lampiran 1: skema kerja penelitianetheses.uin-malang.ac.id/611/11/09620024 lampiran.pdf · lampiran...

104

Lampiran 1: Skema Kerja Penelitian

Hasil

Uji metabolit sekunder kalus ekplan

stevia (Stevia rebaudiana Bert. Dengan

HPLC

Pengamatan selama 4 minggu

(terbentuknya kalus)

Inkubasi planlet setelah penanaman

Inisiasi (penanaman) eksplan dalam

media di LAF

Sterilisasi ekplan stevia (Stevia

rebaudiana Bert.)

Pembuatan media dan sterilisasi media

Sterilisasi alat yang akan digunakan

Persiapan alat dan bahan

105

Lampiran 2: Skema Kerja Sterilisasi

1. Sterilisasi Alat

2. Sterilisasi eksplan

Diletakkan

dalam ruang

inkubasi dan

siap digunakan

Sterilisasi

dengan

autoklaf 30

menit dengan

suhu 1210C

Botol kultur ditutup

dengan plastik dan

diikat dengan karet

sedangkan cawan

petri dan alat

diseksi dibungkus

dengan aluminium

foil, dimasukkan

plastik dan diikat

karet

Dioven untuk

mengeringkan

Dibilas dengan

air mengalir

Dicuci bersih dengan detergen dan

direndam tepol selama 24 jam Botol kultur, cawan

petri, dan alat diseksi

Dicelupkan larutan

betadin

Dibilas aquades 3 kali

Direndam larutan

bayclin 30%, 20%,

10% selama 10 menit

Sterilisasi LAF

Dibilas air mengalir

dan direndam larutan

fungisida 75% selama

10 menit

Dibilas air mengalir

dan direndam larutan

detergent 5 menit

Sterilisasi luar

Eksplan stevia (Stevia

rebaudiana Bert.)

106

Lampiran 3: Komposisi Media MS

No Bahan Kimia Komposisi

mg/L

Komposisi

mg/50ml

Komposisi

mg/100ml

1 NH4NO3 1650 8,25 16,5

2 KNO3 1900 9,5 19

3 CaCl 440 2,2 4,4

4 MgSO4 370 1,85 3,7

5 KH2PO4 170 0,859 1,78

6 FeSO47H2O 27,8 0,139 0,278

7 Na2EDTA 37,3 0,1865 0,373

8 MnSO44H2O 22,3 0,1115 0,223

9 ZnSO47H2O 8,6 0,043 0,086

10 H3BO3 6,2 0,031 0,062

11 KL 0.83 0,00415 0,0083

12 Na2M0O42H2O 0,25 0,00125 0,0025

13 CuSO45H2O 0,025 0,000125 0,00025

14 CoCl26H2O 0,025 0,000125 0,00025

15 Miyoinosital 100 0,5 1

16 Niacin 0,5 0,0025 0,005

17 Pyrodoxyne-HCL 0,5 0,0025 0,005

18 Thiamin-HCL 0,5 0,0025 0,005

19 Glycine 2,0 0,01 0,02

20 Sukrose 3000 15 30

Lampiran 4: Hari Muncul Kalus

No Perlakuan Ulangan

Rata-Rata 1 2 3

1 K1P1 16 16 17 16,33333333

2 K1P2 14 17 19 16,66666667

3 K1P3 18 17 17 17,33333333

4 K1P4 20 20 14 18

5 K2P1 17 17 18 17,33333333

6 K2P2 17 14 14 15

7 K2P3 14 16 16 15,33333333

8 K2P4 14 14 16 14,66666667

9 K3P1 14 16 17 15,66666667

10 K3P2 14 15 16 15

11 K3P3 14 15 16 15

12 K3P4 16 14 14 14,66666667

107

Lampiran 5: Hasil ANAVA pengaruh 2,4-D dan PEG 6000 terhadap hari

munculnya kalus

Tests of Between-Subjects Effects

Dependent Variable:Data

Source

Type III Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Model 9167.167a 14 654.798 240.761 .000

Auksin 26.000 2 13.000 4.780 .019

PEG 3.861 3 1.287 .473 .704

Ulangan 1.500 2 .750 .276 .762

Auksin * PEG 15.556 6 2.593 .953 .478

Error 59.833 22 2.720

Total 9227.000 36

a. R Squared = ,994 (Adjusted R Squared = ,989)

Lampiran 6: Hasil uji DMRT 5% 2,4-D terhadap hari munculnya kalus

Data

Duncan

Auksin N

Subset

1 2

3 12 15.08

2 12 15.58

1 12 17.08

Sig. .466 1.000

108

Lampiran 7: Persentase Pertumbuhan Kalus

No Perlakuan Jumlah Ekplan

yang ditanam

Jumlah Eksplan

yang Tumbuh

Persentase Eksplan

yang tumbuh

1 K1P1 9 7 77,77777778

2 K1P2 9 8 88,88888889

3 K1P3 9 6 66,66666667

4 K1P4 9 8 88,88888889

5 K2P1 9 7 77,77777778

6 K2P2 9 7 77,77777778

7 K2P3 9 8 88,88888889

8 K2P4 9 6 66,66666667

9 K3P1 9 8 88,88888889

10 K3P2 9 5 55,55555556

11 K3P3 9 7 77,77777778

12 K3P4 9 4 44,44444444

Lampiran 8: Hasil ANAVA antara 2,4-D dengan PEG 6000 terhadap persentase

pertumbuhan kalus



Source

Type III Sum of


Model 212781.945a 14 15198.710 26.168 .000

Auksin 1296.481 2 648.241 1.116 .345

PEG 1080.531 3 360.177 .620 .609

Ulangan 3518.759 2 1759.380 3.029 .069

Auksin * PEG 4383.173 6 730.529 1.258 .316

Error 12777.833 22 580.811

Total 225559.778 36


109

Lampiran 9: Berat Kalus

No Perlakuan Ulangan

Rata-Rata 1 2 3

1 K1P1 0,37 0,25 0,25 0,29

2 K1P2 0,19 0,39 0,18 0,253333333

3 K1P3 0,13 0,12 0,05 0,1

4 K1P4 0,19 0,13 0,08 0,133333333

5 K2P1 0,27 0,4 0,25 0,306666667

6 K2P2 0,25 0,36 0,19 0,266666667

7 K2P3 0,19 0,12 0,08 0,155

8 K2P4 0,12 0,19 0,07 0,126666667

9 K3P1 0,23 0,21 0,2 0,213333333

10 K3P2 0,19 0,33 0,18 0,233333333

11 K3P3 0,27 0,07 0,06 0,133333333

12 K3P4 0,1 0,2 0,03 0,11

Lampiran 10: Hasil ANAVA antara 2,4-D dengan PEG 6000 terhadap berat

kalus



Source

Type III Sum of


Model 1.572a 14 .112 28.708 .000

Auksin .007 2 .004 .957 .399

PEG .174 3 .058 14.814 .000

Ulangan .060 2 .030 7.704 .003

Auksin * PEG .012 6 .002 .509 .795

Error .086 22 .004

Total 1.658 36


110

Lampiran 11: Hasil uji DMRT 5 % PEG 6000 terhadap berat kalus

Data

Duncan

PEG N

Subset

1 2

3 9 .1211

4 9 .1233

2 9 .2511

1 9 .2700

Sig. .941 .528

.

Lampiran 12: Perhitungan Eksplan Berkalus

1. K1P1: 7

9 x 100% = 77,78 %

2. K1P2: 8

9 x 100% = 88,89%

3. K1P3: 6

9 x 100% = 66,67%

4. K1P4: 8

9 x 100% = 88,89%

5. K2P1: 7

9 x 100% =77.78%

6. K2P2: 7

9 x 100% = 77,79%

7. K2P3: 8

9 x 100% = 88,89%

8. K2P4: 6

9 x 100% = 66,67%

9. K3P1: 8

9 x 100% = 88,89%

10. K3P2: 5

9 x 100% = 55,56%

11. K3P3: 7

9 x 100% = 77,78%

12. K3P4: 4

9 x 100% = 44,44%

111

Lampiran 13: Gamnbar Hasil Pengamatan Kalus Berumur 4 Minggu

Konsentrasi Ulangan I Ulangan II Ulangan III

K1PI

(1 mg/L 2,4-

D + 0 mg/L

PEG 6000)

K1P2

(1 mg/L 2,4-

D + 5 mg/L

PEG 6000)

K1P3

(1 mg/L 2,4-

D + 15 mg/L

PEG 6000)

K1P4

(1 mg/L 2,4-

D + 25 mg/L

PEG 6000)

112

K2P1

(2 mg/L 2,4-

D + 0 mg/L

PEG 6000)

K2P2

(2 mg/L 2,4-

D + 5 mg/L

PEG 6000)

K2P3

(2 mg/L 2,4-

D + 15 mg/L

PEG 6000)

K2P4

(2 mg/L 2,4-

D + 25 mg/L

PEG 6000)

113

K3P1

(3 mg/L 2,4-

D + 0 mg/L

PEG 6000)

K3P2

(3 mg/L 2,4-

D + 5 mg/L

PEG 6000)

K3P3

(3 mg/L 2,4-

D + 15 mg/L

PEG 6000)

K3P4

(3 mg/L 2,4-

D + 25 mg/L

PEG 6000)

114

Lampiran 14: Gambar Alat, Bahan, dan Kegiatan Penelitian

1. Alat

a. Alat-Alat Penelitian

Hot Plate Oven Autoklaf

Refrigator LAF Timbangan Analitik

PH Meter Alat Gelas Cawan Petri dan Alat

Diseksi

b. Alat-Alat High Performance Liquid Cromatography (HPLC)

Kolom C18 Layar Panel Kendali Panel Kendali HPLC

115

Ruang Kolom Set Kromatografi

Kolom

Tampilan

Pengendalian

Tempat Injek Sample

2. Bahan

Bahan Pembuatan Media Bahan Sterilisasi

Eksplan (Luar LAF) Bahan Sterilisasi

Eksplan (Dalam LAF)

Karet, Label, dan Plastik

Tahan Panas

Bahan Sterilisasi Ruang

dan Alat Media Tanam

116

3. Kegiatan Penelitian

Sterilisasi Basah Sterilisasi Kering Penimbangan Bahan

Pemasakan Media Penuangan Media dalam

Botol Kultur

Sterilisasi Eksplan (Luar

LAF)

Sterilisasi Eksplan

(Dalam LAF) Inisiasi Inkubasi

Pengukuran PH Media

117

Lampiran 15: Gambar Hasil Analisis HPLC

1. Daun Stevia

2. K1P1

118

3. K1P2

4. K1P3

119

5. K1P4

6. K2P1

120

7. K2P2

8. K2P3

121

9. K2P4

10. K3P1

122

11. K3P2

12. K3P3

123

13. K3P4

124

KEMENTERIAN AGAMA RI

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN)

MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG

FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI

Jl. Gajayana No. 50 Dinoyo Malang (0341)558933Fax.(0341) 558933

BUKTI KONSULTASI SKRIPSI

Nama : Fittriya Nur Laila

NIM : 09620024

Fakultas/Jurusan : Sains dan Teknologi/Biologi

Judul Skripsi : Pengaruh Penambahan ZPT 2,4-D dan PEG

(Polyethylene Glykol) 6000 pada Media MS (Murashige

& Skoog) untuk Produksi Metabolit Sekunder

Steviosida pada Kultur Kalus Stevia (Stevia rebaudiana

Bert. M.)

Pembimbing : Dr. Evika Sandi Savitri, M. P.

125

KEMENTERIAN AGAMA RI

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN)

MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG

FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI

Jl. Gajayana No. 50 Dinoyo Malang (0341)558933Fax.(0341) 558933

BUKTI KONSULTASI AGAMA

Nama : Fittriya Nur Laila

NIM : 09620024

Fakultas/Jurusan : Sains dan Teknologi/Biologi

Judul Skripsi : Pengaruh Penambahan ZPT 2,4-D dan PEG

(Polyethylene Glykol) 6000 pada Media MS (Murashige

& Skoog) untuk Produksi Metabolit Sekunder

Steviosida pada Kultur Kalus Stevia (Stevia rebaudiana

Bert. M.)

Pembimbing : Achmad Nasichuddin, M. A.

126

DAFTAR RIWAYAT HIDUP

RIWAYAT PENDIDIKAN

Tingkat Tahun Lembaga Lokasi Keterangan

SD 1997-2003 SDN. Jogosari Pandaan Lulus

SMP / Mts 2003-2006 Mts. Ma’arif Sukorejo Lulus

SMA / MA 2006-2009 MA. Ma’arif Sukorejo Lulus

Nama Fittriya Nur Laila

Tempat, Tanggal

Lahir Pasuruan, 15 September 1990

Alamat

JL. Lukman Hakim RT. 02 RW. 01

Desa Jogonalan Kecamatan

Pandaan Kabupaten Pasuruan

Jenis Kelamin Perempuan

Agama / Status Islam / Belum Nikah

Kewarganegaraan Indonesia

No. HP 085790800270

lampiran 1: skema kerja penelitianetheses.uin-malang.ac.id/611/11/09620024 lampiran.pdf · lampiran...

Documents