Mekanisme Kerja Enzim Schardinger

Oleh: Kelompok 8Farmasi A

• Canthika Anisa Abdulla (2013~013) • Dewi Novarina (2013~041)• Niswatul Imro’ah (2013~048)

• Aliyah Nia Fauziah D. (2013~276)• Cece Furwanti (2013~280)• Dita Yuliana Fransiska (2013~289)

BIOKIMIA

Tujuan Praktikum

Mengetahui kerja enzim Schardinger pada berbagai kondisi

Prinsip Kerja Biokimia

Enzim Schardinger terdiri dari 2 jenis yaitu Xanthin Oxidase dan Xanthin Dehidrogenase. Keduanya dapat mengalami interkonversi satu sama lain sehingga dapat berubah dari jenis ke yang lainnya. Di dalam Xanthin Oxidase mengkatalisis oksidasi hipoxanthin menjadi xanthin dan oksidai xanthin menjadi asam urat. Xanthin dehydrogenase juga mengkatalisis dehidrogenasi aldehida. Hidrogen yang lepas ditangkap oleh akseptor. Dalam praktikum ini methylene blue formaldehida bertugas menjadi akseptor hydrogen.

Dasar Teori

Susu mengandung suatu enzim yang mengkatalisis oksidasi macam-macam aldehid menjadi asam. Reaksinya berlangsung secara anaerobik dan dapat ditunjukkan bila ada akseptor hidrogen yang sesuai seperti Methylen Blue. Jalannya reaksi dapat dilihat dari perubahan warna bila (bentuk oksidasi) menjadi tak berwarna/putih (bentuk reduksi)(Patong, 2009).

enzim Scahrdinger merupakan enzim yang termasuk golongan enzim oksidase yang terdapat di dalam susu sapi dan dikenal sebagai enzim xanthine oksidase karena dapat mengoksidase xanthin. Enzim ini juga dapat mengoksidase aldehid. Gugus aldehid bertindak sebagai donor hidrogen. Methylen Blue biasanya digunakan sebagai uji kesegaran susu. Dimana enzim Schardinger yang terdapat di dalam susu mengkatalisis oksidasi formaldehid menjadi asam-asam dalam suasana anaerob yang terlihat dari perubahan warna dari biru karena penambahan methylen blue sehingga menjadi putih. Penambahan methylen blue sebagai akseptor hidrogen yang mana dalam susu akan berubah menjadi putih bila tereduksi oleh enzim dalam susu.

Alat & Bahan

Alat Tabung reaksi (3 buah) Pipet tetes Rak tabung reaksi Beaker glass Inkubator

Bahan Susu (Enzim Scahrdinger) Methylen Blue Formaldehida Aquades Paraffin liquida

Prosedur Praktikum (Bagan Alir)

Disiapkan 3 buah tabung reaksi

Ditandai dengan P, Q, dan R

Ditambahkan ke dalam tabung P, masing-masing 3 mL susu mentah

Tambahkan ke dalam tabung R masukkan 3 mL susu yang sudah

masak

Tambahkan 6 tetes MB formaldehid(25mg MB dilarutkan dalam

195mL air & 5mL formaldehid 40%) ke

dalam 3 tabung tersebut

Lalu kocok ad warna

rata

Ditambahkan 8 tetes paraffin cair ke dalam

tabung P (jangan

dikocok!)

Diinkubasi ke 3 tabung pada

37oc selama 15 menit

Diamati perubahan warna yang terjadi pada

masing-masing tabung

Skema Kerja

P Q R

3 mL Susu Mentah 3 mL Susu yang

telah dimasak

P Q R

6 tetes MB

Formaldehid

P

Q

R

Dikocok ad warna merata

Skema Kerja

QP R

8 tetes Paraffin liquidum

P Q R

Diinkubasi selama 15 menit Dengan suhu 370C

Skema Kerja

Terjadi perubahan setelah

5 menit diinkubasi

P Q R

Hasil Praktikum

KELOMPOKTABUNG

P Q R12345678

++++++++

--------

--------

Reaksi yang timbul dari aktivitas enzim schardinger pada setiap tabung di setiap kelompok.

Pembahasan

Susu mengandung enzim Schardinger yang dapat mengkatalisis aldehid menjadi asam. Reaksinya berlangsung secara anaerob dan bisa ditunjukkan dengan akseptor hidrogen yang sesuai seperti methylen blue. Uji methylen blue didasarkan pada kemampuan bakteri dalam susu untuk tumbuh dan menggunakan oksigen terlarut sehingga menurunkan oksidasi reduksi dari campuran tersebut. Akibatnya methylen blue yang ditambahkan akan tereduksi menjadi warna putih yang sebelumnya berwarna biru.

Lanjutan...

Dari hasil praktikum, didapatkan hasil yang sama dari 8 kelompok yaitu pada tabung P dan Q terjadi proses oksidasi dari methylen blue sehingga warna biru berubah menjadi putih setelah diinkubasi. Namun, pada tabung Q setelah didiamkan 5 menit, warna larutan berubah menjadi putih kebiruan pada bagian atas larutan. Ini karena methylen blue mengalami reduksi kembali. Sedangkan pada tabung P, warna tetap putih karena diberikan Paraffin cair yang berfungsi sebagai penahan agar udara dari luar tidak masuk ke dalam tabung sehingga mendukung kerja enzim schardinger yang bekerja secara anaerob.

Lanjutan . . .

Pada tabung R yang berisi susu panas + methylen blue formaldehid, tidak terjadi perubahan warna (tetap berwarna biru). Ini dikarenakan pemanasan yag dilakukan menghambat enzim di dalam susu tersebut sehingga menjadi tidak aktif atau rusak, akibatnya enzim tersebut tidak dapat mengoksidasi aldehid dengan baik dan menyebabkan sulitnya terjadi perubahan warna.

Soal

1. Tuliskan reaksi dehydrogenase formaldehida yang dikatalisis oleh enzim xanthin oxidase!

2. Perubahan warna apakah yang terjadi pada masing-masing tabung? Jelaskan mengapa dapat terjadi hal tersebut!

Kesimpulan

Berdasarkan percobaan ini dapat ditarik kesimpulan yaitu:1. 1. Enzim Schardinger pada susu dapat mengkatalisis oksidasi formaldehid dengan

berubahnya warna pada larutan yang ditambah methylen blue formaldehid dari biru menjadi putih dengan adanya bantuan dari Paraffin cair yang menahan masuknya udara dari luar masuk ke dalam tabung.

2. Pemanasan yang tinggi dapat merusak enzim yang terdapat dalam susu sehingga tidak dapat bekerja secara optimum.

Jawaban

1. O H OH Xanthin dehidrogense FAD MbH2

-(Putih)C + H2O oksidasi C -H

2 Xanthine Oxidase

H H H OH OFADH Mb(Biru)

H COH

asam format

2. Pada tabung P, terjadi perubahan warna dari biru (sebelum diinkubasi) menjadi warna putih (setelah diinkubasi). Ini dikarenakan pada tabung P ditambahkan Paraffin cair yang berfungsi sebagai penahan masuknya udara ke dalam tabung sehingga mendukung kerja dari enzim schardinger yang bekerja secara anaerob.

Jawaban

Pada tabung Q, terjadi proses oksidasi dari penambahan methylen blue formaldehid sehingga warna biru berubah menjadi putih setelah diinkubasi. Namun, setelah didiamkan 5 menit, warna larutan pada tabung berubah menjadi biru pada bagian atas larutan. Ini terjadi karena methylen blue mengalami reduksi kembali. Pada tabung R, tidak terjadi perubahan warna (tetap berwarna biru). Ini dikarenakan pemanasan yang dilakukan menghambat enzim di dalam susu tersebut sehingga menjadi tidak aktif/rusak, akibatnya enzim tidak dapat mengoksidasi aldehid dengan baik dan menyebabkan sulit terjadi perubahan warna.