34

LAMPIRAN

35

Lampiran 1. Tata Letak Perlakuan

Tata letak percobaan secara acak selama penelitian adalah sebagai berikut :

D2

B1

D3

B3

B2

E3

C2

C3

A2

D1

A3

E2

A1

E1

C1

Keterangan :

A = Kontrol/Tanpa Pemberian Probiotik

B = 106 CFU/ml

C = 107 CFU/ml

D = 108 CFU/ml

E = 109 CFU/ml

1, 2, 3 = Ulangan

36

Lampiran 2. Proses Isolasi Probiotik (Lactobacillus sp.) dari Saluran

Pencernaan Ikan Tagih.

- Mematikan ikan Tagih dewasa.

- Mengeluarkan saluran pencernaan (lambung dan usus) ikan tagih

- Menggerus lambung dan usus, kemudian sebanyak 1 gram ditambah

dengan 1 ml cairan fisiologis (NaCl 0.85%) steril (Aslamyah 2006) dan

dihomogenkan dengan vortex mixer.

- Setelah dihomogenkan, diambil larutan sebanyak 0.1 ml, dan disebarkan

dalam cawan petri berisi TSA yang dibuat secara duplo.

- Menginkubasi kultur pada suhu 29oC selama 24-48 jam sampai koloni

bakteri dapat tumbuh.

- Mengidentifikasi bakteri yang tumbuh berdasarkan perbedaan warna,

bentuk dan ukurannya. Setiap jenis koloni yang didapat dimurnikan

dengan metode penggoresan kuadran, sampai didapatkan koloni bakteri

yang tunggal dan seragam dan benar-benar yakin bahwa itu adalah

Lactobacillus sp.

- Memperbanyak kultur murni untuk mendapatkan isolat.

37

Lampiran 3. Kelangsungan Hidup Larva Ikan Lele Dumbo

Jumlah Kematian Ikan Per Hari

Perlakuan

Hari

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Jumlah

A1 0 2 4 4 5 5 5 5 4 6 8 10 8 8 74

A2 0 0 0 1 0 3 7 6 8 6 3 4 4 6 48

A3 0 2 1 2 10 2 6 5 3 5 8 8 6 9 67

B1 0 0 0 0 1 1 4 6 3 6 4 3 5 6 39

B2 0 2 0 0 6 0 3 3 2 3 4 6 6 7 44

B3 0 0 0 2 0 0 3 4 4 3 1 4 3 4 28

C1 0 3 4 4 4 3 4 4 4 4 5 5 2 3 44

C2 0 4 0 2 2 3 4 3 3 4 4 4 6 7 39

C3 0 2 0 0 1 2 3 3 3 4 0 5 4 5 34

D1 0 2 0 1 2 4 2 4 3 3 4 9 7 9 50

D2 0 1 1 0 2 2 2 3 2 3 2 1 0 1 20

D3 0 0 0 2 2 2 4 4 4 4 2 2 0 4 30

E1 0 4 2 0 2 5 4 4 2 3 3 4 4 7 44

E2 0 0 8 2 2 5 5 4 4 5 6 5 4 7 67

E3 0 0 0 2 1 4 4 3 5 4 3 3 6 8 43

Kelangsungan Hidup

Perlakuan Ulangan No Nt Mortalitas(%) KH (%)

A 1 75,00 1,00 74,00 1,33

2 75,00 27,00 48,00 36,00

3 75,00 8,00 67,00 10,67

Rata-rata

63,00 16,00

B 1 75,00 36,00 39,00 48,00

2 75,00 31,00 44,00 41,33

3 75,00 47,00 28,00 62,67

Rata-rata

37,00 50,67

C 1 75,00 39,00 36,00 52,00

2 75,00 45,00 30,00 60,00

3 75,00 34,00 41,00 45,33

Rata-rata

35,67 52,44

D 1 75,00 25,00 50,00 33,33

2 75,00 55,00 20,00 73,33

3 75,00 45,00 30,00 60,00

Rata-rata

33,33 55,56

38

Keterangan :

KH : Kelangsungan hidup (%)

Nt : Jumlah larva yang hidup pada akhir pemeliharaan (ekor)

N0 : Jumlah larva yang ditebar (ekor)

E 1 75,00 31,00 44,00 41,33

2 75,00 8,00 67,00 10,67

3 75,00 32,00 43,00 42,67

Rata-rata

51,33 31,56

39

Lampiran 4. Analisis Data Kelangsungan Hidup Larva Ikan Lele Dumbo

Hasil Penelitian

Dengan menggunakan rumus KH = (Nt / N0 ) x 100%. Diperoleh nilai

kelangsungan Hidup sebagai berikut :

Perlakuan Ulangan jumlah Rata-rata

1 2 3

A 1,33 36,00 10,67 48,00 16,00

B 48,00 41,33 62,67 152,00 50,67

C 52,00 60,00 45,33 157,33 52,44

D 33,33 73,33 60,00 166,67 55,56

E 41,33 10,67 42,67 94,67 31,56

Jumlah 618,67

Data Kelangsungan Hidup (%) setelah ditranformasikan Arcsin

Perlakuan

Ulangan

Jumlah Rata-rata 1 2 3

A 6,63 36,87 19,06 62,56 20,85

B 43,85 40,01 52,34 136,20 45,40

C 46,15 50,77 42,32 139,24 46,41

D 35,26 58,91 50,77 144,94 48,31

E 40,01 19,06 40,78 99,85 33,28

Jumlah

582,80

Perhitungan Analisis ragam :

1. Faktor Koreksi (FK) = ij2

r.t

= (582,80)2

3.5

= 22643,5

2. Jumlah Kuadrat Total (JKT) = ij2 – FK

= {(6,63)2 + ... + (40,78)

2} - 22643,5

= 2803,083

40

3. Jumlah Kuadrat Perlakuan (JKP) = ij2

r

= {(62,56)2 + ... + (99,85)

2}

3

= 1633,419

4. Jumlah Kuadrat Galat (JKG) = JKT-JKP

= 2803,083 - 1633,419

= 1169,664

5. KT Perlakuan (KTP) = JKP

t-1

= 1633,419

5-1

= 408,35

6. KT Galat (KTG) = JKG

t (r-1)

= 1169,664

10

= 116,96

7. F Hitung = KTP

KTG

= 408,3548

116,9664

= 3,491215

-22643,5

FK

41

Tabel Analisis Sidik Ragam Kelangsungan Hidup Larva Ikan Lele Dumbo

SK DB JK KT F.Hit F 0.05

Perlakuan 4 1633,419 408,3548 3,491215 3,47805

Galat 10 1169,664 116,9664

Total 14 2803,083

Keterangan : F Hitung > F Tabel = Berbeda nyata pada taraf 5%

Uji Jarak Berganda Duncan Pada Taraf 5%

KT Galat = 116,9664

Sx =

=

= 6,24

SSR5% = Tabel (Gasperz 1991) dengan db Galat = 10

Untuk taraf 5%

LSR = Sx x SSR5%

Sx 6,24

P 2 3 4 5

SSR5% 3,15 3,30 3,37 3,43

LSR 19,65 20,59 21,03 21,40

Tabel Perbandingan Antara Perlakuan

Perlakuan Rata-rata Selisih LSR 5%

A 16,00 - a

E 31,56 15,6 - 19,65 ab

B 50,67 34,67 19,11 - 20,59 bc

C 52,44 36,44 20,88 1,77 - 21,03 c

D 55,56 39,56 24,00 4,89 3,12 21,40 c

42

Tabel Hasil Uji Lanjutan Jarak Berganda Duncan

Perlakuan Kelangsungan Hidup (%)

A (Kontrol) 16,00 a

B (106) 50,67

bc

C (107) 52,44

c

D (108) 55,56

c

E (109) 31,56

ab

Keterangan : Nilai yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata menurut uji

jarak berganda Duncan

43

Lampiran 5. Laju Pertumbuhan Larva Ikan Lele Dumbo

Perlakuan ulangan

panjang

awal

Panjang

Akhir Ln Lt Ln Lo LP (%)

A

1 4 11,80 2,47 1,39 7,73

2 4 11,40 2,43 1,39 7,48

3 4 11,00 2,40 1,39 7,23

Rata-rata

4 11,40 2,43 1,39 7,48

B

1 4 12,60 2,53 1,39 8,20

2 4 12,60 2,53 1,39 8,20

3 4 12,40 2,52 1,39 8,08

Rata-rata

4 12,53 2,53 1,39 8,16

C

1 4 12,80 2,55 1,39 8,31

2 4 12,60 2,53 1,39 8,20

3 4 13,20 2,58 1,39 8,53

Rata-rata

4 12,87 2,55 1,39 8,34

D

1 4 13,80 2,62 1,39 8,85

2 4 13,40 2,60 1,39 8,64

3 4 13,20 2,58 1,39 8,53

Rata-rata

4 13,47 2,60 1,39 8,67

E

1 4 12,20 2,50 1,39 7,97

2 4 12,40 2,52 1,39 8,08

3 4 11,80 2,47 1,39 7,73

Rata-rata

4 12,13 2,50 1,39 7,92

Keterangan : LP = Laju Pertumbuhan

lnLt = Panjang Rata-rata ikan diakhir periode sampling.

lnLo = Panjang rata-rata iikan diawal periode sampling.

44

Lampiran 6. Analisis Laju Pertumbuhan Larva Ikan Lele Dumbo

Dengan Menggunakan rumus P = lnLt – lnL0 x 100% . Diperoleh Laju

Pertumbuhan sebagai berikut :

Data Asli Perhitungan Laju Pertumbuhan

Perlakuan

Ulangan Jumlah

total Rata-rata 1 2 3

A 7,73 7,48 7,23 22,43 7,48

B 8,20 8,20 8,08 24,47 8,16

C 8,31 8,20 8,53 25,03 8,34

D 8,85 8,64 8,53 26,01 8,67

E 7,97 8,08 7,73 23,77 7,92

Jumlah

121,72

Nilai Laju Pertumbuhan (%) setelah Ditranformasikan

perlakuan

ulangan Jumlah

total Rata-rata 1 2 3

A 2,78 2,74 2,69 8,20 2,73

B 2,86 2,86 2,84 8,57 2,86

C 2,88 2,86 2,92 8,67 2,89

D 2,97 2,94 2,92 8,83 2,94

E 2,82 2,84 2,78 8,44 2,81

Jumlah

42,71

8. Faktor Koreksi (FK) = ij2

r.t

= (42,71)2

3.5

= 121,6358

9. Jumlah Kuadrat Total (JKT) = ij2 – FK

= {(2,78)2 + ... + (2,78)

2} – 121,6358

= 0,08

10. Jumlah Kuadrat Perlakuan (JKP) = ij2

T

FK

45

r

= {(8,20)2 + ... + (8,44)

2}

3

= 0,075009

11. Jumlah Kuadrat Galat (JKG) = JKT-JKP

= 0,08 – 0,075009

= 0,01

12. KT Perlakuan (KTP) = JKP

t-1

= 0,075009

5-1

= 0,018752

13. KT Galat (KTG) = JKG

t (r-1)

= 0,1

10

= 0,000975

14. F Hitung = KTP

KTG

= 0,018752

0,000975

= 19,24059

Tabel Analisis Sidik Ragam Laju Pertumbuhan Larva Ikan Lele Dumbo

SK DB JK KT F.Hit F 0.05

Perlakuan 4 0,075009 0,018752 19,24059 3,47805

Galat 10 0,01 0,000975

Total 14 0,08

Keterangan : *F hitung > F Tabel = berbeda nyata pada taraf 5%

Uji Jarak Berganda Duncan pada Taraf Kepercayaan 95%

- 121,6358

46

KT Galat = 0,000975

Sx =

=

= 0,018

SSR5% = Tabel (Gasperz 1991) dengan db Galat = 10

Untuk taraf 5%

LSR = Sx x SSR5%

Sx 0,018

P 2 3 4 5

SSR5% 3,15 3,3 3,37 3,43

LSR 0,0567 0,0594 0,06066 0,06174

Tabel Perbandingan antar Perlakuan

Perlakuan Rata-rata Selisih LSR 5%

A 7,48 -

a

E 7,92 0,44 -

0,0567 b

B 8,16 0,68 0,24 -

0,0594 c

C 8,34 0,86 0,42 0,18 - 0,06066 d

D 8,67 1,19 0,75 0,51 0,33 0,06174 e

Tabel Hasil Lanjutan dengan Jarak berganda Duncan

Perlakuan Laju Pertumbuhan (%)

A (Kontrol) 7,48a

B (106) 8,16

c

C (107) 8,34

d

D (108) 8,67

e

E (109) 7,92

b

Lampiran 7. Hasil Pengukuran Kualitas Air ( suhu, pH, DO dan Amoniak)

47

1. Suhu °C

Perlakuan Hari Ke-

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

A1 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

A2 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

A3 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

B1 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

B2 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

B3 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

C1 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

C2 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

C3 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

D1 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

D2 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

D3 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

E1 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

E2 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

E3 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28 28

2. pH

Perlakuan Hari Ke-

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

A1 6,9 6,9 6,9 7 7 7,2 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,4

A2 6,8 6,8 6,9 7 7 7 7 7 7,1 7,3 7,3 7,5 7,5 7,6

A3 7 7 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5 7,5 7,5 7,5 7,5

B1 6,9 6,9 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5 7,5 7,5 7,5 7,5

B2 6,9 6,9 6,9 7 7 7 7 7 7 7,5 7,5 7,5 7,5 7,6

B3 7 7 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5 7,5 7,5

C1 6,7 6,7 6,8 6,9 6,9 7 7 7 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5

C2 6,9 6,9 6,9 7 7 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5 7,5 7,5

C3 6,9 6,9 6,9 7 7 7 7 7 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5

D1 6,9 6,9 6,9 7 7 7,1 7,2 7,2 7,2 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3

48

D2 6,9 6,9 6,9 7 7 7 7 7 7 7,2 7,2 7,2 7,2 7,3

D3 6,9 6,9 6,8 6,9 6,9 6,9 7 7 7 7,2 7,2 7,2 7,2 7,2

E1 6,8 6,8 6,9 7 7 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5 7,5 7,6

E2 6,9 6,9 7 7 7 7,1 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3 7,5 7,5 7,5

E3 6,9 6,9 6,9 7 7 7 7 7 7 7,3 7,3 7,3 7,3 7,3

3. DO (Disolved Oxygen)

Perlakuan Hari Ke-

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

A1 6 5,9 5,7 5,6 5,6 5,4 5,3 5,3 5,3 5,2 5,2 5 4,7 4,5

A2 5,9 5,9 5,6 5,4 5,4 5,3 5,2 5,3 5,2 5,2 5 5 4,7 4,5

A3 5,9 5,7 5,6 5,4 5,3 5,3 5,1 5 5 4,8 4,6 4,3 4,6 4,4

B1 6 5,7 5,7 5,4 5,3 5,2 5,2 5 4,9 4,9 4,8 4,9 4,7 4,6

B2 6,1 5,7 5,6 5,3 5,3 5,2 5,2 5,1 5,1 5 5 4,9 4,6 4,6

B3 6 6 5,3 5,2 5,2 5,1 5 5 4,9 4,9 4,8 4,8 4,6 4,4

C1 5,9 5,7 5,3 5,2 5,2 5 5 5 4,9 4,8 4,8 4,8 4,6 4,4

C2 6 5,9 5,3 5,2 5,1 4,9 4,6 4,7 4,7 4,8 4,7 4,7 4,5 4,3

C3 5,7 5,9 5,4 5,3 5,1 5 4,9 4,8 4,9 4,8 4,8 4,8 4,4 4,3

D1 5,9 5,7 5,4 5,2 5,1 5 5 4,8 4,9 4,9 4,8 4,9 4,4 4,3

D2 6,1 6 5,7 5,3 5,2 4,9 5 4,9 4,8 4,7 4,8 4,7 4,5 4,3

D3 5,8 5,7 5,5 5,3 5,2 5,2 5,2 5 4,9 4,9 4,8 4,8 4,5 4,3

E1 5,7 5,7 5,6 5,3 5,2 5,1 5 5 4,9 4,8 4,8 4,9 4,4 4,2

E2 6 5,6 5,1 5,2 5,1 5 5 4,6 4,8 4,7 4,7 4,7 4,5 4,3

E3 6,1 5,7 5,3 5,1 5 5 4,9 4,8 4,8 4,7 4,6 4,6 4,4 4,3

4. Amonia

49

Perlakuan Sampling Ke-

1 2 3

A1 0 0,1 0,25

A2 0 0,2 0,5

A3 0 0,1 0,25

Rata-rata : 0 0,13 0,33

B1 0 0 0,1

B2 0 0,05 0,1

B3 0 0 0,1

Rata-rata : 0 0,016 0,1

C1 0 0 0,05

C2 0 0,05 0,1

C3 0 0,05 0,1

Rata-rata : 0 0,03 0,083

D1 0 0 0,05

D2 0 0 0,05

D3 0 0,05 0,1

Rata-rata : 0 0,016 0,06

E1 0 0,25 0,75

E2 0 0,25 0,50

E3 0 0,25 0,75

Rata-rata : 0 0,25 0,66

50

Lampiran 8. Kegiatan Selama Penelitian

A. Kultur bakteri Lactobacillus sp.

Persiapan Alat dan Bahan

Untuk Kultur Bakteri. Penimbangan MRS Agar

Pelarutan MRS Agar untuk

media kultur

Sterilisasi Alat dengan

Autoclave.

Penuangan MRS Agar ke

dalam Tabung Reaksi.

Teknik Penggoresan

Bakteri pada Agar Miring

51

B. Perhiungan Kepadatan Bakteri Lactobacillus sp.

Bakteri yang telah di inkubasi selama

48 jam dan tumbuh dipanen secara

asepik dengan menggunakan jarum ose.

Pngambilan akteri dengan

menggunakan jarum ose dan

dipindahkan kedalam ttabung falcon

yang berisi NaCl. Pemanenan dilakukan

di laminar flow.

Campuran bakterii dengan NaCl

dihomogenkan dengan menggunakan

vortex mixer.

Penghitungan kepadatan bakteri dengan

menggunakan spektrofotometer.

52

C. Pemeliharaan Larva Lele Dumbo

Penentuan Tata Letak

Perlakuan

Pengisian ikan

sebanyak 75 ekor pada

setiap wadah

Pemberian

Lactobacillus sp. ke

Pengukuran pH Pengukuran DO Pengukuran

Konsentrasi Amonia

Penetasan Artemia Pemberian pakan

berupa Artemia

Pengamatan terhadap

Kelangsungan Hidup

Pengukuran Panjang Larva Penghitungan Kematian Ikan