi ini. Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang dapat

membangun dalam penyempurnaan skripsi ini. Akhir kata, semoga penulisan

skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi semua pihak.

Bogor, Februari 2013

Penulis

Page 8: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Bogor 18 Oktober 1990 sebagai

anak ketiga dari tiga bersaudara pasangan Bapak Suwarno

dan Ibu Cicilia Sri Sudarti. Penulis memulai pendidikan di

TK Syntha Kampus IPB Darmaga pada tahun 1995,

kemudian melanjutkan ke SD Negeri Babakan Dramaga 3

pada tahun 1996 sampai dengan tahun 2002. Pada tahun 2002

hingga 2005 penulis melanjutkan pendidikan di SMP Negeri

4 Bogor dan selanjutnya di SMA Negeri 2 Bogor pada tahun 2005 hingga tahun

2008. Penulis melanjutkan pendidikan ke perguruan tinggi di Institut Pertanian

Bogor melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI) pada tahun 2008 dan

diterima sebagai mahasiswi Departemen Konservasi Sumberdaya Hutan dan

Ekowisata, Fakultas Kehutanan.

Selama menjadi mahasiswi di IPB penulis aktif di organisasi Gentra

Kaheman pada divisi infokom pada tahun 2009-2010. Organisasi Himpunan

Mahasiswa Konservasi Sumberdaya Hutan dan Ekowisata (HIMAKOVA) sebagai

anggota biro kekeluargaan pada tahun 2009-2010 dan anggota biro kewirausahaan

pada tahun 2010-2011 serta Kelompok Pemerhati Flora (KPF) sebagai anggota

pada tahun 2009-2010 dan sebagai bendahara pada tahun 2010-2011. Selain itu

penulis aktif dalam organisasi International Forestry Student and Assosiation

(IFSA) LC-IPB pada tahun 2009-2010 sebagai anggota kesekretariatan dan pada

tahun 2010-2011 sebagai anggota Public Relation (PR).

Adapun praktek lapang yang pernah diikuti penulis yaitu Praktek

Pengenalan Ekosistem Hutan (P2EH) di Cagar Alam Gunung Papandayan-

Sancang Barat Kabupaten Garut pada tahun 2010, Praktek Pengelolaan Hutan

(P2H) di Hutan Pendidikan Gunung Walat (HPGW) pada tahun 2011, dan Praktek

Kerja Lapang di Taman Nasional Gunung Gede Pangrango (TNGGP) pada tahun

2012.

Page 9: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

UCAPAN TERIMA KASIH

Segala puji bagi Allah SWT yang telah memberikan hidayah, karunia, cinta

dan kasih sayang sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini. Pada

kesempatan ini penulis ingin mengucapkan terima kasih yang setulus-tulusnya

kepada :

1. Ibu Cicilia Sri Sudarti, Bapak Suwarno, Mas Bondan Winarno, Mbak Sri

Lestari, Mas Bondan Dwinarto, Teh Roshanty, Naila, Fadel, Ayu, Adit

atas kasih sayang dan dukungan yang telah diberikan.

2. Bapak Ir. Edhi Sandra, M.Si beserta keluarga dan Ibu Yupi Isnaini, S.Si,

M.Si selaku dosen pembimbing yang telah memberikan bimbingan,

nasehat, dan dukungan selama penulis melakukan penelitian dan

penyusunan skripsi.

3. Ibu Eva Rachmawati, S.Hut, M.Si selaku ketua sidang dan Bapak Dr. Ir.

Buce Saleh, MS selaku dosen penguji yang telah memberikan saran dan

kritik yang membangun.

4. Seluruh pihak Laboratorium Kultur Jaringan Pusat Konservasi Tumbuhan

LIPI-Kebun Raya Bogor: Teh Irma, Bu Popi, Bu Tini, Mba Rita, Bu Lisa,

Mba Fitri, Pak Darso, dan Pak Sulur.

5. Teman seperjuangan penelitian Fitriyana Insani atas kebersamaan susah

dan senangnya selama di Laboratorium Kultur Jaringan.

6. Sahabat-sahabatku Ajeng, Soraya, Dina, Siti Munawaroh, Rayhani, Kiki,

Fitria, Lucia, Rizka, Septi, Trisma, Ela, Amel, Nindy, dan Andien.

7. Saudari-saudariku selama 9 tahun kebersamaan Yuthika, Dea, Amatur,

Kiki, Fitria, dan Nita.

8. Arya Windujati yang selalu memberi dukungan dan doa selama menyusun

skripsi.

9. Teman-teman seperjuangan di Laboratorium Konservasi Tumbuhan Obat.

10. Kepada seluruh pihak yang telah membantu penulis dan tidak dapat

penulis sebutkan satu persatu.

Page 10: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

DAFTAR ISI

Halaman

DAFTAR ISI ............................................................................................ i

DAFTAR TABEL .................................................................................... iii

DAFTAR GAMBAR ................................................................................ iv

DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................ v

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang.................................................................... 1

1.2 Tujuan ................................................................................ 3

1.3 Hipotesis ............................................................................. 3

1.4 Manfaat .............................................................................. 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Suweg (Amorphophallus paeoniifolius) .............................. 4

2.1.1 Bioekologi suweg (Amorphophallus paeoniifolius) .... 4

2.1.2 Manfaat suweg (Amorphophallus paeoniifolius) ......... 6

2.2 Perbanyakan Suweg (Amorphophallus paeoniifolius) ......... 7

2.2.1 Perbanyakan konvensional ......................................... 7

2.2.2 Kultur jaringan ........................................................... 7

2.2.3 Manfaat kultur jaringan .............................................. 8

2.3 Kultur Jaringan Amorphophallus......................................... 8

2.4 Karakteristik BAP dan NAA ............................................... 9

BAB III METODE PENELITIAN

3.1 Lokasi dan Waktu ............................................................... 11

3.2 Alat dan Bahan ................................................................... 11

3.3 Prosedur Kerja .................................................................... 12

3.3.1 Sterilisasi alat ............................................................. 12

3.3.2 Sterilisasi lingkungan kerja ........................................ 12

3.3.3 Pembuatan media tanam ............................................. 12

3.3.4 Penanaman/ subkultur ................................................ 13

3.4 Rancangan Percobaan ......................................................... 13

3.5 Pengambilan Data ............................................................... 14

3.6 Analisis Data ...................................................................... 14

Page 11: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

ii

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Tingkat Keberhasilan Kultur dan Gangguannya .................. 16

4.2 Pengaruh Pemberian BAP dan NAA ................................... 17

4.2.1 Warna kalus ............................................................... 17

4.2.2 Tekstur kalus .............................................................. 20

4.2.3 Jumlah akar ................................................................ 21

4.2.4 Jumlah tunas .............................................................. 23

4.3 Peran Kultur Jaringan Suweg (Amorphophallus

paeoniifolius) dalam Konservasi ......................................... 26

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan......................................................................... 28

5.2 Saran .................................................................................. 28

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................... 29

Page 12: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

iii

DAFTAR TABEL

No Halaman

1 Interaksi faktor jenis zat pengatur tumbuh dengan konsentrasinya ........... 13

2 Jumlah akar suweg pada setiap perlakuan ................................................ 21

3 Jumlah tunas suweg pada setiap perlakuan .............................................. 24

Page 13: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

iv

DAFTAR GAMBAR

No Halaman

1 Suweg di alam (a) Tumbuhan suweg (b) Batang suweg (c) Daun suweg .. 5

2 Umbi suweg (a) Umbi suweg beserta mata tunas (b) Mata tunas

(c) Bagian dalam umbi suweg ................................................................. 5

3 Buah dan Bunga suweg ........................................................................... 6

4 Kondisi eksplan (a) Kontaminasi oleh bakteri (b) Kontaminasi oleh

Jamur (c) Pencoklatan (browning) ........................................................... 17

5 Warna eksplan pada awal penanaman (a) Cokelat tua (b) Putih

(c) Hijau muda (d) Kombinasi coklat dan hijau muda .............................. 18

6 Warna eksplan pada waktu (a) 5 MST (b) 12 MST .................................. 18

7 Eksplan pada perlakuan (a) 0 mg/1 BAP + 0.5 mg/1 NAA

(b) 3 mg/ 1 BAP + 0.75 mg/1 NAA ......................................................... 19

8 Tekstur kalus suweg (a) Remah (b) Kompak ........................................... 20

9 Eksplan menghasilkan akar lebih dari satu pada satu kalus (a) Tampak

samping (b) tampak depan ....................................................................... 23

10 Eksplan bertunas pada 3 MST (a) Muncul tunas merubah warna kalus

seluruhnya menjadi putih (b) Muncul dengan pembengkakan ................. 23

11 Multiplikasi tunas pada perlakuan (a)1 mg/1 BAP + 0.25 mg/1 NAA

tampak atas (b)1 mg/1 BAP + 0.25 mg/1 NAA dari tampak samping

(c) 3 mg/1 BAP + 0.5 mg/1 NAA (d) 3 mg/1 BAP + 0.75 mg/1 NAA

(e) 3 mg/1 BAP + 0.5 mg/1 NAA (f) 3 mg/1 BAP + 0.75 mg/1 NAA ...... 25

12 Hasil pengamatan visual pada perlakuan (a) 2 mg/l BAP +

0.75 mg/l NAA (b) 2 mg/l BAP + 0.25 mg/l NAA ................................... 26

13 Produk makanan dari umbi suweg (a) Onde-onde suweg dan

(b) Onde-onde suweg dalam kemasan. .................................................... 27

Page 14: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

v

DAFTAR LAMPIRAN

No Halaman

1 Hasil sidik ragam (Anova) respon perlakuan BAP dan NAA terhadap

jumlah akar ............................................................................................. 32

2 Hasil sidik ragam (Anova) respon perlakuan BAP dan NAA terhadap

jumlah tunas ............................................................................................ 32

3 Komposisi media Murashige and Skoog (MS) ......................................... 32

Page 15: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Tumbuhan banyak dimanfaatkan untuk memenuhi kebutuhan sehari-hari

sebagai sumber pangan. Masyarakat banyak memanfaatkan tumbuhan karena

tersedia di alam. Umumnya, masyarakat memanfaatkan tumbuhan sebagai sumber

vitamin dan mineral. Namun, pemanfaatan tumbuhan yang mengandung

karbohidrat sebagai bahan pangan pokok masih terbatas. Masyarakat masih

mengonsumsi nasi sebagai sumber pangan pokok padahal terdapat beberapa jenis

tumbuhan yang memiliki fungsi sama dengan nasi yaitu umbi-umbian. Umbi-

umbian dimanfaatkan oleh masyarakat ketika mereka tidak mampu membeli beras

padahal, umbi-umbian memiliki kandungan yang lebih baik dari nasi. Jenis umbi-

umbian yang sering dimanfaatkan oleh masyarakat antara lain ubi jalar, ubi kayu,

dan talas. Sedangkan yang jarang dimanfaatkan adalah suweg (Amorphophalus

paeoniifolius). Suweg memiliki keunggulan untuk dimanfaatkan dan terdapat di

hutan primer Indonesia.

Pemanfaatan suweg sebagai bahan pangan di Indonesia dikenal sejak masa

penjajahan Jepang sebagai bahan pangan alternatif sumber karbohidrat (Pitojo

2007). Suweg dapat menjadi bahan pangan alternatif untuk penderita diabetes

karena kandungan karbohidrat yang rendah yaitu 23.18% (Faridah et al. 2007).

Nilai karbohidrat yang rendah menjadikan penderita diabetes cepat kenyang.

Selain itu, suweg baik untuk pencernaan dan menstimulasi hati (Nugroho 2007).

Suweg terdapat di hutan dataran rendah dan di pekarangan rumah.

Keberadaan suweg di sekitar lingkungan belum dibudidayakan oleh masyarakat

karena mereka tidak mengetahui fungsi suweg tersebut. Pembudidayaan suweg

dilakukan oleh sebagian orang yang mengetahui yaitu dengan menanam umbinya.

Namun terdapat kendala dengan cara tersebut yaitu habitat tempat tumbuh perlu

disesuaikan dengan tempat aslinya. Waktu penanaman perlu diperhatikan yaitu

ketika musim hujan. Selain itu, kualitas yang dihasilkan dari anakan tidak

seragam. Sehingga perlu adanya upaya budidaya yang dapat dilakukan yaitu

dengan teknik kultur jaringan. Keuntungan teknik kultur jaringan yaitu dapat

Page 16: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

2

menghasilkan tanaman dalam jumlah banyak dan waktu yang relatif singkat.

Teknik kultur jaringan efektif diterapkan karena memiliki beberapa keunggulan,

yaitu produksi cepat dan bebas penyakit, penyedia plasma nutfah, tanaman yang

dihasilkan seragam dan tidak membutuhkan ruang yang luas.

Kultur jaringan terhadap iles-iles (Amorphophallus muelleri) telah

dilakukan oleh Mayasari (2007) yang berasal dari tunas A. muelleri yang sudah

disubkultur dan menghasilkan tunas dengan baik. Hu dan Li (2007) melakukan

kultur jaringan A. albus dengan menggunakan zat pengatur tumbuh NAA

(Napthaleneacetic Acid) dan 6-BA (Benzyladenine), menghasilkan pertumbuhan

kalus dengan cepat. Kultur jaringan terhadap beberapa jenis Amorphophallus

dilakukan oleh Isnaini et al. (2012) yaitu A. muelleri, A. paeoniifolius, dan A.

variabilis untuk percepatan tumbuh kalus dan tunas. Penelitian Isnaini et al.

(2012) dilakukan dengan media dan zat pengatur tumbuh yang baik yaitu media

Murasighe and Skoog (MS)+ 1 mg/l NAA+ 1 mg/l BAP dan media Murasighe

and Skoog (MS)+ 2 mg/l BAP + 0.5 mg/l NAA. Amorphophallus muelleri dan A.

variabilis menghasilkan beberapa tunas dari setiap kalus, sedangkan A.

paeoniifolius hanya memunculkan satu tunas dari setiap kalus.

Kultur jaringan A. paeoniifolius perlu diteliti lebih lanjut berdasarkan

penelitian Isnaini et al. (2012) agar menghasilkan tunas yang banyak dalam satu

kalus seperti pada A. muelleri. Penelitian yang dapat dilakukan dengan

mengombinasikan penggunaan Zat Pengatur Tumbuh (ZPT) BAP dan NAA yang

berpotensi untuk pertumbuhan tunas lebih banyak.

Penambahan zat pengatur tumbuh (ZPT) pada kultur jaringan diperlukan

karena senyawa pada ZPT berperan untuk merangsang pertumbuhan serta

perkembangan sel, jaringan, dan organ tanaman menuju arah diferensiasi tertentu.

Zat pengatur tumbuh yang ditambahkan dalam media adalah BAP dan NAA. BAP

adalah salah satu jenis sitokinin yang berfungsi untuk meningkatkan pembelahan

sel pada jaringan tanaman serta mengatur pertumbuhan dan perkembangan

tanaman (Zulkarnain 2009). Sedangkan NAA adalah salah satu jenis auksin yang

dalam media kultur berfungsi untuk meningkatkan embriogenesis somatik pada

kultur suspensi sel (Zulkarnain 2009).

Page 17: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

3

1.2 Tujuan

Tujuan penelitian ini untuk mengetahui pengaruh pemberian zat pengatur

tumbuh BAP dan NAA dalam multiplikasi tunas suweg.

1.3 Hipotesis

Pemberian zat pengatur tumbuh NAA dan BAP dengan konsentrasi yang

berbeda mempengaruhi pertumbuhan kalus menjadi tunas.

1.4 Manfaat

Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi mengenai

teknik kultur jaringan dengan penggunaan zat pengatur tumbuh yang efektif.

Page 18: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Suweg (Amorphophallus paeoniifolius)

2.1.1 Bioekologi suweg (Amorphophallus paeoniifolius)

Araceae terdiri dari 106 genus yang meliputi lebih dari 3.300 jenis, dan

Indonesia merupakan kawasan yang memiliki keanekaragaman paling besar

sekitar 31 genus (Tjahyani 2010). Jenis yang terdapat di Indonesia salah satunya

adalah suweg (Amorphophallus paeoniifolius) dengan taksonomi sebagai berikut:

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Kelas : Monocotiledoneae

Ordo : Arales

Famili : Araceae

Genus : Amorphophallus

Spesies : Amorphophallus paeoniifolius (Dennst.) Nicolson

Suweg (Amorphophallus paoeniifolius) merupakan sinonim dari

Amorphophallus campanulatus, elephant yam (Inggris), beles (Sunda), dan sobek

(Madura), termasuk dalam famili talas-talasan (Araceae) memiliki daun yang

terletak di ujung tangkainya, daun majemuk terbagi dalam 3 cabang, jumlah

helaian daun tergantung pertumbuhan tanaman, dan berwarna hijau (Pitojo 2007).

Ukuran daun dari kecil hingga besar dengan diameter sampai satu meter. Tangkai

daun muda berwarna hijau muda berbelang putih panjangnya 50-150 cm (Deptan

2002), Sedangkan tangkai daun tua berwarna hijau tua berbelang putih atau

berwarna hijau kecoklatan berbelang putih keabu-abuan. Pada ujung tangkai daun

tidak terdapat umbi tetas, bubil, atau matak (Gambar 1). Suweg memiliki umbi

berbentuk bulat, berkulit cokelat kemerahan, daging umbi berwarna kemerah-

merahan, ukuran kecil hingga besar dengan berat mencapai 7.5 kg (Gambar 2).

Page 19: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

5

(a)

(b)

(c)

Gambar 1 Suweg di alam (a) Tumbuhan suweg, (b) Batang suweg, dan (c) Daun

suweg.

(a)

(b)

(c)

Gambar 2 Umbi suweg (a) Umbi suweg beserta mata tunas, (b) Mata tunas, dan

(c) Bagian dalam umbi suweg.

Bunga muncul setelah daun hilang dari permukaan tanah, terdiri atas

tangkai bunga, seludang, dan tongkol (Gambar 3a). Tongkolnya berbau tidak enak

terdiri dari 3 bagian, yaitu bagian bawah bunga betina, bagian tengah bunga

jantan, dan bagian atas adalah bagian bunga yang mandul (LIPI 1980). Buah

suweg sulit ditemukan karena bunga akan layu dan rusak setelah mekar beberapa

hari dan kematangan bunga jantan dan betina tidak serentak sehingga jarang

terjadi pembuahan (Gambar 3b).

By: isnaini

By: isnaini

Page 20: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

6

(a)

(b)

Gambar 3 (a) Bunga dan (b) Buah suweg.

Suweg berasal dari Asia tropika, tersebar di Malesia mulai dari Jawa,

Filipina sampai ke Pasifik. Tumbuh di daerah vegetasi sekunder, di tepi-tepi hutan

dan belukar, hutan jati, hutan desa, dengan ketinggian tempat mencapai 800 meter

dpl dan suhu antara 25-35°C (Deptan 2002). Jenis tersebut tumbuh dan

berkembang paling baik pada curah hujan 1000-1500 mm selama masa

pertumbuhan. Naungan diperlukan dalam pertumbuhan suweg untuk

meningkatkan produksi umbi sebanyak 50-60%. Jenis tanah yang cocok untuk

suweg adalah tanah lempung berpasir, pH tanah untuk pertumbuhan suweg antara

6-7.

2.1.2 Manfaat suweg (Amorphophallus paeoniifolius)

Pemanfaatan suweg telah dilakukan di Negara Filipina yaitu dengan

mengeringkan umbi suweg kemudian diolah menjadi tepung sebagai bahan dasar

pembuatan roti (Deptan 2002). Menurut Utami (2008) umbi suweg dapat menjadi

sumber pangan karena memiliki kandungan air 72.14% , abu 1.10%, protein

3.25%, lemak 0.33%, dan karbohidrat 23.18%. Hal ini sesuai dengan pernyataan

Faridah et al. (2007) bahwa umbi suweg mengandung karbohidrat tergolong

rendah yaitu 23.18% sehingga dapat menekan kadar gula darah dan dapat

digunakan untuk terapi penderita diabetes mellitus. Faridah (2005) menyatakan

bahwa umbi suweg termasuk pangan dengan indeks glikemik (IG) rendah yaitu

sebesar 42 sehingga baik dikonsumsi untuk kesehatan penderita diabetes mellitus.

Menurut Nugroho (2007), umbi suweg baik untuk pencernaan, stimulan hati

(liver), dan menambah nafsu makan.

By: isnaini

By: isnaini

Page 21: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

7

2.2 Perbanyakan Suweg

2.2.1 Perbanyakan konvensional

Perbanyakan suweg dapat dilakukan dari lima macam benih yaitu mata

tunas pada kulit umbi, mata tunas utama dari umbi, umbi seutuhnya, anakan dari

umbi, dan tanaman muda suweg (Pitojo 2007). Perbanyakan dari mata tunas umbi

lebih mudah daripada bagian lainnya karena mudah penanganannya, mudah

dipindahkan tempatnya, mudah dikemas, dan relatif tidak memerlukan waktu

lama untuk dapat digunakan sebagai bahan perbanyakan tanaman. Perbanyakan

dari benih mengalami kendala karena benih mengalami masa dormansi pada

periode 5-6 bulan dan benih tidak mudah didapatkan.

Tanah yang kompak diperlukan untuk pertumbuhan suweg dengan

pengairan atau kadar air yang baik. Ukuran lubang tanam yang diperlukan yaitu

60 cm × 60 cm × 45 cm dengan didasar lubang diberi campuran tanah dan pupuk

kandang (Flach & Rumawas 1996). Jarak tanam disesuaikan dengan jenis

perbanyakannya seperti untuk benih jarak tanam 10 cm dan umbi 35-90 cm.

Suweg memerlukan naungan untuk hidup, jenis tanaman yang menaungi

diantaranya pinus, pisang, cokelat atau kopi.

2.2.2 Kultur jaringan

Kultur jaringan merupakan cara pemuliaan konvensional guna

menghasilkan varietas-varietas baru melalui haploidisasi, penggabungan

protoplasma (protoplasmatic fusion) dan kejenteraan genetik (genetic

engineering) (Wattimena 1988). Kultur jaringan adalah istilah umum yang

ditujukan untuk budi daya secara in vitro terhadap berbagai bagian tumbuhan.

Menurut Zulkarnain (2009) teknik kultur jaringan dikemukakan oleh Schwan dan

Schleiden dengan teori totipotensi yang menyatakan bahwa sel-sel bersifat

otonom dan mampu beregenerasi menjadi tanaman lengkap.

Kultur jaringan dapat dilakukan pada setiap bagian tanaman termasuk pada

kalus hasil kultur sebelumnya. Kultur kalus memerlukan suatu lingkungan yang

terkendali dan dalam keadaan aseptik atau bebas mikroorganisme (Santoso &

Nursandi 2001). Kultur kalus memerlukan pH asam pada media tanam, pH awal

yang optimum antara 5.5-5.8 hal ini diperuntukan dalam morfogenesis kalus.

Page 22: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

8

Adapun tujuan yang diperoleh dari kultur kalus menurut Santoso dan Nursandi

(2001), yaitu:

1. Menjamin kesinambungan kerja kultur

2. Sebagai upaya konservasi penyedia bank plasma nutfah yang efisien

3. Memproduksi senyawa metabolit sekunder.

2.2.3 Manfaat kultur jaringan

Manfaat kultur jaringan yang utama adalah menghasilkan tanaman dengan

sifat fisiologis dan morfologi sama dengan induknya dalam jumlah banyak dan

waktu relatif singkat. Menurut Santoso dan Nursandi (2001) manfaat kultur

jaringan adalah (1) didapatkannya tanaman mutan yang penting dalam studi

genetik (2) mendapatkan tanaman yang bebas dan bahkan tahan terhadap serangan

bakteri dan virus (3) usaha produksi senyawa metabolit melalui kultur kalus

terutama untuk senyawa metabolit penting. Menurut Zulkarnain (2009) manfaat

kultur jaringan sebagai pelestarian plasma nutfah, memproduksi tanaman

sepanjang tahun, dan memperbanyak tanaman yang sulit diperbanyak secara

vegetatif konvensional seperti stek maupun cangkok.

2.3 Kultur Jaringan Amorphophallus

Penelitian mengenai kultur jaringan Amorphophallus yang telah dilakukan

diantaranya oleh Hu dan Li (2007), Imelda et.al (2008), Mayasari (2007), dan

Isnaini et al. (2012). Hu dan Li (2007) melakukan mikropropagasi A. albus

dengan menggunakan zat pengatur tumbuh 0.5 mg/l NAA dan 2.0 mg/l BA, kalus

menjadi padat setelah tujuh hari, dan tiga minggu kemudian muncul bakal tunas.

Bakal tunas Amorphophallus muelleri berawal dari pembengkakan pada

kalus yang membentuk tonjolan-tonjolan (Imelda et al. 2008). Jumlah tunas

dengan perpanjangan yang cepat dihasilkan pada media MS dengan penambahan

BAP dan NAA walau jumlah tunas sedikit. Kombinasi 0.2 NAA mg/l dan 2 mg/l

BAP menghasilkan 15 tunas.

Perbanyakan iles-iles (Amorphophallus mulleri Blume) secara kultur in

vitro dilakukan oleh Mayasari (2007) dengan pemberian Zat Pengatur Tumbuh

NAA (Naphtalena Acetic Acid) dan BAP (6-Benzylaminopurin) menghasilkan

tunas sebanyak 111 dari 39 eksplan. Namun, penggunaan tunggal BAP 1.5 mg/l

Page 23: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

9

menghasilkan jumlah tunas yang banyak yaitu sebesar 2.20. Selain itu, ZPT NAA

0.2 mg/l dan BAP 1.5 mg/l merupakan kombinasi terbaik untuk pertumbuhan

kalus iles-iles yaitu sebesar 42.68 % dengan jumlah 6 eksplan yang berkalus.

Penelitian Amorphophallus dilakukan oleh Isnaini et al. (2012) dengan

sumber eksplan berasal dari urat daun muda untuk perbanyakan famili Araceae

terhadap Amorphophallus muelleri, A. paeoniifolius, dan A. variabilis.

Berdasarkan hasil penelitian tersebut, bakal tunas muncul pada minggu ke 11

setelah inkubasi untuk A. paeoniifolius JW 386b dan diikuti oleh A. muelleri JW

384 dengan sebelumnya membentuk kalus. Menurut Isnaini dan Yuzammi (2012)

media MS dengan penambahan BAP 2 mg/l dan NAA 0.5 mg/l merupakan media

terbaik untuk penggandaan tunas suweg, tetapi jumlah tunas yang dihasilkan

belum optimal.

2.4 Karakteristik BAP dan NAA

Auksin didefinisikan sebagai zat tumbuh yang mendorong elongasi

jaringan koleoptil pada percobaan-percobaan bio-assay dengan avena atau

tanaman lainnya (Wattimena 1988). NAA (Naphtalena Acetic Acid) adalah auksin

sintetik yang memiliki keaktifan biologis seperti IAA, digunakan untuk

pertumbuhan akar. Menurut Wattimena (1988), aktivitas auksin sintetik

dipengaruhi oleh faktor-faktor sebagai berikut:

1. Kesanggupan senyawa tersebut untuk dapat menembus lapisan

kutikula atau epidermis yang berlilin

2. Sifat translokasi di dalam tanaman

3. Pengubahan auksin menjadi senyawa yang tidak aktif di dalam

tanaman (destruksi atau pengikatan)

4. Berinteraksi dengan hormon tumbuh lainnya

5. Spesies tanaman

6. Fase pertumbuhan

7. Lingkungan (suhu, radiasi, dan kelembaban).

NAA (Naphtalena Acetic Acid) merupakan auksin sintesis yang digunakan

untuk meningkatkan pemanjangan sel, pembelahan sel, dan pembentukan akar

adventif (Zulkarnain 2009). Auksin berasal dari bahasa Yunani auxein yang

Page 24: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

10

berarti meningkatkan. Menurut Santoso dan Nursandi (2001) auksin dalam kultur

in vitro dikenal untuk menginduksi terjadinya kalus, mendorong proses

morfogenesis kalus membentuk akar atau tunas, mendorong embriogenesis, dan

mempengaruhi kestabilan genetik sel tanaman.

Sitokinin mempengaruhi proses fisiologi tanaman yaitu mendorong

pembelahan sel sehingga aktivitas ini menggolongkan suatu zat menjadi kriteria

utama sitokinin (Wattimena 1988). Salah satu jenis sitokinin sintetik yaitu BAP

(Benzyl Amino Purin) berperan untuk memacu pertumbuhan dan morfogenesis

dalam kultur jaringan (Santoso & Nursandi 2001). Aktivitas utama sitokinin

adalah sitokinesis atau pembelahan sel. Aktivitas ini yang menjadi kriteria utama

untuk menggolongkan suatu zat pengatur tumbuh ke dalam sitokinin (Wattimena

1988). Peranan sitokinin penting dalam kultur in vitro untuk menginduksi

perkembangan dan pertumbuhan eksplan. BAP merupakan salah satu jenis

sitokinin sintetik yang banyak digunakan dalam kultur in vitro.

Interaksi antara sitokinin dan auksin dalam kultur in vitro terjadi untuk

menginteraksikan senyawa-senyawa kimia dan dipengaruhi oleh lingkungan

seperti cahaya dan suhu. Inisiasi akar, embriogenesis, dan induksi pembentukan

kalus umumnya terjadi bila terdapat rasio yang tinggi antara auksin dan sitokinin.

Page 25: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Lokasi dan Waktu

Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan Pusat Konservasi

Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga

September 2012. Namun, pengamatan secara visual masih dilakukan sampai bulan

Desember 2012.

3.2 Alat dan Bahan

Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini untuk membuat media

adalah timbangan, botol kultur, oven, alumunium foil, karet gelang, pH meter,

timbangan analitik, labu erlenmeyer, gelas piala, gelas ukur, pengaduk, pipet,

pipet volumetrik, magnetik stirer, kompor, panci, timmer dan autoclave. Peralatan

yang dibutuhkan untuk subkultur (penanaman) antara lain pinset, scalpel, laminar

air flow cabinet, api spiritus, gunting, handsprayer, tisu/ kapas, cawan petri, wrap

plastic, jas laboratorium, masker, serta rak-rak untuk menempatkan botol kultur.

Selain itu, diperlukan alat selama pengamatan antara lain alat tulis, tally sheet, dan

kamera.

Media dasar berfungsi sebagai suplai nutrisi bagi eksplan. Media dasar

yang digunakan adalah Murashige dan Skoog (MS) (Lampiran 3). Bahan yang

dibutuhkan untuk membuat media MS adalah unsur makro, mikro dan vitamin.

Jenis media tanam berupa gel padat, menggunakan agar-agar khusus yang tidak

berwarna dan bersifat netral (gelrite). Gula digunakan sebagai cadangan makanan

dan aquades sebagai pelarut seluruh media. Zat pengatur tumbuh yang digunakan

adalah BAP (Benzyl Adenin Purin) dengan taraf 1 mg/l, 2 mg/l, dan 3 mg/l, serta

NAA (Naphtalena Acetic Acid) dengan konsentrasi 0.25 mg/l, 0.5 mg/l, dan 0.75

mg/l. Selain itu, dibutuhkan HCl dan KOH untuk mendapatkan pH yang sesuai

dalam pembuatan media. Bahan tanaman yang digunakan adalah kalus suweg JW

383 koleksi Laboratorium Kultur Jaringan PKT Kebun Raya Bogor dalam media

MS 0 hasil kultur sebelumnya.

Page 26: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

12

3.3 Prosedur Kerja

3.3.1 Sterilisasi alat

Alat-alat yang akan digunakan dalam kegiatan kultur jaringan seperti botol

kultur, pinset, scalpel, cawan petri, pipet, pengaduk, gelas piala, labu takar dicuci

bersih menggunakan sabun cair. Kemudian, alat-alat yang digunakan dalam

penanaman disterilisasi dengan membungkus alat-alat tersebut menggunakan

kertas tebal dan selanjutnya semua alat-alat tersebut dimasukkan ke dalam oven

selama kurang lebih 24 jam.

3.3.2 Sterilisasi lingkungan kerja

Pembersihan laboratorium dilakukan setiap hari dengan membersihkan

lantai. Pengepelan dan penyemprotan rak kultur dengan alkohol juga dilakukan

secara berkala. Pembersihan tempat kerja (laminar air flow cabinet) dapat

dilakukan dengan mengelap permukaan atau meja kerja menggunakan kapas atau

tisu yang telah disemprot alkohol 70%. Lalu, sebelum dan selama pemakaian,

blower atau peniup udara dalam laminar air flow cabinet harus dinyalakan untuk

menghindari adanya kontaminan yang masuk ke dalam botol kultur ketika

penanaman. Kemudian sebelum melakukan pekerjaan maka dilakukan

penyemprotan dengan alkohol 70% terhadap kedua telapak tangan, botol kultur,

ataupun alat-alat yang akan digunakan dalam penanaman.

3.3.3 Pembuatan media tanam

Pembuatan media tanam dilakukan dengan mencampur seluruh bahan

yang sudah ditimbang ke dalam satu liter aquades, kemudian diaduk hingga

merata. Langkah selanjutnya mengukur pH menggunakan pH meter, hingga

didapatkan pH ±5.7. Kemudian masukkan agar gelrite 2.01 gram/liter dan

panaskan hingga mendidih, selama proses pemanasan larutan harus tetap diaduk

agar semua bahan tercampur dengan sempurna. Pemberian BAP dan NAA sesuai

dengan taraf yang direncanakan, larutan BAP yang digunakan adalah 0 mg/l, 1

mg/l, 2 mg/l dan 3 mg/l, sedangkan NAA yang digunakan adalah 0 mg/l, 0.25

mg/l, 0.5 mg/l, dan 0.75 mg/l. Pencampuran antara media dasar dengan hormon

diaduk hingga merata.

Penuangan dilakukan menggunakan wadah tuang yang berujung lancip

untuk memudahkan masuknya larutan ke dalam botol. Volume penuangan kurang

Page 27: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

13

lebih 15 ml setiap botol. Botol yang telah terisi media segera ditutup

menggunakan alumunium foil dengan ukuran 10 cm x 10 cm kemudian ikat

dengan karet untuk mencegah kontaminasi, pengikatan dengan karet sebaiknya

tidak terlalu rapat untuk mencegah pecahnya tutup botol saat proses sterilisasi

dengan tekanan dan suhu tinggi.

Proses sterilisasi media dilakukan menggunakan autoclave pada suhu

121⁰C -126⁰C dan tekanan 1.5 atm selama 15 menit. Media yang sudah steril

ditempatkan pada ruang media kemudian disimpan selama 3 hari untuk

memastikan media tidak mengalami kontaminasi.

3.3.4 Penanaman / Subkultur

Penanaman eksplan suweg dilakukan di dalam laminar air flow cabinet.

Eksplan berupa kalus kemudian dipotong dan dimasukkan ke dalam botol kuljar

yang sudah terdapat media perlakuan. Setelah selesai penanaman eksplan, botol

kultur diletakan pada rak di ruang kultur.

3.4 Rancangan Percobaan

Percobaan ini dilakukan pada tahap subkultur dengan jenis eksplan kalus.

Adapun rancangan percobaan ini dirancang dengan menggunakan percobaan

faktorial dua faktor dengan dasar rancangan acak lengkap (RAL). Faktor pertama

adalah konsentrasi BAP dengan empat taraf yaitu 0 mg/l, 1 mg/l, 2 mg/l, dan 3

mg/l. Faktor yang kedua yakni konsentrasi NAA dengan empat taraf yaitu 0 mg/l,

0.25 mg/l, 0.5 mg/l, dan 0.75 mg/l. Dengan demikian terdapat 42= 16 perlakuan

dan setiap perlakuan terdiri dari tiga ulangan sehingga seluruhnya terdapat 240

satuan percobaan. Setiap ulangan terdiri dari lima botol yang berisi satu eksplan.

Berikut merupakan gambaran interaksi antar faktor dari percobaan yang

dilaksanakan :

Tabel 1 Interaksi faktor jenis zat pengatur tumbuh dengan konsentrasinya

BAP (mg/l) NAA (mg/l)

0 0.25 0.5 0.75

0 A1 A2 A3 A4

1 A5 A6 A7 A8

2 A9 A10 A11 A12

3 A13 A14 A15 A16 Keterangan: A1= Kontrol

Page 28: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

14

3.5 Pengambilan Data

Pengamatan dilakukan setiap minggu selama 12 minggu setelah penanaman

dan peubah yang diamati yaitu :

a. Eksplan yang hidup dicirikan oleh adanya eksplan yang tumbuh akar dan

tumbuh tunas.

b. Eksplan yang mengalami browning (pencoklatan)

c. Eksplan yang mengalami kontaminasi dicirikan oleh adanya jamur

(cendawan) dan bakteri.

Selain itu, untuk mengetahui pengaruh pemberian ZPT pada pertumbuhan

kalus suweg maka dilakukan pengamatan terhadap:

a. Warna kalus

b. Tekstur kalus

c. Jumlah akar pada kalus

d. Jumlah tunas pada kalus

3.6 Analisis Data

Perhitungan parameter kualitatif meliputi persentase kontaminasi oleh

jamur dan bakteri, browning (pencoklatan), dan kematian pada eksplan dengan

menggunakan rumus sebagai berikut:

% Tingkat kontaminasi =

% Tingkat pencokelatan =

% Tingkat keberhasilan =

Keterangan : N adalah jumlah total eksplan yang tersedia pada setiap perlakuan

Adapun model linear rancangan percobaan yang digunakan yaitu sebagai

berikut (Mattjik & Sumertawijaya 2002) :

Dimana :

i = 1,2

j = 1,2,3,4,5

k = 1,2,3,4,5,6,7,8,9,10

Yijk=μ + αi + βj + (αβ)ij

+ εijk

Page 29: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

15

Keterangan :

Yijk : Hasil pengamatan terhadap eksplan Amorphophallus poeniifolius pada

perlakuan BAP ke-I, NAA ke-j, dan ulangan ke-r

μ : Nilai tengah umum (rata-rata populasi)

αi : Pengaruh perlakuan BAP ke-i

βj : Pengaruh perlakuan NAA ke-j

(αβ)ij : Pengaruh interaksi perlakuan BAP ke-i dan NAA ke-j

εijk : Pengaruh acak pada perlakuan BAP ke-i, NAA ke-j dan ulangan ke-r

Hipotesis :

H0 : P1 = P2= Pi= 0

H1 : ada satu Pi ≠ 0

Uji Hipotesis :

Terima H0 = Perlakuan pada kultur tidak berpengaruh nyata terhadap tingkat

kontaminasi pada selang kepercayaan 95% (α=0.05)

Terima H1 = Sekurang-kurangnya perlakuan pada kultur berpengaruh nyata

terhadap tingkat kontaminasi pada selang kepercayaan 95% (α= 0.05)

Untuk mengetahui pengaruh yang diberikan pada percobaan dilakukan uji-

F yang diperoleh dari hasil analisis ragam atau analysis of variance (ANOVA).

Kemudian dibandingkan dengan F tabel pada selang kepercayaan 95% (α=0.05)

dengan kaidah :

1. Jika F hitung < F tabel maka H0 diterima, H1 ditolak sehingga

perlakuan pada kultur tidak berpengaruh nyata terhadap tingkat

kontaminasi.

2. Jika F hitung > F tabel maka H0 ditolak H1 diterima sehingga

perlakuan pada kultur berpengaruh nyata terhadap tingkat

kontaminasi.

Pengujian hasil pengamatan dilakukan uji Duncan untuk mengetahui beda

antar perlakuan. Pengolahan data dilakukan dengan menggunakan perangkat

lunak ANOVA pada Statiscal Analysis System 9.1.

Page 30: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Tingkat Keberhasilan Kultur dan Gangguannya

Penanaman eksplan atau subkultur dilakukan secara bertahap dengan tiga

kali ulangan dalam setiap perlakuan. Setiap ulangan terdiri dari 5 eksplan pada

setiap perlakuan. Perlakuan yang digunakan sejumlah 16 sehingga terdapat 80

eksplan setiap ulangan, dan total eksplan yang diamati adalah 240 eksplan.

Selama pengamatan 12 minggu terhadap kalus suweg diperoleh keberhasilan

eksplan hidup sebesar 94.17% atau 226 eksplan.

Gangguan pada kultur jaringan sering terjadi akibat media kultur, eksplan

dan lingkungan yang kurang steril. Gangguan tersebut dapat mengakibatkan

kontaminasi dan pencoklatan (browning). Kontaminasi yang ditemukan dalam

penelitian terdiri dari kontaminasi oleh jamur dan bakteri. Kontaminasi oleh

bakteri dan jamur sebesar 2.08% atau 5 eksplan, serta pencoklatan (browning)

sebesar 3.75% atau sebanyak 9 eksplan.

Kontaminasi oleh bakteri memiliki ciri yaitu adanya cairan berwarna

bening seperti lendir (Gambar 4a). Kontaminasi oleh bakteri sulit untuk ditangani

karena belum diketahui jenis bakterinya dan sulit untuk mempertahankan jaringan

untuk tetap hidup (Mayasari 2007). Kontaminasi oleh jamur dicirikan dengan

adanya bintik-bintik hitam disekitar eksplan kemudian terdapat benang-benang

halus berwarna putih di sekitar eksplan (Gambar 4b). Kontaminasi ini terjadi

diduga karena kurang sterilnya lingkungan kerja saat penanaman dan jenis media

kultur.

Santoso dan Nursandi (2001) menyatakan bahwa kontaminasi dapat terjadi

jika semakin kaya komponen unsur hara suatu media maka semakin besar peluang

kontaminasi. Murasighe dan Skoog (MS) merupakan media kaya komponen unsur

hara yang digunakan pada penelitian sehingga potensi kontaminasi semakin besar

terjadi.

Pencoklatan (browning) merupakan kejadian yang mungkin terjadi dalam

kultur jaringan. Pencoklatan (browning) terjadi pada 8 minggu setelah tanam

(MST) terhadap 9 eksplan. Bagian yang mengalami pencoklatan adalah media

Page 31: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

17

kultur bagian bawah kemudian menjadi kecoklatan di sekitar eksplan dan seluruh

media kultur (Gambar 4c). Selain itu, menurut Santoso dan Nursandi (2001)

pencoklatan (browning) terjadi karena media dan suplemen media yang beragam,

penggunaan bahan sterilisasi, pengirisan, dan penggunaan api.

(a)

(b)

(c)

Gambar 4 Kondisi eksplan (a) Kontaminasi oleh bakteri, (b) Kontaminasi oleh

jamur, dan (c) Pencoklatan (browning).

4.2 Pengaruh Pemberian BAP dan NAA

Pemberian BAP dan NAA mempengaruhi keberhasilan hidup eksplan

terhadap warna kalus, tekstur kalus, jumlah akar, dan jumlah tunas.

4.2.1 Warna kalus

Pemilihan kalus tidak dilakukan berdasarkan warna kalus, karena warna

kalus tidak menunjukkan keadaan kalus tersebut mati atau hidup. Warna awal

eksplan ketika penanaman terdiri dari satu warna dan kombinasi warna (Gambar

5).

Page 32: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

18

(a)

(b)

(c)

(d)

Gambar 5 Warna eksplan pada awal penanaman (a) Cokelat tua, (b) Putih, (c)

Hijau muda, dan (d) Kombinasi cokelat dan hijau muda.

Media kontrol (0 mg/l BAP + 0 mg/l NAA) memberikan perubahan warna

yang tidak jauh berbeda dengan warna kalus saat awal penanaman. Perubahan

warna pada media kontrol terjadi pada 5 MST. Awal penanaman kalus berwarna

cokelat muda, di tengah pengamatan menjadi warna cokelat tua dan cokelat muda

hingga akhir pengamatan berwarna cokelat tua (Gambar 6).

(a)

(b)

Gambar 6 Warna eksplan pada (a) 5 MST dan (b) 12 MST.

Eksplan pada perlakuan tanpa BAP pada umumnya menghasilkan warna

cokelat muda dan tua. Sedangkan Eksplan dengan 1 mg/l BAP + 0.25 mg/l NAA,

2 mg/l BAP + 0.5 mg/l NAA, dan 3 mg/l BAP + 0.75 mg/l NAA menghasilkan

warna yang beragam yang menunjukkan adanya pertumbuhan sifat-sifat

Page 33: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

19

embriogenik (Gambar 7) . Hal ini dapat terjadi karena BAP berfungsi untuk

pembelahan sel, sehingga berpengaruh terhadap morfogenesis kalus baru (Santoso

& Nursandi 2001). Menurut Zulkarnain dan Lizawati (2011) warna kalus

didominasi oleh warna putih,kuning muda, krem dan coklat yang menandakan

adanya indikasi sifat-sifat embriogenik yang mengarah kepada perkembangan

embrio somatik. Pada penelitian Zulkarnain dan Lizawati (2011) ditemukan kalus

berwarna hitam maka kalus tersebut mati. Namun, pada hasil pengamatan kalus

suweg berwarna hitam tidak dapat diidentifikasi sebagai kalus mati karena warna

kalus yang hitam masih dapat tumbuh yang dicirikan dengan perubahan warna di

waktu selanjutnya. Kalus suweg dikatakan mati jika kalus tersebut lembek dan

mengempis jika ditekan.

(a)

(b)

Gambar 7 Eksplan pada perlakuan (a) 0 mg/l BAP + 0.5 mg/l NAA, dan (b) 3

mg/l BAP + 0.75 mg/l NAA.

Kemampuan eksplan dalam menyerap makanan berbeda tergantung dari

umur kalus, kalus yang digunakan dalam penelitian merupakan hasil subkultur

sebelumnya sehingga umurnya berbeda-beda. Semakin lama umur eksplan maka

semakin banyak membutuhkan makanan dan fasenya berbeda. Peletakan botol

eksplan disimpan dalam rak secara memanjang dan dalam ruang kultur terdapat

air conditioner (AC) untuk mengatur suhu. Botol eksplan yang diletakan dekat AC

dengan suhu ± 240C warna eksplan kebanyakan menjadi cokelat tua dan hitam.

Sedangkan eksplan yang diletakkan jauh dari AC menghasilkan warna eksplan

yang bervariasi antara lain cokelat muda, hijau muda, pink dan putih. Pada suhu

ruang 280C - 30

0C, warna eksplan lebih bervariasi seperti putih, merah muda,

cokelat muda, dan hijau muda. Hal ini dimungkinkan karena suweg dapat hidup di

alam dengan suhu antara 25-350C (Deptan 2002).

Page 34: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

20

4.2.2 Tekstur kalus

Tekstur kalus pada awal penanaman tidak ditentukan, sehingga pada 240

botol eksplan terdiri dari kalus bertekstur remah dan kompak (Gambar 8). Tekstur

remah sebesar 57.5% atau 138 eksplan dan tekstur kompak sebesar 42.5% atau

102 eksplan.

Hasil yang diperoleh yaitu tekstur kalus mengalami perubahan hampir di

setiap perlakuan, kecuali perlakuan 1 mg/l BAP + 0 mg/l NAA dan 1 mg/l BAP +

0.75 mg/l NAA tidak mengalami perubahan tekstur. Pada 1 MST hingga 3 MST

banyak eksplan mengalami perubahan tekstur yang kemudian tekstur menjadi

tetap hingga 12 MST. Perubahan tekstur tersebut pada umumnya dari tekstur

kompak menjadi remah. Hasil yang diperoleh eksplan bertekstur kompak sebesar

34.58% dan tekstur remah sebesar 63.33%.

(a)

(b)

Gambar 8 Tekstur kalus (a) Remah dan (b) Kompak.

Tekstur kalus dapat berubah disebabkan oleh komposisi BAP dan NAA

yang diberikan. Komposisi BAP tinggi dapat menghambat proses morfogenesis

dalam pembentukan tunas, begitu pula dengan pemberian NAA yang tinggi dapat

menghambat kerja pada kalus. Kombinasi penggunan BAP dan NAA menjadikan

tekstur kalus remah mengidentifikasikan terjadinya pembelahan sel sehingga

menghambat pembentukan akar dan tunas. Pembelahan sel terjadi sehingga kalus

menjadi remah dan membesar seperti bengkak. Pembengkakan kalus terjadi pada

perlakuan 1 mg/l BAP + 0.75 mg/l NAA, 2 mg/l BAP + 0.75 mg/l NAA, dan 3

mg/l BAP + 0.75 mg/l NAA. Menurut Zulkarnain dan Lizawati (2011)

pembentukan kalus diawali oleh terjadinya pembengkakan pada permukaan kalus,

yang kemudian dilanjutkan oleh adanya perubahan warna, struktur dan tekstur

kalus.

Page 35: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

21

Jika kalus sebelumnya berasal dari media tanpa ZPT kemudian diberi

perlakuan dengan penambahan ZPT maka akan mempengaruhi morfogenesis

kalus. Selain itu, lamanya kalus dalam media perlakuan mempengaruhi

pembentukan tekstur kalus. Penggunaaan BAP dengan konsentrasi tinggi dan

masa yang panjang sering kali menyebabkan regenerasi sulit berakar dan dapat

menyebabkan penampakan pucuk abnormal (Gunawan, 1987).

4.2.3 Jumlah akar

Pemberian BAP tidak berpengaruh pada perlakuan terhadap jumlah akar,

sedangkan pemberian NAA berpengaruh terhadap jumlah akar (Lampiran 1). Hal

ini dapat terjadi diduga karena BAP sebagai sitokinin dalam jumlah yang lebih

besar dari NAA dapat membantu pertumbuhan akar.

Kalus suweg menghasikan akar pada 16 perlakuan yang diujikan. Hasil

penelitian menunjukan pertumbuhan akar paling banyak terdapat pada perlakuan 1

mg/l BAP + 0.75 mg/l NAA sejumlah 2.87 akar/minggu (Tabel 2). Sedangkan

pada perlakuan 1 mg/l BAP + 0 mg/l NAA, 2 mg/l BAP + 0 mg/l NAA, dan 3

mg/l BAP + 0 mg/l NAA menunjukan hasil terkecil dengan nilai 0.07

akar/minggu.

Tabel 2 Jumlah akar suweg pada setiap perlakuan

BAP

(mg/l)

NAA (mg/l)

0 0.25 0.5 0.75

0 0.13b 0.53b 0.89b 0.88b

1 0.07b 0.20b 0.92b 2.87

a

2 0.07b 1.07b 0.87b 0.80b

3 0.07b 0.13b 1.00b 0.53b

Keterangan: Angka yang diikuti oleh huruf yang sama untuk kolom yang sama pada masing-

masing peubah, tidak berbeda nyata berdasarkan uji jarak berganda Duncan pada α=0.05.

Bakal akar kalus muncul pada beberapa eksplan dengan waktu dan

perlakuan yang berbeda. Bakal akar muncul saat 1 MST sebanyak 14 akar dari 12

eksplan. Terdapat 1 eksplan yang memiliki akar sebanyak 2 yaitu pada perlakuan

tanpa ZPT BAP dengan 0.25 mg/l NAA dan 0.5 mg/l NAA. Berdasarkan hasil

penelitian tersebut, NAA bekerja sesuai dengan fungsinya yaitu untuk

pembentukan akar. Menurut Purnamaningsih (2002), taraf auksin lebih rendah

dikombinasikan dengan sitokinin dengan taraf yang lebih tinggi akan

Page 36: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

22

menghasilkan akar lebih baik daripada taraf auksin yang lebih tinggi. Hal ini

sesuai dengan pernyataan Zulkarnain (2009), bahwa NAA berfungsi untuk

meningkatkan pemanjangan sel, pembelahan sel, dan pembentukan akar adventif.

Eksplan yang telah memunculkan bakal akar pada 1 MST tidak semua

tumbuh menjadi akar, namun terdapat eksplan yang menjadi kalus kembali. Akar

tersebut tidak tumbuh diduga karena kemampuan eksplan dalam menyerap

makanan untuk berkembang, interaksi dengan ZPT NAA , dan suhu ruangan.

Menurut Wattimena (1988) aktivitas auksin sintetik dipengaruhi oleh interaksi

dengan hormon tumbuh lain dalam media, fase pertumbuhan, dan lingkungan

(suhu, radiasi, dan kelembaban). Eksplan yang tumbuh menjadi bakal akar dari 1

MST sejumlah 9 eksplan. Pada 12 MST eksplan-eksplan tersebut berkembang

sehingga memiliki 2 sampai 3 bakal akar pada setiap eksplannya.

Imelda et.al (2007) menjelaskan bahwa, indole butyric acid (IBA) atau

naphthalene acetic acid (NAA) adalah zat pengatur tumbuh yang dapat

menginduksi pembentukan tunas in vitro yang ditambahkan dalam media kultur,

namun pada jenis-jenis tertentu akar dapat langsung terbentuk tanpa perlakuan.

Benzyl Amino Purin (BAP) berfungsi untuk pembelahan sel dalam morfogenesis,

sedangkan NAA berfungsi untuk mendorong proses morfogenesis kalus

membentuk akar atau tunas. Pemberian BAP dan NAA berpengaruh pada

pertumbuhan akar, karena BAP akan mengendalikan kerja NAA agar eksplan

tetap segar dan dapat melanjutkan proses morfogenesis. Menurut Santoso dan

Nursandi (2001) auksin dalam kultur in vitro dikenal untuk menginduksi

terjadinya kalus, mendorong proses morfogenesis kalus membentuk akar atau

tunas, mendorong embriogenesis, dan mempengaruhi kestabilan genetik sel

tanaman.

Pertumbuhan akar pada eksplan umumnya menghasilkan akar lebih dari

satu. Pertumbuhan akar dipengaruhi oleh auksin dalam perlakuan ini adalah NAA.

Menurut Balogun et al. (2007) pada media MS dengan penambahan BAP dan

NAA pada kalus labu menunjukkan pertumbuhan akar dengan baik. Ciri awal

akar muncul yaitu dengan pembengkakan kalus, kemudian berubah warna, dan

muncul akar. Akar muncul pada kalus berwarna hijau muda dan putih, pada

Page 37: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

23

bagian bawah atau samping kalus yang kemudian akar turun hingga ke dasar

media kultur (Gambar 9).

(a)

(b)

Gambar 9 Eksplan menghasilkan akar lebih dari satu pada satu kalus (a) Tampak

samping dan (b) Tampak depan.

4.2.4 Jumlah tunas

Hasil menunjukkan bahwa kalus menghasilkan tunas dengan sebelumnya

memiliki ciri-ciri berubah warna kalus, membengkak, dan kemudian tumbuh

seludang berwarna hijau dengan ujung berwarna putih yang merekah (Gambar

10). Tunas merupakan bagian tumbuhan yang muncul dari bagian batang yang

ditebang, ketiak daun, dan bagian lainnya. Kalus merupakan bagian tumbuhan

yang berpotensi tumbuh tunas dari bagian mana saja, karena memiliki sifat

totipotensi. Menurut Imelda et al. (2008) bakal tunas Amorphophallus muelleri

berawal dari pembengkakan pada kalus yang membentuk tonjolan-tonjolan. Bakal

tunas mulai terlihat pada perlakuan 2 mg/l BAP + 0.5 mg/l NAA saat 3 MST yang

dicirikan dengan adanya tonjolan pada kalus. Hal tersebut sesuai dengan

penelitian Hu dan Li (2007) pada Amorphophallus albus dengan menggunakan zat

pengatur tumbuh 0.5 mg/l NAA dan 2.0 mg/l BA, kalus menjadi padat setelah

tujuh hari, dan tiga minggu kemudian muncul bakal tunas.

(a)

(b)

Gambar 10 Eksplan bertunas pada 3 MST (a) Muncul tunas tidak merubah warna

kalus seluruhnya menjadi putih (b) Muncul dengan pembengkakan.

Page 38: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

24

Pemberian BAP dan NAA memberikan pengaruh yang sama terhadap

jumlah tunas (Lampiran 2). Jika pemberian BAP dan NAA diberikan dengan

mengombinasikan keduanya maka akan terlihat konsentrasi BAP dan NAA yang

berpengaruh terhadap jumlah tunas.

Jumlah tunas dengan pemberian BAP dan NAA terbaik pada perlakuan 1

mg/l BAP + 0.25 mg/l NAA yaitu 0.47 tunas/minggu (Tabel 3). Sedangkan pada

hasil penelitian Isnaini dan Yuzammi (2012), perlakuan 2 mg/l BAP + 0,5 mg/l

NAA menjadi media terbaik untuk penggandaan tunas suweg. Interaksi BAP dan

NAA yang berbeda konsentrasi akan menghasilkan pertumbuhan morfogenesis

yang berbeda. BAP dan NAA adalah salah satu ZPT yang sering digunakan dalam

multiplikasi tunas karena dapat memberikan reaksi yang cepat dalam waktu tidak

lama.

Tunas tidak muncul pada perlakuan yang tidak diberi NAA, hasil yang

sama ditemukan pada perlakuan 0 mg/l BAP + 0.25 mg/l NAA, 0 mg/l BAP +

0.75 mg/l NAA, 3 mg/l BAP + 0.25 mg/l NAA,dan 3 mg/l BAP + 0.75 mg/l

NAA. Tunas tidak muncul diduga karena tidak adanya NAA yang berinteraksi

dengan BAP dalam pembentukan tunas. Konsentrasi BAP dan NAA pada

perlakuan juga mempengaruhi multiplikasi.

Tabel 3 Jumlah tunas suweg pada setiap perlakuan

BAP

(mg/l)

NAA (mg/l)

0 0.25 0.5 0.75

0 0.07ab 0.00b 0.07ab 0.00b

1 0.00b 0.47

a 0.00b 0.00b

2 0.00b 0.07ab 0.07ab 0.20ab

3 0.00b 0.00b 0.07ab 0.00b

Keterangan: Angka yang diikuti oleh huruf yang sama untuk kolom yang sama pada masing-

masing peubah, tidak berbeda nyata berdasarkan uji jarak berganda Duncan pada α=0.05.

Multiplikasi tunas terjadi pada tiga eksplan yaitu pada perlakuan 1 mg/l

BAP + 0.25 mg/l NAA, 3 mg/l BAP + 0.5 mg/l NAA, dan 3 mg/l BAP + 0.75

mg/l NAA (Gambar 11). Pertumbuhan eksplan pada tiga perlakuan tersebut

berbeda dengan eksplan lainnya. Pada eksplan tersebut, tunas telah muncul pada 3

MST namun pertumbuhannya tidak dengan bentuk yang sama. Perlakuan 3 mg/l

BAP + 0.5 mg/l NAA dan 3 mg/l BAP + 0.75 mg/l NAA menghasilkan

pertumbuhan kalus membengkak hingga membentuk batang dan daun. Selain itu,

Page 39: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

25

terdapat akar dan bakal tunas yang kemungkinan akan muncul menjadi tunas. Hal

ini dapat terjadi karena konsentrasi sitokinin dan auksin yang tinggi sehingga

menghasilkan pertumbuhan eksplan yang baik.

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

Gambar 11 Multiplikasi tunas pada perlakuan (a) 1 mg/l BAP + 0.25 mg/l NAA

tampak atas, (b) 1 mg/l BAP + 0.25 mg/l NAA dari tampak samping,

(c) 3 mg/l BAP + 0.5 mg/l NAA (d) 3 mg/l BAP + 0.75 mg/l NAA,

(e) 3 mg/l BAP + 0.5 mg/l NAA, dan (f) 3 mg/l BAP + 0.75 mg/l

NAA.

Pengamatan rutin selesai pada 12 MST namun, pengamatan secara visual

masih dilakukan hingga 25 MST. Hasil pengamatan secara visual ditemukan kalus

yang tumbuh tunas dengan baik dan mengalami multiplikasi tunas yaitu pada

Page 40: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

26

perlakuan 2 mg/l BAP + 0.75 mg/l NAA dan 2 mg/l BAP + 0.25 mg/l NAA

(Gambar 12).

(a)

(b)

Gambar 12 Hasil pengamatan visual pada perlakuan (a) 2 mg/l BAP + 0.75 mg/l

NAA dan (b) 2 mg/l BAP + 0.25 mg/l NAA.

4.3 Peran Kultur Jaringan Suweg (Amorphophalus paeoniifolius) dalam

Konservasi

Tiga landasan konservasi yaitu perlindungan, pengawetan, dan

pemanfaatan masih mengalami kendala. Upaya konservasi untuk melestarikan

tumbuhan dengan teknik budidaya terus dikembangkan agar tetap lestari. Selama

ini tindakan konservasi yang dilakukan melalui in vivo yaitu dengan menanam biji

dan umbi.

Konservasi dengan in vivo membutuhkan lahan yang luas karena biasa

dilakukan di hutan lindung, kebun raya, dan sebagainya. Selain itu, perlu waktu

yang intensif untuk perawatan agar tumbuhan tidak terserang hama penyakit.

Sehingga perlu teknik yang menunjang teknik budidaya yang sudah ada tersebut

dengan tempat yang lebih kecil dan kondisi aseptik agar terlindung dari hama dan

penyakit.

Sehingga kultur jaringan dapat dilakukan untuk berbagai jenis tumbuhan,

termasuk tumbuhan pangan yang berasal dari hutan. Suweg merupakan tumbuhan

yang terdapat di hutan primer di Indonesia yang bermanfaat untuk pangan dan

obat. Sehingga perlu ada upaya konservasi untuk kehidupan manusia.

Page 41: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

27

Pemanfaatkan suweg sebagai pangan telah dilakukan di Negara Filipina

yaitu digunakan sebagai bahan dasar tepung roti (Deptan 2002). Faridah (2005)

menyatakan bahwa umbi suweg termasuk pangan dengan indeks glikemik (IG)

rendah yaitu sebesar 42 sehingga baik dikonsumsi untuk kesehatan penderita

diabetes mellitus. .Menurut Nugroho (2007), umbi suweg baik untuk pencernaan,

stimulan hati (liver), dan menambah nafsu makan.

Masyarakat lebih menyukai pangan dan obat yang terdapat di alam.

Pangan dan obat tersebut jika tidak dikembangbiakan maka akan terancam punah

sehingga perlu upaya konservasi. Upaya konservasi suweg melalui kultur jaringan

diharapkan dapat membantu kebutuhan masyarakat dalam pangan dan obat.

Perbanyakan suweg di Indonesia saat ini salah satunya telah dilakukan

oleh Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) dengan pembuatan demplot

untuk penanaman kultivar unggul hasil seleksi di Kabupaten Kulonprogo Daerah

Istimewa Yogyakarta (LIPI 2012). Hal ini untuk memperkenalkan masyarakat

terhadap tumbuhan berpotensi pangan disekitar rumah mereka. Selain itu, LIPI

memperkenalkan masyarakat pada transfer teknologi budidaya yang mudah,

murah dan efisien, serta sosialisasi teknologi pengolahan berbagai macam produk

dari suweg (Gambar 13). Upaya konservasi lain yang dilakukan yaitu dengan

teknik kultur jaringan yang dilakukan oleh para peneliti di Laboratorium Kultur

Jaringan Pusat Konservasi Kebun Raya Bogor.

(a)

(b)

Gambar 13 Produk makanan dari umbi suweg (a) Onde-onde suweg dan (b)

Onde-onde suweg dalam kemasan.

Page 42: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Hasil dari penelitian ini adalah perlakuan 1 mg/l BAP + 0.25 mg/l NAA

merupakan perlakuan terbaik untuk multiplikasi tunas. Namun, hasil multiplikasi

tunas masih terbatas sehingga perlu dilakukan penelitian lebih lanjut.

5.2 Saran

Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk menghasilkan multiplikasi

tunas yang optimal dengan penggunaan BAP dan NAA dengan konsentrasi yang

lebih rendah.

Page 43: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

DAFTAR PUSTAKA

Balogun MO, Akande SR, Ogunbodede BA. 2007. Effects of plant growth

regulators on callus, shoot and root formation in fluted pumpkin (Telfairia

occidentalis). African Journal of Biotechnology Vol. 6 (4): 355-358.

[Deptan] Departemen Pertanian. 2002. Pengenalan & Budidaya Talas, Garut,

Ganyong, Gembili, Ubi Kelapa, Gadung, Iles-iles, Suweg/Acung.

Departemen Pertanian. Jakarta.

Faridah DN. 2005. Sifat fisiko-kimia tepung suweg (Amorphophallus

campanulatus B1.) dan indeks glikemiknya. Jurnal Tekno1. Dan Industri

Pangan 16(3).

Faridah D, Prangdimurti E, Adawiyah DR. 2007. Pangan fungsional dari umbi

suweg dan garut: kajian daya hipokolesterolemik dan indeks glikemiknya

[laporan]. Lembaga Penelitian dan Pengabdian kepada Masyarakat. IPB

Press. Bogor. Institut Pertanian Bogor. Bogor.

Flach, Rumawas. 1996. Plants yielding non-seed carbohydrates.

http://www.proseanet.org/prohati2/browser.php?docsid=474 [27

Desember 2012].

Hu J, Li J. 2007. Morphogenetic pathway in petiole derived callus of

Amorphophallus albus in vitro. Acta Physiol Plant 30:389–393.

Imelda M, Wulansari A, Poerba YS. 2007. Mikropropagasi tanaman iles-iles

(Amorphophallus muelleri Blume). Berita Biologi 8(4).

Imelda M, Wulansari A, Poerba YS. 2008. Regenerasi tunas dari kultur tangkai

daun iles-iles (Amorphophallus muelleri Blume). Biodiversitas 9(3): 173-

176.

Isnaini Y, Sri W, Yuzammi. 2012. Aplikasi kultur jaringan untuk perbanyakan

araceae berpotensi pangan: Amorphophallus muelleri Blume, A.

poeniifolius (Dennst.) Nicolson, dan A. variabilis Blume. Makalah

dipresentasikan pada Seminar Bersama di IPB International Conference

Center. 1-2 Mei 2012.

Isnaini Y,Yuzammi. 2012. Aplikasi teknik kultur jaringan dalam pengadaan bibit

suweg. Makalah dipresentasikan pada Seminar Pertemuan Pakar

Bioteknologi.

[LIPI] Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia. 1980. Ubi-Ubian. Balai Pustaka.

Jakarta.

Page 44: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

30

. 2012. Budidaya dan pemanfaatan

suweg (Amorphophallus paeoniifolius (Dennst.) Nicolson) sebagai bahan

pangan fungsional, kultivar hasil seleksi di Kabupaten Kulon Progo, DIY.

http://pkpp.ristek.go.id/index.php/penelitian/detail/347 [26 November

2012].

Mattjik AA, Sumertasijaya M. 2002. Perancangan Percobaan dengan Aplikasi

SAS dan Minitab Jilid I. IPB Press. Bogor.

Mayasari I. 2007. Perbanyakan iles-iles (Amorphophallus mulleri Blume) secara

kultur in-vitro dengan pemberian zat pengatur tumbuh NAA (Napthalene

Acetic Acid) dan BAP (6-Benzylaminopurin) [skripsi]. Departemen

Konservasi Sumberdaya Hutan dan Ekowisata Fakultas Kehutanan Institut

Pertanian Bogor. Bogor.

Nugroho.2007. Potience of Amorphophallus paeoniifolius (Dennst.) Nicolson and

Amorphophallus konjac Koch as medical food plant [laporan]. UPT Balai

Konservasi Tumbuhan Kebun Raya Eka Karya Bali. LIPI.

Pitojo S. 2007. Suweg. Kanisius. Yogyakarta.

Purnamaningsih R. 2002. Regenerasi tanaman melalui embriogenesis somatik dan

beberapa gen yang mengendalikannya. Buletin AgroBio 5(2):51-58.

Santoso U, Nursandi F. 2001. Kultur Jaringan Tumbuhan. Penerbitan Universitas

Muhammadiyah Malang. Malang.

Tjahyani E. 2010. Studi venasi daun pada beberapa tumbuhan tergolong suku

araceae di Kota Malang [skripsi]. Jurusan Biologi Fakultas Matematika

dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Malang. Malang.

Utami AR. 2008. Kajian indeks glikemik dan kapasitas in vitro pengikatan

kolesterol dari umbi suweg (Amorphophallus campanulatus Bl.) dan umbi

garut (Maranta arundinaceae L.) [skripsi]. Departemen Ilmu dan

Teknologi Pangan Fakultas Teknologi Pertanian Institut Pertanian Bogor.

Bogor.

Wattimena GA. 1988. Zat Pengatur Tumbuh Tanaman. Pusat Antar Universitas.

Institut Pertanian Bogor. Bogor.

Zulkarnain. 2009. Kultur Jaringan Tanaman. PT Bumi Aksara.Jakarta.

Zulkarnain, Lizawati. 2011. Proliferasi kalus dari eksplan hipokotil dan kotiledon

tanaman jarak pagar (Jatropha curcas L.) pada Pemberian 2,4-D. Jurnal

Natur Indonesia 14(1): 19-25.

Page 45: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

LAMPIRAN

Page 46: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

LAMPIRAN

Lampiran 1 Hasil sidik ragam (Anova) respon perlakuan BAP dan NAA terhadap

jumlah akar Sumber DF JKP JKT Fhitung Pvalue

f1 3 2.11655625 0.70551875 0.89 0.4585

f2 3 9.60305625 3.20101875 4.02 0.0155

f1*f2 9 9.94783542 1.10531505 1.39 0.2340

Keterangan: *interaksi

Lampiran 2 Hasil sidik ragam (Anova) respon perlakuan BAP dan NAA terhadap

jumlah tunas Source DF JKP JKT Fhitung Pvalue

f1 3 0.07583333 0.02527778 0.48 0.6975

f2 3 0.08916667 0.02972222 0.57 0.6413

f1*f2 9 0.48750000 0.05416667 1.03 0.4370

Keterangan: *interaksi

Lampiran 3 Komposisi media Murashige and Skoog

No Nama Bahan Konsentrasi dalam

Media (mg/l)

Konsentrasi dalam

larutan stok 50x

(g/500ml)

Volume

larutan stok

yang

dibutuhkan

per liter media

(ml)

Unsur Makro

1 NH4NO3 1650 82.5 10

2 KNO3 1900 95 10

3 MgSO47H2O 370 18,5 10

4 KH2PO4 170 8,5 10

5 CaCl22H2O 440 22 10

FeSO47H2O 27,8 1,39 10

Na2EDTA 37,3 1,865

Unsur Mikro 10

1 H2BO3 6,2 0,310

2 MnSO4H2O 16,9 0,845

3 ZnSO47H2O 8,6 0,430

4 KI 0,83 0,041

5 Na2MoO47H2O 0,25 0,0125

Page 47: MULTIPLIKASI TUNAS SUWEG (Amorphophallus paeoniifolius ... · Tumbuhan Kebun Raya Bogor, selama 4 bulan mulai dari bulan Juni hingga ... whole tuber, sapling from the tuber, and seedling

33

6 CuSO45H2O 0,025 0,00125

7 CoCl2.6H2O 0,025 0,00123

Vitamin 10

1 Niacin 0,5 0,025

2 Pyridoxine 0,5 0,025

3 Thiamin 0,4 0,02

4 Glycine 2 0,1

5 Myo-Inositol 100 5