“Isolasi Piperin dari Piperis nigri fruktus atau albi fruktus”

Disusun Oleh:

Ghani Nurfiana Fadma Sari

14082489A

Kelompok A/4

FAKULTAS FARMASIU N I V E R S I T A S   S E T I A  B U D I

S U R A K A R T A2011

A.    TUJUAN

Mahasiswa dapat memahami prinsip dan melakukan isolasi piperin dari Pipirin Nigri

Fruktus dan Albi Fruktus beserta analisis kualitatif hasil isolasi dengan metode KLT.

B.     PENDAHULUAN

    Nama lain dari lada adalah pedes (Sunda) dan merica (Jawa). Lada dengan nama latin; Piper

Nigrum, sudah dikenal sebagai penyedap makanan,mengatasi bau badan, rasa makanan yang

beraroma tak sedap, serta pengawet daging (Septiatin, 2008).

  

Ada dua macam lada yang menjadi komoditi perdagangan yaitu lada hitam dan lada

putih. Lada hitam diperoleh dengan memetik buah yang masih hijau, mengupasnya,

difermentasi untuk menambah rasa lada, kemudian dikeringkan di bawah sinar matahari, dan

rasanya lebih pedas. Sedangkan lada putih diperoleh dengan memetik biji masak

merah,diremas perlahan-lahan dan direndam dalam air, kulit dan daging buah dibuang

sebelum dikeringkan di sinar matahari (Septiatin, 2008).

Aroma dan rasa pedas lada hitam paling tajam di antara semua jenis lada. Rempah

ynag bernilai tinggi ini dapat meningkatkan sekresi atau pengeluaran asam hidroklorik yang

berguna membantu untuk meningkatkan fungsi pencernaan dengan begitu kita dapat terbebas

dari resiko sakit perut, kembung, iritasi, diare, dan sembelit. Selain itu, lada hitam juga

bersifat sebagai peluruh kencing dan meningkatkan produksi keringat . Rempah ini pun

memiliki efek antibakteri dan antioksidan. Lada juga merangsang terpecahnya sel-sel lemak

sehingga bisa menjaga tubuh tetap langsing.

Lada mengandung minyak atsiri, pinena, kariofilena, lionena, filandrena alkaloid

piperina, kavisina, piperitina, piperidina, zat pahit dan minyak lemak. Rasa pedas disebabkan

oleh resin yang disebut kavisin. Kandungan piperine dapat merangsang cairan lambung dan

air ludah. Selain itu lada bersifat pedas, menghangatkan dan melancarkan peredaran darah.

Piperin berupa Kristal berbentuk jarum berwarna kuning, tidak berbau, tidak berasa

lama-lama pedas, larut dalam etanol, benzene, kloroform dengan titik lebur 125-126oC

(Septiatin,2008).

Piperin termasuk golongan alkaloid yang merupakan senyawa amida basa lemah yang

dapat membentuk garam dengan asam mineral kuat. Piperin bila dihidrolisis dengan KOH-

etanolik yang berlebihan dan dalam keadaan panas menyebabkan piperin terhidrolisis dan

membentuk kalium piperinat dan piperidin.

Khasiat dari buah lada yaitu dapat mengobati kaki bengkak pada ibu hamil, kolera,

nyeri haid, rematik, salesma, air mani yang encer, dan impoten (septiatin, 2008).

  Jalur biosintesis

Kebanyakan alkaloid bersifat basa. Sifat tersebut tergantung pada adanya pasangan

electron pada nitrogen. Inti piridin mengandung 6π electron di dalam cincin heterosiklis.

Dengan demikian pasangan electron terdapat pada nitrogen dan piridin bersifat basa. Tapi

ikatan rangkap karbo-nitrogen mengurangi kebasaannya dan piridin kurang basa daripada

piperidin yang tak jenuh.

Biosintesa alkaloid didasarkan hasil analisa terhadap cirri struktur tertentu yang sama

terdapat dalam berbagai molekul alkaloida. Alkaloid aromatic mempunyai berbagai struktur

yaitu β-ariletinamia. Alkaloid tertentu dari jenis 1-benzilisokuinolin seperti loudonosin

mengandung 2 unit β-ariletinamia yaitu reaksi kondensasi mamich. Aldehid berkondensasi

dengan amina menghasilkan suatu karbonitrogen dalam bentuk imina atau garam iminium

diikuti oleh serangan atom karbon nukleofilik dapat berupa enol atau suatu fenol. β-

ariletinamia berasal dari asam-asam amino fenil alanin dan tirosin yang dapat mengalami

dekarboksilasi menghasilkan asam-asam amino.

Ada oksidasi yang dapat menyingkirkan gugus-gugus asam amino ( deaminasi

oksidatif ) diikuti oleh dekarboksilasi menghasilkan aldehid. Amina dan aldehide melakukan

kondensasi mamich. Reaksi sekunder yang dapat menghasilkan alkaloid yaitu reaksi rangkap

oksidasi fenol pada orto atau para dari gugus fenol, reaksi akan bereaksi dengan radikal

bebas, metilasi dari atom oksigen menghasilkan gugus N-metil atau dari gugus amina.

Keragaman struktur aldehid disebabkan oleh keterlibatan fragmen-fragmen kecil yang berasal

dari jalur mevalonat, fenilpropanoid, polisiasetat.

  SISTEMATIKA TANAMAN

Klasifikasi Ilmiah

Kerajaan                      : Plantae

Devisi                          : Magnoliophyta

Kelas                           : Magnoliopsida

Ordo                            : Piperales

Famili                          : Piperaceae

Genus                          : Piper

Spesies                        : Piper nigrum

Nama binomial            : Piper nigrum L

Pada mulanya tanamna lada ini berasal dari Malaysia Timur, tetapi dalam jangka yang

relative singkat, tanaman lada ini menyebar ke seluruh Malaysia dan Asia. Dalam habitat

liarnya, tanaman lada tumbuh di hutan hujan tropis. Tanaman yang memiliki nama farmasi

Piperis nigri fruktus ini termasuk tanaman herbal memanjat. Buah dari tanaman ini sejak dulu

telah digunakan sebagai bumbu dan seiring dengan berkembangnya ilmu pengetahuan, lada

kemudian digunakan sebagai obat untuk mengobati penyakit-penyakit tertentu.

            Lada pertama kali diperkenalkan oleh Theophrastus (327-278 SM) yang berhasil

mengenali dua jenis lada. Buah lada rasanya pedas menyengat, menyerupai rasa pedas cabai.

Sifat buah lada sedikit membius karena zat piperin yang dapat disamakan dengan morfin

karena lada termasuk golongan alkaloid.

            Tanaman ini sangat dikenal luas pada berbagai kalangan masyarakat di berbagai

kalangan di berbagai daerah. Karenanya memiliki bermacam-macam nama yang

diantaranya :

Sumatra     : Koro-koro (Enggano); lada (Aceh) ; lada (Batak) ; lada ketek (Minang) ; lada kecik 

( Bengkulu)

Jawa          : Pedes (Sunda) ; merica (jateng)

Madura      : Sekang

Bali            : Mika

Sulawesi    : Malita (Seram) ; Merica (Makassar)

C.    PRINSIP KERJA

Piperin disari dari buah piper dengan etanol 96%, dipisahkan dari senyawa resin

dengan penambahan KOH-etanolik 10% b/v. Kristalisasi dengan etanol.

D.    ALAT DAN BAHAN

        Alat :        Bahan :

o  Perangkat penyari soxhlet                                                         o   Serbuk buah piper nigrum

o   Beaker glass                               o   Etanol 95%

o   Corong                                  o   KOH-Etanolik 10%

o   Perangkat KLT                                                                                     o   Silika gel GF 254

o   Glasswool                                 o   Aseton

o   Batang pengaduk                            o   Anisaldehida-asam sulfat

  E.     CARA KERJA

1. Ekstraksi serbuk buah lada hitam

Timbang 30 g serbuk buah lada hitam, dimasukkan kedalam alat soxhlet ditambahkan

50 ml etanol 96 %.Dilakukan penyarian selama 90 menit dengan kecepatan 6-8 sirkulasi per

jam. Penyarian dilakukan hingga filtrate tidak berwarna. Pisahkan sari dari bagian yang tidak

larut sisihkan sari jernih yang didapat sebanyak 3 ml dalam flakon dan ditutup. Sisa diuapkan

di atas penangas air sampai kering dan didapat ekstrak kental.

2. Isolasi piperin dengan metode rekristalisasi 

Ditambahkan 10 ml KOH-etanolik 10 % pada ekstrak kental sambil diaduk aduk.

sehingga timbul endapan. setelah mengendap dipisahkan sari dari bagian yang tak larut

melalui glasswool. sari yang didapat didiamkan di dalam almari pendingin selama satu

malam sampai terbentuk kristal.

3. Identifikasi kristal dengan metode KLT

Kristal yang terbentuk dipisahkan, dicuci dengan etanol 96 % dikeringkan dalam

almari pengering pada suhu 40' C selama 30-45 menit, kemudian disimpan dalam desikator.

dihitung rendemen hasil percobaan dan identifikasi piperin menggunakan kristal yang telah

dilarutkan dalam etanol dan menggunakan sari  yang telah disimpan dalam flakon

Fase diam : Silika gel GF 254 nm

Fase gerak: Toluen : etil asetat (2:1)

Diamati hasil bercak yang tampak pada sinar tampak, UV 254, dan 366, setelah disemprot

dengan pereaksi anisaldehid-asam sulfat dan dipanaskan pada 110' C selama 10 menit. amati

warna yang terjadi. Hitung Rf bercak.  

F.     HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil

Organoleptis :

1.      Jenis sampel                                  : Serbuk Lada Hitam

2.      Jumlah sampel (g)                         : 30 gr

3.      Jumlah pelarut untuk ekstraksi      : 100 ml

4.      Warna kristal                                 : Kuning

5.      Bentuk                                          : Kristal panjang

6.      Rasa                                              : Pedas

7.      Bau                                                : Menyengat

8.      Titik Lebur                                    : 130o C

Rendemen =  x 100% = 2,43%

% Kemurnian = 1- x 100 %

                        = 1- x 100 % = 101,6 %

  

Pembahasan

Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengisolasi piperin yang terkandung dalam

piperis nigrii fructus, dengan metode rekristalisasi menggunakan soxhlet. Rekristalisasi

merupakan suatu teknik pemisahan zat padat dari suatu zat pencemar dengan cara

mengkristalkan kembali zat tersebut setelah dilarutkan dengan pelarut yang sesuai.

Ekstraksi dilakukan dengan penambahan pelarut etanol 96%. Pemilihan etanol 96%

karena jika yang dipakai etanol 70% di khawatirkan banyak amilum yang akan lebih banyak

ditarik dibandingkan piperinnya, jadi piperinnya sedikit dan pengotornya yang lebih bnayak.

Penambahan etanol sebanyak satu setengah kali sirkulasi dengan kecepatan 4-5

sirkulasi per jam. Jika penambahan etanolnya hanya 1x sirkulasi dikhawatirkan pada saat

pemanasan etanolnya menguap semua dan belum tentu bisa turun jadi ekstraksi bisa berhenti.

Hasil dari ekstraksi ini kemudian didinginkan dan disisihkan ekstrak jernih sebanyak

3 ml disimpan dalam flakon dan ditutup yang digunakan sebagai baku pembanding KLT.

Sisanya diuapkan dengan penangas air sampai kental. Untuk menghilangkan etanol 96%

diatur suhu 60-80°C. Penambahan KOH-Etanolik 10% untuk memisahkan senyawa resin

dengan meminimalkan pembentukan garam, sehingga didapatkan alkaloida yang murni.

Endapan dipisahkan dengan cara penyaringan dengan glasswool, agar filtrate bisa

tersaring. Jika digunakan kertas saring, susah untuk mendapatkan filtratnya karena resin

bersifat lengket jadi menempel di kertas saring. Penyaringan dengan glasswool untuk

meminimalkan kandungan resin yang ikut tersaring, kemudian didapatkan sari yang jernih.

Sari didiamkan selama 1 malam sampai diperoleh Kristal. Agar kristalisasi berhasil : jangan

memakai pelarut yang terlalu polar (etanol 70%), harus sudah melewati titik jenuh, dan

pengendapan sudah benar-benar kental.

Setelah terbentuk Kristal, dicuci dengan etanol dingin agar piperin tidak ikut larut,

jadi senyawa lain (resin dan pengotor lainnya) yang larut lalu di oven pada suhu 40o C.

Identifikasi kristal piperin dengan metode KLT menggunakan fase dian berupa Silika

gel GF 254 dan fase gerak toluen:etil asetat (70:30). Bercak yang timbul pada UV 254

tampak warna yang meredam dan pada UV 365 tampak warna fluoresensi. Titik lebur piperin

kelompok 4 127o C berbeda dengan teoritis, karena api yg didigunakan terlalu besar, sehingga

angka pada thermometer naik terus.

G.    KESIMPULAN

1.      Jumlah kristal yang didapat dari proses isolasi adalah 0,729 gr

2.      Piperin yang didapat dari proses isolasi lada hitam sebanyak 2,43 %

3.      Titik lebur Kristal = 101,6 %

H.    SOAL

1.      Sebutkan kandungan golongan senyawa yang pada umumya terdapat dalam tumbuhan yang

termasuk satu jenis dengan piper nigrum !

“ Alkaloid 2 - 5%, amilum 30 - 40%, kavisin (rasa pedas), minyak atsiri, protein dan resin”.

2.      Apa perbedaan antara piperis nigri fruktus dan piperis albi fruktus?

Lada putih diperoleh dengan memetik biji masak merah,diremas perlahan-lahan dan

direndam dalam air, kulit dan daging buah dibuang sebelum dikeringkan di sinar matahari

jadi lebih halus dibanding lada hitam.

Lada hitam diperoleh dengan memetik buah yang masih hijau, mengupasnya, difermentasi

untuk menambah rasa lada, kemudian dikeringkan di bawah sinar matahari, dan rasanya

lebih pedas dan kandungan minyak atsirin lebih banyak dari pada lada putih .

3.      Bagaimana bila penambahan KOH-etanolik disertai pemanasan, tulis reaksinya?

Piperin bila dihidrolisis dengan KOH-etanolik yang berlebihan dan dalam keadaan panas

menyebabkan piperin terhidrolisis dan membentuk kalium piperinat dan piperidin.

I.       DAFTAR PUSTAKA

1.      Septiatin, Eatin ,2008, Apotek Hidup dari Rempah-Rempah, Tanaman Hias, dan Tanaman

Liar, CV.YRAMA WIDYA, Bandung, (60,61,62).

2.      Mamik P.R. 2011. Petunjuk Praktikum Kimia Produk Alam. USB : Surakarta.

3.      http://Obatherbalalami /lada/Tanaman Obat Lada Hitam.net

4.      http://Tanaman obat-obatan.ic

5.      Voight, R., Buku pelajaran teknologi farmasi edisi V, Universitas Gajah Mada Press.         Yogyakarta, 1995.

6.       Depkes dan kesejahteraan RI. 2001. Inventaris tanaman obat Indonesia (I) jilid 2. Jakarta.