isolasi kandungan kimia tumbuhan

7/25/2019 Isolasi Kandungan Kimia Tumbuhan

1/18

6/17/201

ISOLASI KANDUNGAN KIMIA

TUMBUHAN

Endang Dwi Wulansari

Prinsip

Ekstraksi

Pemurnian awal

Pemurnian lanjut

Identifikasi


2/18

6/17/201

TAHAP EKSTRAKSI

Ekstraksi lazimnya dilakukan dengan melarutkan suatuserbuk bahan dalam pelarut tertentu

1. Pemilihan Pelarut Ekstraksi

penting untuk memperhatikan sifat kimia dan

sifat fisika dari komponen yang akan diekstraksi

atau diisolasikelarutan, pH, stabilitas senyawa

Dapat menggunakan pelarut air/pelarut organik

untung/ruginya apa ?

KEUNTUNGAN-KERUGIAN

Murah

Mudah didapat

Dapat ditumbuhi jamur

Dapat menghidrolisissenyawa (dalamkeadaan asam)

TD tinggi, shgpenguapan butuh suhutinggi,waktu lama

Mahal

Selektif

Tidak menghidrolisis

senyawa

TD rendah, shg

penguapan butuh suhu

rendah, waktu cepat

AIR PELARUT ORGANIK


3/18

6/17/201

Pelarut tunggal

Untuk tujuan isolasi zat tunggal dg kepolaran ttt

Kepolaran pelarut disesuaikan dg kepolaran

senyawa yg akan diisolasi

Pelarut ganda

Untuk tujuan isolasi berbagai macam senyawa dg

kepolaran berbeda

Perlu diperhatikan urutan kepolaran

Deret eluotropi, dari non polarpolar


4/18

6/17/201

Pelarut

Pelarut yang lazim digunakan pada

proses ekstraksi adalah n-heksana,benzena, diklorometan (CH2Cl2),

kloroform (CHCl3), aseton, etil asetat,

metanol atau etanol, dan air.

Semua pelarut yang digunakan dalam

proses ekstraksi adalah pelarut teknis

yang didestilasi terlebih dahulu atau

p.a. Destilasi pelarut teknis ini penting

untuk selalu diperhatikan sebab

pelarut teknis seringkali mengandungbahan kimia yang dapat mengacaukan

proses isolasi.

Pelarut Ekstraksi

komponen yang akan diisolasi bersifat ionik (misalnya

senyawa garam organik) atau sangat polar (seperti turunan

glikosida) pelarut metanol/air atau campurannya, p.u

kloroform

komponen minyak atsiri pelarut seperti n-heksana,

benzena atau eter (dietil eter).

Pengotor ekstrak dari bahan daun adalah klorofil, bisa

dieliminasi dengan menambahkan air hangat pada ekstrak

(setelah ekstrak diuapkan dan dilarutkan dalam etil asetat)

Pengotor ekstrak dari bahan kulit adalah tanin, bisa

dieliminasi dengan menambahkan dietileter.


5/18

6/17/201

2. Pemilihan cara ekstraksi

Dipertimbangkan :

tujuan akan diekstraksi ad habis atau tidak

Tekstur dan kadar air bahan tanaman

stabilitas

Cara ekstraksi :

Cara dingin :

Maserasi

Perkolasi

Perasan/penekanan

Cara panas : Perebusan (infus, dekokta, digesti)

Refluks

Soxhlet

Destilasi , eufleurasi


6/18

6/17/201


7/18

6/17/201


8/18

6/17/201

Cara panas, kontinyu, exhaustive

Rangkaian alat soxhlet

3. Penanganan hasil ekstraksi

Pemekatan

Penghilangan lemak

penyimpanan


9/18

6/17/201

PEMEKATAN

SUHU KAMAR

Penguapan pada udara terbuka, tanpa pemanasan

Penguapan dengan penghisapan

Penguapan dengan gas N2

SUHU YANG DITINGKATKAN

Penguapan pada tekanan atmosfer (w.b, destilasi)

Penguapan dengan pengurangan tekanan (rotary

evaporator)


10/18

6/17/201

1

Rotary evaporator

Dengan penurunan

tekanan maka

cairan akan

mendidih di bawah

titik didihnyawaktu cepat


11/18

6/17/201

SUHU YANG DITURUNKAN

Freeze dryer (liofilisasi)

Prinsip : ekstrak didinginkan, kristal air yang

terbentuk disublimasikan


12/18

6/17/201

1

PENGHILANGAN LEMAK

Lemak dihilangkan karena lemak akan

mengecoh dari larutannya

Dalam suasana basa, lemak akan membentuk

sabun sehingga sulit dipisahkan

Ditambah eter, kloroform, n-heksana laludikocok


13/18

6/17/201

1

PENYIMPANAN

Ekstrak air diusahakan disimpan dalam bentuk

ekstrak kering

Disimpan dengan pendinginan

Bila perlu ditambah pengawet yang dapat

menguap pada waktu diuapkan, misal : toluena

Untuk zat tunggal dapat digunakan cararekristalisasi

Pelarut tunggal

2 pelarut


14/18

6/17/201

1

untuk pemisahan awal zat rumit, 2 cara yang lazim

digunakan, yaitu

secara fisika (partisi)

secara kimia (pengaturan pH dan pelarut)

1. Partisi

Partisi dilakukan apabila jumlah komponen di dalam

ekstrak terdapat puluhan senyawa. Dasar dari

pemisahan dengan cara partisi adalah perbedaan

kelarutan, dan syarat yang harus dipenuhi untuk

melakukan hal ini adalah bahwa dua pelarut yang

digunakan tidak saling bercampur. Dua pelarut yang

tidak saling bercampur adalah n-heksana-metanol,kloroform-air, dan etil asetat-air.

2. Pengaturan pH dan Pelarut :

Pemisahan alkaloid dengan pembentukangaramnya

Pemisahan fenol dari campurannya denganpembentukan senyawa fenolatnya

Eugenol + NaOH Na-Eugenolat

(larut p.organik) (larut air)

asam

Pemisahan senyawa kumarin dari campurannyadengan pembentukan senyawa kumarinatnya


15/18

6/17/201

1

suatu teknik pemisahan campuran menjadi

komponennya berdasarkan perbedaan migrasi

masing-masing komponennya dalam fase diam

akibat pengaruh dari fase gerak

Separate

Analyze

Identify

Purify

QuantifyComponentsMixture

Pemisahan lanjut zat rumitKromatografi

Illustration of Chromatography

Components Affinity to Stationary Phase Affinity to Mobile Phase

Blue ---------------- Insoluble in Mobile Phase

Black

Red

Yellow

Mixture Components

Separation

Stationary Phase

Mobile Phase


16/18

6/17/201

1

Analisis komponen dengan KLT

Ada 2 tujuan :1. Untuk analisis, mengetahui berapa jumlah

komponen (noda) yang ada dalam ekstrak atau

fraksi.

Eluen campuran n-heksana-etil asetat, umumnya

cocok untuk golongan terpenoid, sementara

campuran kloroform-metanol cocok untuk golongan

fenolik.

2. Untuk mencari fase gerak/eluen yang sesuai untuk

proses fraksinasi.

Eluen yang murah untuk tujuan ini adalah campuran

n-heksana-etil asetat atau n-heksana-aseton.

Tahapan KLT ??


17/18

6/17/201

1

PemurnianBeberapa teknik kromatografi yang dapat digunakan untuk pemurnian adalah:

-Kromatografi Vakum Cair (KVC) -Kolom gravitasi

-Kromatografi Kolom Tekan (KKT) -KLT preparatif

-Kromatografi sentrifugal (chromatotron)

Tahap Identifikasi

Perlu dilakukan uji kemurnian isolat dulu

Fraksi-fraksi yang memberikan noda kromatogram

tunggal dengan nilai Rf sama dengan

standarnya, digabung dicek kemurniannya,

dielusi dengan 3 (tiga) system eluen yang

berbeda-beda (sifat polaritasnya).Misal; system I campuran heksana:etilasetat;

system II campuran kloroform:metanol; system

III campuran heksana:kloroform:etilasetat.

Jika blm murni ??? 1 tahap kromatografi lagi


18/18

6/17/201

Identifikasi senyawa hasil isolasi (isolat) :

Organoleptis

Analisis golongan senyawa

Analisis spektra

Spektra uv-vis

Spektra ir

Spektra massa

Spektra NMR

Semoga cukup jelas

isolasi kandungan kimia tumbuhan

Documents