makala h
TRANSCRIPT
Aktivitas Antioksidan Fraksi Fenolik dari Terminalia Catappa pada
Penyebaran ELA di Mencit Albino Swiss
Disusun untuk memenuhi tugas mata kuliah seminar
Disusun oleh:
Dyah Arum Ariyanti
J2C008014
JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS DIPONEGORO
Abstrak
Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi potensi antioksidan fraksi fenolik dari
Terminalia catappa ELA disebarkan pada tikus Swiss albino. Tingkat dari enzimik antioksidan
seperti katalase, superoksida dismutase dan glutation peroksidase dan non enzimik antioksidan
seperti vitamin A, vitamin E dan pengurangan glutasi meningkat dengan fraksi fenolik dari
Terminalia catappa pada tikus diinduksi ELA. Hasil ini menunjukkan bahwa fraksi fenolik
Terminalia catappa memiliki aktivitas antioksidan.
Keywords: Terminalia catappa, Limfoma Ascite Ehrlich, fraksi fenolik, Antioksidan
BAB I
Pendahuluan
Tanaman obat dan aromatik, hadiah alam yang sedang digunakan untuk melawan berbagai
infeksi dan penyakit di dunia. Produk alami berfungsi sebagai sumber yang sangat baik dari
molekul bioaktif yang digunakan untuk mengobati berbagai macam penyakit manusia yang
berbeda. Obat produk alam termasuk poliketida aromatik, polieter, coumarin, flavonoid,
terpenoid, alkaloid dan aminoglikosida. Kanker adalah penyebab utama kematian di seluruh
dunia dan insiden kanker meningkat pesat dari tahun ke tahun. Studi terbaru telah menunjukkan
bukti kuat bahwa spesies oksigen biologis reaktif (ROS) seperti anion superoksida hidroksil
radikal dan terlibat dalam perkembangan kanker. Sebagai ROS yang terlibat dalam
perkembangan kanker, senyawa dengan aktivitas pengurangan ROS yang tinggi mampu
mencegah kejadian kanker. Antioksidan telah dilaporkan untuk mencegah kerusakan oksidatif
yang disebabkan oleh ROS dan dapat mencegah terjadinya kanker. Flavonoid dan senyawa
fenolik secara luas didistribusikan dalam tanaman yang telah dilaporkan untuk mengerahkan
efek biologis termasuk, antioksidan, kemampuan menangkap radikal bebas, anti-inflamasi, anti
kanker, dan lainnya. Kandungan Fenol dan flavanoid dari ekstrak officinalis Melliiotus dan
fenolat dari Scutellaria baicalensis dilaporkan memiliki kemampuan untuk menangkap radikal
bebas dan sebagai antioksidan. Azizah Othman et al menyelidiki kandungan fenolik ekstrak biji
koka memiliki aktivitas antioksidan. Terminalia catappa adalah (keluarga - combretaceae)
banyak ditanam di daerah tropis di dunia sebagai pohon hias. Fitokimia tanaman ini termasuk
tanin, flavonoid dan triterpenoid. Ekstrak etanol berair dan daun dilaporkan untuk aktivitas
heapatoprotektif. Studi lebih dan lebih farmakologis telah melaporkan bahwa ekstrak daun T.
catappa dan buah-buahan memiliki antikanker, antioksidan, anti-HIV reverse transkriptase, anti-
inflamasi, efek antidiabetes dan aktivitas hepatoprotektif. Baru-baru ini, telah dilaporkan bahwa
Terminalia catappa protein daun memiliki aktivitas antioksidan terhadap ELA ditanamkan tikus
Swiss albino. Oleh karena itu tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan potensi
antioksidan fraksi fenolik dari Terminalia catappa terhadap ELA tikus ditanamkan Swiss albino.
BAB II
Bahan dan Metode
A. Bahan Tanaman
Daun Terminalia catappa segar dikumpulkan di daerah bebas dari pestisida dan
kontaminan lainnya dari daerah sekitarnya Tiruchengode, Namakkal kabupaten,
Tamilnadu. Daun dicuci bersih dikumpulkan dan dikeringkan dengan kertas filter dan
digunakan untuk persiapan fraksi fenolik.
B. Persiapan ekstrak metanol
Daun Terminalia catappa dikumpulkan dan dikeringkan dan dibuat menjadi bentuk
bubuk. 10 gm sampel dikemas dalam alat Soxhlet dan diekstraksi menggunakan metanol
selama 4 jam. Ampas dibuang dan filtratnya dikeringkan dalam desikator. Setelah kering
kemudian disimpan di 4 oC dalam ruangan yang dingin.
C. Hewan uji
Tujuh sampai delapan minggu tikus Swiss albino jantan dengan berat sekitar 25-30 g
dibawa dari peternakan hewan kecil stasiun, Thrissur, Kerala. Hewan-hewan itu
diaklimatisasi selama 15 hari di bawah kondisi laboratorium dan diberi makan dengan
diet standar.
D. Penyebaran Ela pada sel
Ehrlich Limfoma Ascites (ELA) baris sel tumor yang diperoleh dari Pusat Penelitian
Kanker Amala, Thrissur, Kerala. Tikus-tikus itu diaklimatisasi selama dua minggu dan
sel-sel disebarkan oleh transplantasi intraperitoneal dari 1x106 sel dalam 100μl PBS.
Setelah 15 hari, sel-sel diambil dari rongga intraperitoneal dan digunakan untuk studi in
vitro dengan metode eksklusi sitotoksik tripan biru. Studi In vitro sitotoksik dilakukan
untuk mengetahui dosis efektif 50% (ED50) ekstrak fenol Terminalia catappa yang
75μg/100μl ditentukan dengan metode eksklusi biru tripan. Para Fraksi yang
menunjukkan minimal ED50 dipilih untuk studi in vivo.
E. Pengelompokan hewan uji
a) Kelompok 1
Diberi 0,1 ml dimetil sulfat (DMSO) setiap hari, dan intraperitoneal digunakan sebagai
kontrol untuk kelompok percobaan 2 sampai 4.
b) Kelompok 2
Kelompok kontrol positif dengan diberi makan antoksidan silmarin ((0,18 mg / kg
berat badan).
c) Kelompok 3
Diberi 1x106 tumor ELA sel, intraperitoneal dan diperlakukan sebagai kontrol ELA
d) Kelompok 4
Diberi ED50 ekstrak dari T. catappa Fenol (T.catappa 75μg fenol di 100μl DMSO)
intraperitoneal.
e) Kelompok 5
Ekstrak T. catappa dan sel-sel tumor ELA diberikan pada hari yang sama dan ekstrak
fenol dilanjutkan selama 15 hari. Setelah 15 hari, tikus dikorbankan setelah puasa
semalam. Hati itu dibedah, dicuci dengan PBS pada pH 7,2 dan di homogenkan
dengan menggunakan PBS dan digunakan untuk penentuan katalase, superoksida
dismutase, glutation peroxidise dan non enzimik antioksidan seperti vitamin A,
vitamin E , pengurangan glutation dan lipid peroksidas dan hasilnya disajikan sebagai
deviasi standar dari rata-rata 6 hewan.
BAB III
Pembahasan
Tabel I. menunjukkan tingkat enzimik antioksidan katalase, Superoksida dismutase dan
peroksidase Glutathione dalam hati homogenat kontrol dan kelompok eksperimen. Tingkat CAT,
SOD, GPX yang menurun pada tikus diinduksi ELA bila dibandingkan dengan kelompok
kontrol. Tabel II. menunjukkan kadar antioksidan non enzimik seperti vitamin A, vitamin E,
glutathione dan mengurangi lipid peroksidasi di homogenat hati kontrol dan kelompok
eksperimen. Tingkat non enzimik antioksidan Vitamin A, Vitamin E dan Glutathione
Mengurangi mengalami penurunan pada tikus diinduksi ketika ELA dibandingkan dengan
kelompok kontrol. Tingkat peroksidasi lipid itu meningkat pada tikus diinduksi ELA bila
dibandingkan dengan kelompok kontrol.
Tabel 1. Kegiatan enzimik Antioksidan dalam kontrol hati
dan eksperimen di mencit albino swiss
Tabel 2. Kegiatan Non enzimik Antioksidan dalam kontrol hati
dan eksperimen di mencit albino swiss
Flavonoid dan senyawa fenolik secara luas didistribusikan di tanaman
yang telah dilaporkan memberikan beberapa efek biologis termasuk, antioksidan, kemampuan
menangkap radikal bebas, antiradang, anti kanker. Senyawa polifenol didefinisikan sebagai zat
yang memiliki cincin aromatik dengan satu atau lebih substituen hidroksil dan dilaporkan untuk
memberikan radikal bebas oksigen dengan menyumbangkan atom hidrogen atau elektron pada
radikal bebas. Demikian juga fraksi fenolik Terminalia catappa yang dapat meningkatkan kadar
antioksidan enzimik katalase, Superoksida dismutase dan Glutathione peroxidise dan non
enzimik antioksidan Vitamin A, Vitamin E serta pengurangan Glutathione dalam homogenat hati
tikus yang diinduksi ELA dibandingkan dengan untuk tikus kontrol ELA. Spesies oksigen yang
reaktif(ROS) diikat oleh antioksidan, dan peroksidasi lipid menurun ketika ditambahkan dengan
ekstrak tanaman serta dibandingkan dengan tikus kontrol ELA. Enzimik antioksidan dan
aktivitas antioksidan enzimik juga meningkat ketika diberikan dengan silymarin.
BAB IV
Kesimpulan
Dari hasil penelitian ekstrak fenolik Terminalia catappa dapat meningkatkan kadar
antioksidan enzimik katalase, Superoksida dismutase dan Glutathione peroksidase dan non
enzimik antioksidan Vitamin A, Vitamin E serta pengurangan Glutathione dalam homogenat hati
tikus yang diinduksi ELA dibandingkan dengan untuk tikus kontrol ELA. Senyawa fenol ini juga
dapat menurunkan lipid peroksidase hasil penelitian menegaskan bahwa pemberian ekstrak fenol
dari Terminalia catappa memiliki aktivitas antioksidan yang menghambat sel tumor ELA
multiplisitas dan dapat direkomendasikan sebagai agen antitumor.
DAFTAR PUSTAKA
Azizah Othman, Amin Ismail, Nawalyah Abdul Ghani, Ilham Adenan. Food Chemistry, 2007;
100: 1523-1530.
Bayfield RF, Cole ER. Methods of Enzymology, 1980; 67: 189-195.
Dewick PM. Medicinal Natural Products: A Biosynthetic Approach. Chichester, UK; John Wiley
& Sons; 2002. p. 112-129.
Halliwel B, Gutterdige JMC. Free radicals In Biology and Medicine 1989 (2nd ed) Oxford;
Clarendon Press.
Luck H, In: Methods in Enzymatic analysis 2 (Ed. Bergmeyer), Academic Press, New York,
1974, 885.
M,Saroja, R,Santhi, S,Annapoorani, 2011, , Antioxidant Activity of Phenolic of Terminalia
Catappa in Ela Propagated Swiss Albino Mice, Journal of Advanced Scientific
Research 2(3): 70-72
Misra HP, Fridovich. J Biol Chem, 1972, 247: 3170-3171.
Mohale DS, Dewani AP, Chandewar AV, Khadse CD, Tripathi AS, Agarwal SS. J Herbal
Medicine &Toxicology, 2009; 3(1): 7-11.
Moron MS, Depierre JN, Mannerisk VC. Biochimica Biophysica Acta, 1979; 582: 67-68.
Newman DJ, Cragg GM. J Nat Prod, 2007; 70(3): 461-477.
Ohkawa H, Ohisi N, Yagi K. Assay for tissue lipid peroxides in animal tissues by thiobarbituric
acid reaction, 1979; 95: 351-358.
Pourmorad F, Hosseinimehr SJ, Shahabimajd NA. J Biotech, 2006; 5(11): 1142-1145.
Rosenberg HR, Chemistry and Physiology of the Vitamins, Interscience Publishers, New York,
1992; 452-453.
Rotruck JT, Pope AL, Ganther HE, Hafeman DG, Hockstraw G. Science, 1973; 179: 588-590.
Salomi MJ, Panikkar KR. Amala Research Bulletin, 1989, 11: 60-63.
Santhi R, Annapoorani S. Int J. Drug Dev & Res, 2009; 1: 81-88.
Shahidi F, Naczk M. Food Phenolics; Sources, Chemistry, effects and applications. Basal,
Switterland; Technomic Pub. Co.
Shukla Y, Pal S K. International Journal of Human Genetics, 2004; 4(4): 265-276.
Ta- Chen Lin, Kazutaka Nishikawa, Tzu- Hua Wu, Kanji Ishimaru. Chin Pharm J, 2002; 54:
193-198.
USULAN
Tanaman Terminalia catappa yang mengandung fenol dan flavanoid selain digunakan untuk
menguji anti kanker, dapat digunakan untuk uji aktivitas lainnya. Salah satunya adalah dengan
menggunakan senyawa flavanoid sebagai uji aktivitas antioksidan. Metode yang digunakan
dalam uji ini adalah dengan menggunakan DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil). Setelah
ditambahkan DPPH kemudian dilakukan analisis dengan menggunakan spektometer UV-Vis.
Selain mengandung senyawa flavanoid dan fenol, terdapat senyawa metabolit sekunder lainnya
yaitu alkaloid, terpenoid, steroid, triterpenoid, dan tanin. Sehingga perlu dilakukan penelitian
selanjutnya untuk mengetahui uji aktivitasnya lainnya misalnya sebagai uji sitotoksik,
antidiabetes dan uji lainnya. Hal ini dapat bermanfaat dalam bidang kesehatan karena tanaman
ini dapat bermanfaat untuk mengobati dan mencegah beberapa penyakit.